Natural Infection with Cryptosporidium galli in Canaries (Serinus canaria), in a Cockatiel (Nymphicus hollandicus), and in Lesser Seed-Finches (Oryzoborus angolensis) from Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Identificação de espécies e genótipos de Cryptosporidium em bovinos leiteiros no Brasil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação da PCR em tempo real para detecção de Cryptosporidium parvum em amostras fecais de bezerros: Camila Guariz Homem. -

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Ocorrência de crryptosporidium spp, em animais exóticos de companhia no Brasil: Milena Sato de Souza. -

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Ocorrência de Criptosporidium spp. (Tyzzer, 1907) e Giardia spp. (Kunstler, 1882) em leitões ao desmame

Pós-graduação em Ciência Animal - FMVA

Ocorrência da infecção por cryptorporidium spp. em éguas e seus respectivos potros em municípios da região noroeste do estado de São Paulo

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Detecção de Cryptosporidium serpentis em amostras fecais de serpentes utilizando PCR em tempo real

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Diferentes técnicas de diagnóstico empregadas na estimativa de prevalência populacional de infecção por Cryptosporidium felis em gatos domiciliados no município de Araçatuba, São Paulo

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

High occurrence of Cryptosporidium ubiquitum and Giardia duodenalis genotype E in sheep from Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Infecção por Cryptosporidium em bezerros e humanos de assentamentos rurais na região de Araçatuba, São Paulo

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

First genetic identification of Cryptosporidium parvum subtype IIaA14G2R1in beef cattle in Brazil

The presence of Cryptosporidium spp. in a cattle herd registered with an outbreak of diarrhea was investigated and the the molecular subtyping of Cryptosporidium parvum was characterized. Fecal samples from 85 Nellore beef cattle (Bos indicus) were collected and examined with Ziehl-Neelsen modified staining method. Fifty-four cattle (63.52%) had Cryptosporidium spp. oocysts in their feces. Fragments of genes encoding the 18S ribosomal RNA subunit and a 60-kDa glycoprotein (gp60) were amplified by nested PCR accomplished in the 11 most heavily parasitized samples, and the amplicons were sequenced. Eight of the 11 analyzed samples were positive for 18S rRNA sequences and identified monospecific infections with C. parvum. Seven samples were positive for gp60 and identified subtypes IIaA15G2R1 (6/11) and IIaA14G2R1 (1/11). This report is the first for C. parvum subtype IIaA14G2R1 in beef cattle in Brazil.

Real-time PCR assay targeting the actin gene for the detection of Cryptosporidium parvum in calf fecal samples

Cryptosporidium parvum infection is very important with respect to public health, owing to foodborne and waterborne outbreaks and gastrointestinal illness in immunocompetent and immunocompromised persons. In cattle, infection with this species manifests either as a subclinical disease or with diarrheal illness, which occurs more often in the presence of other infectious agents than when alone. The aim of this study was to develop a real-time polymerase chain reaction (PCR) assay for the detection of C. parvum in calf fecal samples and to compare the results of this assay with those of the method routinely used for the diagnosis of Cryptosporidium spp., nested PCR targeting the 18S rRNA gene. Two hundred and nine fecal samples from calves ranging in age from 1 day to 6 months were examined using real-time PCR specific for the actin gene of C. parvum and by a nested PCR targeting the 18S rRNA gene of Cryptosporidium spp. Using real-time PCR detection, 73.2% (153 out of 209) of the samples were positive for C. parvum, while 56.5% (118 out of 209) of the samples were positive for Cryptosporidium spp. when the nested PCR amplification method was used for the detection. The analytical sensitivity of the real-time PCR was approximately one C. parvum oocyst. There was no significant nonspecific DNA amplification of any of the following species and genotype: Cryptosporidium andersoni, Cryptosporidium baileyi, Cryptosporidium bovis, Cryptosporidium canis, Cryptosporidium galli, Cryptosporidium ryanae, Cryptosporidium serpentis, or avian genotype II. Thus, we conclude that real-time PCR targeting the actin gene is a sensitive and specific method for the detection of C. parvum in calf fecal samples.

Genetic diversity of Cryptosporidium identified in clinical samples from cities in Brazil and Argentina

The identification and characterisation of Cryptosporidium genotypes and subtypes are fundamental to the study of cryptosporidiosis epidemiology, aiding in prevention and control strategies. The objective was to determine the genetic diversity of Cryptosporidium in samples obtained from hospitals of Rio de Janeiro, Brazil, and Buenos Aires, Argentina. Samples were analysed by microscopy and TaqMan polymerase chain reaction (PCR) assays for Cryptosporidium detection, genotyped by nested-PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis of the 18S rRNA gene and subtyped by DNA sequencing of the gp60 gene. Among the 89 samples from Rio de Janeiro, Cryptosporidium spp were detected in 26 by microscopy/TaqMan PCR. In samples from Buenos Aires, Cryptosporidium was diagnosed in 15 patients of the 132 studied. The TaqMan PCR and the nested-PCR-RFLP detected Cryptosporidium parvum , Cryptosporidium hominis , and co-infections of both species. In Brazilian samples, the subtypes IbA10G2 and IIcA5G3 were observed. The subtypes found in Argentinean samples were IbA10G2, IaA10G1R4, IaA11G1R4, and IeA11G3T3, and mixed subtypes of Ia and IIa families were detected in the co-infections. C. hominis was the species more frequently detected, and subtype family Ib was reported in both countries. Subtype diversity was higher in Buenos Aires than in Rio de Janeiro and two new subtypes were described for the first time.

Etiology of acute diarrhea among children in Ribeirão Preto-SP, Brazil

Com o objetivo de caracterizar os principais enteropatógenos causadores de diarréia na região de Ribeirão Preto, quanto aos sorogrupos e sorotipos, por um período de 4 anos foram estudadas fezes de 1836 crianças, menores de 10 anos de idade, de ambos os sexos, portadoras de gastrenterite aguda no IAL de Ribeirão Preto, SP. Foram pesquisados os seguintes enteropatógenos: Escherichia coli, Salmonella sp., Shigella sp., Campylobacter sp., Yersinia sp., e Cryptosporidium sp., identificados através de metodologia tradicional. Foram positivas 419 (22,8%) amostras, com 1,7% de associação entre enteropatógenos. Houve predomínio na faixa etária de 0 a 11 meses. Destacou-se a E.coli enteropatogênica (EPEC) (8,7%), sendo mais frequente o sorogrupo O119 (40,2%), seguida do gênero Shigella (6,2%), dos quais 63,2% corresponderam à S. sonnei.

Contribution to the laboratory diagnosis of human cryptosporidiosis

A criptosporidiose humana é uma infecção causada pelo Cryptosporidium sp, um protozoário coccídio de patogenicidade emergente e responsável por severa e prostrante diarréia aquosa em humanos, principalmente em indivíduos imunodeprimidos. O diagnóstico, feito através da utilização de esfregaços de fezes submetidos a técnicas de concentração e coloração específica pela fucsina-carbólica tem oferecido bons resultados em nosso laboratório. Tendo em vista o longo tempo despendido para a observação dos esfregaços considerando-se a pequenez das formas e o contraste da coloração, realizamos modificações no procedimento técnico da coloração ácido-resistente que resultaram em sensível melhoria das preparações: a fucsina-carbólica passou a ser deixada sobre o esfregaço por período de 3 minutos (LENNETTE et al., 1985) e procedeu-se a substituição da solução de álcool-ácido sulfúrico a 5% (HENRIKSEN & POHLENZ, 1981) por solução de ácido clorídrico a 0,5% em álcool etílico 70%, por cerca de 2 minutos (contribuição original). Estas alterações promoveram melhor remoção do excesso de fucsina-carbólica, aumentando a eficiência da etapa de descoloração e consequentemente otimizando o contraste do processo de coloração. Nestas condições, as lâminas examinadas em microscópio óptico em aumentos de 250x e 1000x tiveram a visualização dos oocistos do protozoário facilitada, sendo os mesmos observados em contraste destacado com pigmentação intensa de cor rosa-avermelhada contra coloração de fundo azulada. Vale destacar que estas modificações oferecem vantagens de rápido processamento do material e facilidade de visualização do protozoário, diminuindo o tempo de microscopia, tornando a análise das lâminas mais rápida e menos cansativa, agilizando o diagnóstico.