Eficácia e segurança do Sirolimus associado a tacrolimus em baixas doses em paciente idoso transplantado renal

Pós-graduação em Fisiopatologia em Clínica Médica - FMB

Efeitos da administração de inibidores de fosfodiesterases na reversão da hiperatividade de camundongos expostos ao etanol no período correspondente ao terceiro trimestre de gestação em humanos

O consumo de etanol durante a gestação é um grave problema de saúde pública. Durante o desenvolvimento, o sistema nervoso é especialmente susceptível aos efeitos tóxicos do etanol e a exposição ao etanol durante este período pode gerar um amplo espectro de distúrbios neurocomportamentais, sendo o mais frequente, a hiperatividade. Recentemente, estudos têm sugerido que distúrbios na plasticidade neuronal podem estar relacionados com a hiperatividade. Os inibidores de PDE são drogas que agem impedindo a degradação de segundos mensageiros celulares como AMPc e GMPc, mantendo a ativação de proteínas quinases e de fatores de transcrição como o CREB, levando a expressão de genes relacionados à plasticidade. Neste trabalho, avaliamos através do teste de campo aberto se a administração de Vinpocetina ou Rolipram (inibidores de PDE) seria capaz de amenizar ou reverter a hiperatividade de camundongos Suíços expostos ao etanol no período correspondente ao terceiro trimestre de gestação humana. Para tanto, foram realizadas duas etapas: na primeira etapa, durante o período neonatal, os animais receberam injeções intraperitoneais de etanol (5g/Kg em solução salina a 25%, no 2, 4, 6 e 8 dias de vida pós-natal - PN2 a PN8) ou de salina, e 4 horas antes do teste comportamental no campo aberto (10 min), em PN30, receberam Vinpocetina (10mg/Kg ou 20mg/Kg diluídas em DMSO ip) ou somente DMSO ip. Na segunda etapa, os animais foram expostos ao etanol ou à salina no período neonatal nas mesmas condições da primeira etapa e no dia do teste comportamental receberam Rolipram (0,5mg/Kg diluídas em DMSO ip ou somente DMSO ip). Posteriormente aos testes, foram coletados o córtex cerebral frontal e o hipocampo dos animais para avaliação dos níveis de AMPc. Os resultados comportamentais indicam que somente o tratamento com Vinpocetina (20mg/Kg) reverteu a hiperatividade de camundongos expostos ao etanol, resultado que não foi observado com o tratamento com Rolipram. Desta forma, a dosagem dos níveis de AMPc foi realizada apenas nos animais que receberam injeção de Vinpocetina (20mg/Kg). A exposição neonatal ao etanol reduziu significativamente os níveis de AMPc no córtex e no hipocampo. O tratamento com Vinpocetina gerou um aumento nos níveis de AMPc no córtex e restaurou estes níveis no hipocampo. Nossos resultados sugerem que a reversão da hiperatividade pelo tratamento com Vinpocetina pode estar associada ao aumento da plasticidade neural induzida por esta droga.

Emprego da técnica de emissão por fluorescência de ultravioleta no monitoramento de inibidores de corrosão em água produzida

Para aumentar os volumes de extração de petróleo, resolver e prevenir problemas nas operações de produção são utilizados diversos produtos químicos, dentre os quais se destacam os inibidores de corrosão, que são utilizados em toda cadeia produtiva do petróleo visando proteger o sistema da deterioração por corrosão. Os sais de amônio quaternário são uma das classes de inibidores mais utilizadas pela indústria do petróleo devido a sua grande eficiência. Entretanto, sua solubilidade em água faz com que estejam presentes na água produzida representando um risco para contaminação ambiental, visto que possuem baixa biodegrabilidade e potencial de bioacumulação. Como se encontram misturados a outros produtos químicos e sob efeitos das variações do ambiente em que são aplicados, definir um método de análise confiável e viável para monitoramento em linha representa um desafio para os laboratórios de campos de produção. Neste trabalho, foi estudado o emprego da fluorescência de ultravioleta na quantificação de um inibidor de corrosão do tipo sal de amônio quaternário em água. Foram obtidos espectros de emissão do produto comercial em água, além do estudo de variáveis instrumentais e interferentes presentes na água produzida. A comparação com padrões de sal de amônio quaternário permitiu identificar como principal fluorófilo, um sal alquil-aril de amônio quaternário. Estudos de estabilidade revelaram que a adsorção do inibidor de corrosão nas superfícies dos frascos plásticos provoca a queda do sinal fluorescente e que a adição de isopropanol reduz este efeito de 40 para 24%. Foram obtidas curvas de calibração com a formulação comercial e com o cloreto de 2-metil-4-dodecil-benzil-trimetil amônio com uma boa correlação. Amostras sintéticas do inibidor foram determinadas com um erro relativo de 2,70 a 13,32%. O método de adição padrão foi avaliado usando uma amostra de água produzida, e os resultados não foram satisfatórios, devido à interferência, principalmente, de compostos orgânicos aromáticos presentes

Avaliação de aminoácidos como inibidores de corrosão para cobre em meio de água do mar artificial

Inibidores de corrosão são substâncias que quando adicionadas a um meio agressivo, diminuem ou previnem a reação de oxidação de um metal com este meio e/ou as reações de redução de espécies presentes no meio. Para a inibição da corrosão de cobre e suas ligas em meios ácidos ou neutros, o inibidor mais empregado é o benzotriazol (BTAH), o qual forma complexos com os íons Cu (I) e Cu (II) na superfície do metal, diminuindo o processo corrosivo. A preocupação com a preservação ambiental e a toxicidade de inibidores de corrosão vem sendo discutida na literatura. Vários estudos têm-se intensificado usando aminoácidos, como proposta para substituição ao BTAH, considerado tóxico. Entre os aminoácidos estudados, dois apresentavam enxofre em suas moléculas (cisteína e metionina) e um outro sem heteroátomo na cadeira lateral (glicina). As concentrações variaram entre 10-2 a 10-4 mol/L e pH da solução entre 7,2 e 8,4. Foram realizadas medidas gravimétricas (ensaios de imersão total) e técnicas eletroquímicas, tais como polarização potenciodinâmica e espectroscopia de impedância eletroquímica. A caracterização morfológica da superfície do substrato após os ensaios de imersão total (743 horas) foi feita por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia de raios X por dispersão de energia (EDS ou EDX) e difração de raios X (DRX). Embora os resultados com aminoácidos tenham sido sempre muito inferiores àqueles obtidos na presença de BTAH, comportamentos semelhantes em função da concentração dos aminoácidos puderam ser observados pelos diagramas de Nyquist. Contudo, com exceção dos resultados verificados para o meio contendo cisteína 10-2 mol/L, todas as eficiências de inibição para os meios contendo aminoácidos, obtidas pelos ensaios de imersão total, foram negativas, mostrando que o tempo de exposição também pode ser relevante para o desempenho destes inibidores. Entre todos os aminoácidos testados, os meios contendo glicina apresentaram os piores desempenhos anticorrosivos, inclusive acelerando o processo de dissolução anódica do cobre. Esse resultado pode estar relacionado à faixa de pH das soluções testadas e à solubilidade dos complexos de cobre formados com os aminoácidos, mostrando que uma faixa ótima de pH também deve ser assegurada para aprimorar a ação destes aminoácidos como inibidores de corrosão

Sinalização da MAPK/ERK na diferenciaçãao da oligodendroglia: efeitos de inibidores da MEK sobre a morfologia e distribuição de proteínas de oligodendrócitos/mielina in vitro

A via de sinalização da cinase regulada por fatores extracelulares, da família das proteínas cinases ativadas por mitógenos (MAPK/ERK) é importante tanto para a sobrevivência como para a progressão da diferenciação de oligodendrócitos. Neste trabalho, a via da MAPK/ERK foi avaliada na oligodendroglia in vitro com a utilização de inibidores da MEK. A morfologia celular, assim como a distribuição de proteínas foram analisadas em diferentes estágios de maturação da oligodendroglia. Culturas primárias de oligodendrócitos foram tratadas com os inibidores da MEK PD98059 ou U0126, aos 5 ou 11dias in vitro (div), por 30min, 24 ou 48h. A oligodendroglia foi distinguida com marcadores estágio-específicos: A2B5, 23nucleotídeo cíclico 3 fosfodiesterase (CNPase) e proteína básica de mielina (MBP), e classificada de acordo com sua morfologia em diferentes estágios de desenvolvimento. O tratamento aumentou significativamente o número de células com morfologia mais imatura e diminuiu o número de células maduras. Além disso, aumentou o número de células redondas e sem prolongamentos as quais não puderam ser classificadas em nenhum dos estágios de desenvolvimento da oligodendroglia. Os efeitos mais evidentes foram observados logo após o menor tempo de tratamento. Células redondas eram positivas para CNPase e MBP, porém não foram marcadas com A2B5 ou com NG2, indicando que seriam células maduras incapazes de estender ou manter seus prolongamentos. De fato, estas mudanças foram acompanhadas por alterações na distribuição de proteínas de oligodendrócitos como a MBP e a CNPase, assim como alterações em proteínas de citoesqueleto, como actina, tubulina e na cinase de adesão focal (FAK). A MBP foi observada nas células tratadas em um padrão de distribuição desorganizado e disperso, oposto ao padrão contínuo que é observado nas células das culturas controle. Além disso, o tratamento causou uma desorganização na distribuição da CNPase, actina e tubulina. Nas células das culturas controle, estas proteínas apresentam um padrão organizado compondo as estruturas de citoqueleto semelhantes a nervuras. Após um pequeno período de tratamento (30min), actina e tubulina apresentaram o mesmo padrão de marcação puntiforme que a CNPase apresentou. O tratamento também reduziu os pontos de adesão focal demonstrados pela FAK. Com o decorrer do tratamento, após 24 e 48h, actina e tubulina aparentavam estar se reorganizando em um padrão filamentar. Estes resultados indicam um efeito importante da via da MAPK/ERK na ramificação e alongamento dos prolongamentos dos oligodendrócitos, com possíveis consequências para a formação da bainha de mielina.

Preliminary observations on the availability of Tor tor (Hamilton) fry in the River Narmada near Hoshangabad, Madhya Pradesh

Collection of mahseer (Tor tor) fry during December to January from three centres of the river Narmada near Hoshangabad, (Joshipur ghat, Dungerwada ghat and Kherra ghat) using a special type of fry collection net is described. The physical features and physico-chemical conditions of the collection sites are also dealt with.

Effect of dietary protein level on the growth of Deccan mahseer fry Tor khudree Sykes

Four feeds having different protein levels were separately tested on Tor khudree fry having an average length of 23.5 mm and weight 55 mg. The best average growth of 15.66 mg and 0.456 mm/day was obtained with Feed IV which comprised rice bran, ground nut oil cake, Acetes, wheat flour and mineral mix at the ratio of 1:1:1:0.7143:0.01428. These constitute 35.29% of proteins. The Feed II which comprised R.B + G.O.C. + prawn shell + wheat flour and mineral mix at a ratio of 1:1:1:0.7143:0.01428 contained 32.61% crude proteins. It provided a growth rate of 14.83 mg and 0.440 mm per day. The conversion rates were 38.258 and 37.776 for feeds IV and II respectively. Since Feed II is cheaper than Feed IV and provides almost equal growth rate, it can be used in the nurseries for intensive rearing of T. khudree fry.

Present status of the Himalayan mahseer Tor putitora, an endangered species in Nainital lakes of Uttar Pradesh

The present status of the Himalayan mahseer in the three lakes of Nainital district of Uttar Pradesh is discussed based on the catch data from 1983-84 to 1992-93. Yield of mahseer have shown a gradual decline in the recent years. Besides catch statistics, market arrivals and availability of fish to anglers have also shown a marked decline. Tor putitora is being considered as an endangered fish. It is therefore necessary to repopulate the lakes with the mahseer by adopting better management practices like stocking the lakes continually with sufficient mahseer fingerlings and enforce strict conservation measures to stop killing of juveniles.

Feed utilization and wastage in semi-intensive pond culture of mahseer, Tor putitora. (Ham.)

Mahseer, Tor putitora with 12.75, 12.11, and 12.02g of initial weight were fou · J to attain a net weight gain of 12.0 kg, ll.5 kg, and 11.4 kg respectively in pond-1 (commercial feed), pond-2 (farm-made feed), and pond-3 (farm-made feed), respectively against 78.2 kg, 70.3 kg, and 68.1 kg feed fed. Gross energy contents in fish were 1359.3 Kcal/kg, 1281.5 Kcal/kg and 1266.6 Kcal/kg, respectively in pond-1, pond-2, and pond-3 against 3630.4, 3876.9 and 3570.5 Kcal/kg energy in the feed fed. Only 9.4%, 10.5% and 13.7% of the protein, and 8.9%, 3.4% and 3.3% of the lipid fed to fish were converted into muscle respectively in pond-1, pond-2 and pond-3. It was observed that the higher the protein content in feed, the lower the rate of conversion in muscle; the same was also true for lipid. It is supposed that feed derived wastes contribute potentially to water quality deterioration and eutrophication. Lower feed conversion, higher nitrogenous and phosphatic concentrations and higher plankton biomass in the ponds are all supportive to this observation.

Length-weight relationship and relative condition factor of pond-reared mahseer, Tor putitora(Ham.)

The study deals with the length-weight relationship and relative condition factor (Kn) of mahseer, Tor putitora reared for 150 days in ponds. The logarithmic form of equation for the relationship was found to be logW = -1.727+2.875logL or W=O.Ol875U·875 • The graphical presentation of the parabolic and logarithmic forms showed respectively the curvilinear and linear relationships between length and weight of the fish. The mean value (±sd) of relative condition factor was found to be 0.95±0.12. The exponential value 'b' was found to be 2.96 and the coefficient of correlation 'r' was 0.965, which showed strong and highly correlated relationships between length and weight of the fish.

Estimation of RNA/DNA ratio in two north-Indian natural populations of mahseer (Tor tor) and its relationship with growth and hydrobiology

Samples of Tor tor were collected from Bari Reservoir of Udaipur and Narmada River at Hoshangabad (India), in the months of July and November 2005, respectively. Twenty-five samples were collected from each location. Bari Reservoir samples ranged from 17.0 to 24.5 cm in total length and from 75 to 155 g in weight, while Narmada samples ranged from 20.0 to 42.0 cm in length and 90 to 425 g in weight. The nucleic acid content in body muscle of Tor tor and the RNA/DNA ratio were estimated. The age of fishes was estimated by the scale study method and specimens were classified into four age groups. RNA/DNA ratio showed significant linear increase with increase in weight and age till the age of three years after which, the growth rate reduced. The 1-2 year group was the only one common between the two water bodies and a comparison of RNA/DNA ratios showed higher growth rate in Bari Reservoir. The gross primary productivity was also higher in Bari Reservoir being 551 mg cmˉ³ dˉ¹ compared to 404 mg cmˉ³ dˉ¹ observed for Narmada River. The condition factor (K) was found to be higher (1.21) in the fish from the Bari Reservoir compared to those of Narmada River (1.14). The growth rate was higher in females compared to males in >100 g specimens.

On the optimum mesh size for the capture of Barbus tor (Hamilton)

Results of mesh selectivity experiments on B. tor are presented in this paper. Selectivity curve on the basis of maximum girth of fish in relation to perimeter of mesh was worked out. The optimum girth/mesh perimeter ratio was found to be 1.31. A linear regression of G+0.445L=12.8 was fitted for conversion of length to girth.

Development of cell culture from caudal fin and heart of Tor tor (Hamilton-Buchanan)

Tor mahseer (Tor tor), possess high commercial and recreational value as they are potential game as well as food fish of India. Two cell culture systems were developed from fin and heart of T. tor (Hamilton-Buchanan). The explants excised aseptically from fingerling of T. tor were cultured in Leibovitz-15 (L-15) medium with 20% fetal bovine serum (FBS). Radiation of cells started after 72 hours and 48 hours of explant attachment from caudal fin and heart respectively. Confluent monolayer of cells with heterogeneous morphology around fin explants was observed after 7-10 days, where as a homogenous confluent layer of fibroblastic cells from heart explant was observed after 12-13 days. The establishment of cell culture systems from different organs and tissues of commercial important species would facilitates in vitro research.

A new species of the genus Tor from Yunnan, China (Teleostei : Cyprinidae)

A new species of the subfamily Barbinae, Tor yingjiangensis, is recognized from Yunnan province, China. It can be distinguished from other Tor species by the following combination of characters: last simple dorsal-fin ray osseous and non-serrated; no forward directed predorsal procumbent spine; head length considerably longer than body depth; no tubercles on the snout or sides of the face; 18-20 gill rakers on the outside of first gill arch; 24-26 lateral line scales; median lobe of lower lip short, its posterior margin truncate, not extending to the vertical across the inner corners of the mouth; and the condition of the lower lip consistent in individuals of different sizes. The new species has been misidentified previously as Tor putitora (Hamilton, F. 1822. An account of the fishes found in the River Ganges and its Branches. Edinburgh & London. 405 pp), which occurs in the Ganges and Indus River basins. The new species can easily be distinguished from T. putitora by having 3-3.5 (vs. 2.5) scales from lateral line to pelvic-fin origin, shorter caudal peduncle length (13.0% vs. 17.2% of standard length), lesser body depth (26.4% vs. 24.0% of standard length) and longer caudal peduncle depth (12.0% vs. 10.9% of standard length), no longitudinal stripe present along side of body, and eyes visible in ventral view of head.

Cloning and sequence analysis of Sox genes in a tetraploid cyprinid fish, Tor douronensis

A PCR survey for Sox genes in a young tetraploid fish Tor douronensis (Teleostei: Cyprinidae) was performed to access the evolutionary fates of important functional genes after genome duplication caused by polyploidization event. Totally 13 Sox genes were obtained in Tor douronensis, which represent SoxB, SoxC and SoxE groups. Phylogenetic analysis of Sox genes in Tor douronensis provided evidence for fish-specific genome duplication, and suggested that Sox19 might be a teleost specific Sox gene member. Sequence analysis revealed most of the nucleotide substitutions between duplicated copies of Sox genes caused by tetraploidization event or their orthologues in other species are silent substitutions. It would appear that the sequences are under purifying selective pressure, strongly suggesting that they represent functional genes and supporting selection against all null allele at either of two duplicated loci of Sox4a, Sox9a and Sox9b. Surprising variations of the intron length and similarities of two duplicated copies of Sox9a and Sox9b, suggest that Tor douronensis might be an allotetraploidy.