Use of PCR to estimate the prevalence of Equus caballus papillomavirus in aural plaques in horses

Aural plaques occur on the skin of the medial surface of the pinnae of horses. In this study the presence of Equus caballus papillomavirus (EcPV)-3 and -4 DNA was assessed in 45 such plaques using a 'touchdown' PCR. Papillomaviruses (PVs) were detected in 62.3% (28/45) of samples: EcPV-3 and -4 DNA in 8.89% (4/45) and 37.78% (17/45) of samples, respectively, with 15.56% (7/45) of samples exhibiting co-infection. Viral DNA was not detected in 37.78% (17/45) of samples, suggesting the possible existence of other equine PVs. Neither EcPV-3 nor -4 were detected in negative control skin. This study is the first to evaluate the prevalence of these two viruses in equine aural plaques. © 2013 Elsevier Ltd.

Phylogenetic and structural studies of a novel equine papillomavirus identified from aural plaques

Papillomaviruses (PVs) infect a wide range of animal species and show great genetic diversity. To date, excluding equine sarcoids, only three species of PVs were identified associated with lesions in horses: Equus caballus papillomavirus 1 (EcPV1-cutaneous), EcPV2 (genital) and EcPV3 (aural plaques). In this study, we identified a novel equine PV from aural plaques, which we designated EcPV4. Cutaneous samples from horses with lesions that were microscopically diagnosed as aural plaques were subjected to DNA extraction, amplification and sequencing. Rolling circle amplification and inverse PCR with specific primers confirmed the presence of an approximately 8. kb circular genome. The full-length EcPV4 L1 major capsid protein sequence has 1488 nucleotides (495 amino acids). EcPV4 had a sequence identity of only 53.3%, 60.2% and 51.7% when compared with the published sequences for EcPV1, EcPV2 and EcPV3, respectively. A Bayesian phylogenetic analysis indicated that EcPV4 clusters with EcPV2, but not with EcPV1 and EcPV3. Using the current PV classification system that is based on the nucleotide sequence of L1, we could not define the genus of the newly identified virus. Therefore, a structural analysis of the L1 protein was carried out to aid in this classification because EcPV4 cause lesion similar to the lesion caused by EcPV3. A comparison of the superficial loops demonstrated a distinct amino acid conservation pattern between EcPV4/EcPV2 and EcPV4/EcPV3. These results demonstrate the presence of a new equine PV species and that structural studies could be useful in the classification of PVs. © 2012 Elsevier B.V.

Novel keratins identified by quantitative proteomic analysis as the major cytoskeletal proteins of equine (Equus caballus) hoof lamellar tissue

The dermo-epidermal interface that connects the equine distal phalanx to the cornified hoof wall withstands great biomechanical demands, but is also a region where structural failure often ensues as a result of laminitis. The cytoskeleton in this region maintains cell structure and facilitates intercellular adhesion, making it likely to be involved in laminitis pathogenesis, although it is poorly characterized in the equine hoof lamellae. The objective of the present study was to identify and quantify the cytoskeletal proteins present in the epidermal and dermal lamellae of the equine hoof by proteomic techniques. Protein was extracted from the mid-dorsal epidermal and dermal lamellae from the front feet of 5 Standardbred geldings and 1 Thoroughbred stallion. Mass spectrometry-based spectral counting techniques, PAGE, and immunoblotting were used to identify and quantify cytoskeletal proteins, and indirect immunofluorescence was used for cellular localization of K14 and K124 (where K refers to keratin). Proteins identified by spectral counting analysis included 3 actin microfilament proteins; 30 keratin proteins along with vimentin, desmin, peripherin, internexin, and 2 lamin intermediate filament proteins; and 6 tubulin microtubule proteins. Two novel keratins, K42 and K124, were identified as the most abundant cytoskeletal proteins (22.0 ± 3.2% and 23.3 ± 4.2% of cytoskeletal proteins, respectively) in equine hoof lamellae. Immunoreactivity to K14 was localized to the basal cell layer, and that to K124 was localized to basal and suprabasal cells in the secondary epidermal lamellae. Abundant proteins K124, K42, K14, K5, and α1-actin were identified on 1- and 2-dimensional polyacrylamide gels and aligned with the results of previous studies. Results of the present study provide the first comprehensive analysis of cytoskeletal proteins present in the equine lamellae by using mass spectrometry-based techniques for protein quantification and identification.

Avaliação da suplementação intranasal de oxigênio em burros (Equus caballus x Equus asinus) anestesiados com a associação cetamina, butorfanol e éter gliceril guaiacólico

Pós-graduação em Cirurgia Veterinária - FCAV

Infecção natural de Equus caballus por Leishmania sp - São Paulo, Brasil (Breve comunicação científica)

E assinalado, pela primeira vez, o encontro de um cavalo (Equus caballus) infeclado por Leishmania sp, no Estado de São Paulo.

Estudo morfológico e radiológico sobre a comunicação entre a articulação interfalangeana distal e a bolsa do osso navicular em eqüinos (Equus caballus, L., 1758)

Objetivou-se neste estudo verificar radiográfica e morfologicamente a existência de comunicação entre a bolsa do osso navicular (BN) e a articulação interfalangeana distal (AID), estabelecendo sua freqüência, sua forma e identificação das estruturas anatômicas envolvidas no processo. Para tanto, foram utilizados membros torácicos e pélvicos de 16 animais vivos, sendo 8 animais jovens e 8 animais adultos. Contraste iodado era injetado na BN dos membros direitos e na AID dos membros esquerdos. em seguida, realizavam-se radiografias em projeções látero-medial ou médio-lateral, dorsopalmar ou dorsoplantar, para a constatação de possível comunicação entre as estruturas em questão, que, posteriormente, seriam identificadas por meio da técnica de dissecação. Não foram observadas comunicações entre as estruturas em questão ou qualquer outra na porção distal dos membros, porém, em dois membros torácicos, constataram-se variações morfológicas nas extremidades laterais da BN, caracterizadas por projeções que se estendiam até o terço proximal da falange média, sendo mais pronunciada na face lateral que na medial.

Estudo morfológico e radiológico sobre a comunicação entre a articulação interfalangeana distal e a bolsa do osso navicular em peças anatômicas de eqüinos (Equus caballus, L. 1758)

Objetivou-se neste estudo verificar anatômica e radiograficamente a existência de comunicação entre a bolsa do osso navicular (BN) e a articulação interfalangeana distal (AID), estabelecendo sua freqüência e forma e identificando as estruturas anatômicas envolvidas no processo. Desta forma, foram utilizadas 140 peças anatômicas de membros torácicos e pélvicos de eqüinos. Com o auxílio de fluoroscópio, foi injetada uma mistura de contraste iodado, Neoprene látex e corante na BN dos membros direito e na AID dos membros esquerdos, com subseqüentes exposições radiográficas. Constatadas comunicações, identificavam-se as estruturas e os locais envolvidos, mediante técnica de dissecação. Verificou-se, em duas observações, comunicação entre a BN e a AID, após injeção de contraste iodado, látex e corante na bolsa do osso navicular, sendo um no membro torácico direito (MTD) e outro no membro pélvico direito (MPD). Comunicação entre a AID e a bainha do tendão do músculo flexor profundo do dedo (BTMFPD) ocorreu em uma peça, pertencente ao membro torácico esquerdo (MTE). Comunicação entre a BN e a BTMFPD foi observada na peça de um membro torácico direito. Variações morfológicas nas extremidades laterais da BN, constituindo projeções que se estendiam até o terço proximal da falange média, sendo mais pronunciada na face lateral do que na medial, ocorreram em cinco membros. Mediante a administração de contraste iodado, látex e corante na AID, nenhuma comunicação foi observada entre a AID e a BN.

ULTRASTRUCTURE OF THE HINNY (EQUUS-ASINUS X EQUUS-CABALLUS) SEMINIFEROUS EPITHELIUM

The gonads and the germinative cells of 3 male hinnies were studied with light and transmission electron microscopy with the aim to observe the development of germ cells and verify the morphological modifications due to the hybridization. The hinny seminiferous epithelium presented Sertoli cells and spermatogonia with normal features and anomalous spermatocytes I. The other cells from the spermatogenic sequence were not seen. Most of the alterations began to occur in the cytes I, which presented nuclear vacuolization and deposits of amorphous material between the carioteca and the nuclear lamina, forming vesicles, or exaggerated chromatin condensation, resulting in pyknosis. In the cytoplasm vacuolization was also observed, besides organelle destruction.The arrest of meiosis due to lock of chromosome homologies leads to germinative cell degeneration and, therefore, the spermatogenesis arrest. This fact causes a profound alteration in the seminiferous epithelium morphology in comparison with the parental species.

Emprego da mitomicina C como agente antifibrótico na mioplastia do reto medial do bulbo do olho de coelhos (Oryctolagus cuniculus, Linnaeus, 1758) pela cápsula renal de eqüino ( Equus caballus, 1758)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Valores hematológicos bioquímicos e exame de líquido peritoneal de eqüinos(Equus caballus, Linnaeus, 1758) durante síndrome cólica

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FMVZ