Germline mutation analysis of Tpit in Poodle dogs with ACTH-dependent hyperadrenocorticism

There is a high incidence of pituitary-dependent hyperadrenocorticism (PDH) in Poodle dogs, with family members being affected by the disease, suggesting a genetic involvement. Tpit is an obligate transcription factor for the expression of pro-opiomelanocortingene and for corticotroph terminal differentiation. The aim of the present study was to screen the Tpit gene for germline mutations in Poodles with PDH. Fifty Poodle dogs (33 female, 8.71 +/- 2.8 years) with PDH and 50 healthy Poodle dogs (32 females, 9.4241 2.8 years) were studied. Genomic DNA was isolated from peripheral blood, amplified by PCR and submitted to automatic sequence. No mutation in the coding region of Tpit was found, whereas the new single nucleotide polymorphism p.S343G, in heterozygous state, was found in the same frequency in both PDH and control groups. We concluded that Tpit gain-of-function mutations are not involved in the etiology of PDH in Poodle dogs.

Phenotypic homogeneity and genotypic variability in a large series of congenital isolated ACTH-deficiency patients with TPIT gene mutations

Congenital isolated ACTH deficiency (IAD) is a rare disease characterized by low plasma ACTH and cortisol levels and preservation of all other pituitary hormones. This condition was poorly defined before we identified TPIT, a T-box transcription factor with a specific role in differentiation of the corticotroph lineage in mice and humans, as its principal molecular cause.

Rôle des facteurs de transcription Tpit et NeuroD1 dans l'activation histospécifique de la POMC et dans la différenciation des cellules corticotropes

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Régulation de l'activité transcriptionnelle du facteur corticotrope Tpit par la CRH : implication des voies de signalisation et des coactivateurs

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Rôle des facteurs de transcription Tpit et NeuroD1 dans l'activation histospécifique de la POMC et dans la différenciation des cellules corticotropes

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Régulation de l'activité transcriptionnelle du facteur corticotrope Tpit par la CRH : implication des voies de signalisation et des coactivateurs

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Génomique fonctionnelle des cellules corticotropes hypophysaires : contrôle génétique de la gestion systémique des stress

L'axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien (HPA) permet de maintenir l'homéostasie de l'organisme face à divers stress. Qu'ils soient de nature psychologique, physique ou inflammatoire/infectieux, les stress provoquent la synthèse et la libération de CRH par l'hypothalamus. Les cellules corticotropes hypophysaires perçoivent ce signal et en réaction, produisent et sécrètent l'ACTH. Ceci induit la synthèse des glucocorticoïdes (Gc) par le cortex surrénalien; ces stéroïdes mettent le système métabolique en état d’alerte pour la réponse au stress et à l’agression. Les Gc ont le rôle essentiel de contrôler les défenses de l'organisme, en plus d'exercer une rétro-inhibition sur l'axe HPA. L'ACTH est une petite hormone peptidique produite par le clivage d'un précurseur: la pro-opiomélanocortine (POMC). À cause de sa position critique dans la normalisation de l'homéostasie, le contrôle transcriptionnel du gène Pomc a fait l'objet d'études approfondies au cours des dernières décennies. Nous savons maintenant que la région promotrice du gène Pomc permet une expression ciblée dans les cellules POMC hypophysaires. L'étude du locus Pomc par des technologies génomiques m'a permis de découvrir un nouvel élément de régulation qui est conservé à travers l'évolution des mammifères. La caractérisation de cet enhancer a démontré qu'il dirige une expression restreinte à l'hypophyse, et plus particulièrement dans les cellules corticotropes. De façon intéressante, l'activité de cet élément dépend d'un nouveau site de liaison recrutant un homodimère du facteur de transcription Tpit, dont l'expression est également limitée aux cellules POMC de l'hypophyse. La découverte de cet enhancer ajoute une toute nouvelle dimension à la régulation de l'expression de POMC. Les cytokines pro-inflammatoires IL6/LIF et les Gc sont connus pour leur antagonisme sur la réaction inflammatoire et sur le promoteur Pomc via l'action des facteurs de transcription Stat3 et GR respectivement. L'analyse génomique des sites liés ii par ces deux facteurs nous a révélé une interrelation complexe et a permis de définir un code transcriptionnel entre ces voies de signalisation. En plus de leur action par interaction directe avec l’ADN au niveau des séquences régulatrices, ces facteurs interagissent directement entre eux avec des résultats transcriptionnels différents. Ainsi, le recrutement de GR par contact protéine:protéine (tethering) sur Stat3 étant lié à l'ADN provoque un antagonisme transcriptionnel. Inversement, le tethering de Stat3 sur GR supporte une action synergique, tout comme leur co-recrutement à l'ADN sur des sites contigus ou composites. Lors d'une activation soutenue, ce synergisme entre les voies IL6/LIF et Gc induit une réponse innée de défense cellulaire. Ainsi lors d'un stress majeur, ce mécanisme de défense est mis en branle dans toutes les cellules et tissus. En somme, les travaux présentés dans cette thèse définissent les mécanismes transcriptionnels engagés dans le combat de l'organisme contre les stress. Plus particulièrement, ces mécanismes ont été décrits au niveau de la réponse globale des corticotropes et du gène Pomc. Il est essentiel pour l'organisme d'induire adéquatement ces mécanismes afin de faire face aux stress et d'éviter des dérèglements comme les maladies inflammatoires et métaboliques.

Adrenal gland development and defects

The network regulating human adrenal development is complex. Studies of patients with adrenal insufficiency due to gene mutations established a central role for transcription factors GLI3, SF1 and DAX1 in the initial steps of adrenal formation. Adrenal differentiation seems to depend on adrenocorticotropic hormone (ACTH) stimulation and signalling, including biosynthesis and action of POMC, PC1, TPIT, MC2R, MRAP and ALADIN, all of which cause adrenocortical hypoplasia when mutated in humans. Studies of knockout mice revealed many more factors involved in adrenal development; however, in contrast to rodents, in humans several of those factors had no adrenal phenotype when mutated (e.g. WT1, WNT4) or, alternatively, human mutations have not (yet) been identified. Tissue profiling of fetal and adult adrenals suggested 69 genes involved in adrenal development. Among them were genes coding for steroidogenic enzymes, transcription and growth factors, signalling molecules, regulators of cell cycle and angiogenesis, and extracellular matrix proteins; however, the exact role of most of them remains to be elucidated.

Sur la régulation transcriptionnelle du gène de la pro-opiomélanocortine par l'hormone hypothalamique CRH

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Sur la régulation transcriptionnelle du gène de la pro-opiomélanocortine par l'hormone hypothalamique CRH

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.