Modulation of the SHBG signalling axis

Sex hormone-binding globulin (SHBG) is a homodimeric plasma glycoprotein that is the major sex steroid carrier-protein in the bloodstream and functions also as a key regulator of steroid bioavailability within target tissues, such as the prostate. Additionally, SHBG binds to prostatic cell membranes via the putative and unidentified SHBG receptor (RSHBG), activating a signal transduction pathway implicated in stimulating both proliferation and expression of prostate specific antigen (PSA) in prostate cell lines in vitro. A yeast-two hybrid assay suggested an interaction between SHBG and kallikrein-related protease (KLK) 4, which is a serine protease implicated in the progression of prostate cancer. The potential interaction between these two proteins was investigated in this PhD thesis to determine whether SHBG is a proteolytic substrate of KLK4 and other members of the KLK family including KLK3/PSA, KLK7 and KLK14. Furthermore, the effects from SHBG proteolytic degradation on SHBG-regulated steroid bioavailability and the activation of the putative RSHBG signal transduction pathway were examined in the LNCaP prostate cancer cell line. SHBG was found to be a proteolytic substrate of the trypsin-like KLK4 and KLK14 in vitro, yielding several proteolysis fragments. Both chymotrypsin-like PSA and KLK7 displayed insignificant proteolytic activity against SHBG. The kinetic parameters of SHBG proteolysis by KLK4 and KLK14 demonstrate a strong enzyme-substrate binding capacity, possessing a Km of 1.2 ± 0.7 µM and 2.1 ± 0.6 µM respectively. The catalytic efficiencies (kcat/Km) of KLK4 and KLK14 proteolysis of SHBG were 1.6 x 104 M-1s-1 and 3.8 x 104 M-1s-1 respectively, which were comparable to parameters previously reported for peptide substrates. N-terminal sequencing of the fragments revealed cleavage near the junction of the N- and C-terminal laminin globulin-like (G-like) domains of SHBG, resulting in the division of the two globulins and ultimately the full degradation of these fragments by KLK4 and KLK14 over time. Proteolytic fragments that may retain steroid binding were rapidly degraded by both proteases, while fragments containing residues beyond the steroid binding pocket were less degraded over the same period of time. Degradation of SHBG was inhibited by the divalent metal cations calcium and zinc for KLK4, and calcium, zinc and magnesium for KLK14. The human secreted serine protease inhibitors (serpins), α1-antitrypsin and α2-antiplasmin, inhibited KLK4 and KLK14 proteolysis of SHBG; α1-antichymotrypsin inhibited KLK4 but not KLK14 activity. The inhibition by these serpins was comparable and in some cases more effective than general trypsin protease inhibitors such as aprotinin and phenylmethanesulfonyl fluoride (PMSF). The binding of 5α-dihydrotestosterone (DHT) to SHBG modulated interactions with KLK4 and KLK14. Steroid-free SHBG was more readily digested by both enzymes than DHT-bound SHBG. Moreover, a binding interaction exists between SHBG and pro-KLK4 and pro-KLK14, with DHT strengthening the binding to pro-KLK4 only. The inhibition of androgen uptake by cultured prostate cancer cells, mediated by SHBG steroid-binding, was examined to assess whether SHBG proteolysis by KLK4 and KLK14 modulated this process. Proteolytic digestion eliminated the ability of SHBG to inhibit the uptake of DHT from conditioned media into LNCaP cells. Therefore, the proteolysis of SHBG by KLK4 and KLK14 increased steroid bioavailability in vitro, leading to an increased uptake of androgens by prostate cancer cells. Interestingly, different transcriptional responses of PSA and KLK2, which are androgen-regulated genes, to DHT-bounsd SHBG treatment were observed between low and high passage number LNCaP cells (lpLNCaP and hpLNCaP respectively). HpLNCaP cells treated with DHT-bound SHBG demonstrated a significant synergistic upregulation of PSA and KLK2 above DHT or SHBG treatment alone, which is similar to previously reported downstream responses from RSHBG-mediated signaling activation. As this result was not seen in lpLNCaP cells, only hpLNCaP cells were further investigated to examine the modulation of potential RSHBG activity by KLK4 and KLK14 proteolysis of SHBG. Contrary to reported results, no increase in intracellular cAMP was observed in hpLNCaP cells when treated with SHBG in the presence and absence of either DHT or estradiol. As a result, the modulation of RSHBG-mediated signaling activation could not be determined. Finally, the identification of the RSHBG from both breast (MCF-7) and prostate cancer (LNCaP) cell lines was attempted. Fluorescently labeled peptides corresponding to the putative receptor binding domain (RBD) of SHBG were shown to be internalized by MCF-7 cells. Crosslinking of the RBD peptide to the cell surfaces of both MCF-7 and LNCaP cells, demonstrated the interaction of the peptide with several targets. These targets were then captured using RBD peptides synthesized onto a hydrophilic scaffold and analysed by mass spectrometry. The samples captured by the RBD peptide returned statistically significantly matches for cytokeratin 8, 18 and 19 as well as microtubule-actin crosslinking factor 1, which may indicate a novel interaction between SHBG and these proteins, but ultimately failed to detect a membrane receptor potentially responsible for the putative RSHBG-mediated signaling. This PhD project has reported the proteolytic processing of SHBG by two members of the kallikrein family, KLK4 and KLK14. The effect of SHBG proteolysis by KLK4 and KLK14 on RSHBG-mediated signaling activation was unable to be determined as the reported signal transduction pathway was not activated after treatment with SHBG, in combination with either DHT or estradiol. However, the digestion of SHBG by these two proteases positively regulated androgen bioavailability to prostate cancer cells in vitro. The increased uptake of androgens is deleterious in prostate cancer due to the promotion of proliferation, metastasis, invasion and the inhibition of apoptosis. The increased bioavailability of androgens, from SHBG proteolysis by KLK4 and KLK14, may therefore promote both carcinogenesis and progression of prostate cancer. Finally, this information may contribute to the development of therapeutic treatment strategies for prostate cancer by inhibiting the proteolysis of SHBG, by KLK4 and KLK14, to prevent the increased uptake of androgens by hormone-dependent cancerous tissues.

Morphological overlap of fish community in Vamanapuram River, south Kerala

The morphological characteristics and overlap of fish community in Vamanapuram River have been studied in detail. In the 12 study sites, 19 fish species were encountered. Based on the body shape, four different types are apparent. The elongate bodied fishes (RBD<1.5) like Hemiramphus xanthopterus and Xenentodon cancila are grouped under one category. The deep bodied fishes (RBD>3.5) like Puntius filamentosus, P. ticto, P. vittatus, P. melanampyx, P. sarana, Etroplus maculatus and E. suratensis come under a separate category. Fishes with round to square cross section like Garra mullya and Glossogobius giuris form a separate group. All the other species are grouped as generalized bodied fishes. The morphological overlap studied for the Vamanapuram fish community showed that out of 190 combinations, 30 combinations have high overlaps (≥ 67). P. melanampyx has maximum number (6) of high overlaps. Puntius spp., which constituted 49.5% of the total population, have a mean morphological overlap of 52%. The morphological overlap of fish species in relation to the trophic structure is discussed in detail.

稀土催化剂合成窄分子量分布聚异戊二烯的研究

本论文利用传统的稀土催化剂组成，探讨了稀土催化剂的配制方式，配制出稳定的均相催化剂；深入探讨了影响聚异戊二烯分子结构的因素，合成了高顺式、高分子量、窄分子量分布且具有与天然橡胶相似的拉伸结晶特点的聚合物；讨论了催化剂活性中心的形成机理；均相催化剂用于丁二烯-异戊二烯共聚合可制备窄分子量分布的无规共聚物。 1. NdCl3•3iPrOH/MMAO催化体系：可在较低的MMAO (Al/Nd < 40)用量下，高收率地合成高的顺式-1,4含量(> 96%)、非常高的分子量(Mn > 100×104)、相当窄的分子量分布(Mw/Mn < 2.0)的聚异戊二烯。与烷基铝助催化剂如Al(i-Bu)3和Al(i-Bu)2H相比，在顺-1,4含量相同的情况下，MMAO体系所得聚合物的分子量最高，分子量分布最窄。催化剂形成配位阳离子性质的活性中心。 2. Nd(vers)3/Al(i-Bu)2H/Al(i-Bu)2Cl催化体系：可在适当的陈化条件下配制出稳定的均相催化剂，该均相催化剂可在较低的Al/Nd用量(Al/Nd = 10)和催化剂用量([Nd] = 0.20 mM)下，高收率(> 80%)地合成高顺式-1,4含量(> 96%)、高分子量(Mn > 50×104)、窄分子量分布(Mw/Mn < 3.0)的聚合物。均相催化剂的活性中心为配位阳离子性质的单活性中心。 3. Nd(vers)3/MMAO/Al(i-Bu)2H/Al(i-Bu)2Cl催化体系：在相当低的MMAO用量(Al/Nd = 10，总铝量Al/Nd = 20)下，仍具有高的催化活性，所得聚合物的分子量较高(Mn 52.4×104)，分子量分布较窄(Mw/Mn < 3.0)，顺-1,4结构含量可达96%。通过调节Al(i-Bu)2H和MMAO用量可以控制聚合物的分子量及分子量分布。 4. Nd(vers)3/Al(i-Bu)3/Al(i-Bu)2Cl催化体系：用Al(i-Bu)3代替Al(i-Bu)2H作助催化剂，可在各种加料方式下高收率地获得高顺-1,4含量(96%)、非常高分子量(Mn > 100×104)、窄分子量分布(Mw/Mn < 3.0)的聚异戊二烯，且所得异戊橡胶在高顺-1,4含量(96%)、高分子量(Mn ≥ 90×104)、窄分子量分布(Mw/Mn ≤ 2.1)时存在拉伸结晶现象，性能接近甚至超过天然橡胶。 5. Nd(vers)3/AlR3(Al(i-Bu)2H, Al(i-Bu)3)/Al(i-Bu)2Cl催化体系在一定条件下，可获得高顺式-1,4含量(丁二烯和异戊二烯的顺-1,4含量均可达99.9%)、高分子量(Mn > 50×104)、窄分子量分布(Mw/Mn < 3.0)的丁二烯-异戊二烯共聚物。只是用Al(i-Bu)3作助催化剂时，均相和非均相催化剂均可得到高顺式、更高分子量(Mn > 100×104)、更窄分子量分布(Mw/Mn < 1.8)的共聚物。两单体的竞聚率为：对于Al(i-Bu)2H体系，rBD = 0.923，rIP = 0.612；对于Al(i-Bu)3体系，rBD = 1.02，rIP = 0.919。表明聚合物为无规共聚物。

Towards a better understanding of the nature and contribution of the interflow to catchment dynamics.

A detailed understanding of flow and contaminant transfer along each of the key hydrological pathways within a catchment is critical for designing and implementing cost effective Programmes of Measures under the Water
Framework Directive.
The Contaminant Movement along Pathways Project (’The Pathways Project’) is an Irish, EPA STRIVE funded, large multi-disciplinary project which is focussed on understanding and modelling flow and attenuation along each of these pathways for the purposes of developing a catchment management tool. The tool will be used by EPA and RBD catchment managers to assess and manage the impacts of diffuse contamination on stream aquatic ecology. Four main contaminants of interest — nitrogen, phosphorus, sediment and pathogens — are being
investigated in four instrumented test catchments. In addition to the usual hydrological and water chemistry/quality parameters typically captured in catchment studies, field measurements at the test catchments include ecological
sampling, sediment dynamics, soil moisture dynamics, and groundwater levels and chemistry/quality, both during and between significant rainfall events. Spatial and temporal sampling of waters directly from the pathways of
interest is also being carried out.
Sixty-five percent of Ireland is underlain by poorly productive aquifers. In these hydrogeological settings, the main pathways delivering flow to streams are overland flow, interflow and shallow bedrock flow. Little is
known about the interflow pathway and its relative importance in delivery of flow and contaminants to the streams. Interflow can occur in both the topsoil and subsoil, and may include unsaturated matrix flow, bypass or macropore
flow, saturated flow in locally perched water tables and artificial field drainage.
Results to date from the test catchment experiments show that artificial field drains play an important role in the delivery of interflow to these streams, during and between rainfall events when antecedent conditions are
favourable. Hydrochemical mixing models, using silica and SAC254 (the absorbance of UV light at a wavelength of 254 nm which is a proxy for dissolved organic matter) as tracers, show that drain flow is an important end
member contributing to the stream and that proportionally, its contribution is relatively high.
Results from the study also demonstrate that waters originating from one pathway often mix with the waters from another, and are subsequently delivered to the stream at rates, and with chemical/quality characteristics,
that are not typical of either pathway. For example, pre-event shallow groundwater not far from the catchment divide comes up to the surface as rejected recharge during rainfall events and is rapidly delivered to the stream
via overland flow and/or artificial land drainage, bringing with it higher nitrate than would often be expected from a quickflow pathway contribution. This is contrary to the assumption often made in catchment studies that the
deeper hydrological pathways have slower response times in stream hydrographs during a rainfall event, and it emphasizes that it is critical to have a strong three-dimensional conceptual model as the basis for the interpretation
of catchment data.

Exploring Rac GTPase regulation : the molecular mechanisms governing the DOCK180 and ELMO interaction and the role of this complex in Rac-mediated cell migration

Les protéines DOCK180 et ELMO coopèrent ensemble biochimiquement et génétiquement afin d’activer la GTPase Rac1 lors de plusieurs évènements biologiques. Toutefois, le rôle que jouent ces protéines dans la signalisation par Rac est encore mal compris. Nous émettons l’hypothèse que Dock180 agit comme activateur de Rac, alors que ELMO est requis pour l’intégration de la signalisation de Rac plutôt que son activation per se. Nous postulons que ELMO agit comme signal de localisation intracellulaire afin de restreindre de façon spatio-temporelle la signalisation de Rac en aval de Dock180, et/ou que ELMO agit comme protéine d’échafaudage entre Rac et ses effecteurs pour amplifier la migration cellulaire. Dans l’objectif nº 1, nous démontrons que le domaine PH atypique de ELMO1 est le site d’interaction principal entre cette protéine et DOCK180. De plus, nous démontrons que la liaison entre ELMO et DOCK180 n’est pas nécessaire pour l’activation de Rac, mais est plutôt essentielle pour faciliter la réorganisation du cytosquelette induite par l’activation de Rac en aval de Dock180. Ces résultats impliquent que ELMO pourrait jouer des rôles additionnels dans la signalisation par Rac. Dans l’objectif nº 2, nous avons découvert l’existence d’une homologie structurelle entre ELMO et un module d’autorégulation de la formine Dia1, et avons identifié trois nouveaux domaines dans la protéine ELMO : les domaines RBD, EID et EAD. De façon analogue à Dia1, nous avons découvert que ELMO à l’état basal est autoinhibé grâce à des intéractions intramoléculaires. Nous proposons que l’état d’activation des protéines ELMO est régulé de façon similaire aux formines de la famille Dia, c’est-à-dire grâce à des interactions avec d’autres protéines. Dans l’objectif nº 3, nous identifions un domaine RBD polyvalent chez ELMO. Ce domaine possède une double spécificité pour les GTPases de la famille Rho et Arf. Nous avons découvert que Arl4A agit comme signal de recrutement membranaire pour le module ELMO/DOCK180/Rac. Nos résultats nous permettent de supposer que d’autres GTPases pourraient être impliquées dans l’activation et la localisation de cette voie de signalisation. Nous concluons qu’à l’état basal, ELMO et DOCK180 forment un complexe dans lequel ELMO est dans sa conformation autoinhibée. Bien que le mécanisme d’activation de ELMO ne soit pas encore bien compris, nous avons découvert que, lorsqu’il y a stimulation cellulaire, certaines GTPases liées au GTP peuvent intéragir avec le domaine RBD de ELMO pour relâcher les contacts intramoléculaires et/ou localiser le complexe à la membrane. Ainsi, les GTPases peuvent servir d’ancrage au complexe ELMO/DOCK180 pour assurer une regulation spatiotemporelle adequate de l’activation et de la signalisation de Rac.

Étude de la perfusion cérébrale régionale dans le trouble comportemental en sommeil paradoxal

Le trouble comportemental en sommeil paradoxal (TCSP) se caractérise par une perte de l’atonie musculaire en sommeil paradoxal et par des manifestations motrices élaborées souvent associées au contenu onirique. Le TCSP peut apparaître sous une forme idiopathique (TCSPi), mais il est fréquemment lié à certains désordres neurodégénératifs, dont les synucléinopathies. Des marqueurs biologiques des synucléinopathies, tels que la présence d’anomalies au plan de la motricité, de la détection des odeurs ainsi que de la discrimination des couleurs, ont été retrouvés dans le TCSPi. De plus, des perturbations de l’activité cérébrale en neuroimagerie ainsi que du fonctionnement cognitif ont été observées chez ces patients. Des études ont démontré que le TCSPi pouvait précéder l’apparition d’une maladie de Parkinson (MP) ou d’une démence à corps de Lewy (DCL). Ceci suggère que le TCSPi représenterait un facteur de risque des synucléinopathies. L’objectif principal du présent projet est d’étudier les anomalies du débit sanguin cérébral régional (DSCr) de repos avec la tomographie par émission monophotonique (TEM) dans le TCSPi. Deux études ont été réalisées. La première visait à comparer le DSCr entre des patients avec un TCSPi et des sujets sains, puis d’explorer la relation entre l’activité cérébrale et la présence de marqueurs biologiques des synucléinopathies. Les résultats ont montré une diminution de la perfusion cérébrale dans les régions frontales et pariétales ainsi qu’une augmentation de la perfusion au niveau du pont, du putamen et des hippocampes chez les patients avec un TCSPi. Une relation significative entre la performance des sujets avec un TCSPi à une épreuve de discrimination des couleurs et la perfusion cérébrale au niveau des régions frontales et occipitales a été mise en évidence. Dans l’ensemble, ces résultats ont démontré des anomalies du DSCr chez les patients avec un TCSPi qui sont similaires à celles observées par d’autres études en neuroimagerie dans la MP. Ceci suggère des atteintes neuroanatomiques semblables entre ces pathologies. La seconde étude en TEM a été effectuée dans le but d’examiner les modifications du DSCr associées aux perturbations du fonctionnement cognitif dans le TCSPi. Pour ce faire, le DSCr a été comparé entre un sous-groupe de patients avec un TCSPi et un trouble cognitif léger (TCL), un sous-groupe de patients avec un TCSPi sans TCL et un groupe de sujets sains. Les résultats ont montré que seuls les patients avec un TCSPi et un TCL présentaient une diminution de la perfusion cérébrale dans les aires corticales postérieures (occipitales et temporo-pariétales). Ces observations sont similaires à celles rapportées dans la MP avec démence et la DCL dans les études en neuroimagerie. En conclusion, les résultats de ces deux études ont montré des perturbations du DSCr dans le TCSPi, similaires à celles observées dans les synucléinopathies. Par ailleurs, nos résultats ont mis en évidence que les patients avec un TCSPi et un TCL présentaient les mêmes anomalies de la perfusion cérébrale que les patients avec une MP avec démence et/ou une DCL. La présence de tels marqueurs des synucléinopathies dans le TCSPi suggère que ces patients pourraient être plus à risque d’évoluer vers ce type de maladie neurodégénérative.

Marqueurs électroencéphalographiques du développement d’une maladie neurodégénérative dans le trouble comportemental en sommeil paradoxal

Le trouble comportemental en sommeil paradoxal (TCSP) est une parasomnie se caractérisant par la perte de l’atonie musculaire, la paralysie qui accompagne généralement le sommeil paradoxal, suivie de l’apparition de comportements indésirables et souvent violents. Des études suggèrent que le TCSP idiopathique (TCSPi) est fortement lié au développement ultérieur de la maladie de Parkinson, de la démence à corps de Lewy et de l’atrophie multisystémique. En effet, des signes subtils de neurodégénérescence sont observés chez ces patients, notamment un ralentissement de l’activité électrique cérébrale (EEG) à l’éveil et la présence de troubles cognitifs. Le but de cette thèse est 1) d’évaluer sur le plan transversal la contribution du trouble cognitif léger (TCL) dans le ralentissement de l’EEG à l’éveil observé chez ces patients et 2) d’évaluer la valeur prédictive des mesures de l’EEG à l’éveil mesurées au temps de base par rapport au développement d’une maladie neurodégénérative (MND) lors du suivi longitudinal. Dans le cadre de la première étude, l’EEG à l’éveil d’un groupe de patients avec un TCSPi présentant des atteintes cognitives a été comparé à celui d’un groupe de patients sans troubles cognitifs et à des sujets témoins sains. Seuls les patients avec un TCL affichaient un ralentissement de l’EEG d’éveil plus prononcé au niveau postérieur, c’est-à-dire une puissance relative thêta plus élevée dans les régions pariétale, temporale et occipitale, une puissance relative alpha plus faible dans les régions occipitale et temporale, en plus d’un ratio spectral (ondes lentes sur ondes rapides) plus élevé dans ces régions en comparaison avec les deux autres groupes. De plus, le ratio spectral corrélait négativement avec les fonctions attentionnelles/exécutives, visuospatiales et la mémoire épisodique verbale. La deuxième étude a quant à elle évalué l’EEG à l’éveil au temps initial de patients qui ont développé une MND sur une période de 3,5 ans en comparaison à celui de patients qui sont demeurés idiopathiques et à un groupe de témoins sains. Les patients avec un TCSPi qui ont évolué vers une MND présentaient une augmentation de la puissance de l’activité absolue delta et thêta, en plus d’un ratio spectral plus élevé dans les cinq régions corticales en comparaison avec les deux autres groupes. Cette thèse suggère ainsi que le ralentissement de l’EEG à l’éveil dans le TCSPi est relié à la présence d’un TCL concomitant. De plus, ces anomalies sont associées à un plus grand risque de développer une maladie de Parkinson, une démence à corps de Lewy ou une atrophie multisystémique à court terme chez ces patients. Le ralentissement de l’EEG à l’éveil semble donc être un marqueur prometteur d’une neurodégénérescence cérébrale plus sévère chez les patients souffrant d’un TCSPi.

Rêves et émotions chez des sujets souffrant du trouble comportemental en sommeil paradoxal

Le trouble comportemental en sommeil paradoxal (TCSP) est caractérisé par des rêves intenses et une perte de l’atonie musculaire normalement présente au cours du sommeil paradoxal qui permet l’apparition de comportements oniriques isomorphiques au contenu des rêves. Quelques chercheurs ont étudié le contenu des rêves des patients atteints du TCSP, plusieurs ont trouvé une plus grande présence de thèmes menaçants et agressifs, d’autres ont obtenu des résultats plus mitigés. Ces études comportent des failles méthodologiques importantes, comme l’absence d’un groupe contrôle ou l’inclusion de patients consommant une médication psychoactive. La présence de rêves à caractère dysphorique a été associée, dans d’autres populations, à une psychopathologie marquée et à des difficultés émotionnelles, et cette association, quoiqu’inexplorée pourrait aussi être présente chez patients ayant un TCSP. La raison pour laquelle ces patients font des rêves plus dysphoriques est encore largement inconnue, de même qu’une partie des mécanismes qui génèrent les comportements oniriques. Le but du premier article de cette thèse était de mesurer l’alexithymie et la détresse des cauchemars chez les patients atteints du TCSP par rapport à des contrôles. Les résultats indiquent que les patients souffrent davantage d’alexithymie, et particulièrement d’une difficulté à identifier leurs émotions et qu’elle corrélait avec la détresse due aux cauchemars. Le second article estimait, à l'aide d'un questionnaire validé, la présence de rêves, la diversité des thèmes des rêves chez les patients et examinait leurs thèmes au cours de leur vie. Les patients rapportaient beaucoup plus de cauchemars et plus de thèmes à caractère menaçant, comme des agressions, des catastrophes, et des rêves où le rêveur a peu de contrôle. Le troisième article avait pour objectif de clarifier les écarts dans les résultats des études sur les rêves des patients, c'est-à-dire déterminer si l'agressivité rapportée par ces patients est vraiment une différence au niveau du contenu des rêves, ou s'il s'agit plutôt d'un problème dû à la détresse liée aux rêves. Un second objectif était de mesurer le degré de corrélation entre les comportements à l’éveil, comme les comportements miroirs, et les comportements oniriques chez les patients. L’article démontre que les patients ressentaient une plus grande détresse à l'éveil en lien avec leurs expériences oniriques et que leurs rêves étaient plus dysphoriques et contenaient plus d'anxiété. De plus, leurs résultats au questionnaire de comportements miroirs corrélaient avec la sévérité de leurs comportements oniriques, ce qui suggère que le système de neurones miroirs pourrait avoir une influence sur les manifestations de ces comportements chez les patients. Globalement, ces résultats suggèrent que des difficultés au niveau de la régulation émotionnelle pourraient expliquer à la fois les symptômes émotionnels à l’éveil et les difficultés nocturnes des patients. Nous suggérons qu'un déficit au niveau des régions régulatrices frontales pourrait être à la base des différentes difficultés éprouvées par les patients. De plus, il est possible que des anomalies au niveau du système de neurones miroirs aient à la fois un impact sur la capacité des patients à réguler leurs émotions, mais aussi sur les manifestations de comportements oniriques.

Research by Design is up and running

This paper explores the context of and developments in Research by Design (RbD) as currently developing in Schools of Architecture. It starts from noticing that the design studio is the core of the bachelor and master curriculum. Extending this position to PhD research implies the search for research where the design process is the main method of researching and creating knowledge and understanding. These developments connect to similar developments in the arts. Mode 1 and mode 2 knowledge, reflection and other knowledge processes are the base for developing knowledge for the field of architecture when practice and designing are the main method of research. The paper concludes with observing many PhD and research projects building on design activities and practice are currently under way and are supported by academia. They produce a specific type of knowledge and understanding, usually opening up problems and exploring boundaries.

Avaliação de fungicidas no controle de Asperisporium caricae na cultura do mamoeiro

Dentre as doenças fúngicas do mamoeiro, a varíola (Asperisporium caricae) é umas das doenças mais importantes. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a eficácia de fungicidas no controle da varíola em folhas e frutos do mamoeiro. O experimento foi conduzido em área comercial, no município de Taquarintiga - SP, em delineamento de blocos casualizados, com cinco tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos foram tebuconazol + trifloxistrobina (0,06 L.100L-1 de água), piraclostrobina (0,04 L.100L-1 de água), difenoconazol (0,03 L.100L-1 de água), azoxistrobina (128 g.ha-1) e a testemunha. Foram realizadas três avaliações, nas quais foram avaliadas a severidade da varíola através de escala diagramática, nas folhas e nos frutos de três plantas previamente marcadas. Os dados registrados foram submetidos à análise de variância pelo teste F, e as médias, comparadas pelo teste de Scott-Knott (p<0,05). Os fungicidas tebuconazol+trifloxistrobina, piraclostrobina, difenoconazol e azoxistrobina foram eficientes no controle da varíola.

Níveis de fertirrigação na avaliação das características morfofisiológicas em mudas de pimenta malagueta

O presente trabalho teve o objetivo de avaliar as características morfofisiológicas de mudas de pimenta malagueta (Capsicum frutescens) sob diferentes níveis de fertirrigação, utilizando-se fertilizante líquido 10-10-10 (N-P-K). O experimento foi realizado na Faculdade de Ciências Agrárias da Universidade Federal da Grande Dourados. O delineamento experimental foi em blocos casualizados (DBC), com seis doses de fertilizante líquido (0; 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 e 40 mL L-1) diluídos na água de irrigação e quatro repetições. As mudas foram produzidas em viveiro telado, em bandejas de 128 células preenchidas com substrato. Realizou-se uma fertirrigação, aos 15 dias após a semeadura ( DAS). Avaliou-se, aos 30 dias após a semeadura, o número de folhas, o comprimento da parte aérea e da raiz, a massa fresca e seca da parte aérea e da raiz, a área foliar e o teor de clorofila. A dose de 25 mL L-1 do fertilizante líquido 10-10-10, aplicada via fertirrigação, é recomendada para a produção de mudas de pimenta malagueta, embora tenha havido aumento da massa seca de raízes e parte aérea em dose maior.

Balanço de nitrogênio em viveiros de crescimento final de Macrobrachium amazonicum com uso de aeração noturna e substratos artificiais

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Efeito da alimentação e densidade de estocagem no desempenho zootécnico e perfil celular do hepatopâncreas do camarão-da-amazônia Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) (Crustacea, Palaemonidae)

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Perdas na colheita e qualidade da fibra de cultivares de algodão adensado em função de sistemas de colheita

Pós-graduação em Agronomia (Energia na Agricultura) - FCA

Incidência de Diatraea saccharalis Fabr., 1794 (Lepidoptera: Crambidae) e Mahanarva fimbriolata Stal, 1854 (Hemiptera: Cercopidae), produtividade e qualidade tecnológica da cana-de-açúcar em função da irrigação e da fertilização nitrogenada

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