Níveis urinários de TGF-B1 em pacientes com diabetes mellitus tipo 2 : impacto da hipertensão arterial sistêmica

Resumo não disponível.

Sustained release of TGF-β1 from biodegradable microparticles prepared by a new green process in CO2 medium

International audience

Transforming Growth Factor-b1 polymorphism is not associated with chronic graft disease: evidence from a meta-analysis

Kidney transplantation has been recognised as the optimal treatment choice for most end stage renal disease patients and the increase of allograft survival rates is achieved through the refinement of novel immunosuppressive agents. Chronic Graft Disease (CGD) is a multifactorial process that likely includes a combination of immunological, apoptotic and inflammatory factors. The application of individualised immunosuppressive therapies will also depend on the identification of risk factors that can influence chronic disease. Despite being the subject of several independent studies, investigations of the relationship between transforming growth factor-b1 (TGF-b1) polymorphisms and kidney graft outcome continue to be plagued by contradictory conclusions.

Controlling whole blood activation and resultant clot properties by carboxyl and alkyl functional groups on material surfaces : a possible therapeutic approach for enhancing bone healing

Most research virtually ignores the important role of a blood clot in supporting bone healing. In this study, we investigated the effects of surface functional groups carboxyl and alkyl on whole blood coagulation, complement activation and blood clot formation. We synthesised and tested a series of materials with different ratios of carboxyl (–COOH) and alkyl (–CH3, –CH2CH3 and –(CH2)3CH3) groups. We found that surfaces with –COOH/–(CH2)3CH3 induced a faster coagulation activation than those with –COOH/– CH3 and –CH2CH3, regardless of the –COOH ratios. An increase in –COOH ratios on –COOH/–CH3 and –CH2CH3 surfaces decreased the rate of coagulation activation. The pattern of complement activation was entirely similar to that of surface-induced coagulation. All material coated surfaces resulted in clots with thicker fibrin in a denser network at the clot/material interface and a significantly slower initial fibrinolysis when compared to uncoated glass surfaces. The amounts of platelet-derived growth factor-AB (PDGF-AB) and transforming growth factor-b (TGF-b1) released from an intact clot were higher than a lysed clot. The release of PDGF-AB was found to be correlated with the fibrin density. This study demonstrated that surface chemistry can significantly influence the activation of blood coagulation and complement system, resultant clot structure, susceptibility to fibrinolysis as well as release of growth factors, which are important factors determining the bone healing process.

Osteoprotegerin expression by periodontal ligament fibroblasts

Objectives: Receptor Activator of NF-kappaB ligand (RANKL), through binding to its receptor (RANK), plays an important role in osteoclast differentiation and activation. Conversely, osteoprotegerin (OPG), a decoy receptor for RANKL, inhibits osteoclastogenesis and subsequent bone turnover. Little is known about the role of resident periodontal ligament fibroblasts in regulating bone turnover. The aim of this study was to determine (i) if periodontal ligament fibroblasts produced OPG in vitro and (ii) the effects of IL-1b and TGF-b1 on OPG expression. Methods: Three human periodontal ligament fibroblast populations, developed by explant culture, were grown to confluence in 6-well plates in DMEM supplemented with 10% FCS. Cells were washed in HBSS and then cultured for an additional 48 hours in serum-free media supplemented with IL-1b or TGF-b1 at 10ng/ml. OPG expression levels in the conditioned medium were determined by ELISA (R&D Systems, UK) and confirmed by Western blot. Results: All three fibroblast strains produced quantifiable levels of OPG. Both IL-1b and, to a lesser extent, TGF-b1 significantly stimulated OPG expression in all fibroblast strains (p<0.05). Pre-incubation of samples with N-glycosidase F prior to Western blots indicated glycosylation of expressed OPG. Conclusions: These data indicate that periodontal ligament fibroblasts can regulate osteoclast activation via the RANK/RANKL signalling pathway. These fibroblasts may play an important role in regulating bone turnover both in periodontal disease and orthodontic tooth movement.

Neuropeptide Receptors in the Dental Pulp

Objectives: The inflammatory response to pulpal injury or infection has major clinical significance. The aim of the study is to investigate the presence and regulation of expression of neuropeptide receptors on human pulp fibroblasts and whole pulp tissue. This study will investigate the expression of Substance P (NK-1) and Neuropeptide Y (NPY-Y1) receptors on pulp fibroblasts, determine the effects of Transforming Growth Factor Beta-1 (TGF-b1) and Interleukin 1-Beta (IL-1b) on the expression of NK-1 and NPY-Y1 receptors on pulp fibroblasts and examine the levels of receptor expression in whole pulp samples. Methods: Primary pulp fibroblast cell lines were obtained from patients undergoing extractions for orthodontic reasons. The cells were grown to confluence and stimulated for 5 days with IL-1b or TGF-b1. Pulp tissue fragments were obtained from freshly extracted sound and carious teeth, snap frozen in liquid nitrogen and cracked open using a vice. The monolayer was removed with cell scrapers and pelleted. The cell membranes of the cultured cells and the whole tissue were isolated using a Mem-PER® Eukaryotic Membrane Protein Extraction Reagent Kit (Pierce, UK). The membrane proteins were separated by SDS-PAGE and Western blotting was used to detect the presence of NK-1 and NPY-Y1. Results: Initial results demonstrated the presence of NK-1 and NPY-Y1 in cultured pulp fibroblasts. Following the 5 day incubation with TGF-b1, the cells appeared not to express NK-1. IL-1b had a slight stimulatory effect on NK-1 expression. The NPY-Y1 expression was not affected by either TGF-b1 or IL-1b. In whole pulp samples, levels of NK-1 were increased in carious teeth compared to caries-free teeth. The NPY-Y1 levels were similar in carious and non-carious teeth. Conclusion: These findings give an insight into how pulp cells react to inflammatory stimuli with regards to neuropeptide receptor expression and their roles in health and disease

The role of transforming growth factor-beta 1 in steroidogenesis, cell proliferation, and apoptosis in cultured bovine granulosa cells

Thèse numérisée par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal

Les cellules endothéliales peuvent acquérir un phénotype mésenchymateux associé avec l’expression de la protéine nestine dans un modèle d’hypertrophie cardiaque et de fibrose réactive

L’hypertrophie cardiaque représente la réponse primaire du cœur dans le but d’améliorer la fonction cardiaque qui est compromise suite à un accident ischémique ou une surcharge hémodynamique. Cependant, l’hypertrophie cardiaque a pour conséquence pathologique la fibrose réactive, qui est caractérisée par la synthèse incontrôlée et le dépôt du collagène par les myofibroblastes. Ainsi, l’accumulation accrue du collagène dans le cœur hypertrophié mène à l’augmentation de la rigidité cardiaque et la détérioration progressive de la fonction contractile du cœur. Plusieurs études ont démontré que la protéine nestine, appartenant à la famille des filaments intermédiaires, est ré-exprimée dans les myofibroblastes durant la fibrose réparative et est impliquée dans la prolifération cellulaire. Basée sur ces observations, cette étude teste l’hypothèse selon laquelle nestine est induite dans les myofibroblastes suivant le développement de la fibrose réactive dans le cœur des rats ayant subi une constriction aortique supra-rénale. Deux semaines suivant une constriction aortique supra-rénale chez le rat, un patron d’hypertrophie concentrique cardiaque a été observé et associé avec une réponse de fibrose réactive caractérisée par le dépôt accru de collagène dans le tissu interstitiel et la région péri-vasculaire de nombreux vaisseaux sanguins cardiaques. De plus, les niveaux de la protéine nestine sont augmentés significativement dans les cœurs des rats hypertrophiés, et ce, de façon corrélative avec la pression artérielle moyenne et la pression systolique du ventricule gauche. Les techniques d’immunofluorescences ont révélé une apparition accrue des cellules immunoréactives à nestine, qui présentent un phénotype mésenchymateux caractérisé par la co-expression de collagène dans le tissu interstitiel et la région péri-vasculaire des cœurs hypertrophiés. Ces données suggèrent que les fibroblastes résidents peuvent exprimer la protéine nestine ou que l’expression de nestine est induite en réponse aux facteurs pro-fibrotiques impliqués dans la fibrose réactive. En effet, l’exposition des myofibroblastes normaux et des myofibroblastes isolés des cœurs hypertrophiés à l’AII, TGF-B1 et EGF augmente significativement l’expression de la protéine nestine, tandis que l’expression de l’α-SMA demeure inchangée. De plus, de manière prédominante dans le cœur hypertrophié, des cellules non-vasculaires CD31(+) ont été détectées dans le tissu interstitiel et la région péri-vasculaire. Ces cellules co-expriment nestine et collagène suggérant une transition des cellules endothéliales vers un phénotype mésenchymateux. Finalement, la protéine nestine, sous sa forme filamenteuse, a été détectée dans les cellules endothéliales de l’artère coronaire humaine et leur exposition au TGF-B1, induit l’expression de collagène. En revanche, l’expression de collagène a été détectée dans les cellules microvasculaires de rats CD31(+), alors que l’expression de nestine est absente. En réponse aux traitements de TGF-B1 et EGF, l’expression de nestine, sous sa forme non-filamenteuse, est détectée dans les cellules microvasculaires de rats. Collectivement, ces données supportent la prémisse selon laquelle la réponse de fibrose réactive dans les cœurs hypertrophiés, suite à une constriction aortique supra-rénale, est attribuée en partie à l’augmentation de l’apparition des cellules mésenchymateuses positives à l’expression de nestine qui proviennent des fibroblastes résidents du ventricule. De plus, les données in vivo et in vitro suggèrent que les cellules endothéliales déplacées représentent une source additionnelle des cellules mésenchymateuses nestine(+) dans le cœur hypertrophié et contribuent au développement de la fibrose réactive. Cibler la protéine nestine peut représenter une approche thérapeutique afin d’atténuer la réponse de fibrose réactive indépendamment de l’origine des cellules mésenchymateuses.

Atividade de monócitos em gestantes normais e com pré-eclâmpsia

Pós-graduação em Ginecologia, Obstetrícia e Mastologia - FMB

Avaliação de citocinas pró e anti-inflamatórias e de fatores pró e anti-angiogênicos em placenta de gestantes com pré-eclâmpsia

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

GM-CSF (granulocyte-macrophage colony-stimulating factor): Modulation der durch UV-B-Strahlung induzierten Hautkarzinogenese

UV-B-Strahlung, die durch die fortschreitende Zerstörung der Ozonschicht zunimmt, ist hauptsächlich für das Entstehen von Basaliomen und Plattenepithelkarzinomen verantwort-lich, an denen jedes Jahr etwa 2-3 Millionen Menschen weltweit erkranken. UV-B indu-zierte Hautkarzinogenese ist ein komplexer Prozess, bei dem vor allem die mutagenen und immunsuppressiven Wirkungen der UV-B-Strahlung von Bedeutung sind. Die Rolle von GM-CSF in der Hautkarzinogenese ist dabei widersprüchlich. Aus diesem Grund wurde die Funktion von GM-CSF in vivo in der UV-B induzierten Hautkarzinogenese mittels zwei bereits etablierter Mauslinien untersucht: Erstens transgene Mäuse, die einen GM-CSF Antagonisten unter der Kontrolle des Keratin-10-Promotors in den suprabasalen Schichten der Epidermis exprimieren und zweitens solche, die unter dem Keratin-5-Promotor murines GM-CSF in der Basalschicht der Epidermis überexprimieren. Eine Gruppe von Tieren wurde chronisch, die andere akut bestrahlt. Die konstitutionelle Verfassung der Tiere mit erhöhter GM-CSF-Aktivität in der Haut war nach chronischer UV-B-Bestrahlung insgesamt sehr schlecht. Sie wiesen deshalb eine stark erhöhte Mortali-tät auf. Dies ist sowohl auf die hohe Inzidenz als auch dem frühen Auftreten der benignen und malignen Läsionen zurückzuführen. Eine verminderte GM-CSF Aktivität verzögerte dagegen die Karzinomentwicklung und erhöhte die Überlebensrate leicht. GM-CSF wirkt auf verschiedenen Ebenen tumorpromovierend: Erstens erhöht eine gesteigerte Mastzell-anzahl in der Haut der GM-CSF überexprimierenden Tiere per se die Suszeptibilität für Hautkarzinogenese. Zweitens stimuliert GM-CSF die Keratinozytenproliferation. Dadurch kommt es nach UV-B-Bestrahlung zu einer prolongierten epidermalen Hyperproliferation, die zur endogenen Tumorpromotion beiträgt, indem sie die Bildung von Neoplasien unter-stützt. Der Antagonist verzögert dagegen den Proliferationsbeginn, die Keratinozyten blei-ben demzufolge länger in der G1-Phase und der durch UV-B verursachte DNA-Schaden kann effizienter repariert werden. Drittens kann GM-CSF die LCs nicht als APCs aktivie-ren und eine Antitumorimmunität induzieren, da UV-B-Strahlung zur Apoptose von LCs bzw. zu deren Migration in Richtung Lymphknoten führt. Zusätzlich entwickeln GM-CSF überexprimierende Tiere in ihrer Haut nach UV-B-Bestrahlung ein Millieu von antago-nistisch wirkenden Zytokinen, wie TNF-a, TGF-b1 und IL-12p40 und GM-CSF, die proinflammatorische Prozesse und somit die Karzinomentwicklung begünstigen. Der Anta-gonist hemmt nach UV-B-Bestrahlung die Ausschüttung sowohl von immunsuppressiven Zytokinen, wie etwa TNF-a, als auch solchen, die die Th2-Entwicklung unterstützen, wie etwa IL-10 und IL-4. Dies wirkt sich negativ auf die Karzinomentwicklung aus.

The highs (B1H) and lows (B1L) of human heart B1-adrenoceptors (AR)

The 1AR has two binding sites which can be activated to cause cardiostimulation. The first, termed, 1HAR (high affinity site of 1AR) is activated by noradrenaline and adrenaline and is blocked by relatively low concentrations of β-blockers including carvedilol (Kaumann and Molenaar, 2008). The other, termed, 1LAR (low affinity site of 1AR) has lower affinity for noradrenaline and adrenaline and is activated by some β-blockers including CGP12177 and pindolol, at higher concentrations than those required to block the receptor (Kaumann and Molenaar, 2008). (-)-CGP12177 is a non-conventional partial agonist that causes modest and transient increases of contractile force in human atrial trabeculae (Kaumann and Molenaar, 2008). These effects are markedly increased and maintained by inhibition of phosphodiesterase PDE3. The stimulant effects of (-)-CGP12177 at human β1ARs was verified with recombinant receptors (Kaumann and Molenaar, 2008). However, in a recent report it was proposed that the positive inotropic effects of CGP12177 are mediated through 3ARs in human right atrium (Skeberdis et al 2008). This proposal was not consistent with the lack of blockade of (-)-CGP12177 inotropic effects or increases in L-type Ca2+ current (ICa-L ) by the β3AR blocker 1 μM LY748,337 (Christ et al, 2010). On the otherhand, (-)-CGP12177 increases in inotropic effects and ICa-L were blocked by (-)-bupranolol 1-10 μM (Christ et al, 2010). Chronic infusion of (-)-CGP 12177 (10 mg/Kg/24 hours) for four weeks in an aortic constriction mouse model of heart failure caused an increase in left ventricular wall thickness, fibrosis and inflammation-related left ventricular gene expression levels. Christ T et al (2010) Br J Pharmacol, In press Kaumann A and Molenaar P (2008) Pharmacol Ther 118, 303-336 Skeberdis VA et al (2008) J Clin Invest, 118, 3219-3227