Semen cryopreservation protocols of Mangalarga Marchador stallions

The effect of the utilization of three semen protocols (Inra 82®, Merck Gema and Botu-crio®) and two filling techniques (0.25 and 0.50 mL straws) in Mangalarga Marchador stallions were studied in this experiment. Sperm parameters were assessed during processing and post-freezing. No interactions between the protocols and type of filling were observed, so they were assessed separately. Sperm parameters were not altered when the extender was added to the centrifugation; however, there was reduction of motility and strength when freezing extenders were added. The Botu-crio® protocol preserved the parameters of total and progressive sperm motility, smoothed path velocity (µm/s), straight line velocity (µm/s), track velocity (µm/s) and the average and fast spermatozoa percentage better than the others. No difference between the extenders for the percentage of sperm integrity was observed. There was no difference in the responses studied on the filling techniques. The stallions presented better freezing with the use of the Botu-crio® protocol. The best post-freezing viability results were found for semen frozen using the Botu-crio® protocol and there were no differences concerning the sperm quality comparing 0.25 and 0.50 mL straws.

Variações da marcha em equinos da raça Mangalarga Marchador

O andamento marcha característico de equinos da raça Mangalarga Marchador foi analisado em 104 animais, por meio de filmes de vídeo cassete (sistema VHS / PAL SECAM a 50 quadros por segundo). Cada animal foi observado no filme em velocidade normal por dez segundos, seguindo-se a análise quadro a quadro, estes apresentando vista lateral em movimento. Nesta fase foram registrados os momentos de apoio (mono, bi ou tripedais) bem como os momentos de suspensão, compreendendo duas sequências de oito momentos de apoio para cada animal. Dos 104 animais analisados, 98 mostraram oito variações de andamento, agrupados portanto de A a H. Os seis cavalos restantes mostraram variar em dois andamentos distintos, pertencendo assim a dois destes grupos. No primeiro conjunto com 98 animais, 32 apresentaram marcha ideal com sequência de apoios semelhante ao passo (grupo A), 34 animais mostraram andamento marchado com apoios monopedais posteriores, bipedais diagonais e laterais e tripedais anteriores (grupo B), 18 animais (grupo C) apresentaram andamento com apoios monopedais posteriores, bipedais diagonais e tripedais anteriores. O único andamento assimétrico pertenceu a cinco animais (grupo D). Três equinos apresentaram andamento saltado, com momento de suspensão na sequência de apoios (grupo E). Outros três animais apresentaram andamento baseado em apoios monopedais anteriores e posteriores e bipedais diagonais e laterais (grupo F). Andamento com apoios bipedais diagonais e laterais além de tripedais anteriores foi apresentado por dois equinos (grupo G). Um equino mostrou andamento com apoios bipedais diagonais e tripedais anteriores e posteriores (grupo H). Os outros seis animais com dois andamentos diferentes foram: um animal com andamento dos grupos A e C, um dos grupos A e D, dois dos grupos B e D, um dos grupos B e G e um dos grupos C e F. Os equinos da raça Mangalarga Marchador analisados neste trabalho mostraram-se possuidores de muitas variações de andamento em relação a marcha ideal, com alterações variando entre o trote e a andadura.

Reproductive Parameters of Mangalarga Marchador Mares in a Commercial Embryo Transfer Programme

ContentsThe objective of this study is to evaluate the reproductive efficiency in donors and recipient Mangalarga Marchador mares in commercial programmes of embryo transfer (ET) and the effects of some reproductive characteristics and ET methodology on conception rates in the recipient mares. A total of 1140 flushing procedures were performed and 830 embryos (72.8%) were recovered. There were no differences between the rates of embryonic recovery in the different breeding seasons (p > 0.05) and 92.8% of the recovered embryos were 8-9 days old. There was no difference in the embryonic recovery regarding the collection order from the first to the ninth embryo collection along the breeding season, as well as among mares inseminated during the foal heat or subsequent cycles (p > 0.05). Pregnancy rates observed in the total period of all reproductive seasons at 15, 30, 45 and 60 days of pregnancy were 73.4, 69.9, 66.7 and 64.5%, respectively. Differences in pregnancy rate and early embryonic loss rates were not observed between embryos transferred immediately after collection (66.8% and 13.5%) and embryos transported at room temperature for periods of < 1 h (62.9% and 14.4%; p > 0.05). Pregnancy rates were higher when the interval between ovulations of donor and recipient mares remained between -3 and -2 days (p < 0.05), and the lowest rates were observed for intervals of -6 days (p < 0.05) with intermediary values for intervals of -1, 0 and +1 (p > 0.05). Embryonic loss rates, however, did not differ between intervals of ovulation's synchronism between donor and recipient mares (p > 0.05). This flexibilization in the ovulatory synchronism between donor and recipient mares optimizes the use of recipient mares, thus reducing costs and facilitating management of horse breeding farms.

Concentrações séricas de aspartato aminotransferase e creatinoquinase e concentrações plasmáticas de lactato em equinos da raça Mangalarga Marchador após exercício físico

The aim of this study was evaluate the influence of physical exercise (marcha gait) on serum values of CK and AST and plasmatic values of lactate in Mangalarga Marchador horses trained in Espirito Santo, Brazil. Serum and plasma samples were obtained from 15 horses in four different moments: rest (T0), 5 minutes (T1), 30 minutes (T2) and 2 hours (T3) after the exercise. Lactate analysis revealed values of 1.02 ± 0.41 mmol/L, 2.73 ± 2.43 mmol/L, 1.89 ± 1.24 mmol/L and 1.31 ± 0.60 mmol/L, respectively at T0, T1, T2 and T3. When evaluating AST, the results recorded in T0, T1, T2 and T3 were, respectively, 189.3 ± 56.0 UI/L, 223.9 ± 53.5 UI/L, 186.8 ± 25.8 UI/L and 193.9 ± 44.7 UI/L. Finally, the CK at moments T0, T1, T2 and T3 were, respectively, 113.4 ± 56.3 UI/l, 144.1 ± 70.9 UI/L, 143.0 ± 81.0 UI/L and 173.1 ± 128.0 UI/L. The results showed that marcha gait leaded to significantly increased in plasma lactate and did not alter serum AST and CK, suggesting that the equines used were conditioned to the physical exercised imposed.

Seleção de características morfofuncionais de cavalos da raça Mangalarga Marchador por meio da análise de componentes principais

Records from 14,288 animals of the Mangalarga Marchador breed, born from 1990 to 2005, were used to discard morphofunctional traits in a principal component analysis. The following traits were used: height at withers, height at croup, lengths of head, neck, back, croup, hip length and body, widths of head, hip width, thorax perimeter, cannon bone circumference and gait score. For the traits considered it was observed that 7 principal components showed variation lower than 0.7; suggesting that seven variables could be discarded. The reason is that when variable are highly correlated with the principal components of smaller variance, their variation is practically insignificant. Based on those results the recommendation is to maintain the following traits for future research with this database: gait score, height at croup, length of back, length of croup, width of head and cannon bone circumference.

Chromium or L-carnitine supplementation during an aerobic conditioning program mildly modified the energy metabolism biomarker response in Mangalarga Marchador fillies

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Estudo da influência do relacionamento entre a égua e o potro no comportamento social e no temperamento de potros da raça Mangalarga Marchador

O trabalho teve como objetivo compreender o relacionamento entre a égua e o potro e a influência deste sobre o comportamento social e temperamento do potro, a partir do décimo primeiro dia de vida até após o processo de desmama do potro. Oito díades de éguas e potros da raça Mangalarga Marchador provenientes de um criatório situado na cidade de Amparo/SP foram avaliadas durante três etapas distintas. A primeira foi realizada para caracterizar o comportamento social do grupo de equinos e o relacionamento entre égua e potro durante os três períodos de desenvolvimento do potro (dependência, socialização e independência). Nessa etapa foram registradas: as interações agonísticas das éguas; episódios de mamada dos potros (tentativas e mamadas) e para o par égua e potro foram anotados os comportamentos afiliativos e a relação espacial. Ao final dessa etapa os potros foram classificados em dependentes e independentes e as éguas foram divididas de acordo com sua hierarquia. A segunda etapa constitui-se da avaliação das atividades e relação espacial dos potros durante o processo de desmama, para a caracterização do estresse dos potros. Na terceira etapa a relação social dos potros foi observada na ausência de suas mães, através do registro das interações e da relação espacial dos potros. Durante as três etapas foram aplicados quatro testes de avaliação dos aspectos do temperamento dos animais: teste de reatividade durante o manejo de escovação para a avaliação da reatividade ao manejo; teste de arena para avaliar a emotividade ao isolamento; teste de reatividade perante humano desconhecido e ativo para avaliar a reatividade ao humano; e teste da presença de estímulo sonoro desconhecido para avaliação da emotividade ao estímulo desconhecido. A hierarquia e a experiência da mãe interferiam no cuidado materno de aleitamento (P<0,05), entretanto, não influenciaram o cuidado de proteção (P>0,05). A frequência de permanência dos potros com sua mãe na distância de até 1 metro diminuiu ao longo dos períodos (P<0,05). As éguas não modificaram a frequência dos comportamentos afiliativos com seus potros ao longo dos períodos (P>0,05). As maiores frequências de comportamentos afiliativos dos potros com suas mães foram durante os períodos iniciais do desenvolvimento do potro (dependência e socialização, P<0,05). Potros dependentes apresentaram maior frequência e menor duração das mamadas quando comparado à frequência e duração dos potros independentes (P<0,05). A reatividade ao manejo e a emotividade ao isolamento dos potros foram maiores nos períodos da dependência, da socialização e durante a desmama (P<0,05). A reatividade ao humano e emotividade ao desconhecido apresentaram a tendência de diminuir ao longo dos períodos observados (P<0,05). Os potros dependentes apresentaram maior emotividade ao desconhecido e ao isolamento (P<0,05), além de maior estresse durante a desmama, quando comparado aos potros independentes. Todos os potros normalizaram suas atividades no decorrer do processo da desmama. Na ausência das mães os potros independentes foram os que iniciaram a maioria das interações entre os animais (P<0,05). O relacionamento entre a égua e o potro foi modificado devido às características maternas de hierarquia e experiência, além do nível de independência do potro e do seu temperamento.

Use of a Low Dose of Equine Purified FSH to Induce Multiple Ovulations in Mares

The effects of a low dose of equine purified FSH (eFSH) on incidence of multiple ovulations and embryo recovery rate in mares were studied. During the physiological breeding season in Brazil (19 degrees 45'45'S), 14 Mangalarga Marchador donor mares were used in a crossover study and another 25 mares of the same breed, between 3 years and 12 years of age were used as recipients for the embryo transfers. Donors were monitored during two consecutive oestrus cycles, an untreated control cycle followed by a treated cycle, when eFSH was administered. In both cycles, after an embryo collection attempt on day 8 post-ovulation all mares received 7.5 mg dinoprost and had their two largest follicles tracked daily by ultrasonography until the period of ovulation. Mares were inseminated every 48 h with extended fresh semen from a single stallion after the identification of a 35-mm follicle until the period of ovulation. Ovulations were induced by intravenous administration of 2.500 IU of human chorionic gonadotropin, upon detection of a 35- to 40-mm follicle. In the treated cycle, 5 mg eFSH was given intramuscularly once a day, from day 8 post previous ovulation until at least one follicle reached 35 mm in diameter. Embryo flushes were performed on day 8 of dioestrus (day 0 = ovulation). Treatment with eFSH resulted in higher (p < 0.05) ovulation rate and incidence of multiple ovulations compared to the control (1.6 vs 1.0 and 50% vs 0%, respectively - one mare had triple ovulation). However, embryo recovery rates in the control and treated cycles were similar (0.8 and 1.0, respectively; p > 0.05). Pregnancy rates in the recipient mares following embryo transfer were similar for the control and eFSH cycles (11/11 and 10/14, respectively). Additional studies are necessary in order to develop a low-dose protocol for the use of eFSH that brings a more consistent contribution to the efficiency of commercial equine embryo transfer programs.

Efeito do número de inseminações artificiais por ciclo sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen eqüino diluído, resfriado a 20ºC e transportado

Cento e vinte ciclos estrais de cento e cinco fêmeas eqüinas da raça Mangalarga Marchador foram analisados com o objetivo de estudar o efeito do número de inseminações artificiais por ciclo sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen resfriado. Os ciclos foram acompanhados por palpação retal e rufiação, e as inseminações realizadas a cada 48 horas, a partir de um folículo de 30-35 mm de diâmetro até a ovulação, com sêmen diluído, resfriado a 20ºC e transportado. As éguas foram aleatoriamente distribuídas nos seguintes grupos: T1 - uma IA/ciclo, T2 - duas IA/ciclo e T3 - três ou mais IA/ciclo. As taxas de concepção ao primeiro ciclo foram, respectivamente, para T1, T2 e T3, de 47,83% (11/23), 70,00% (21/30) e 45,16% (14/31) e, após cinco ciclos, de 51,43% (18/35), 48,89% (22/45), e 47,50% (19/40) (P>0,05). O número de IA/ciclo não teve efeito sobre a fertilidade das éguas.

Fertilidade do sêmen eqüino diluído, resfriado e transportado

Objetivou-se neste experimento estudar o efeito do transporte de sêmen equino, entre haras, sobre a fertilidade de éguas inseminadas. Setenta e seis fêmeas da raça Mangalarga Marchador foram distribuídas, ao acaso, com número desigual de repetições, para se estudarem os efeitos do sêmen in natura, transportado ou não, e do sêmen diluído, resfriado e transportado, sobre a fertilidade de éguas e diferentes características reprodutivas. O sêmen foi diluído no diluidor lactose-gema de ovo sem glicerina. As fêmeas foram inseminadas, em dias alternados, com sêmen de apenas um garanhão, com volumes/dose inseminante variáveis dependendo do número de fêmeas a serem inseminadas por dia com determinado ejaculado. Utilizou-se para o transporte do sêmen um contêiner especialmente projetado para este fim (MSP-1). As taxas de concepção ao primeiro ciclo e totais, a eficiência de prenhez, o número de ciclos/égua, ciclos/égua gestante, ciclo/prenhez e prenhez/ciclo, o número de IA/égua, o número de IA/égua gestante e o número de IA/égua vazia não foram influenciados pelos tratamentos. O diluidor de lactose gema, modificado pela retirada do glicerol de sua formulação, constitui uma opção para a diluição do sêmen a ser resfriado e transportado. O suceso do transporte do sêmen, diluído e resfriado, a pequenas distâncias, por período de tempo curto, depende mais de um bom diluídor que de um sofisticado contêiner de transporte.

Avaliação de uma Técnica de Diluição e Transporte de Sêmen Eqüino, para as Condições Brasileiras

Ninety-seven Mangalarga Marchador mares were allocated in a randomized experimental design, with different number of replicates per treatments. The objective of this experiment was to study the effect of raw (T3) or diluted, cooled semen transported to the breeding farms 1 (T1) and 3 (T2), on mare fertility and different aspects of reproductive efficiency. The mares were inseminated, with semen of only one stallion (Farm 2), on alternate days using different inseminating volumes, according to number of inseminated mares per day using only one ejaculate. For transportation, semen diluted in a lactose-egg yolk modified extender and the MSP-2 container were used. There was no difference among treatments in relation to conception rates of mares inseminated with raw or diluted, cooled and transported semen. Regardless of the farm, the total fertility obtained with cooled semen was 80% (52/65). The following variables were not affected by the treatments: cycles/mare, cycles/pregnant mare, cycles/pregnancy, pregnancy/cycle, number of inseminations/mare, number of inseminations/pregnant mare, number of inseminations/open mare and efficiency of pregnancy. However, the breeding farm had an effect on water and semen temperature in the container, time between collection and insemination, according to time and distance covered. Based on the results, cooling and transporting equine semen, using an extender, lactose-egg yolk without glycerine and the MSP-2 container should be recommended for short distances. The use of raw semen immediately after collection is also recommended.

Efeito de Diferentes Concentrações Espermáticas sobre a Fertilidade de Éguas Inseminadas com Sêmen Eqüino Diluído, Resfriado a 20oC e Transportado

One hundred and one estral cycles of 92 Mangalarga Marchador breed mares were analyzed to study the effect of different spermatic concentrations on different reproductive characteristics. The mares were inseminated with diluted equine semen, cooled at 20 degrees C and transported: T1-concentrations below 250 x 10(6) (177.58 +41.74 x 10(6) viable spermatozoa per inseminate dose), T2-concentrations between 250 and 350 10(6) sptz (315.51 +/- 20.78 x 10(6)), and T3-concentrations above 350 x 10(6) sptz (477.71 +/- 136.83 x 10(6)). The conception rates in the first cycle were 43.75 (7/16), 57.89 (11/19)and 54.55% (18/33) for treatments 1, 2 and 3,respectively. After five cycles, the conception rates were 36.00 (9/25), 44.12 (15/34) and 54.76% (23/42) for treatments 1,2 and 3, respectively. Concentrations of 177.58 +/- 41,74 x 10(6) viable spermatozoa perinseminate dose had moderate fertility index in a commercial program using cooled and transported semen.

Efeito de Diferentes Diluídores na Fertilidade de Éguas de Diferentes Haras Inseminadas com Sêmen Diluído, Resfriado e Transportado em Conteiner Especial

The effects of extender and farms on the fertility of sixty-five Mangalarga Marchador breed mares were studied. The mares were randomly assigned to a 2 x 2 factorial experiment, with two breeding farms (H1 and H2) and two extenders (glycine-egg yolk-T1 and lactose-egg yolk modified-T2), from only one stallion, with different number of replicates. The mares were inseminated, on alternated days, with diluted, cooled, transported semen, in a special container (MSP-2). There were no differences in the conception rate at first cycle, regardless of the breeding farm or extender used. Also. there was no difference among breeding farm or extender concerning the conception rate/cycle and the following reproductive characteristics: number of cycles/pregnancy, number of inseminations/mare, inseminations/pregnant mare, inseminations/open mare, water temperature in the container, temperature of semen in the container, time between collection and insemination and efficiency of pregnancy. The use of lactose-egg yolk modified extender for the dilution, cooling and transport of stallion semen between farms is recommended. The new container MSP-2 showed to be a option for the transportation between farms, for the same purpose.

Efeito de diferentes concentrações espermáticas sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen eqüino diluído, resfriado a 20°C e transportado

One hundred and one estral cycles of 92 Mangalarga Marchador breed mares were analyzed to study the effect of different spermatic concentrations on different reproductive characteristics. The mares were inseminated with diluted equine semen, cooled at 20°C and transported: T1 - concentrations below 250×10 6 (177.58±41.74×10 6 viable spermatozoa per inseminate dose), T2 - concentrations between 250 and 350 10 6 sptz (315.51±20.78×106), and T3 - concentrations above 350×10 6 sptz (477.71±136.83×10 6). The conception rates in the first cycle were 43.75 (7/16), 57.89 (11/19) and 54.55% (18/33) for treatments 1, 2 and 3, respectively. After five cycles, the conception rates were 36.00 (9/25), 44.12 (15/34) and 54.76% (23/42) for treatments 1, 2 and 3, respectively. Concentrations of 177.58±41,74×10 6 viable spermatozoa per inseminate dose had moderate fertility index in a commercial program using cooled and transported semen.