Efeito de um quelante de cálcio, um detergente e da lecitina de soja sobre a qualidade do sêmen caprino congelado-descongelado

The aim of this paper was verifying the effect of the Equex STM Paste and EDTA addition to a Tris-egg yolk extender, on the postthaw goat sperm viability. Nine semen samples of two adult goats were collected by artificial vagina and cryopreserved. It was also objective of this study, to evaluate the utilization of a soybean lecithin based commercial extender (Bioexcell® - IMV, L'Aigle, French) for the goat semen freezing. They were formed five experimental groups: TRIS; TRIS+EDTA; TRIS+EQUEX; TRIS+EDTA+EQUEX e Bioexcell. After evaluation, the semen was diluted in the five extenders and packed in 0.25mL straws with 100 million of motile spermatozoa. The samples were cooled at 0,46°C/min to 5°C, submitted at 75min of equilibration time and frozen in liquid nitrogen vapour. The thawing was accomplished in 37°C water bath for 50s. There were no differences (P>0,05) on the means of post-thaw total and progressive sperm motility among the groups TRIS, TRIS+EQUEX and TRIS+EQUEX+EDTA. The Bioexcell group obtained the least (P<0,05) percentage of post-thawing total and progressive sperm motility. After the thermotolerance test, it was observed the greatest (P<0,05) rates of total and progressive sperm motility in the Equex STM groups (TRIS+EQUEX and TRIS+EQUEX+EDTA). Thus, it can be affirmed that the Equex addition promotes better maintenance rates in the pos-thaw sperm viability, when compared with the extenders that did not contain it.

Toxoplasmose experimental em caprinos machos, com ênfaser no sitema reprodutor

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeito da adição de Trolox® e catalase ao meio glicina-gema-leite sobre o sêmen caprino refrigerado por 24 ou 48 horas em sistema Equitainer®

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Evaluation of plasma membrane integrity of frozen-thawed goat spermatozoa with or without seminal plasma

The aim of the present work was to evaluate plasma membrane integrity, motility, vigor and morphology of fresh and frozen goat spermatozoa with or without seminal plasma. Semen samples were diluted in Tris solution, before and after thawing, with a combination of carboxifluorescein diacetate and propidium iodide. The results showed differences (P < 0.01) for motility and minor defects in the presence or absence of seminal plasma, for both fresh and frozen samples. Periods of collection had a significant effect on motility, probably due to changes in the photoperiod. Plasma membrane integrity was significantly reduced by the freezing process, whether seminal plasma was present or absent. In conclusion, removal of seminal plasma decreased motility and vigor rates in frozen samples. The photoperiod probably decreased the testosterone level, contributing negatively to the high percentage of sperm abnormalities, mainly damaged membranes. The use of fluorescent probes allowed a better estimation of the percentage of functional cells, instead of only estimating the percentage of motile cells or morphology defects. © 2001 Elsevier Science B.V. All rights reserved.

Ureaplasma parvum and ureaplasma urealyticum detected in semen after washing prior to assisted reproductive technology procedures

Objective: This study investigated: (i) the prevalence of ureaplasmas in semen and washed semen and (ii) the effect of ureaplasmas on semen andrology parameters. Design: Prospective study. Setting: IVF unit -private hospital, Brisbane, Australia. Patient(s): Three hundred and forty three men participating in an assisted reproductive technology (ART) treatment cycle. Intervention(s): Semen and washed semen tested by culture, PCR assays and indirect immunofluorescent antibody assays. Statistical differences were determined by a t-test, Wilcoxon or Pearson’s Chi- square test where appropriate. Main Outcome Measure(s): The prevalence of ureaplasmas in semen and washed semen and the effect of these microorganisms on semen andrology parameters. Result(s): Ureaplasmas were detected in 73/343 (22%) semen samples and 29/343 (8.5%) washed semen samples. Ureaplasmas adherent to the surface of spermatozoa were demonstrated by indirect immunofluorescent antibody testing. U. parvum serovar 6 (36.6%) and U. urealyticum (30%) were the most prevalent isolates in washed semen. A comparison of the semen andrology parameters of washed semen ureaplasma positive and negative groups demonstrated a lower proportion of non-motile sperm in the washed semen ureaplasma positive group. Conclusion(s): Ureaplasmas are not always removed from semen by a standard ART washing procedure and can remain adherent to the surface of spermatozoa.

Ghrelin O-acyltransferase (GOAT) is expressed in prostate cancer tissues and cell lines and expression is differentially regulated in vitro by ghrelin

Background Ghrelin is a 28 amino acid peptide hormone that is expressed in the stomach and a range of peripheral tissues, where it frequently acts as an autocrine/paracrine growth factor. Ghrelin is modified by a unique acylation required for it to activate its cognate receptor, the growth hormone secretagogue receptor (GHSR), which mediates many of the actions of ghrelin. Recently, the enzyme responsible for adding the fatty acid residue (octanoyl/acyl group) to the third amino acid of ghrelin, GOAT (ghrelin O-acyltransferase), was identified. Methods We used cell culture, quantitative real-time reverse transcription (RT)-PCR and immunohistochemistry to demonstrate the expression of GOAT in prostate cancer cell lines and tissues from patients. Real-time RT-PCR was used to demonstrate the expression of prohormone convertase (PC)1/3, PC2 and furin in prostate cancer cell lines. Prostate-derived cell lines were treated with ghrelin and desacyl ghrelin and the effect on GOAT expression was measured using quantitative RT-PCR. Results We have demonstrated that GOAT mRNA and protein are expressed in the normal prostate and human prostate cancer tissue samples. The RWPE-1 and RWPE-2 normal prostate-derived cell lines and the LNCaP, DU145, and PC3 prostate cancer cell lines express GOAT and at least one other enzyme that is necessary to produce mature, acylated ghrelin from proghrelin (PC1/3, PC2 or furin). Finally, ghrelin, but not desacyl ghrelin (unacylated ghrelin), can directly regulate the expression of GOAT in the RWPE-1 normal prostate derived cell line and the PC3 prostate cancer cell line. Ghrelin treatment (100nM) for 6 hours significantly decreased GOAT mRNA expression two-fold (P < 0.05) in the PC3 prostate cancer cell line, however, ghrelin did not regulate GOAT expression in the DU145 and LNCaP prostate cancer cell lines. Conclusions This study demonstrates that GOAT is expressed in prostate cancer specimens and cell lines. Ghrelin regulates GOAT expression, however, this is likely to be cell-type specific. The expression of GOAT in prostate cancer supports the hypothesis that the ghrelin axis has autocrine/paracrine roles. We propose that the RWPE-1 prostate cell line and the PC3 prostate cancer cell line may be useful for investigating GOAT regulation and function.

Isolation of bovine herpesvirus type 5 from the semen of a healthy bull in Australia.

Artificial insemination is widely used in the cattle industry and a major challenge is to ensure that semen is free of infectious agents. A healthy donor bull was tested for freedom from infectious agents. A bovine herpesvirus was isolated in testis cells and identified as bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) by polymerase chain reaction and by direct amplicon sequencing. The amplicon sequence shared 100% similarity with the published sequence of BoHV-5. This is the first report in Australia of BoHV-5 in semen. The implications of this finding are discussed.

Characterization of vitamin A transport system from goat plasma

Retinol-binding protein and its complex with prealbumin were isolated from goat serum by chromatography on DEAE-Sephadex A-50, gel filtration and immuno-affinity chromatography on antigoat-serum albumin-Sepharose 4B. The homogeneous prealbumin-retinol-binding protein complex had a molecular weight of 75 000. Both on electrophoresis and in the presence of 2 M urea, the complex dissociated into retinol-binding protein and prealbumin. The molecular weight, electrophoretic behaviour, ultraviolet and fluorescence spectra of goat retinol-binding protein were similar to those isolated from other sources. On sodium dodecyl sulphate gel electrophoresis, goat prealbumin (molecular weight ≈ 55 000) exhibited two bands corresponding to molecular weights 26 000 and 13 000. This suggests that either goat prealbumin consists of two non-identical sub-units or perhaps complete dissociation might not have occurred. Goat prealbumin was able to bind Image -thyroxine and retinol-binding protein.

Purification of goat serum retinol-binding protein and preparation of its antibodies

The method for the purification of goat serum retinol-binding protein consists of DEAE-cellulose chromatography of the serum followed by preparative polyacrylamide disc gel electrophoresis. After electrophoresis, the retinol-binding protein containing zone is identified by the specific fluorescence of retinol. For raising the antibodies, the portion of the gel containing retinol binding protein is homogenized and injected intradermally and intramuscularly to rabbits. The availability of this simple method for the isolation of retinol-binding protein and production of its antibodies enables the development of a radioimmunoassay for this protein.

Comparación de índices productivos y reproductivos de monta natural e inseminación artificial con semen congelado en cerdos

El presente trabajo de tesis se realizó en la granja experimental porcina MAGFOR-Misión China de la república de Taiwán, ubicada en Cofradía. El estudio consistió en la evaluación de los parámetros reproductivos en grupos de cerdas obtenidos por inseminación artificial y grupos obtenidos a través de la monta natural, también se aborda el tema de la consanguinidad y sus consecuencias como un factor negativo en la fijación de caracteres indeseables, esto sucede en las poblaciones en las que existe una alta homocigosis debido al origen común del material genético (padres emparentados). Las variables evaluadas en el presente trabajo fueron: tamaño de la camada al nacimiento, peso promedio de los lechones al nacimiento, peso promedio de los lechones al destete e intervalo parto parto. para el análisis estadístico se elaboraron tablas de contingencias por cada una de las variables con base en los promedios. Para la variable tamaño de la camada al nacimiento se obtuvo para el tratamiento inseminación artificial un promedio de 9.16 lechones y para la monta natural un promedio de 9.89 lechones al contrastar las medias de los dos tratamientos se obtuvo un valor de t de 0.88 que comparado con el valor tabulado al 5% resulto no significativo al observar el comportamiento de las diferentes razas ,la yorkshire obtuvo los mayores promedios en inseminación el caso especifico de esta habían muy pocos ejemplares 6 . Se trabajo en condiciones normales de producción lo cual pudo influir en estos resultados debido al tamaiio de la muestra en esta raza. Los resultados para la variable peso promedio de los lechones al nacimiento, arrojaron un promedio de 1.76 Kg. para las camadas obtenidas por inseminación artificial y 1.67kg para las obtenidas por el método de monta natural en las observaciones de los promedios por razas, se obtuvo el mayor peso a favor de la raza Landrace con 1.99 Kg. seguido de la raza duroc con 1.85 Kg. en el tratamiento de inseminación artificial, y para la monta natural el menor peso lo obtuvo la raza duroc con 1.44 Kg. y elmayor peso fue también la raza Landrace. la raza Yorkshire mostró un comportamiento similar tanto en inseminacion artificial, como en monta natural. Para la variable peso promedio de los lechones al destete, se obtuvo un peso promedio de 7.39 Kg. para los lechones obtenidos por el método de inseminacion artificial y un peso promedio de 6.71 Kg. en el caso de lechones obtenidos por monta natural al evaluar las razas, la raza Landrace obtuvo el mayor peso al destete con 8.01 Kg. como era de esperar al obtener los mayores promedios en peso al nacimiento esto fue para las camadas obtenidas por inseminacion artificial. en el caso. de los lechones obtenidos mediante la monta natural el mayor peso correspondió a la raza Hampshire pudiendo haber influido el numero de lechones, ya que esta fue la que presento el menor numero la raza Yorkshire tuvo en este caso un comportamiento similar en los dos tratamientos. Para la variable intervalo parto-parto, en el caso de las cerdas servidas por el método de inseminacion artificial presentaron un IPP de 5.52 meses o sea 167 días y las cerdas servidas por monta natural obtuvieron un IPP de5.01 meses o 152 días. En la prueba de hipótesis tanto como el contraste de varianza, los resultados fueron significativos y una diferencia de 15 días vacíos en una hembra eleva los costos de producción de una manera considerable por esta razón un IPP como el de la inseminación artificial solo se justifica en la granja experimental porcina en un numero especifico de cerdas elite y como apoyo al mejoramiento genético del hato porcino de esta así como del hato nacional.

Establecimiento de técnica de extracción de semen en gallos criollos e inseminación artificial en gallinas criollas en Nejapa - Managua

La inseminación artificial es una técnica que fue desarrollada en la década de los años treinta utilizando el método descrito por Buno\VS y Quinn (1937), consistía en practicarle masajes abdominales y en la cloaca tanto al ave macho como a la hembra Este trabajo de investigación que tiene por título: Establecimiento de técnicas de extracción de semen en gallos criollos e inseminación artificial en gallinas criollas, fue investigado con los tines de realizar la técnica inseminación artificial en gallinas criollas que no se utiliza en nuestro país, y también comprobar que esta tiene resultado positivo. En la investigación se trabajo con 10 gallinas y 2 gallos en donde se divide dos tratamientos: 1er tratamiento monta natural que se utilizaron 5 gallinas y un gallo, 2do tratamiento Inseminación artificial que se utilizaron 5 gallinas y un gallo Los cuales fueron seleccionados con Jónne parámetros establecidos En el tratamiento en la monta natural las gallinas estaban en manejo tradicional y la alimenticio ad-libitum y copulacion natural de gallo. Mientras que en 2do tratamiento para el gallo de la inseminación se le realizo un adiestramiento durante 6 meses para lograr la obtención de semen puro posteriormente inseminar a las gallinas destinadas para el 2do tratamiento. En los resultados de la variable de incubación de cada tratamiento se valoró la diferencia de los tratamiento empleados, mostrando que en el tratamiento 1 por la monta natural (T1 M.N) fue de margen inferior de 75%, donde para el tratamiento 2 de inseminación artificial (T2 LA) un margen de superioridad reflejado en 83% Se encontró un Chi­ cuadrado de 1.7562 no significativo al5% con 1 grado de libertad,-- (filas-uno)*(columnas-1) -­ entendiéndose que las diferencias observadas en el porcentaje de huevos nacidos de cada grupo de tratamiento, así como el porcentaje de huevos no nacidos de cada grupo de tratamiento están en el rango posible de diferencias atribuibles a la casualidad propias de unidades experimentales biológicas empleando un nivel de significación del 5 % También se rellejo el porcentaje de huevos incubables fue para(T1 M.N) 35% y ("12 LA) 31%, para mortalidad embrionaria se determino un 32%(T1 M.N)y el 20% para elpara(T2I.A). En elcomportamiento reproductivo se constato que para (T1 M.N) un margen de 28- 15 huevos y para (T2 LA) un margen de 24- 13 huevos. Concluyendo que la técnica de inseminación attiticial se puede realizar, y puede ser beneficiosa, pero a niveles industriales o en aves de razas debido a que los costos son significativamente costosos no siendo viable para los pequeños productores de gallinas de patio