Saprophytic microorganisms with potential for biological control of Botrytis cinerea on Geraldton waxflower flowers

Saprophytic bacteria, yeasts and filamentous fungi were isolated from Geraldton waxflower flowers and screened to identify potential antagonism towards Botrytis cinerea. Isolates from other sources (e.g. avocado) were also tested. Isolates were initially screened in vitro for inhibition of B. cinerea conidial germination, germ tube elongation and mycelial growth. The most antagonistic bacteria, yeasts and fungi were selected for further testing on detached waxflower flowers. Conidia of the pathogen were mixed with conidia or cells of the selected antagonists, co-inoculated onto waxflower flowers, and the flowers were sealed in glass jars and incubated at 20 degreesC. The number of days required for the pathogen to cause flower abscission was determined. The most antagonistic bacterial isolate, Pseudomonas sp. 677, significantly reduced conidial germination and retarded germ tube elongation of B. cinerea. None of the yeast or fungal isolates tested was found to significantly reduce conidial germination or retard germ tube elongation, but several significantly inhibited growth of B. cinerea. Fusarium sp., Epicoccum sp. and Trichoderma spp. were the most antagonistic of these isolates. Of the isolates tested on waxflower, Pseudomonas sp. 677 was highly antagonistic towards B. cinerea and delayed waxflower abscission by about 3 days. Trichoderma harzianum also significantly delayed flower abscission. However, as with most of the fungal antagonists used, inoculation of waxflower flowers with this isolate resulted in unsightly mycelial growth.

Effects of UV-B radiation on the antagonistic ability of Clonostachys rosea to Botrytis cinerea on strawberry leaf disc

Human activities are altering the concentrations of ozone in the troposphere and hence in the incidence of ultraviolet-B (UV-B) on Earth’s surface. Although representing only five percent of UV-B radiation striking the Earth's surface, this radiation has the potential to cause effects on biologically active molecules. Sensitivity to UV-B radiation is one of the limitations of biological control of plant pathogens in the field. The objectives of this work were to evaluate the effects of UV-B on several isolates of Clonostachys rosea, and the ability of an isolate of C. rosea, previously selected for its tolerant to UV-B radiation, to control Botrytis cinerea on strawberry leaves in controlled conditions (strawberry leaf discs). The germination of C. rosea conidia was inversely proportional to the irradiance. The most tolerant strain (LQC62) had relative germination of about 60% after irradiation of 4.2kJ/m2, and this strain was selected to be used in the subsequent studies. The data showed that even with exposure to UV-B radiation, C. rosea LQC62 controlled the pathogen. Conidial concentrations of strain LQC62 above 105 conidia/ml showed higher tolerance to UV-B radiation and increased ability to control more than 75% of the B. cinerea even with exposure to radiation. According to our results, in addition to showing less growth under UV-B, conidia of C. rosea had lower antagonistic ability. Further studies are needed to observe the tolerance of B. cinerea conidia to UV-B radiation and thereby prove that an environment with increased UV-B radiation may be favoring the pathogen due to a lower ability of C. rosea to control the pathogen in conditions of increased UV-B.

Untersuchungen mit Bodenpilzen aus der Rebstock-Rhizosphäre unterschiedlich bewirtschafteter Rebanlagen des Rheingaus unter besonderer Berücksichtigung ihrer Pathogenität

Ziel der Untersuchungen war, Pilze aus geschädigtem und ungeschädigtem Wurzelmaterial konventionell und ökologisch bewirtschafteter Weinbergsböden zu isolieren und diese auf ihre Durchsetzungsfähigkeit gegenüber den anderen Arten bzw. deren Pilzmetabolitsuspensionen unter unterschiedlichen Nahrungsbedingungen zu prüfen und eine eventuelle substratabhängige Verhaltensänderung bei den Spezies in Interaktion festzustellen. Zudem wurde in weiteren In-vitro- Versuchen das pathogene Potenzial der gefundenen Arten gegenüber Vitis spp. getestet. Hintergrund dieser Untersuchungen war die Hypothese, dass Absterbeerscheinungen in Rebanlagen nicht durch die Reblaus per se verursacht werden, sondern dass ein Zusammenhang zwischen der Bewirtschaftungsmethode und dem Schadbild in reblausbefallenen Rebanlagen besteht und dessen Entstehung auf pathogenkonduktive und –suppressive Eigenschaften des Bodens zurückgeführt werden kann. Aus rund 2400 Wurzelproben konnten insgesamt 49 Pilzarten isoliert und bestimmt und mehr als die Hälfte davon in Wurzeln beider Versuchsflächen nachgewiesen werden. Ein Großteil der Pilze wurde sowohl in geschädigten als auch in ungeschädigten Wurzelgeweben identifiziert. Darunter waren Arten, die in der Literatur als Parasiten und Saprobier beschrieben werden, aber auch Arten, die eine andere Lebensweise pflegen oder deren Lebensweise nicht bekannt ist. Mit Hilfe von Interaktionsversuchen auf unterschiedlichen Nährmedien (einem Voll- und einem Mangelmedium) konnte bei den untersuchten Arten teilweise starke substratabhängige Verhaltensänderung in Interaktion mit bestimmten Pilzkolonien festgestellt und auf die Verfügbarkeit von organischem Kohlenstoff zurückgeführt werden. Starke Konkurrenz um organischen Kohlenstoff und dadurch entstehende fungistatische und antibiotische Effekte können in diesem Zusammenhang pathogenkonduktive bzw. pathogensuppressive Bodeneigenschaften fördern oder hemmen. Weiterhin konnte gezeigt werden, dass alle 15 in vitro an Vitis spp. inokulierten Pilze (Absidia glauca, Acremonium kiliense, Aspergillus ustus, Cylindrocarpon magnusianum, Cylindrocarpon sp., Fusarium culmorum, F. detonianum, F. oxysporum, F. sacchari, F. semitectum, Gliocladium roseum, Leptosphaeria coniothyrium, Penicillium expansum, Trichoderma harzianum, T. pseudokoningii), unter denen sich auch als Saprobier bekannte Arten befanden (P. expansum, T. harzianum), selbst bei Verfügbarkeit organischer Kohlenstoffverbindungen im Substrat, gegenüber Vitis spp. ein fakultativ pathogenes Potenzial besitzen. Diese aus In-vitro-Interaktionsversuchen gewonnenen Erkenntnisse geben Hinweise darauf, welchen Einfluss die Bewirtschaftung, insbesondere die Versorgung der Weinbergsböden mit organischem Kohlenstoff, auf fakultativ pathogene Sekundärparasiten in Form von Bodenpilzen und folglich auf die Entwicklung von Schadbildern an durch die Reblaus prädispositionierten Rebpflanzen in vivo haben kann.

"Roseum memoriale divinorum eloquiorum, auct. Petro de Rosentheim.

Ex-libris du XVe s. "Iste liber est beate Marie de Amberto. 348" et ajout du XVIIIe s. "nunc S. Germani a Pratis" (1); — ex-libris du XVIe s. "Hic liber me jurae posside [sic] qui vocatus sum Edmondus Theveneon" suivi d'une formule en grec "Tevenon bonus puer" (f. de garde)

Purification, partial characterization and preliminary X-ray diffraction analysis of a mannose-specific lectin from Cymbosema roseum seeds

A lectin from Cymbosema roseum seeds (CRL) was purified, characterized and crystallized. The best crystals grew in a month and were obtained by the vapour-diffusion method using a precipitant solution consisting of 0.1 M Tris-HCl pH 7.8, 8% (w/v) PEG 3350 and 0.2 M proline at a constant temperature of 293 K. A data set was collected to 1.77 angstrom resolution at a synchrotron-radiation source. CRL crystals are orthorhombic, belonging to space group P2(1)2(1)2(1). Crystallographic refinement and full amino-acid sequence determination are in progress.

Purification, Characterization, and Preliminary X-Ray Diffraction Analysis of a Lactose-Specific Lectin from Cymbosema roseum Seeds

The unique carbohydrate-binding property of lectins makes them invaluable tools in biomedical research. Here, we report the purification, partial primary structure, carbohydrate affinity characterization, crystallization, and preliminary X-ray diffraction analysis of a lactose-specific lectin from Cymbosema roseum seeds (CRLII). Isolation and purification of CRLII was performed by a single step using a Sepharose-4B-lactose affinity chromatography column. The carbohydrate affinity characterization was carried using assays for hemagglutination activity and inhibition. CRLII showed hemagglutinating activity toward rabbit erythrocytes. O-glycoproteins from mucine mucopolysaccharides showed the most potent inhibition capacity at a minimum concentration of 1.2 A mu g mL(-1). Protein sequencing by mass spectrometry was obtained by the digestion of CRLII with trypsin, Glu-C, and AspN. CRLII partial protein sequence exhibits 46% similarity with the ConA-like alpha chain precursor. Suitable protein crystals were obtained with the hanging-drop vapor-diffusion method with 8% ethylene glycol, 0.1 M Tris-HCl pH 8.5, and 11% PEG 8,000. The monoclinic crystals belong to space group P2(1) with unit cell parameters a = 49.4, b = 89.6, and c = 100.8 A....

Zur Kenntniss der durch Cephalothecium roseum Corda hervorgerufenen Fruchtfäulniss

Von Konstantin Malkoff

Epilobium hirsutum X roseum (E. Schmalhausenianum M. Schulze.)

Dr. Torges

Potential for entomopathogenic fungi to control Triatoma dimidiata (Hemiptera: Reduviidae), a vector of Chagas disease in Mexico

Introduction The use of entomopathogenic fungi to control disease vectors has become relevant because traditional chemical control methods have caused damage to the environment and led to the development of resistance among vectors. Thus, this study assessed the pathogenicity of entomopathogenic fungi in Triatoma dimidiata. Methods Preparations of 108 conidia/ml of Gliocladium virens, Talaromyces flavus, Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae were applied topically on T. dimidiata nymphs and adults. Controls were treated with the 0.0001% Tween-80 vehicle. Mortality was evaluated and recorded daily for 30 days. The concentration required to kill 50% of T. dimidiata (LC50) was then calculated for the most pathogenic isolate. Results Pathogenicity in adults was similar among B. bassiana, G. virens and T. flavus (p>0.05) and differed from that in triatomine nymphs (p=0.009). The most entomopathogenic strains in adult triatomines were B. bassiana and G. virens, which both caused 100% mortality. In nymphs, the most entomopathogenic strain was B. bassiana, followed by G. virens. The native strain with the highest pathogenicity was G. virens, for which the LC50 for T. dimidiata nymphs was 1.98 x108 conidia/ml at 13 days after inoculation. Conclusions Beauveria bassiana and G. virens showed entomopathogenic potential in T. dimidiata nymphs and adults. However, the native G. virens strain presents a higher probability of success in the field, and G. virens should thus be considered a potential candidate for the biological control of triatomine Chagas disease vectors.

La biodiversidad microbiana del suelo y su rol en el manejo de enfermedades causadas por hongos de suelo en soja. Soil microbial diversity and its key role in the management of soybean diseases caused by fungi.

Las poblaciones microbianas juegan un rol fundamental en la estabilidad de los sistemas agrícolas e indican los niveles de salud de un suelo, tanto que pueden ser utilizadas como indicadores de sustentabilidad de un agroecosistema. Los microorganismos reflejan el efecto que tienen las prácticas agrícolas sobre el suelo a través de modificaciones en la abundancia (biodiversidad estructural) y actividades de sus poblaciones (como control biológico de los patógenos, entre otras). Al cuantificarse la biodiversidad microbiana nativa se puede conocer la riqueza de un agroecosistema y utilizarla para el manejo sustentable de hongos patógenos. En este trabajo se evaluará el efecto de la rotación de cultivo (soja-maíz y soja en monocultivo) y los sistemas de labranza (siembra directa y labranzas reducida) sobre la biodiversidad microbiana. Se cuantificarán a partir de suelo: poblaciones de hongos y bacterias totales; agentes potenciales de biocontrol de como Trichoderma spp., Gliocladium spp. y micorrizas vesículo arbusculares (mediante la cuantificación de glomalina), biomasa y respiracion microbiana, y la biodiversidad de comunidades de microorganismos que habitan en el suelo mediante el análisis de perfiles de ácidos grasos (PLFA). Al final del ciclo de cultivo de soja se cuantificará la incidencia de enfermedades causadas por hongos de suelo. Dada la gran abundancia y diversidad de los microorganismos del suelo, las metodologías que se emplearán permitirán obtener información global de la riqueza microbiana de un agro-ecosistema. Se relacionará la biodiversidad microbiana con la incidencia de enfermedades por hongos de suelo, en respuesta a diferentes prácticas de manejo. Esto permitirá aprender a combinar las tecnologías para mejorar los beneficios de la produccion y preservar el agroecosistema en el marco de una agricultura sustentable, y no de una agricultura sostenida por insumos.

Manejo da queima das flores e da podridão-parda do pessegueiro cultivado em sistema orgânico

O presente trabalho objetivou avaliar o uso de fosfitos, iodo, calda sulfocálcica e Trichothecium roseum no manejo da Queima das flores e da Podridão-Parda do pessegueiro, doenças causadas por Monilinia fructicola, nas cultivares Granada e Chimarrita, em cultivo orgânico. Os tratamentos foram: 1) calda sulfocálcica + iodo (aplicada na floração e na pré-colheita); 2) alternância entre calda sulfocálcica + iodo, fosfito de CaB e T. roseum (aplicados na floração) e Fosfito de K e T. roseum (aplicados na pré-colheita); 3) T. roseum (aplicado na floração e na pré-colheita); 4) testemunha. Os tratamentos foram paralisados uma semana antes do início da colheita. A doença foi quantificada pela incidência da doença nas fases de floração, de frutos verdes, de colheita e de pós-colheita. A incidência da doença na testemunha, na fase de floração, variou de 22 a 72%; nos frutos verdes, de 19 a 30%, e na colheita, de 18 a 61%. Todos os tratamentos reduziram a doença nas fases de floração e de frutos verdes, em ambas as cultivares, na ordem de 49 a 73% na floração e de 57 a 84% na fase de frutos verdes em relação à testemunha. Resultados significativos foram obtidos também em pós-colheita, na cultivar Granada, com reduções da doença em 54% no tratamento 1, e 30% no tratamento 2. Nenhum dos tratamentos foi eficiente na redução da incidência da doença na colheita.

Incidência de fungos em pós-colheita de banana 'Prata anã'(Musa AAB)

Este trabalho teve por objetivo determinar a ocorrência e a freqüência de fungos em banana 'Prata anã' e elucidar o agente causal das podridões em pós-colheita de frutos provenientes do norte de Minas Gerais. Dois métodos de isolamento foram adotados: diluição em placas, a partir da lavagem de frutos verdes, e direto de frutos maduros. Os fungos Colletotrichum musae, Trichoderma harzianum, Fusarium equisetii, Penicillium sp. Aspergillus parasiticus, Trichothecium roseum, Colletotrichum acutatum, Alternaria sp., Cladosporium musae e Curvularia lunata foram os mais freqüentemente associados aos frutos. A patogenicidade desses fungos foi testada pela substituição de discos da casca de frutos verdes por discos de micélio. Colletotrichum musae apresentou área média lesionada em torno do ponto de inoculação igual a 5,8 cm², enquanto para os demais fungos testados não passou de 1,50 cm². Os resultados mostraram que C. musae é o agente primário das podridões dos frutos examinados com 100 % de incidência e os demais fungos limitaram-se a necrosar os ferimentos em torno do ponto de inoculação. O modo de infecção latente, causada por C. musae, parece favorecer, primeiramente, a colonização interna dos tecidos e, posteriormente, a ação dos fungos oportunistas, que aceleram as podridões nos frutos e na coroa.

Fungos antagonistas e efeito de produtos químicos no controle da podridão parda em pomar de pessegueiro

Para verificar a eficiência de controladores biológicos e produtos químicos para controle da podridão parda, foi conduzido um experimento a campo na safra de 2002 no município da Lapa-PR, com a cultivar BR-1. O objetivo do experimento foi fazer seleção de tratamentos com controle biológico comparando-os com químicos em sistemas de manejo utilizados na região. Como tratamentos foram utilizados quatro antagonistas previamente selecionados em trabalho de pós-colheita, isolados F1, F2, F4 (Trichothecium roseum), isolado F9 (Penicillium sp) (em 16 aplicações), sistema de Produção Integrada de Pêssegos (PIP) (nove aplicações), fosfitos de Ca e de K + captan (11 aplicações), alternância de fungicidas (oito aplicações), tratamento convencional da propriedade (PC) (nove aplicações), pulverizados desde a floração até a colheita, sendo a testemunha sem pulverização. Para avaliação, foi contado o número de frutos por ramo marcado após o raleio e no início da colheita. Para os frutos colhidos nos ramos foi determinada a incidência da doença na colheita e aos 3 e 5 dias em pós-colheita. O PIP, fosfito+captan, e isolado F4, não diferirem estatisticamente do padrão PC, e reduziram 95,5; 63,6 e 68,2%, respectivamente a doença em relação à testemunha que apresentou 44% dos frutos com podridão parda aos cinco dias. O tratamento com a alternância de fungicidas foi o melhor, e não foram observados frutos com a doença, entretanto apresentou uma redução do número de frutos entre o raleio e a colheita de 76,5% contra 50% em média dos demais tratamentos indicando um provável efeito fitotóxico.

Viabilidade de escleródios de Sclerotinia sclerotiorum e incidência de fungos antagonistas em solo de Cerrado

A viabilidade de escleródios de Sclerotinia sclerotiorum foi avaliada durante oito meses em três solos de Cerrado cultivados. Escleródios produzidos "in vitro", mantidos em invólucros de náilon perfurados, foram enterrados a 5 cm de profundidade, em solos previamente fumigados ou não fumigados com brometo de metila. Após 10 dias de incubação, os escleródios foram examinados quanto à viabilidade e a presença de fungos antagônicos. A viabilidade foi estimada através do número de escleródios germinados 7 dias após plaqueamento em meio semi seletivo Neon-S. A viabilidade dos escleródios variou com o solo de Cerrado. Escleródios incubados em solos não fumigados com brometo de metila apresentaram menor viabilidade e maior presença de fungos antagônicos, indicando que estes solos contêm elementos supressivos de origem biológica. A viabilidade dos escleródios foi relacionada negativamente com a população de alguns microorganismos de solo. Nos tratamentos de maior incidência de Trichoderma spp. observou-se menor viabilidade de escleródios e solos fumigados suprimiram fortemente a ocorrência deste antagonista.