NONINVASIVE MONITORING OF ANDROGENS IN MALE AMAZONIAN MANATEE (TRICHECHUS INUNGUIS): BIOLOGIC VALIDATION

The Amazonian manatee (Trichechus inunguis) is endemic in the Amazonian basin and is the only exclusively fresh water sirenian. Historically hunted on a large scale, this species is now considered endangered, and Studies on the reproductive physiology are critical for the improvement of reproductive management of captive and wild Populations of manatees. The aim of this Study was to verify the viability of androgen measurement in saliva, lacrimal, urine, and fecal samples of the Amazonian manatee by conducting a hormone challenge. Two adult male manatees (A-1 and A-2) were Submitted to an experimentation protocol of 12 day (D1 to D10). On D0, the animals received an intramuscular injection of gonadotropin-releasing hormone (GnRH)-analogue. Salivary, lacrimal, urinary, and fecal samples were collected daily (between 0800 hours and 0900 hours) and frozen at -20 degrees C until assayed. Fecal samples were lyophilized, extracted with 80% methanol, and diluted in buffer before the radioimmunoassay (RIA). Urine samples underwent acid hydrolysis and were diluted in depleted bovine serum. Salivary and lacrimal samples were assayed without the extraction step. Hormonal assays were conducted with a commercial testosterone RIA kit. An androgen peak (>median + 2 interquartile range [IQR]) was observed in all matrices of both animals, although it was less prominent in the lacrimal samples of A-2. However, the fecal androgen peak (A-1 peak = 293.78 ng/g dry feces, median [IQR] = 143.58 [32.38] ng/g dry feces; A-2 peak = 686.72 ng/g dry feces, median [IQR] = 243.82 [193.16] ng/g dry feces) occurred later than urinary (A-1 peak = 648.16 ng/mg creatinine [Cr], median [IQR] = 23.88 [30.44] ng/mg Cr; A-2 peak = 370.44 ng/mg Cr, median [IQR] = 113.87 [117.73] ng/mg Cr) and salivary (A-1 peak = 678.89 pg/ml, median [IQR] = 103.69 [119.86] pg/ml; A-2 peak = 733.71 pg/ml, median [IQR] = 262.92 [211.44] pg/ml) androgen peaks. These intervals appear to be correlated with the long digesta passage time in this species. The salivary and urinary peaks were closely associated. These results demonstrate that androgen concentrations in saliva, urine, or feces samples reflect reliably physiologic events and are a powerful tool for noninvasive reproductive monitoring of Amazonian manatees.

Placentation in the Amazonian manatee (Trichechus inunguis)

Evidence from several sources supports a close phylogenetic relationship between elephants and sirenians. To explore whether this was reflected in similar placentation, we examined eight delivered placentae from the Amazonian manatee using light microscopy and immunohistochemistry. In addition, the fetal placental circulation was described by scanning electron microscopy of vessel casts. The manatee placenta was zonary and endotheliochorial, like that of the elephant. The interhaemal barrier comprised maternal endothelium, cytotrophoblasts and fetal endothelium. We found columnar trophoblast beneath the chorionic plate and lining lacunae in this region, but there was no trace in the term placenta of haemophagous activity. The gross anatomy of the cord and fetal membranes was consistent with previous descriptions and included a four-chambered allantoic sac, as also found in the elephant and other afrotherians. Connective tissue septae descended from the chorionic plate and carried blood vessels to the labyrinth, where they gave rise to a dense capillary network. This appeared to drain into shorter vessels near the chorionic plate. The maternal vasculature could not be examined in the same detail, but maternal capillaries ran rather straight and roughly parallel to the fetal ones. Overall, there is a close resemblance in placentation between the manatee and the elephant.

Tempo de passagem de duas dietas no trato gastrointestinal do peixe-boi da Amazônia Trichechus inunguis (Natterer, 1883) em cativeiro

Com o objetivo de testar o tempo de passagem do alimento no trato digestório de peixes-bois da Amazônia em cativeiro, foram testadas separadamente duas dietas distintas. Uma composta exclusivamente de capim do gênero Brachiaria (dieta experimental - DE 1) e outra de capim do gênero Brachiaria acrescentado de pequenas porções de ração extrusada para eqüinos (dieta experimental - DE 2). Foram selecionados do plantel do INPA dois animais adultos machos sadios, os quais foram isolados dos demais e submetidos a um período de aclimatação às dietas experimentais por 15 dias. Após este período, as dietas foram marcadas com uma fita plástica de 10 cm e fornecidas aos animais que foram monitorados em intervalos de uma hora. Todo material fecal foi coletado até a recuperação dos marcadores plásticos. A média do tempo de passagem da DE 1 foi de 123h57min, cerca de 5,15 dias e da DE 2 foi de 125h04min ou 5,21 dias. Não houve diferença estatística (P<0,05) entre as dietas fornecidas. O tempo de passagem observado (aproximadamente 5 dias) coincide com o relatado por outros autores para a espécie, sendo esse tempo considerado uma estratégia para aumentar o tempo de absorção nutricional dos alimentos. Apesar do número reduzido de amostras, os resultados sugerem que o uso da ração na alimentação não interfere no tempo de passagem do capim pelo trato digestório do peixe-boi. Com isso, sugere-se que a introdução de alimento concentrado (ração) não afeta a eficiência na digestão e absorção correta do alimento.

Etnoconhecimento do peixe-boi amazônico (Trichechus inunguis): uso tradicional por ribeirinhos na Reserva Extrativista Tapajós Arapiuns e Floresta Nacional do Tapajós, Pará

A atividade de caça é praticada por populações rurais da Amazônia, sendo utilizada tanto para fins de subsistência, como comercial. Esta prática faz com que o amazônida adquira conhecimento sobre o ambiente e as espécies autóctones, interagindo de forma direta com a natureza. O peixe-boi amazônico (Trichechus inunguis) é um animal tradicionalmente utilizado por ribeirinhos, mesmo estando protegido por Lei desde 1967. Diante do exposto, este trabalho teve dois objetivos principais: 1- analisar o uso do peixe-boi amazônico na Reserva Extrativista Tapajós Arapiuns (RESEX T/A) e na Floresta Nacional do Tapajós (FLONA do Tapajós), segundo o conhecimento dos ribeirinhos; 2- caracterizar o nível de organização social das comunidades como forma de identificar a viabilidade para a implantação de alternativas sustentáveis de produção animal. Para isso realizaram-se duas expedições às margens dos rios Tapajós (2002) e rio Arapiuns (2003) (Pará - Brasil) nos limites das Unidades de Conservação (UCs) citadas acima. Foram utilizados questionários pré-elaborados e realizadas 189 entrevistas. A atividade principal dos ribeirinhos entrevistados na duas UCs foi a agricultura (n=103 ribeirinhos). Segundo os relatos, são avistados um ou dois peixes-boi, durante a época de cheia e neste mesmo período a fêmea é vista com o filhote. Este animal é visto tanto no rio Tapajós (41,57%, n= 74) como nos lagos da região (47,19%, n= 84), diferente do que foi observado nas comunidades do rio Arapiuns cujos relatos indicam um avistamento maior no rio (56,56%, n=56) do que nos lagos (30,3%, n=30). Quarenta e nove ribeirinhos das UCs estudadas admitiram já terem caçado o peixe-boi, sendo que somente na RESEX T/A 46,34% (n= 19) caçaram para subsistência, enquanto que na FLONA do Tapajós 50% (n= 4) dos casos foi para o comércio e 37,5% (n= 3) foi para a subsistência. Mas é oportuno ressaltar que o número de caçadores da FLONA do Tapajós (n=8) foi pequeno para se afirmar um padrão de uso do T. inunguis. Nestas UCs 92,59% (n= 175) dos caçadores sabiam da proibição da caça. Sendo que em 46,33% (n= 101) das respostas esta informação foi obtida por meio do IBAMA. Em relação aos utensílios de caça, o arpão foi o mais utilizado. O uso mais comum foi como alimento, sendo identificado no animal três tipos diferentes de carne, de acordo com a visão dos ribeirinhos. Na medicina tradicional a banha foi empregada sobretudo nos casos de reumatismo 22,75% (n= 43). As UCs possuem juntas aproximadamente 26 mil habitantes, oferecer alternativas sustentáveis de alimento, trabalho e renda poderiam melhorar a realidade adversa das comunidades. Há um histórico de luta pelo direito a terra e melhoria da qualidade de vida nas UCs, 86,77% das comunidades da RESEX T/A fazem parte de associações, e na FLONA do Tapajós 68%. Em ambas houveram experiências com projetos comunitários, embora existam ainda limitações em algumas comunidades, como a falta de assistência técnica contínua e de maior engajamento por parte dos moradores, estes fatores representam uma limitação importante para a implementação de atividades produtivas dentro do contexto do desenvolvimento sustentável.

OCCURRENCE OF ANTIBODIES TO TOXOPLASMA GONDII AND LEPSTOSPIRA SPP. IN MANATEES (TRICHECHUS INUNGUIS) OF THE BRAZILIAN AMAZON

The presence of Toxoplasma gondii and Leptospira spp. antibodies was investigated in 74 manatees (Trichechus inunguis [Mammalia: Sirenia]) kept in captivity in two rescue units in the northern region of Brazil. Antibodies to T gondii were detected in 29 (39.2%) of 74 animals by using the modified agglutination test (titer, 1:25). For antibodies against Leptospira spp., sera were diluted 1:50 and tested against 24 strains of leptospires by microscopic agglutination microtechnique, and positive samples were end titrated. Twenty-three (31.1%) of 74 animals were reactive to four serovars (Patoc 21/23, Castellonis 2/23, Icterohaemorrhagiae 1/23, and Butembo 1/23), with titers ranging from 100 to 1,600. This is the first report of antibodies against T gondii and Leptospira spp. in T. inunguis from the Brazilian Amazon.

Análise da ocorrência de peixes-boi com base no conhecimento ecológico local e nos parâmetros ambientais na costa leste da Ilha de Marajó, Pará

Atualmente, existem ao redor do mundo três espécies de peixes-boi: a) Trichechus manatus (Linnaeus, 1758); b) Trichechus senegalensis (Link, 1795) e c) Trichechus inunguis (Natterer, 1883), todas pertencentes à família Trichechidae. Algumas características ambientais parecem influenciar a presença dos peixes-boi em uma determinada área, tais como: i) temperatura da água – principalmente para áreas subtropicais, ii) profundidade dos corpos d’água, iii) salinidade e iv) ação das marés; v) disponibilidade de alimento e vi) baixa hidrodinamica. Apesar de as espécies de sirênios existentes no Brasil estarem protegidas pela Lei Federal de Proteção à Fauna (Lei nº 5.197, de 03-01-1967) e sua alteração (Lei nº 7.653, de 18-12- 1987) e pela Lei de Crimes Ambientais (Lei nº 9.605/98, de 12-02-98), o peixe-boi amazônico e o peixe-boi marinho ainda correm risco de desaparecimento em um futuro próximo, sendo por isso, considerados como vulnerável e muito ameaçado de extinção, respectivamente, pela Portaria IBAMA nº 1.522/89. O presente estudo tem como objetivo investigar a ocorrência de sirênios do gênero Trichechus com base no conhecimento ecológico local e nos parâmetros ambientais existentes na costa leste da Ilha do Marajó, no Estado do Pará. Para tanto foi avaliado o nível de conhecimento dos pescadores locais sobre os peixes-boi; mapeada as áreas de ocorrência dos peixes-boi com base no conhecimento ecológico local e determinou as áreas de maior ou menor probabilidade de ocorrência de peixes-boi com base em indicadores ambientais. Os pescadores locais possuem um excelente conhecimento sobre o peixe-boi, informando características morfológicas, hábito alimentar e preferências ambientais satisfatórias. As ameaças diretas (caça) para a região não estão evidentes devido à diminuição de mão de obra especializadas, havendo apenas captura oportuna. Foi registrado durante o estudo dois encalhes na região e segundo informações de mortalidade de Trichechus spp. na área, nos últimos 50 anos morrem no mínimo 43 animais, sendo estes principalmente usados na farmacologia e consumo. O município de Salvaterra é o com maior probabilidade de ocorrência de peixe-boi segundo as características ambientais (menor intensidade de correntes, baixa salinidade, abundancia de alimento, menor tráfego de embarcações motorizadas) corroborando com os dados do conhecimento ecológico local, que indica a mesma área como de uso pelos peixes-boi. Apesar do incremento nos últimos anos nos estudos dos peixes-boi para o estado do Pará, ainda se faz necessário o investimento maior na pesquisa acerca desses animais. A continuidade das ações relacionadas ao manejo e a conservação dos peixes-boi devem ser somadas a participação dos atores sociais para uma rede de informações mais eficiente a fim de minimizar a perda de hábitat, os encalhes e aperfeiçoar as ações de resgate e reabilitações dos sirênios no estado. A foz do rio Amazonas deve ser especialmente estudada, pois se trata de uma área de simpatia das duas espécies ocorrentes no Brasil que influencia diretamente na conservação dos peixes-boi do todo o país.

Impacto de interações antrópicas sobre o comportamento de peixes-boi marinhos (Trichechus manatus manatus) reintroduzidos no litoral norte de Alagoas

Atualmente o encalhe de filhotes órfãos representa uma das principais ameaças à conservação do peixe-boi marinho (Trichechus manatus manatus) no litoral nordeste do Brasil. O Projeto Peixe-boi resgata os filhotes encalhados, reabilita em cativeiro e reintroduz estes animais em áreas de ocorrência histórica e em locais onde a população está em declínio. Estudos sobre comportamento animal fornecem uma importante ferramenta para avaliação dos Programas de Reintrodução. Os trabalhos existentes sobre comportamento de peixes-boi marinhos em vida livre sujeitos a interações antrópicas restringem-se a animais nativos na Flórida. No Brasil, há estudos etológicos apenas com espécimes em cativeiro ou recinto em ambiente natural. O objetivo do trabalho foi verificar possíveis alterações comportamentais de peixes-boi reintroduzidos, ou seja, que passaram parte da vida em cativeiro e foram soltos em ambiente natural, em função de interações antrópicas. No período de Fevereiro a Julho de 2010, com o auxílio da radio-telemetria, uma fêmea e dois machos (8 anos de idade) foram observados diariamente, em períodos alternados, com a metodologia do “animal focal”. Para o monitoramento, utilizou-se bicicleta, caiaque e, em locais de difícil acesso, o mesmo foi feito a pé. Totalizou-se 114 horas de observação para Arani e 167 horas para Potiguar. As observações da fêmea Aira ficaram comprometidas em função da perda do equipamento de radio-telemetria. A análise dos dados mostrou uma alta freqüência de comportamentos de interação (mais de 50%) em relação aos demais comportamentos de função vital para os dois machos. Dessas interações, as com animais de mesma espécie e objeto atingiram elevadas freqüências. Verificou-se ainda que a categoria afiliativa foi predominante nas interações entre peixes-bois... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Studio preliminare sul comportamento acustico di Trichechus manatus in ambiente controllato presso Acquario di Genova

Il lamantino (Trichechus manatus) appartiene alla famiglia dei Trichechidae, vivono nel golfo del messico e lungo le coste Atlantiche dell’America centrale. Considerando i comportamenti abituali di questa specie in natura risulta essere difficoltoso investigare il comportamento sociale. Spesso gli individui che producono un suono non riescono ad essere identificati e quindi il contesto in cui un segnale viene prodotto rimane sconosciuto. L’osservazione ed il monitoraggio di individui in ambiente controllato può portare un contributo considerevole nell’aumentare le conoscenze di questa specie. In questo studio abbiamo potuto osservare il comportamento di due giovani esemplari maschi mantenuti all’Acquario di Genova. In questo progetto di ricerca l’obbiettivo è quello di caratterizzare i comportamenti giornalieri e quindi le abitudini dei due esemplari in esame; inoltre mediante l’analisi dei vocalizzi e dei contesti nei quali vengono prodotti i segnali, si è cercato di individuare le abitudini acustiche di questi esemplari. Gli animali sono stati osservati per 8giorni per un totale di 192 ore di registrazioni acustiche e osservazioni comportamentali; i segnali sono stati registrati con l’ausilio di un idrofono su un PC, con un range di frequenza tra i 100Hz fino ai 22kHz. I segnali acustici cosi raccolti sono stati analizzati tramite Adobe Audition 3.0, che ha fornito le immagini dei vari spettri d’onda. Questi dati acustici e comportamentali hanno permesso di identificare 6 differenti pattern comportamentali e 10 tipologie di segnali acustici. L’analisi di questi dati hanno permesso di definire le abitudini comportamentali dei due esemplari le differenze e l’andamento della “giornata tipo”. Confrontando i contesti comportamentali nei quali i segnali sono stati emessi si sono potuti evidenziare i momenti in cui i segnali vengono emessi e quindi quando avviene comunicazione tra questi due esemplari.

The placentation of the manatee (Trichechus latirostris) / by George B. Wislocki.

v.54:no.3 (1935)

Manual of procedures for the salvage and necropsy of carcasses of the West Indian Manatee (Trichechus manatus) /

"A few minor corrections were made and this manuscript was reprinted in September 1984."

Anatomische und zoologische untersuchungen über das wallross (Trichechus rosmarus) und vergleichung dieses thiers mit andern see-saugethieren,

Mode of access: Internet.

Immunocytes of the Atlantic bottlenose dolphin (Tursiops truncatus) and West Indian manatee (Trichechus manatus latirostris): Morphologic characterizations and correlations between healthy and disease states under free-ranging and captive conditions

Interest in the health of marine mammals has increased due, in part, to the attention given to human impact on the marine environment. Recent mass strandings of the Atlantic bottlenose dolphin (Tursiops truncatus) and rising mortalities of the endangered Florida manatee (Trichechus manatus latirostris) have raised questions on the extent to which pollution, infectious disease, "stress," and captivity influence the immune system of these animals. This study has provided the first in-depth characterization of immunocytes in the peripheral blood of dolphins (n = 190) and manatees (n = 56). Immunocyte morphology and baseline values were determined in clinically normal animals under free-ranging, stranded and captive living conditions as well as by age and sex. Additionally, immunocyte population dynamics were characterized in sick animals. This was accomplished with traditional cytochemical techniques and new lymphocyte phenotyping methodology which was validated in this study. Traditional cytochemical techniques demonstrated that blood immunocyte morphology and cell numbers are similar to terrestrial mammals with some notable exceptions. The manatee heterophilic granulocyte is a morphologically unique cell and probably functions similarly to the typical mammalian neutrophil. Eosinophils were rarely found in manatees but were uncommonly high in healthy and sick dolphins. Basophils were not identified. Manatees had higher total lymphocyte numbers compared to dolphins and most terrestrial mammals. Lymphocyte subsets identified in healthy animals included T$\rm\sb{h}$, T$\rm\sb{c/s}$, B and NK cells. Dolphin and manatee T and B cell values were higher than those reported in man and most terrestrial mammals. The manatee has extraordinarily high absolute numbers of circulating T$\rm\sb{h}$ cells which suggests an enhanced immunological response capability. With few exceptions, immunocyte types and absolute numbers were not significantly different between free-ranging, stranded and captive categories or between sex and age categories. The evaluation of immunocyte dynamics in various disease states demonstrated a wide variation in cellular responses which provided new insights into innate, humoral and cell-mediated immunity in these species. Additionally, this study demonstrated that lymphocyte phenotyping has diagnostic significance and could be developed into a potential indicator of immunocompetence in both free-ranging and captive dolphin and manatee populations.

Immunocytes of the Atlantic bottlenose dolphin (Tursiops truncatus) and West Indian manatee (Trichechus manatus latirostris) : morphologic characterizations and correlations between healthy and disease states under free-ranging and captive conditions

Interest in the health of marine mammals has increased due, in part, to the attention given to human impact on the marine environment. Recent mass strandings of the Atlantic bottlenose dolphin (Tursiops truncatus) and rising mortalities of the endangered Florida manatee (Trichechus manatus latirostris) have raised questions on the extent to which pollution, infectious disease, "stress," and captivity influence the immune system of these animals. This study has provided the first in-depth characterization of immunocytes in the peripheral blood of dolphins (n=180) and manatees (n=56). Immunocyte morphology and baseline values were determined in clinically normal animals under free-ranging, stranded and captive living conditions as well as by age and sex. Additionally, immuocyte population dynamics were characterized in sick animals. This was accomplished with traditional cytochemical techniques and new lymphocyte phenotyping methodology which was validated in this study. Traditional cytochemical techniques demonstrated that blood immunocyte morphology and cell numbers are similar to terrestrial mammals with some notable exceptions. The manatee heterophilic granulocyte is a morphologically unique cell and probably functions similarly to the typical mammalian neutrophil. Eosinophils were rarely found in manatees but were uncommonly high in healthy and sick dolphins. Basophils were not identified. Manatees had higher total lymphocyte numbers compared to dolphins and most terrestrial mammals. Lymphocyte subsets identified in healthy animals included Th, Tes, B and NK cells. Dolphin and manatee T and B cell values were higher than those reported in man and most terrestrial mammals. The manatee has extraordinarily high absolute numbers of circulating Th cells which suggests an enhanced immunological response capability. With few exceptions, immunocyte types and absolute numbers were not significantly different between free-ranging, stranded and captive categories or between sex and age categories. The evaluation of immunocyte dynamics in various disease states demonstrated a wide variation in cellular responses which provided new insights into innate, humoral and cell-mediated immunity in these species. Additionally, this study demonstrated that lymphocyte phenotyping has diagnostic significance and could be developed into a potential indicator of immunocompetence in both free-ranging and captive dolphin and manatee populations.

Degenerate dentition of the dugong (Dugong dugon), or why a grazer does not need teeth: morphology, occlusion and wear of mouthparts

The morphology and functional occlusion of the cheekteeth of 57 dugongs Dugong dugon of both sexes were examined using reflected light and scanning electron microscopy, radiography, hardness testing and skull manipulation. The functional morphology of the horny oral pads was also described. Mouthparts and body size allometry was examined for ontogenetic and gender-related trends. We found that the worn erupted cheekteeth of the dugong are simple flat pegs composed of soft degenerative dentine. During occlusion, the mandible moves in a mainly antero-lingual direction, with the possibility of mandibular retraction in some individuals. Anterior parts of the cheektooth row may become non-functional as a dugong ages. As a function of body size, dugong cheekteeth are extremely small compared with those of other mammalian herbivores, and with other hindgut fermenters in particular. The morphology, small size and occlusal variability of the cheekteeth suggest that there has not been strong selective pressure acting to maintain an effective dentition. In contrast, great development of the horny pads and associated skull parameters and their lower size variability suggest that the horny pads may have assumed the major role in food comminution.

Correlates of Boater Knowledge and Views Regarding the Florida Manatee and Manatee Related Issues

Scientists are extremely concerned that the Florida manatee, Trichechus manatus latirostris, does not have a sufficient population number nor reproductive rate to ensure long-term species viability. This research was done to investigate aspects of boater behavior in an effort to determine measures that might decrease boat-manatee collisions and help researchers plan intervention strategies in related areas. Initially, boat data was collected over a period of several months at a Miami waterway. Next, a detailed phone survey of boat owners was conducted. Although most boaters were found noncompliant with the speed zone, several questions from the survey showed that most valued manatees and almost half wanted them to remain listed as endangered. This is very encouraging as boater support for the manatee is possibly one of the most important indicators of manatee chances for survival. Suggestions included requiring mandatory boating classes and informing boaters of faster routes to their destinations.