Molecular mechanism of PUVA-induced apoptosis in mouse epidermal cells

A combination of psoralens and ultraviolet-A radiation referred to as PUVA, is widely used in the treatment of psoriasis. PUVA therapy is highly effective in killing hyperproliferative cells, but its mechanism of action has not been fully elucidated. Psoralen binds to DNA, and upon photoactivation by UVA, it forms monofunctional adducts and interstrand cross-links. PUVA treatment has been shown to be mutagenic and to produce tumors in animals. In addition, epidemiological studies have reported a 10 to 15 percent increased risk of developing squamous cell carcinoma in individuals treated chronically with PUVA. However, it remains a treatment for skin disorders such as psoriasis because its benefits outweigh its risks. The widespread use of PUVA therapy and its associated cancer risk requires us to understand the molecular mechanisms by which PUVA induces cell death. Immortalized JB6 mouse epidermal cells, p53−/− mice, and Fas Ligand−/− (gld) mice were used to investigate the molecular mechanism by which PUVA kills cells. Treatment of JB6 cells with 10 μg/ml 8-methoxypsoralen followed by irradiation with 20 kJ/m2 UVA resulted in cell death. The cells exhibited morphological and biochemical characteristics of apoptosis such as chromatin condensation, DNA ladder formation, and TUNEL-positivity. PUVA treatment stabilized and phosphorylated p53 leading to its activation, as measured by nuclear localization and induction of p21Waf/Cip1, a transcriptional target of p53. Subsequent in vivo studies revealed that there was statistically significantly less apoptosis in p53 −/− mice than in p53+/+ mice at 72 hours after PUVA. In addition, immunohistochemical analysis revealed more Fas and FasL expression in p53+/+ mice than in p53−/− mice, suggesting that p53 is required to transcriptionally activate Fas, which in turn causes the cells to undergo apoptosis. Studies with gld mice confirmed a role for Fas/FasL interactions in PUVA-induced apoptosis. There was statistically significantly less apoptosis in gld mice compared with wild-type mice 24, 48, and 72 hours after PUVA. These results demonstrate that PUVA-induced apoptosis in mouse epidermal cells requires p53 and Fas/FasL interactions. These findings may be important for designing effective treatments for diseases such as psoriasis without increasing the patient's risk for skin cancer. ^

Sensitized formation of oxidatively generated damage to cellular DNA by UVA radiation

The survey is aimed at critically reviewing information on the UVA-mediated oxidative reactions to cellular components with emphasis on DNA as the result of mostly photosensitized pathways. It appears clearly that UVA radiation is relatively much more efficient than UVB photons in inducing oxidative processes. The main UVA-induced oxidative degradation pathways of DNA are reported and discussed mechanistically. They are mostly rationalized in terms of a major contribution of singlet molecular oxygen ((1)O(2)) and to a lesser extent of hydroxyl radical ((center dot)OH), that in the latter case originates from Fenton-type reactions. This leads to the predominant formation of 8-oxo-7,8-dihydroguanine together with smaller amounts of oxidized pyrimidine bases and DNA strand breaks in UVA-irradiated cells.

Chlorogenic Acid UVA-UVB Photostability

Chlorogenic acid is a natural potent antioxidant. It can be used in cosmetics formulations, but for this purpose its photochemical stability should be determined to ensure that the compound will not be degraded after UV radiation exposure. To evaluate this possibility, the concentration of a chlorogenic acid solution was determined by HPLC before and after UVA and UVB irradiation. The results indicate that chlorogenic acid is not degraded under UVA or UVB irradiation.

Atividade fotossintética do bago de uva (Vitis vinifera, cv. Alvarinho) ao longo do desenvolvimento dos cachos em diferentes microambientes de luz

Dissertação de mestrado em Biologia Molecular, Biotecnologia e Bioempreendedorismo em Plantas

Efeitos do ethephon sobre a produção da uva 'Niagara Rosada' (Vitis labrusca L.), produzida na entressafra na região de Jales-SP

A produção de 'Niagara Rosada' na entressafra, embora sendo uma excelente opção para os viticultores de Jales-SP, é problemática devido à dificuldade de emissão e desenvolvimento das brotações após a poda, realizada nos meses de ocorrência de temperaturas inferiores a 10ºC, o que tem causado pequenas produções e desestímulo entre os viticultores. Visando a solucionar este problema, foram conduzidos seis experimentos nos anos de 2001 e 2002, cujo objetivo foi verificar o efeito do ethephon aplicado antes da poda sobre o número de cachos, a produção e a qualidade da uva. Foram testadas as doses 0; 3; 6 e 9L.ha-1 de ethephon aplicado via foliar. Concluiu-se que o uso de ethephon proporcionou aumento do número de cachos e da produtividade de 'Niagara Rosada', especialmente quando da ocorrência de condições climáticas desfavoráveis e com satisfatório grau de enfolhamento. A utilização de ethephon na dose de 9L.ha-1 proporcionou aumento da produtividade da uva 'Niagara Rosada' na entressafra.

Efeito do ethephon na qualidade da uva 'Niagara Rosada' (Vitis labrusca L.), produzida na entressafra, na região de Jales-SP

Na região de Jales (SP), a produção de uva 'Niagara Rosada' obtida de videiras podadas em períodos de ocorrência de baixas temperaturas é, em geral, insatisfatória, apresentando pequena produtividade e cachos com qualidade inadequada à comercialização. Essa qualidade da produção está intimamente relacionada à efetiva brotação. Assim, este trabalho teve o objetivo de avaliar a aplicação do ethephon em diferentes doses antes da poda, visando a melhorar a brotação e a qualidade dos cachos, em seis experimentos, durante os anos de 2001 e 2002. Foram testadas as doses de 0; 3; 6 e 9 L.ha-1 de ethephon aplicado via foliar. Concluiu-se que o uso de ethephon, na dose de 9 L.ha-1, proporcionou cachos e bagas maiores e com maiores pesos, comprimento e largura, melhorando o aspecto dos mesmos. A aplicação de ethephon não afetou os teores de sólidos solúveis totais e a acidez total titulável, não alterando o sabor da uva 'Niagara Rosada'.

Efeitos do thidiazuron e do ácido giberélico nas características dos cachos de uva de mesa cultivar Rubi, na região da Nova Alta Paulista

Com o objetivo de avaliar os efeitos de thidiazuron e de ácido giberélico nas características dos cachos de uvas 'Rubi', foi conduzido um experimento, utilizando-se de thidiazuron a 5 e 10 mg.L-1 e ácido giberélico a 20mg.L-1, combinados ou não. As aplicações dos produtos foram realizadas aos 14; 21 ou 28 dias após o pleno florescimento, por meio de imersão dos cachos. Todos os tratamentos com reguladores de crescimento aumentaram a massa dos cachos. A massa dos bagos e dos engaços foi identicamente influenciada pela aplicação dos produtos, porém menos evidente, quando as aplicações foram realizadas aos 28 dias após o pleno florescimento. As aplicações de thidiazuron a 5mg.L-1, aos 14 ou 21 dias após o florescimento, não diferiram das aplicações de ácido giberélico para as variáveis estudadas. Não houve diferenças significativas para as variáveis teor de sólidos solúveis totais, acidez titulável, porém os tratamentos com thidiazuron retardaram a maturação em até 7 dias.

Análise isotópica (δ¹³C) e legalidade em néctares de uva

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Análise isotópica (δ13c) e legalidade em néctares de uva

The aim of this work was to develop an isotopic analysis method to quantify the carbon of C3 photosynthesis cycle in grape nectar and to identify the commercial beverages in disagreement to the Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA) regulation. The nectars were produced in a laboratory, according to the Brazilian Law. Adulterated beverages with quantity of grape juice lower than the legal limit were also produced. Isotopic analysis measured the relative isotopic enrichment of grape nectar and its purified sugar fraction. Based on these results, it was possible to estimated the quantity of source C3 by means of isotopic dilution equation. To determine the existence of adulteration in commercial nectars, it was necessary to create a legal limit according to the Brazilian Law. One of the twelve commercial brands of nectar analyzed was classified as adulterated. The developed methodology proved to be efficient to quantify the carbon of C3 origin and identify the adulterated commercial grape nectar.

Influência de pré-tratamentos com emulsões a base de lecitina e óleo de soja na cinética de secagem da uva rubi

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Níveis e épocas de aplicação de etefon sobre a coloração e a qualidade dos frutos da uva rubi (Vitis vinifera L.), cultivada na região noroeste do Estado de São Paulo

Pós-graduação em Agronomia (Horticultura) - FCA

Ação de biorreguladores na brotação, produção e algumas características físico-químicas de uva do cultivar Superior Seedless

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Produção de uva passa de BRS Morena: pré-tratamento, caracterização físico-química e composição fenólica

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Produção de bebida mista de extrato hidrossolúvel de soja e suco de uva submetida a diferentes doses de radiação gama

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Pré-tratamento e hidrólise da casca de uva para liberação de açúcares fermentescíveis

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)