988 resultados para Drogas - Resistencia em microorganismos Teses
Resumo:
Os enterococos esto amplamente distribudos no ambiente. Nos seres humanos, compem a microbiota do trato gastrintestinal, da cavidade oral e do trato geniturinrio. Nas ltimas dcadas, esses microrganismos se tornaram importantes agentes etiolgicos de infeces hospitalares. Uma caracterstica marcante desses microrganismos a resistncia intrnseca a vrios antimicrobianos utilizados habitualmente no tratamento de infeces, alm de alguns fatores que tem sido relacionado virulncia de enterococos. Este estudo investigou a presena de enterococos em amostras de infeco e colonizao de pacientes hospitalizados, profissionais de sade, dietas hospitalares e manipuladores de alimentos. Foram analisadas 276 amostras de colonizao, de quadros de infeco, dietas orais e manipuladores de alimento. No foram recuperadas amostras dos profissionais de sade. Todas as amostras foram submetidas a testes convencionais de caracterizao do gnero e espcies. Testes de susceptibilidade aos antimicrobianos foram empregados pelo mtodo de disco difuso, alm da CIM para vancomicina e teicoplanina. A produo de biofilme e a expresso da gelatinase tambm foram avaliadas. Os genes de resistncia a gentamicina, estreptomicina e vancomicina e os genes de virulncia cylA, esp e fsr foram pesquisados pela tcnica de PCR. O polimorfismo gentico foi determinado por PFGE. A espcie E. faecalis foi a prevalente nas amostras isoladas de colonizao e infeco (42,2% e 81,9%, respectivamente). E. casseliflavus (58,9%) foi a mais freqente dentre as amostras das dietas hospitalares e E. faecium (46,7%) de manipuladores. Dentre as amostras de colonizao as maiores taxas de resistncia foram observadas para eritromicina (76,3%) e ciprofloxacina (53,9%). Dentre as amostras de infeco, >70% foram resistentes a eritromicina, ciprofloxacina e tetraciclina. Resistncia a nveis elevados de gentamcina (HLR-GE) e estreptomicina (HLR-ST) foi detectada em 24,6% e 20,4% das amostras, respectivamente, e todas foram portadoras dos respectivos genes. A maioria das amostras de colonizao (52,6%) e infeco (55,7%) foram multirresistentes. A taxa para resistncia a nveis elevados de vancomicina foi de 5,2% e todas eram portadoras do gene vanA. Em relao a formao de biofilme, 70,2% foram produtoras, com uma maior freqncia dentre as de infeco. A expresso de gelatinase foi detectada em 28,9% e 44,3% das amostras de colonizao e infeco, respectivamente. Nenhuma das amostras isoladas das dietas hospitalares e de manipuladores expressou gelatinase. Nas amostras pertencentes as espcies E. faecalis e E. faecium (n=109) 16,5%, 51,4% e 48,6% apresentaram produtos de amplificao referentes aos genes cylA, esp e fsr, respectivamente. A anlise do polimorfismo gentico revelou uma extensa diversidade dentre as amostras pertencentes as espcies E. faecalis e E. faecium, no acarretando um perfil eletrofortico prevalente. Entretanto, foi observado um perfil nico dentre as amostras de E. gallinarum resistentes a vancomicina (vanA). Este estudo mostrou que amostras de enterococos isoladas de diferentes fontes, no s de quadros infecciosos, podem representar um risco para a populao, apontando para uma maior reflexo quanto ao papel desses microrganismos nas infeces humanas, particularmente no ambiente hospitalar.
Resumo:
Os Staphylococcus coagulase-negativos (SCN) so encontrados na pele e mucosas de seres humanos e outros animais, j que algumas espcies so parte constituinte da microbiota normal destes mesmos stios, e podem constituir um reservatrio para SCN. A espcie Staphylococcus epidermidis, reconhecida como grande oportunista e agente de graves infeces nosocomiais e comunitrias, alm de associado com infeces em pacientes submetidos a implantes com dispositivos mdicos, e a espcie Staphyloccus haemolyticus a segunda espcie mais isolada de hemoculturas humanas, sendo uma das espcies que apresenta elevada resistncia aos antimicrobianos. O presente estudo teve como objetivo principal investigar a presena de SCN em fmites (estetoscpios, termmetros e esfigmomanmetros) no ambiente hospitalar, identificar as espcies S. haemolyticus e S. epidermidis e correlacionar seus perfis de resistncia aos antimicrobianos com a capacidade de produo de biofilme. A tcnica de multiplex-mPCR foi empregada na determinao das espcies e a fenotipagem foi realizada pelos testes fenotpicos convencionais. Os perfis de resistncia aos antimicrobianos foram verificados atravs do teste de disco-difuso, determinao da CIM (oxacilina e vancomicina), determinao da CBM e presena do gene mecA. A capacidade de produo de biofilme foi investigada pelos testes do gar Vermelho do Congo e ensaios de aderncia em superfcies abiticas (poliestireno e vidro) na presena e ausncia de oxacilina e vancomicina, alm da PCR para o gene icaAD. Os resultados demonstraram que pelos testes bioqumicos convencionais, a espcie mais encontrada foi S. epidermidis (43,5%). Aps a confirmao pela tcnica de PCR, 29 amostras (82%) foram identificadas como S. epidermidis, e 6 amostras (18%) foram identificadas como S. haemolyticus. Todas as amostras foram multirresistentes, oxacilina resistentes e vancomicina sensveis, sendo que apenas 5 amostras S. epidermidis (17,2%) foram tolerantes a oxacilina. A presena do gene mecA foi detectada em 71,4% das amostras. Apesar da maioria das amostras ter apresentado capacidade de produzir slime e/ou biofilme no foi observada total correlao com a presena do gene icaAD enfatizando a natureza multifatorial da produo de biofilme. As amostras aderiram melhor ao esfigmomanmetro, e tambm, neste fmites, foi encontrado a maior porcentagem de amostras positivas para a produo de slime. Para aderncia ao vidro e aderncia ao poliestireno no foi encontrada correlao com os fmites. Foram isoladas amostras S. epidermidis de todos os stios hospitalares estudados e S. haemolyticus s no foi encontrado em Enfermaria de Clnica Mdica. Em relao aos fmites, S. epidermidis foi encontrado em todos os fmites estudados, e S. haemolyticus, apenas foi encontrado em esfigmomanmetro e em outros fmites. Os fmites esto servindo como fontes de transmisso e disseminao de micro-organismos, sendo necessrio maiores estudos a respeito.
Resumo:
A ocorrncia de fentipos multirresistentes de Corynebacterium pseudodiphtheriticum e sua associao a infeces graves, com elevada mortalidade em pacientes imunocomprometidos, aliados ao escasso conhecimento da virulncia e patogenia destas infeces, motivou esta pesquisa, que teve como objetivo investigar mecanismos de virulncia e resistncia microbiana deste agente entre pacientes de um hospital universitrio brasileiro. Um total de 113 amostras de C. pseudodiphtheriticum identificadas por mtodos bioqumicos convencionais e sistema API-Coryne isoladas de pacientes de diferentes grupos etrios. Os micro-organismos eram, em sua maioria, relacionados a infeces no trato respiratrio (27,45%), urinrio (29,20%) e sitios intravenosos (18,60%) e cerca de 32,70% das amostras foram provenientes de pacientes com pelo menos uma das condies predisponentes: insuficincia renal; transplante renal, tuberculose em paciente HIV+, cncer, cirrose heptica, hemodilise e uso de cateter. As amostras testadas revelaram-se multirresistentes sendo a maioria resistente oxacilina, eritromicina e clindamicina. A adeso das cepas ao poliestireno e ao poliuretano indicou o envolvimento de hidrofobicidade da superfcie celular na fase inicial da formao de biofilmes. O crescimento subsequente conduziu formao de microcolnias, agregados bacterianos densos incorporados na matriz exopolimrica rodeada por espaos vazios, tpica de biofilmes maduros. Adicionalmente, a interao do micro-organismo com fibrinognio e fibronectina humana indica o envolvimento destes componentes sricos na formao de biofilme, sugerindo a participao de diferentes adesinas neste processo e a capacidade deste agente formar biofilme in vivo. A afinidade por esses componentes e a formao de biofilme podem contribuir para o estabelecimento e disseminao da infeco no hospedeiro. Adicionalmente, as cepas de C. pseudodiphtheriticum isoladas de pacientes com infeces localizadas (ATCC10700/Pharyngitis) e sistmicas (HHC1507/Bacteremia) exibiram um padro de aderncia agregativa-like a clulas HEp-2, caracterizado por aglomerados de bactrias com aparncia de um "empilhado de tijolos". Atravs do teste FAS e ensaios de interao na presena de inibidores de citoesqueleto, demonstramos o envolvimento da polimerizao de actina na internalizao das cepas testadas. A internalizao bacteriana e rearranjo do citoesqueleto pareceu ser parcialmente desencadeado pela ativao da tirosina-quinase. Finalmente, C. pseudodiphtheriticum foi capaz de sobreviver no ambiente intracelular e embora no tenha demonstrado capacidade de replicar intracelularmente, clulas HEp-2 foram incapazes de eliminar o patgeno completamente no ambiente extracelular no perodo de 24 horas. Todas as cepas estudadas foram capazes de induzir apoptose em clulas epiteliais 24 horas ps-infeco evidenciada pelo aumento significativo no nmero de clulas mortas e pela ocorrncia de alteraes nucleares reveladas atravs dos mtodos de colorao pelo azul Trypan, pelo DAPI e microscopia electrnica de transmisso. Alteraes morfolgicas incluindo a vacuolizao, a fragmentao nuclear e a formao de corpos apoptticos foram observadas neste perodo. A citometria de fluxo demonstrou ainda uma diminuio significativa no tamanho das clulas infectadas e a utilizao de dupla marcao (iodeto de propdio / anexina V) permitiu a deteco da ocorrncia de necrose e apoptose tardia. Em concluso, o conhecimento de tais caractersticas contribuiu para a compreenso de mecanismos envolvidos no aumento da frequncia de infeces graves com elevada mortalidade em pacientes no ambiente hospitalar, por C. pseudodiphtheriticum, um patgeno rotineiramente subestimado em pases em desenvolvimento.
Resumo:
Ps-graduao em Biologia Geral e Aplicada - IBB
Resumo:
Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
Resumo:
Ps-graduao em Medicina Veterinria - FCAV
Resumo:
Ps-graduao em Medicina Veterinria - FCAV
Resumo:
Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
Resumo:
Ps-graduao em Fisiopatologia em Clnica Mdica - FMB
Resumo:
Ps-graduao em Fisiopatologia em Clnica Mdica - FMB
Resumo:
Ps-graduao em Doenas Tropicais - FMB
Resumo:
Estudar o perfil patognico e de resistncia aos antimicrobianos em amostras de Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus warneri, Staphylococcus lugdunensis e Staphylococcus hominis. Foram estudadas 65 amostras isoladas de pacientes do Hospital das Clnicas da FMB, Botucatu, sendo 23 S. haemolyticus, 23 S. hominis, 10 S. warneri e 9 S. lugdunensis. Foram pesquisados por PCR os genes responsveis pela produo de biofilme (icaA, icaC, icaD), genes de enterotoxinas (sea, seb, sec, sed), Toxina 1 da Sndrome do Choque Txico (tst) e resistncia oxacilina (mecA). Das 65 amostras estudadas, 83% apresentaram ao menos um dos genes das toxinas pesquisadas, 87,7% um dos genes ica e 63,1% o gene mecA. O SCCmec foi tipado por PCR-Multiplex, sendo o tipo I o mais prevalente (34,1%). A heterorresistncia vancomicina foi pesquisada atravs da triagem em gar BHI com 4 g ml-1, encontrada em 36,9% das amostras, e com 6 g ml-1 de vancomicina, encontrada em 15,4%. Todas as espcies estudadas foram altamente toxignicas. A presena do SCCmec I apresentou relao com a heterorresistncia vancomicina. Ainda, S. hominis e S. haemolyticus se revelaram mais virulentos e resistentes, levando em conta os fatores de virulncia, resistncia oxacilina e heterorresistncia vancomicina. A evidncia e a necessidade de maior preocupao com as espcies S. hominis e S. haemolyticus ficou clara, o que ainda no havia sido relatado, bem como a relao entre a presena de SCCmec I e heterorresistncia vancomicina
Resumo:
Staphylococcus aureus um patgeno ubquo capaz de causar uma variedade de infeces em humanos. A resistncia desse microrganismo a antibiticos como oxacilina e meticilina um problema srio, de crescimento significativo para a teraputica antimicrobiana clnica em pacientes acometidos por infeces estafiloccicas. A resistncia meticilina em S. aureus decorrente da alterao do stio de ao dos antibiticos -lactmicos, os quais agem atravs da inibio de enzimas que catalisam a sntese da parede celular. Essas enzimas so o stio de ao das penicilinas, e por isso, passaram a ser chamadas de protenas ligadoras de penicilinas (PBPs). O gene mecA codifica a PBP2a, que substitui a funo das outras PBPs neste patgeno e confere resistncia a -lactmicos. A PBP2a exibe uma afinidade reduzida pelo anel -lactmico e permite que a bactria continue a sintetizar a parede bacteriana. Este gene faz parte de um elemento gentico mvel encontrado em isolados de MRSA, designado cassete cromossmico estafiloccico mec (SCCmec), integrado ao cromossomo de S. aureus. O objetivo do estudo foi a caracterizao molecular de 139 isolados de S.aureus provenientes de pacientes peditricos com bacteremia durante o perodo de 1991 a 2010. Mtodos moleculares foram utilizados para a determinao do perfil gentico das amostras, incluindo, identificao do tipo de SCCmec, deteco do gene codificador de leucocidina de panton valentine (PVL) e similaridade clonal em gel de eletroforese em campo pulsado (PFGE). O gene mecA foi detectado em 32 (23%) amostras e houve predomnio do SCCmec IV (68,8%) em relao ao SCCmec III (31,2%). A presena de PVL foi encontrada em 18 amostras (12,9%), todas sensveis oxacilina. O clone epidmico brasileiro, relacionado ao SCCmec tipo III, esteve presente na unidade neonatal do hospital... (Resumo completo, clicar acesso eletrnico abaixo)
Resumo:
Patients that are mechanically ventilated in ICUs are constantly exposed to different pathogens, which present multiantibiotic resistance. Among these microorganisms, is MRSA (Meticillin-Resistant Staphylococcus aureus) considered to be a therapeutic challenge due to its resistance to -lactam antibiotics. Therefore, this study proposed to identify species of Staphylococcus spp. isolated from mechanically ventilated patients in ICU, the gene mecA detection and the genes of the enterotoxins A (sea), B (seb), C (sec-1) and D (sed) in samples of S. aureus, as well as the phenotypic resistance determination to oxacillin using the disc-diffusion method with discs of oxacillin and cefoxitin. The samples collection occurred during in a period of 19 months, obtaining samples from 232 patients. A percentage of 39% (70) of Gram-positive cocci were found; which 82,8% (58) were identified as Staphylococcus spp,. among these, 75,8% (44) corresponded to S. aureus species and 47,7% were identified as MRSA. It was found resistance to both drugs in 31,8% of the S. aureus samples, 16 (36,3%) had the gene sea and 11 (25%) had the sec-1 gene. Among the coagulase-negative staphylococci obtained, the species most found was S. epidermidis, corresponding to 43% (6). The results revealed that one of the most important etiologic agents of VAP amid the Gram-positive cocci is the species S. aureus, with special attention to MRSA. The presence of enterotoxins genes in S. aureus did not showed determinant role in VAP, but the presence of these superantigens can contribute worsening the patients prognosis, since they are associated with intense inflammatory response
Resumo:
Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
