Fertilização in vitro com injeção intracitoplasmática de espermatozóide em ciclos naturais

OBJETIVO: avaliar a eficácia da fertilização in vitro (FIV) com injeção intracitoplasmática de espermatozóide (ICSI) em ciclo natural (CN). MÉTODOS: estudo clínico retrospectivo que avaliou 70 ciclos de tratamento em 60 casais que se submeteram ao tratamento de FIV com auxílio da técnica de ICSI em CN em clínica privada de 1999 a 2003. Foi realizada monitorização ultra-sonográfica diária ou em dias alternados, e dosagem de LH urinário a partir de 16 mm de diâmetro folicular. Programada captação oocitária quando o folículo atingiu 18 mm de diâmetro e 36 horas após a administração de gonadotrofina coriônica humana (hCG - 5000UI) quando o teste de LH era negativo. A transferência embrionária foi realizada 48 a 52 horas depois do ICSI. RESULTADOS: foram realizados 70 ciclos de ICSI em 60 pacientes com as seguintes indicações: fator masculino (47,1%), fator tubo-peritoneal (37,1%), fatores associados (8,7%) e infertilidade sem causa aparente (7,1%). Do total de 70 ciclos, 18 foram cancelados (25,7% de taxa cancelamento). Das 52 pacientes que se submeteram à punção ovariana, oócitos maduros foram encontrados em 77% das vezes (40 ciclos). A taxa de fertilização foi de 70% e as taxas de transferência embrionária por punção e por oócito maduro foram de 52 e 67,5%, respectivamente. As taxas de gestação por ciclo iniciado, ciclo puncionado e transferência embrionária foram 11,4, 15,4 e 29,6%, respectivamente. Das oito gestações, sete foram diagnosticadas em pacientes com idade inferior a 37 anos. A única gestação conseguida em pacientes com idade entre 37 e 43 anos evoluiu para abortamento. CONCLUSÕES: ICSI em ciclos naturais parece ser uma opção satisfatória de tratamento, com custos e índice de complicações (gestação múltipla e síndrome de hiperestímulo ovariano) reduzidos. Os resultados são melhores em pacientes mais jovens, com idade inferior a 37 anos.

Ultraestrutura do espermatozóide de Protothaca pectorina (Lamarck) (Mollusca, Bivalvia) do litoral norte do Brasil

The ultrastructure of spermatozoa of the Protothaca pectorina (Lamarck, 1818) is described. The most significam differences were found in the structure and arreangement of the acrosomes, with contains two types of material, one fibrilar, the other electrondense granular. It is concluded that sperm ultrastructure is of the primitive type.

Estrutura fina do espermatozóide de Tagelus plebeius (Lightfoot) (Mollusca, Bivalvia) do litoral norte do Brasil

It is described the sperm ultraestructure differentiation during spermiogenesis of Tagelus plebeius (Lightfoot, 1786). The spermatozoon is an uniflagellated cell of the primitive type. The head region contains a rounded or conical nucleus surrounded by acrosome. The middle piece contains four mitochondria which are arranged around the axoneme. The flagellum contains the usual microtubular axoneme.

Aspectos ultraestruturais do espermatozóide de Natica marochiensish (Gmelin) (Mollusca, Gastropoda) do litoral norte do Brasil

Spermatozoa of Natica marochienssish (Gmelin, 1791) is described by light and electron microscopy. The spermatozoon is of the primitive type with head contains a conical acrosomal complex with an acrosomal vesicle of dense matrix having a basis occupied by the subacrosomal space. The middle piece shows the centriolar complex surrounded by mitochondria and the tail contains the axoneme with a 9+2.

Ultraestrutura do espermatozóide de Ucides cordatus Linnaeus (Crustacea, Ocypodidae) do litoral norte do Brasil

Ultrastructure of spermatozoa of the crab Ucides cordatus Linnaeus, 1763 is described and illustrated. Three parts can be distinguished: 1. the elongate-ovoid acrosome located anteriorly; 2. the cytoplasmic region; and 3. the nuclear region. The acrosome is composed of a thick electron-dense wall and a less electron-dense subacrosomal space. The cytoplasm region connects the acrosome with the nucleus, and three arms filled with microtubules arise from this region. The nucleus is polymorphous. The spermatozoon of Ucides cordatus follows the general pattern described for other Decapods.

Estrutura fina do espermatozóide de Acestrorhynchus falcatus Bloch (Teleostei, Characidae) da região norte do Brasil

Spermatozoa of amazon fish, Acestrorhynchus falcatus Bloch, 1794 were investigated by optical microscopy (DIC) and electron microscopy (TEM). Spermatozoa have no acrosome, the head is ovoid, and the midpiece region cylindrical, contains spherical mitochondria. The centriolar complex is located at the lateral side of the nucleus, formed by nine peripheral pairs of microtubules and arranged in a right angle to each other. The flagellum consists of nine pairs of peripheral and two central microtubules.

Estrutura fina do espermatozóide de Mellita quinquiesperforata Leske (Echinodermata) do litoral norte do Brasil

The fine structure of the spermatozoon in the Mellita quinquiesperforata Leske, 1778 was studied. Collected from the Amazon region, were described by light and transmission electron microscopy. The spermatozoon consisted of a acrosome complex, nucleus, four to six mitochondria, two centrioles and flagellum. The acrosome was composed of a acrosome complex, the acrosomal vesicle and the subacrosomal space. The nucleus are composed by dense material. The middle piece contains 4-6 mitochondria which are arranged around the centrioles, the 9p+0, whose axoneme has the classic 9p+2 microtubular construction.

Uso de sêmen liofilizado de gatos domésticos (Felis silvestris catus) para produção in vitro de embriões através da técnica de injeção intracitoplasmática de espermatozóide (ICSI)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Aspectos da espermatogênese de tucunaré, Cichla ocellaris Schneider, 1801 (TELEOSTEI, CICHLIDAE).

São descritos os eventos citológicos sequenciais da espermatogênese de Cichla ocellaris (tucunaré) desde o espermatócito primário até o espermatozóide maduro. Verificou-se que a espermiogenese compreende cinco diferentes estágios de maturação das espermátides, caracterizadas por transformações da cromatina nuclear e das estruturas citoplasmáticas. O esperatozóide da espécie é do tipo primitivo, apresentando uma cabeça sem acrossomo e uma cauda.

Aspectos morfológicos e ultraestruturais do Espermatozóide de Curimata Inornata Vari, 1989 (Pisces, Teleostei) do Rio Amazonas

Estão descritos aspectos morfológicos e ultraestruturais do espermatozóide de Curimata inornata Vavi, 1989 (Pisces,Teleostei) observados com microsopia óptica e microscopia eletrônica de transmissão. O espermatozóide é constituído de cabeça, contendo um núcleo ovoide com cromatina granular densa, uma peça intermediária curta e uma cauda com a constituição axonêmica clássica de microtúbulos de 9p+2.

Espermiogênese em Eupemphix nattereri (Anura, Leiuperidae): aspectos ultra-estruturais

A maturação dos espermatozóides envolve um extenso e complexo processo que começa com a proliferação e diferenciação das espermatogônias, passa pela meiose e finaliza com a espermiogênese. Nessa fase, eventos envolvendo alterações morfológicas e bioquímicas transformam espermátides em espermatozóides. Aspectos ultra-estruturais da espermiogênese e do espermatozóide do anuro Eupemphix nattereri (Steindachner, 1863) foram analisados através de microscopia eletrônica de transmissão. A espermiogênese envolve condensação da cromatina e alongamento nuclear, com visível eliminação de citoplasma. Nesse estágio, grande quantidade de microtúbulos e glicogênio podem ser visualizados no citoplasma das células de Sertoli, rodeando cada espermátide. O espermatozóide é fusiforme e o acrossomo forma uma capa na região anterior do núcleo. A bainha mitocondrial é encontrada ao redor da porção proximal da cauda. A cauda apresenta o axonema com o modelo 9+2, uma fibra axonemal, a membrana ondulante e ausência de bastão axial. Esta organização apresenta algumas similaridades com espécies do gênero Physalaemus (Leiuperidae) como P. biligonigerus (Cope, 1861), P. gracilis (Boulenger, 1883) e P. fuscomaculatus (Steindachner, 1864).

Efeito do tamanho do folículo na maturação nuclear e citoplasmática de ovócitos de fêmeas zebuínas

Este estudo avaliou o efeito do tamanho do folículo na capacidade dos ovócitos de sofrerem maturação nuclear e citoplasmática. Ovários de vacas Nelore (Bos indicus) foram coletados logo após o abate, e os complexos cúmulus-ovócitos foram aspirados de folículos de diferentes categorias, e classificados de acordo com seus diâmetros em: 1-2 mm, 3-5 mm, 6-8 mm e > ou = 9 mm. A medida do diâmetro e a fixação dos ovócitos para avaliação do estádio nuclear antes da maturação foram feitas logo após a aspiração. Ovócitos morfologicamente viáveis foram maturados, fecundados e cultivados in vitro. Os ovócitos obtidos de folículos de 1-2 mm apresentaram menor diâmetro (P<0,01) do que os dos demais grupos. Antes da maturação, 89,8%, 90,1%, 85,7% e 100% dos ovócitos provenientes de folículos de 1-2, 3-5, 6-8 e > ou = 9 mm de diâmetro, respectivamente, apresentavam vesícula germinativa. O tamanho do folículo não influenciou (P<0,05) a taxa de maturação nuclear. A porcentagem de ovócitos que chegaram a metáfase II foi de 88,8%, 87,8%, 92,9% e 100% no que se refere aos ovócitos de folículos de 1-2, 3-5, 6-8 e > ou = 9 mm, respectivamente. As taxas de penetração e clivagem foram semelhantes (P>0,05) nos grupos de 1-2 mm (93,4% e 81,9%), 3-5 mm (90,7% e 79,6%), 6-8 mm (91,3% e 77,8%) e > ou = 9 mm (92,0% e 78,3%). Da mesma forma, não houve diferenças (P>0,05) entre as categorias de folículos no que se refere às taxas de polispermia, descondensação da cabeça do espermatozóide e formação de pro-núcleos. Os resultados deste estudo demonstram que na espécie B. indicus, folículos com diâmetro de 1 mm até > ou = 9 mm não influenciaram a capacidade dos ovócitos de reiniciar e completar a meiose e de clivar após maturação e fecundação in vitro.

Fertilidade de sêmen suíno avaliada pelo teste de ligação dos espermatozóides a um substrato sintético

O objetivo deste trabalho foi avaliar a fertilidade de sêmen suíno pelo teste de ligação de espermatozóides a um substrato sintético. A motilidade (MOT) e o porcentual de espermatozóides ligados (PEL) foram avaliados após 5, 24, 48 e 72 horas de armazenamento a 17ºC. O PEL foi determinado em soluções contendo 6,25 ou 12,5 milhões de espermatozóides/mL, com ou sem albumina sérica bovina (BSA), preparadas a partir de dois a cinco ejaculados de cada um dos quatro machos. Cinqüenta e oito leitoas foram inseminadas, uma vez, 24 horas após o início do estro. Houve correlação positiva (P = 0,0001; r = 0,33) entre a MOT e o PEL. O PEL foi maior com 12,5 milhões de espermatozóides/mL e na presença de BSA (P<0,05). Após 72 horas, o macho 3 apresentou PEL inferior ao dos outros três (P<0,05). As taxas de clivagem (TC) e de embriões morfologicamente normais não diferiram entre indivíduos, mas o macho 3 apresentou menos de 70,0% de TC no quartil superior, enquanto os outros tiveram mais de 75,0%. Os machos diferem quanto à capacidade de ligação de seus espermatozóides ao substrato sintético, a partir de 24 horas de armazenamento do sêmen. A ligação dos espermatozóides ao substrato sintético é maior com a inclusão de BSA e com o aumento da concentração espermática.