Efeitos da vernalização e de fitoreguladores no desenvolvimento de Lilium longiflorum Thunb

Bulbos de lírio foram mantidos a 22°C ou vernalizados a 4º ou 8°C por duas semanas, sendo então imersos por 12 horas em soluções de ácido giberélico (GA) 1000 ppm ou ácido indolilacético (IAA) 1000 ppm, antes de serem plantados em condições de campo. Tratamento dos bulbos a 4°C, durante duas semanas, atrasou a emergência das brotações. Este atraso devido a vernalização foi removido quando os bulbos foram imersos por 12 horas em soluções de GA ou IAA 1000 ppm. Vernalização e fitoreguladores não afetaram a altura nem a qualidade das plantas de lírio. A vernalização dos bulbos a 4º ou 8°C, durante duas semanas, reduziu o número de hastes produzidas. Nao se verificaram diferenças entre os tratamentos em relação ao período de tempo para a ocorrência da antese floral. A qualidade da inflorescência foi melhorada pela vernalização do bulbo a 8°C durante duas semanas ou por imersão durante 12 horas em solução de IAA 1000 ppm.

Actin cytoskeleton regulates pollen tube growth and tropism

La fertilisation chez les plantes dépend de la livraison des cellules spermatiques contenues dans le pollen à l’ovule. Au contact du stigmate, le grain de pollen s’hydrate et forme une protubérance, le tube pollinique, chargé de livrer les noyaux spermatiques à l’ovule. Le tube pollinique est une cellule à croissance rapide, anisotrope et non autotrophe; ainsi tout au long de sa croissance à travers l’apoplaste du tissu pistillaire, le tube pollinique puise ses sources de carbohydrates et de minéraux du pistil. Ces éléments servent à la synthèse des constituants de la paroi qui seront acheminés par des vésicules de sécrétion jusqu’à l’apex du tube. Ce dernier doit aussi résister à des pressions mécaniques pour maintenir sa forme cylindrique et doit répondre à différents signaux directionnels pour pouvoir atteindre l’ovule. Mon projet de doctorat était de comprendre le rôle du cytosquelette dans la croissance anisotrope du tube pollinique et d’identifier les éléments responsables de sa croissance et de son guidage. Le cytosquelette du tube pollinique est composé des microfilaments d’actine et des microtubules. Pour assurer une bonne croissance des tubes polliniques in vitro, les carbohydrates et les éléments de croissance doivent être ajoutés au milieu à des concentrations bien spécifiques. J’ai donc optimisé les conditions de croissance du pollen d’Arabidopsis thaliana et de Camellia japonica qui ont été utilisés avec le pollen de Lilium longiflorum comme modèles pour mes expériences. J’ai développé une méthode rapide et efficace de fixation et de marquage du tube pollinique basée sur la technologie des microondes. J’ai aussi utilisé des outils pharmacologiques, mécaniques et moléculaires couplés à différentes techniques de microscopie pour comprendre le rôle du cytosquelette d’actine lors de la croissance et le tropisme du tube pollinique. J’ai trouvé que le cytosquelette d’actine et plus précisément l’anneau d’actine localisé dans la partie sub-apicale du tube est fortement impliqué dans la croissance et le maintien de l’architecture du tube à travers le contrôle de la livraison des vésicules de sécrétion. J’ai construit une chambre galvanotropique qui peut être montée sur un microscope inversé et qui sert à envoyer des signaux tropistiques bien précis à des tubes polliniques en croissance. J’ai trouvé que les filaments d’actine sont impliqués dans la capacité du tube pollinique à changer de direction. Ce comportement tropistique dépend de la concentration du calcium dans le milieu de croissance et du flux de calcium à travers des canaux calciques. Le gradient de calcium établi dans le tube pollinique affecte l’activité de certaines protéines qui se lient à l’actine et dont le rôle est la réorganisation des filaments d’actine. Parmi ces protéines, il y a celles de dépolymérisation de l’actine (ADF) dont deux spécifiquement exprimées dans le gamétophyte mâle d’Arabidopsis (ADF7 et ADF10). Par marquage avec des proteins fluorescents, j’ai trouvé que l’ADF7 et l’ADF10 ont des expressions différentielles pendant la microsporogenèse et la germination et croissance du tube pollinique et qu’elles partagent entre elles des rôles importants durant ces différents stades.

Inhibitory Regulation of Higher-Plant Myosin by Ca2+ Ions1

Myosin isolated from the pollen tubes of lily (Lilium longiflorum) is composed of a 170-kD heavy chain (E. Yokota and T. Shimmen [1994] Protoplasma 177: 153–162). Both the motile activity in vitro and the F-actin-stimulated ATPase activity of this myosin were inhibited by Ca2+ at concentrations higher than 10−6 m. In the Ca2+ range between 10−6 and 10−5 m, inhibition of the motile activity was reversible. In contrast, inhibition by more than 10−5 m Ca2+ was not reversible upon Ca2+ removal. An 18-kD polypeptide that showed the same mobility in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis as that of spinach calmodulin (CaM) was present in this myosin fraction. This polypeptide showed a mobility shift in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis in a Ca2+-dependent manner. Furthermore, this polypeptide was recognized by antiserum against spinach CaM. By immunoprecipitation using antiserum against the 170-kD heavy chain, the 18-kD polypeptide was coprecipitated with the 170-kD heavy chain, provided that the Ca2+ concentration was low, indicating that this 18-kD polypeptide is bound to the 170-kD myosin heavy chain. However, the 18-kD polypeptide was dissociated from the 170-kD heavy chain at high Ca2+ concentrations, which irreversibly inhibited the motile activity of this myosin. From these results, it is suggested that the 18-kD polypeptide, which is likely to be CaM, is associated with the 170-kD heavy chain as a light chain. It is also suggested that this polypeptide is involved in the regulation of this myosin by Ca2+. This is the first biochemical basis, to our knowledge, for Ca2+ regulation of cytoplasmic streaming in higher plants.

Actin-Bundling Protein Isolated from Pollen Tubes of Lily : Biochemical and Immunocytochemical Characterization

A 135-kD actin-bundling protein was purified from pollen tubes of lily (Lilium longiflorum) using its affinity to F-actin. From a crude extract of the pollen tubes, this protein was coprecipitated with exogenously added F-actin and then dissociated from F-actin by treating it with high-ionic-strength solution. The protein was further purified sequentially by chromatography on a hydroxylapatite column, a gel-filtration column, and a diethylaminoethyl-cellulose ion-exchange column. In the present study, this protein is tentatively referred to as P-135-ABP (Plant 135-kD Actin-Bundling Protein). By the elution position from a gel-filtration column, we estimated the native molecular mass of purified P-135-ABP to be 260 kD, indicating that it existed in a dimeric form under physiological conditions. This protein bound to and bundled F-actin prepared from chicken breast muscle in a Ca2+-independent manner. The binding of 135-P-ABP to actin was saturated at an approximate stoichiometry of 26 actin monomers to 1 dimer of P-135-ABP. By transmission electron microscopy of thin sections, we observed cross-bridges between F-actins with a longitudinal periodicity of 31 nm. Immunofluorescence microscopy using rhodamine-phalloidin and antibodies against the 135-kD polypeptide showed that P-135-ABP was colocalized with bundles of actin filaments in lily pollen tubes, leading us to conclude that it is the factor responsible for bundling the filaments.

Respuestas del cultivo de Lilium spp. ante diferencias en la variedad y densidad de plantación

El cultivo de flores de corte está centralizado en la provincia de Buenos Aires. Nuestra provincia dista de ser un centro productor pero es un importante polo consumidor. La falta de asesoramiento técnico respecto a los cultivos y su adaptación a nuestras condiciones agroclimáticas constituyen la razón fundamental para el desarrollo de este proyecto. El cultivo de Lilium es sin duda uno de los más demandados y su precio supera las demás flores de corte. Tal costo deriva del valor del material vegetal original (bulbo), el cual se importa desde Holanda (se carece de producción nacional estable, con suficiente sanidad y calidad para lograr abastecimiento continuo). A través del proyecto se pretende analizar la calidad y sanidad de la primer generación de bulbos nacionales de un productor del área metropolitana de Buenos Aires, además del grado de adaptación a nuestras condiciones agroclimáticas. Para responder a ambos parámetros los estudios se realizan en paralelo en ambas instituciones: la Universidad Católica de Córdoba realiza el análisis de parámetros agronómicos: variedad, densidad, temperatura sobre el cultivo, la Universidad Nacional del Sur complementa los datos obtenidos con análisis de presencia y tipo de virus, carga viral, influencia en el desenvolvimiento del cultivo.

De convallariae specie vulgo Lilium convallium dicta

Invocatio: Q.D.B.V.

De convallariae specie vulgo Lilium convallium dicta

Invocatio: I.N.S.S.T.

Potentiel d'infestation des populations sauvages de lis indigènes (Lilium canadense et L. philadelphicum) par le criocère du lis (Lilioceris lilii)

Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal

Interindividual variations in fruit preferences of the yellow-shouldered bat Sturnira lilium (Chiroptera: Phyllostomidae) in a cafeteria experiment

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Efeito da fragmentação florestal sobre parâmetros hematológicos em três espécies de morcegos (Artibeus lituratus, Carollia perspicillata e Sturnira lilium)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)