Conventional and molecular typing of Salmonella typhi strains from Brazil

Phenotypic and genotypic characteristics of Salmonella Typhi were studied in 30 strains, isolated in different years, from some areas in Brazil. Conventional typing methods were performed by biochemical tests, Vi phage-typing scheme, and antimicrobial susceptibility test. Molecular typing methods were performed by analysis of plasmid DNA and by random amplified polymorphic DNA (RAPD-PCR). For the latter, an optimization step was performed to ensure the reproducibility of the process in genetic characterization of S. Typhi. The predominance of 76.7% of biotype I (xylose +, arabinose -) was noticed in all studied areas. Three phage types were recognized, with prominence for the phage types A (73.3%) and I+IV (23.3%). All the strains were susceptible to the drugs used. However, 36.7% of the strains contained plasmids, with predominance of the 105 Kb plasmid. RAPD was capable of grouping the strains in 8 genotypic patterns using primer 784, in 6, using primer 787 and in 7, using primer 797. Conventional phenotypic typing methods, as well as the DNA plasmid analysis, presented nonsignificant discriminatory power; however, RAPD-PCR analysis showed discriminatory power, reproducibility, easy interpretation and performance, being considered as a promising alternative typing method for S. Typhi.

Níveis de sensibilidade de enterobactérias, em particular Salmonella typhi, a rifamicina S.V.

Em face à predominante eliminação biliar da rifamicina S.V. atingindo concentrações muitas vêzes superiores aos níveis séricos obtidos com as doses terapêuticas, e pelo possível interêsse dessa verificação para o tratamento dos portadores biliares crônicos de Salmonella typhi determinou-se a concentração mínima inibitória de 165 estirpes de enterobactérias, incluindo 77 amostras de S. typhi. Foi verificado que a maioria das cepas de Escherichia coli, Shigella e Proteus mirabilis correspondiam a uma concentração inibitória mínima entre 33 a 65 μg/ml. Entre 65 e 128 μg/ml foram determinadas as concetrações inibitórias mínimas da maioria das outras espécies de Proteus, de Providencia e de Klebsiella. Para Salmonella e Enterobacter o limite mínino de sensibilidade foi, em regra, igual ou superior a 128 μg/ml. Diferenças mais acentuadas de comportamento entre as enterobactérias foram observadas quanto à ação bactericida da rifamicidas S.V. De uma maneira geral, para E. coli e Shigella, as concentrações inibitórias mínimas já referidas. Para as espécies de Proteus e Providencia houve variação maior de comportamento, mas tendência a que o efeito bactericidas fôsse encontrado em concentrações que correspondiam a 4 vêzes as bacteriostáticas para as mesmas espécies. Finalmente, de modo pouco feliz para os propósitos visados, em Salmonella, com a inclusão de S. typhi, não foi atingido um efeito bactericida, com as mais altas concentrações usadas as quais corresponderam em média a 6 vêzes as concentrações bacteriostáticas para esse gênero.

Tipos bioquímicos de Salmonella typhi de algumas regiões do Brasil

Foram estudadas 813 amostras de Salmonella typhi provenientes dos estados da Bahia, Guanabara, Pará, Pernambuco e S. Paulo, quanto ao seu comportamento diante da arabinose e xilose. Revelaram os resultados que 472 culturas (58,05%) caracterizaram-se como tipo fermentativo I (acidificando apenas a xilose), 334 amostras (41,08%) per­tencei am ao biotipo II (ausência de fermentação em arabinose e xilose), tendo apenas 7 culturas (0,86%) representando o biotipo III (fermentam a arabino­se e xilose).

Atividade «in vitro» da ampicilina e hetacilina sobre amostras de Salmonella typhi

Os autores, utilizando a técnica da diluição seriada em meio líquido, determinaram as concentrações mínimas inibitórias da ampicüina e da hetacilina em 150 amostras de Salmonella typhi, isoladas em sua totalidade a partir de hemoculturas, no Estado da Guanabara. Obteve-se como média das concentrações bacteriostáticas, 0,545 mcg/ml para ampicilina e 0,720 mcg/ml, no caso da hetacilina.

Antibody response to Salmonella typhi lw human Schistosomiasis mansoni

Antibody response to Salmonella typhi O and H antigens was evaluated in 24 individuals with either hepatointestinal or hepatosplenic schistosomiasis mansoni before and after typhoid vaccination, and compared with that of non-infected controls. Before vaccination, Schistosoma-infected patients showed a higher frequency of positive antibody to O antigen and the same frequency to H antigen when compared with that of healthy individuals. However, those with hepatosplenic schistosomiasis showed higher titres of antibody to H antigen than those with hepatointestinal disease or healthy individuals. Infected subjects, particularly those with hepatointestinal disease, showed a decreased response after typhoid vaccine. Tins diminished ability to mount an immune response towards typhoid antigens dining schistosomiasis may interfere ivith the clearance of the bacteria from blood stream and, therefore, play a role in the prolonged survival of salmonella as obsewed in some patients with chronic salmonellosis associated with schistosomiasis.

Capacidade receptora de Salmonella typhi A fatores R*1

Estudando a incidência de fatores infecciosos de resistência, em amostras de Salmonella, foi verificado apresentarem as amostras de S. typhi uma fraca habilidade receptora inicial a esses fatores.

Lisotipia Vi e classificação bioquímica de amostras de Salmonella typhi isoladas no Estado da Guanabara

Na presente investigação, os autores estudaram a distribuição dos lisótipos Ví, tipos fermentativos e tetrationato-redutase, em 110 amostras de Salmonella typhi, isoladas no período de 1966-1970, no Estado da Guanabara. Para estabelecer uma melhor configuração epidemiológica dos resultados, fez-se a divisão do Estado em seis regiões, respectivamente as zonas Sul, Centro, Norte, da E. F. Central, da E. F. Leopoldina e rural. Obteve-se no cômputo geral, a prevalência dos lisótipos A (59,09%), E 1a (19,09%), T (7,27%) e amostras Vi negativas (4,55%). Verificou-se ainda, que cerca de 70,90% das culturas foram classificadas no tipo fermentativo II, segundo esquema de Kristensen e 95,42% das amostras revelaram-se positivas na prova de detecção da tetrationato-redutase.

Salmonella typhi: lisotipia VI e biotipificação em amostras oriundas de algumas regiões do Brasil

Fez-se uma análise da distribuicão da frequência dos lisotipos VI e dos tipos fermentativos segundo o esquema de Kristensen, em 1.150 amostras de Salmonella typhi, isoladas de diferentes regiões do Brasil (Pará, Pernambuco, Bahia, Minas Gerais, Rio de Janeiro, São Paulo e Rio Grande do Sul). No computo geral, observou-se a prevalência dos lisotipos A (38,1%); Ela (18,9%); amostras VI negativas (16,6%); D6 (8,7%) I + IV (4,6%); T (2,3%) e C1 (2,1%) e a ocorrência de alguns tipos fágicos característicos para determinadas áreas (B3, C4 e 40 na Bahia; E1b, F2, G1 e L1 em São Paulo; E4 e 28 no Rio de Janeiro). Quanto a classificacão bioquímica, 55,2% das amostras caracterizaram-se no biotipo II (xilose e arabinose negativas), 44,2% no tipo fermentativo I (xilose positiva e arabinose negativas) e 0,52% no tipo III (xilose e arabinose positivas), respectivamente.

The effects of Brazilian and Bulgarian propolis in vitro against Salmonella Typhi and their synergism with antibiotics acting on the ribosome

Salmonella enterica serovar Typhi is the causative agent of typhoid fever in humans, and the use of antibiotics is essential for controlling this infection; however, the excessive use of antibiotics may select resistant strains. Propolis is a honeybee product and its antimicrobial activity has been intensively investigated. Thus, the objective of this study was to investigate a possible synergism between propolis (collected in Brazil and Bulgaria) and antibiotics acting on the ribosome (chloramphenicol, tetracycline and neomycin) against Salmonella Typhi in vitro. The synergism was investigated by using 1/2 and 1/4 of the minimum inhibitory concentration for propolis and these antimicrobial agents, evaluating the number of viable cells according to the incubation time. Brazilian propolis showed a bacteriostatic action against S. Typhi, while Bulgarian propolis showed a bactericidal activity and a synergistic effect with the three antibiotics. Variations in the biological assays might be due to the differences in their chemical compositions. Based on the results, one may conclude that Bulgarian propolis showed an important antibacterial action, as well as a synergistic effect with antibiotics acting on the ribosome, which points out a possible therapeutic strategy evaluating the use of propolis preparations for the treatment of Salmonella Typhi infection.

Synergistic effect of propolis and antibiotics on the Salmonella Typhi

O objetivo do presente trabalho foi investigar um possível efeito sinérgico entre extrato alcoólico de própolis do Brasil e Bulgária com alguns antibióticos (Amoxilina, Ampicilina e Cefalexina) utilizados contra Salmonella Typhi. Própolis do Brasil e Bulgária mostraram uma atividade antibacteriana, embora a amostra da Bulgária tenha sido mais eficiente. Ambas as amostras apresentaram um efeito sinérgico com os antibióticos estudados. Pode-se concluir que as amostras de própolis possuem atividade antibacteriana, bem como apresentam efeito sinérgico com antibióticos utilizados contra Salmonella Typhi.

Caracterização molecular e fenotípica de Salmonella Typhi isolada de casos de febre tifóide no Estado do Pará, no período de 1970 a 2009

A Salmonella Typhi é o agente etiológico da febre tifóide, uma doença infecciosa, sistêmica, que constitui importante problema de saúde pública principalmente nos países em desenvolvimento da África, Ásia, América Central e do Sul. Amostras de Salmonella Typhi isoladas de casos clínicos no período de 1970 a 2009 no Estado do Pará foram caracterizadas por meio da técnica de Eletroforese em Gel de Campo Pulsado (PFGE). O perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos foi realizado através dos métodos manual e automatizado. Foi empregada a técnica de Reação em Cadeia Mediada pela Polimerase (PCR) para a pesquisa das integrases de classe 1 e 2 e do fator de virulência Vi. Em 151 amostras pôde-se observar 68 diferentes pulsotipos, sendo 66 deles agrupados em 5 clusters. As amostras independente de sua procedência, fonte de isolamento ou ano, apresentaram elevada similaridade genética que variou de 80 a 100%. Verificou-se resistência (1,99%) e resistência intermediária (6,62%) somente à nitrofurontoína, em nenhuma amostra foi detectado integrase de classe 1 e 2, demonstrando, que, no Estado do Pará, as cepas circulantes não apresentam multi-resistência como observado em várias regiões do mundo. Foram encontradas 4 (2,65%) amostras Vi-negativo, que pode ser devido ao longo período de armazenamento, pois a ilha de patogenicidade SPI-7 é geneticamente instável e pode ser perdida após sucessivos repiques.

Sistemas de liberação controlada de quitosana contendo antigeno capsular Vi de Salmonella Typhi

A utilização do antígeno Vi em vacinas é bastante promissor devido a este proporcionar um alto nível de imunidade em vacinas parenterais. A necessidade pela busca por alternativas para administração de vacinas levou à aplicação da tecnologia da liberação controlada de fármacos no campo da imunização. Nestes sistemas de liberação controlada, as doses administradas são diminuídas, porém o período de imunidade aumenta, já que prolonga a quantidade liberada do antígeno ao longo do tempo. O presente estudo propôs desenvolver e caracterizar um sistema de liberação controlada contendo antígeno Vi, utilizando como polímero veiculador a quitosana. As técnicas de RMN H^-1 e espectroscopia de infravermelho mostraram que o método de extração do antígeno Vi empregado foi satisfatório qualitativamente. A caracterização da quitosana e das nanopartículas através de ensaios de análise térmica mostrou maior estabilidade das partículas em relação à quitosana, além do aumento da temperatura de degradação nas nanopartículas à medida que aumenta a concentração da quitosana. Em relação ao potencial zeta todas as nanopartículas tiveram cargas positivas em pH 7,2, enquanto que, no tamanho, as partículas foram menores à medida que aumentou a quantidade de quitosana no sistema. Na microscopia eletrônica de transmissão, as partículas mostraram-se morfologicamente homogêneas e com formato esférico. Na cinética de adsorção o antígeno, contido em solução, sofreu uma adsorção de 55% nas partículas de quitosana. Com isso, observou-se que é possível criar um sistema de liberação controlada envolvendo nanopartículas de quitosana e antígeno Vi de Salmonella enterica sorotipo Typhi.

Variabilidade genética de amostras de Salmonella Typhi isoladas de surto e de casos esporádicos ocorridos em Belém, Brasil

INTRODUÇÃO: Salmonella Typhi é o agente da febre tifóide (doença caracterizada por febre, cefaléia, mialgia, artralgia, diarréia ou constipação), cujo quadro pode se complicar e levar o paciente a óbito. No Brasil, a febre tifóide é endêmica nas regiões Norte e Nordeste, com surtos ocorridos nos meses de intenso calor. OBJETIVO: Analisar e comparar a variabilidade genética de S. Typhi isoladas de surto e casos esporádicos de febre tifóide ocorridos em determinado período na cidade de Belém (PA). MATERIAL E MÉTODOS: Foram analisadas 20 amostras de S. Typhi: 10 isoladas de um surto ocorrido no bairro do Guamá, Belém, entre os meses de dezembro/2005 e março/2006, e 10 de casos esporádicos ocorridos em diferentes localidades da mesma cidade e no mesmo período do surto. A caracterização genética foi realizada pela análise do perfil de macrorrestrição obtido pela enzima XbaI e definido por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). RESULTADOS: A análise de XbaI-PFGE das amostras estudadas demonstrou uma similaridade genética de 83% a 100%. CONCLUSÃO: Este estudo pôde demonstrar a relação clonal das amostras S. Typhi causadoras de surto e de casos esporádicos de febre tifóide ocorridos na cidade de Belém no período de dezembro/2005 a março/2006.

Barriers to recombination between closely related bacteria: MutS and RecBCD inhibit recombination between Salmonella typhimurium and Salmonella typhi

Previous studies have shown that inactivation of the MutS or MutL mismatch repair enzymes increases the efficiency of homeologous recombination between Escherichia coli and Salmonella typhimurium and between S. typhimurium and Salmonella typhi. However, even in mutants defective for mismatch repair the recombination frequencies are 102- to 103-fold less than observed during homologous recombination between a donor and recipient of the same species. In addition, the length of DNA exchanged during transduction between S. typhimurium and S. typhi is less than in transductions between strains of S. typhimurium. In homeologous transductions, mutations in the recD gene increased the frequency of transduction and the length of DNA exchanged. Furthermore, in mutS recD double mutants the frequency of homeologous recombination was nearly as high as that seen during homologous recombination. The phenotypes of the mutants indicate that the gene products of mutS and recD act independently. Because S. typhimurium and S. typhi are ≈98–99% identical at the DNA sequence level, the inhibition of recombination is probably not due to a failure of RecA to initiate strand exchange. Instead, these results suggest that mismatches act at a subsequent step, possibly by slowing the rate of branch migration. Slowing the rate of branch migration may stimulate helicase proteins to unwind rather than extend the heteroduplex and leave uncomplexed donor DNA susceptible to further degradation by RecBCD exonuclease.