Comparison of the Retinomax autorefractor with hand-held retinoscopy in 1-year-old infants

This study aimed to determine the accuracy (and usability) of the Retinomax, a hand-held autorefractor, compared to measurements taken from hand-held retinoscopy (HHR) in a sample of normal 1-year-old children. The study was a method comparison set at four Community Child Health Clinics. Infants (n = 2079) of approximately 1 year of age were identified from birth/immunization records and their caregivers were contacted by mail. A total of 327 infants ranging in age from 46 weeks to 81 weeks (mean 61 weeks) participated in the study. The children underwent a full ophthalmic examination. Under cycloplegia, refraction was measured in each eye by streak retinoscopy (HHR) and then re-measured using the Retinomax autorefractor. Sphere, cylinder, axis of cylinder and spherical equivalent measurements were recorded for HHR and Retinomax instruments, and compared. Across the range of refractive errors measured, there was generally close agreement between the two examination methods, although the Retinomax consistently read around 0.3 D less hyperopic than HHR. Significantly more girls (72 infants, 47.7%), struggled during examination with the Retinomax than boys (52 infants, 29.5%) (P < 0.001). Agreement deteriorated between the two instruments if the patient struggled during the examination (P < 0.001). In general, the Retinomax would appear to be a useful screening instrument in early childhood. However, patient cooperation affects the accuracy of results and is an important con-sideration in determining whether this screening instrument should be adopted for measuring refractive errors in early infancy.

Refração por retinoscopia com luz em faixa em cães

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Retinoscopia com luz em faixa em cães fácicos, afácicos e pseudofácicos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação do erro refracional por retinoscopia com luz em faixa em cães fácicos, afácicos e pseudofácicos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Habits and attitudes towards retinoscopy and the relative accuracy of dedicated and combined retinoscopes

The studies presented in this thesis were carried out because of a lack of previous research with respect to (a) the habits and attitudes towards retinoscopy and (b) the relative accuracy of dedicated retinoscopes compared to combined types in which changing the bulb allows use in spot or streak mode. An online British survey received responses from 298 optometrists. Decision tree analyses revealed that optometrists working in multiple practices tended to rely less on retinoscopy than those in the independent sector. Only half of the respondents used dynamic retinoscopy. The majority, however, agreed that retinoscopy was an important test. The University attended also influenced the type of retinoscope used and the use of autorefractors. Combined retinoscopes were used most by the more recently qualified optometrists and few agreed that combined retinoscopes were less accurate. A trial indicated that combined and dedicated retinoscopes were equally accurate. Here, 4 optometrists (2 using spot and 2 using streak retinoscopes) tested one eye of 6 patients using combined and dedicated retinoscopes. This trial also demonstrated the utility of the relatively unknown ’15 degrees of freedom’ rule that exploits replication in factorial ANOVA designs to achieve sufficient statistical power when recruitment is limited. An opportunistic international survey explored the use of retinoscopy by 468 practitioners (134 ophthalmologists, 334 optometrists) attending contact related courses. Decision tree analyses found (a) no differences in the habits of optometrists and ophthalmologists, (b) differences in the reliance on retinoscopy and use of dynamic techniques across the participating countries and (c) some evidence that younger practitioners were using static and dynamic retinoscopy least often. In conclusion, this study has revealed infrequent use of static and dynamic retinoscopy by some optometrists, which may be the only means of determining refractive error and evaluating accommodation in patients with communication difficulties.

Promoters for pregenomic RNA of banana streak badnavirus are active for transgene expression in monocot and dicot plants

Two putative promoters from Australian banana streak badnavirus (BSV) isolates were analysed for activity in different plant species. In transient expression systems the My (2105 bp) and Cv (1322 bp) fragments were both shown to have promoter activity in a wide range of plant species including monocots (maize, barley, banana, millet, wheat, sorghum), dicots (tobacco, canola, sunflower, Nicotiana benthamiana, tipu tree), gymnosperm (Pinus radiata) and fern (Nephrolepis cordifolia). Evaluation of the My and Cv promoters in transgenic sugarcane, banana and tobacco plants demonstrated that these promoters could drive high-level expression of either the green fluorescent protein (GFP) or the beta -glucuronidase (GUS) reporter gene (uidA) in vegetative plant cells. In transgenic sugarcane plants harbouring the Cv promoter, GFP expression levels were comparable or higher (up to 1.06% of total soluble leaf protein as GFP) than those of plants containing the maize ubiquitin promoter (up to 0.34% of total soluble leaf protein). GUS activities in transgenic in vitro-grown banana plants containing the My promoter were up to seven-fold stronger in leaf tissue and up to four-fold stronger in root and corm tissue than in plants harbouring the maize ubiquitin promoter. The Cv promoter showed activities that were similar to the maize ubiquitin promoter in in vitro-grown banana plants, but was significantly reduced in larger glasshouse-grown plants. In transgenic in vitro-grown tobacco plants, the My promoter reached activities close to those of the 35S promoter of cauliflower mosaic virus (CaMV), while the Cv promoter was about half as active as the CaMV 35S promoter. The BSV promoters for pregenomic RNA represent useful tools for the high-level expression of foreign genes in transgenic monocots.

Clonagem e purificação de fragmento da proteína capsidial de Banana streak OL virus

O objetivo deste trabalho foi clonar e induzir a expressão de fragmento da proteína capsidial de Banana streak OL virus (BSOLV-CP) em Escherichia coli, bem como purificar a proteína recombinante obtida. Empregou-se um par de iniciadores específicos para amplificar, em PCR, um fragmento de aproximadamente 390 pb, da região codificadora da porção central da BSOLV-CP. O fragmento obtido foi clonado em vetor pGEM-T Easy, subclonado em vetor pQE-30 e transformado em células de E. coli M15 (pREP4) por choque térmico. A expressão da proteína foi induzida por tiogalactopiranosídeo de isopropila (IPTG), e a proteína recombinante BSOLV-rcCP de 14 kDa foi detectada em Western blot e Dot blot. A expressão da proteína BSOLV-rcCP abre novas possibilidades para a obtenção de antígenos para a produção de antissoros contra o BSOLV.

Biological and molecular characterization of an isolate of Tobacco streak virus obtained from soybeans in Brazil

A virus was isolated from soybean (Glycine max) plants with symptoms of dwarfing and bud blight in Wenceslau Braz County, Paraná, Brazil. The host range and properties resembled those of Tobacco streak virus (TSV). The purified virus showed three peaks in a frozen sucrose gradient. Antiserum was produced and the virus was serologically related to TSV. Electron microscopy detected 28 nm spherical particles. Coat protein (CP) had a Mr of 29.880 Da. A fragment of 1028 nt was amplified, cloned and sequenced. One open reading frame with 717 nt was identified and associated to the CP. The CP gene shared 83% identity with the sequence of TSV CP from white clover (Trifolium repens) (GenBank CAA25133). This is the first report of the biological and molecular characterization of TSV isolated from soybeans. It is proposed that this isolate be considered a strain of TSV named TSV-BR.

Detecção e análise da variabilidade de seqüências do Banana streak virus (BSV) em bananeiras no Brasil

A técnica de PCR utilizando-se "primers" degenerados para o gênero Badnavirus foi utilizada para a detecção e análise da variabilidade de seqüências do Banana streak virus (BSV) provenientes de bananeiras. A partir desta metodologia seqüências do vírus puderam ser detectadas em cultivares diplóides (AA), triplóides (AAA; AAB) e tetraplóides (AAAB). Foram encontrados quatro padrões de seqüência do BSV (estirpes BSVBR-1, BSVBR-2, BSVBR-3 e BSVBR-4), diferenciadas através da análise do perfil eletroforético das amostras amplificadas. A estirpe BSVBR-1 prevalece nos estados do Acre, Amazonas, Bahia, Ceará, Goiás, Minas Gerais, Piauí, Rio de Janeiro, Rondônia, Santa Catarina, e São Paulo, enquanto que, a estirpe BSVBR-2 foi encontrada em amostras oriundas do Amazonas e do Ceará. As estirpes BSVBR-3 e BSVBR-4 foram encontradas apenas no Ceará. Este trabalho revela a presença de diferentes estirpes do BSV no Brasil, bem como a existência de cultivares de bananeiras sadias e livres de seqüências virais do BSV integradas ao seu genoma.

Efeitos do Banana streak virus no desenvolvimento de cultivares de bananeira

Este trabalho avaliou, em condições de casa de vegetação, os efeitos da infecção pelo BSV no crescimento de cinco cultivares de bananeira. Mudas micropropagadas das cultivares SH 3640, FHIA 18, Caipira, Thap Maeo e Pioneira foram inoculadas com BSV pela cochonilha Planacoccus citri Risso. Como controles utilizaram-se mudas não inoculadas e inoculadas com cochonilhas não virulíferas. Avaliou-se a altura das plantas, o diâmetro do pseudocaule, o número de folhas, a área foliar e as massas da matéria seca da parte aérea e da raiz. Os primeiros sintomas do BSV foram detectados 15 dias após a inoculação em todas as plantas inoculadas com o vírus. Houve diferenças estatísticas significativas nas variáveis analisadas, concluindo-se que o vírus afetou o desenvolvimento das plantas de todas as cultivares avaliadas.

Dinâmica temporal e espacial da begomovirose causada por Tomato yellow vein streak virus em tomateiro na região de Campinas-SP

O objetivo desse trabalho foi caracterizar os padrões temporal e espacial do Tomato yellow vein streak virus (ToYVSV) em tomatais cultivados em condições de campo, no município de Sumaré, e de estufa plástica, na região de Elias Fausto, Estado de São Paulo. No ensaio de campo, plantado com a variedade Alambra, foram avaliadas 4.032 plantas, distribuídas em oito blocos. Em oito estufas plásticas, com plantios escalonados da variedade Ikram, foram avaliadas 6.016 plantas. As avaliações foram feitas com base nos sintomas característicos induzidos por esse vírus. A confirmação da identidade do vírus foi feita por meio da análise da seqüência de nucleotídeos de parte do DNA-A viral (genes AV1 e AC3). No ensaio em condições de campo, a incidência da doença evoluiu lentamente, desde um mínimo de 0,002 (proporção de plantas sintomáticas) até um máximo de 0,0497. Mesmo assim, foi possível constatar um efeito de borda, pois a incidência média de plantas doentes nos blocos situados nos bordos da área foi 2,1 vezes maior do que naqueles internos. O progresso da incidência da doença foi linear, o que indica que novas infecções foram devidas principalmente a um influxo constante de vetores virulíferos de fora para dentro da área avaliada. Nos plantios em estufas plásticas, os níveis finais de doença foram fortemente dependentes da época de plantio, com médias variando de 4,8% a 69,3%. A distribuição espacial de plantas sintomáticas nesses plantios foi fortemente agregada. Essa agregação provavelmente não se deve a infecções secundárias dentro das estufas plásticas, mas sim à concentração de plantas sintomáticas nos bordos das estufas, conseqüência da migração de vetores virulíferos a partir de áreas externas à estufa. Com base nesses resultados, sugere-se a eliminação de fontes de inóculo representadas por plantios mais velhos de tomateiro e por hospedeiras do vírus na vegetação espontânea como uma das principais medidas para o manejo da doença.

Indexação biológica de genótipos de bananeira para o Banana streak virus

O Banco Ativo de Germoplasma (BAG) de bananeira é a base do programa de melhoramento genético da Embrapa Mandioca e Fruticultura Tropical. O objetivo deste trabalho foi indexar os acessos do BAG para o vírus das estrias da bananeira (Banana streak virus, BSV). Cada amostra foliar, coletada dos 220 acessos do BAG foi utilizada na inoculação de três plantas de bananeira 'Caipira' produzidas por micropropagação. As plantas foram inoculadas, através da cochonilha vetora Planococcus citri Risso, fornecendo-se um acesso de aquisição de 24 horas e de transmissão de 48 horas. Como controle positivo e negativo foram utilizadas plantas previamente analisadas por PCR, quanto a presença de BSV. Entre 15 e 70 dias após a inoculação, as plantas indicadoras apresentaram os primeiros sintomas. Desta forma, verificou-se que 44 dos 220 acessos estavam infectados com BSV.

Influences of alpha-tocopherol on cholesterol metabolism and fatty streak development in apolipoprotein E-deficient mice fed an atherogenic diet

Although the role of oxidized lipoproteins is well known in atherogenesis, the role of vitamin E supplementation is still controversial. There is also little information about cholesterol metabolism (hepatic concentration and fecal excretion) in the new models of atherosclerosis. In the present study, we evaluated the effect of moderate vitamin E supplementation on cholesterol metabolism and atherogenesis in apolipoprotein E (apo E)-deficient mice. Apo E-deficient mice were fed an atherogenic diet containing 40 or 400 mg/kg of alpha-tocopherol acetate for 6 weeks. Total cholesterol in serum and liver and 3-OH-alpha-sterols in feces, and fecal excretion of bile acids were determined and histological analyses of aortic lesion were performed. A vitamin E-rich diet did not affect body weight, food intake or serum cholesterol. Serum and hepatic concentrations of cholesterol as well as sterol concentration in feces were similar in both groups. However, when compared to controls, the alpha-tocopherol-treated mice showed a reduction of about 60% in the atherosclerotic lesions when both the sum of lesion areas and the average of the largest lesion area were considered. These results demonstrate that supplementation of moderate doses of alpha-tocopherol was able to slow atherogenesis in apo E-deficient mice and to reduce atherogenic lipoproteins without modifying the hepatic pool or fecal excretion of cholesterol and bile acids.