Iniciação floral e ácido giberélico no florescimento e na produção da lima ácida 'Tahiti' (Citrus latifolia, Tanaka)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

EFEITO DO ÁCIDO GIBERÉLICO (AG3) NA FLORAÇÃO E PRODUÇÃO DA LIMA ÁCIDA 'TAHITI' (Citrus latifolia Tan.)

A floração nos citros, assim como em outras fruteiras, é um dos fatores determinantes para a produção. A possibilidade de inibição ou redução da florada normal e alteração da época de produção para a lima 'Tahiti' é fator primordial para determinar sua rentabilidade econômica. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do ácido giberélico sobre a florada, número de flores formadas, da lima ácida 'Tahiti', nas condições do Estado de São Paulo durante dois anos, buscando inibir a florada normal e observar o efeito desta inibição sobre produções temporãs. O delineamento experimental foi em blocos casualizados (5 blocos) com 3 plantas por tratamento. Foi utilizada uma planta como bordadura entre os tratamentos e uma linha de plantas entre os blocos. Os tratamentos foram: testemunha, 20, 40 e 80 mg/L de ácido giberélico (AG3) + 10 ml/L de espalhante adesivo, e o pH da água utilizada foi 6,2. As plantas foram tratadas com ácido giberélico durante o inverno (estação seca) após 50 dias sem irrigação no primeiro ano e 60 dias no segundo. O ácido giberélico reduziu o número de flores formadas (-81%) e aumentou a produção de frutos temporões (+59,77% ou +16,04 kg/pl).

Floração da variedade Tobias (Citrus sinensis Osbeck.) sobre três porta-enxertos no Vale do Taquari-RS

O objetivo do trabalho foi determinar a plena floração (70% de flores abertas) de uma variedade cítrica no Vale do Taquari - RS, no ano de 2003. O trabalho foi realizado no Centro de Pesquisa de Fruticultura de Taquari, em um pomar de laranjeira Tobias, com 16 anos de idade, e enxertado sobre os seguintes porta-enxertos: C13, Poncirus trifoliata e Laranjeira Caipira, denominadas de Tobias 1, Tobias 2 e Tobias 3, respectivamente. A data utilizada como início da floração foi 1º/09/2003. A plena floração foi estimada em 16-07 para a variedade Tobias enxertada sobre C13 e Poncirus trifoliata e 19-07 sobre Laranjeira Caipira; a combinação Tobias 2 apresentou a data de plena floração antes da Tobias 3; o quadrante Sul reduz a média da plena floração da Laranjeira Tobias sobre a Laranjeira Caipira (Tobias 3).

EFEITO do ÁCIDO GIBERÉLICO (AG3) NA FLORAÇÃO E PRODUÇÃO da LIMA ÁCIDA 'TAHITI' (Citrus latifolia Tan.)

A floração nos citros, assim como em outras fruteiras, é um dos fatores determinantes para a produção. A possibilidade de inibição ou redução da florada normal e alteração da época de produção para a lima 'Tahiti' é fator primordial para determinar sua rentabilidade econômica. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do ácido giberélico sobre a florada, número de flores formadas, da lima ácida 'Tahiti', nas condições do Estado de São Paulo durante dois anos, buscando inibir a florada normal e observar o efeito desta inibição sobre produções temporãs. O delineamento experimental foi em blocos casualizados (5 blocos) com 3 plantas por tratamento. Foi utilizada uma planta como bordadura entre os tratamentos e uma linha de plantas entre os blocos. Os tratamentos foram: testemunha, 20, 40 e 80 mg/L de ácido giberélico (AG3) + 10 ml/L de espalhante adesivo, e o pH da água utilizada foi 6,2. As plantas foram tratadas com ácido giberélico durante o inverno (estação seca) após 50 dias sem irrigação no primeiro ano e 60 dias no segundo. O ácido giberélico reduziu o número de flores formadas (-81%) e aumentou a produção de frutos temporões (+59,77% ou +16,04 kg/pl).

Efeito do ácido giberélico na floração da lima ácida 'Tahiti' (Citrus latifolia Tan.)

Pós-graduação em Agronomia (Produção Vegetal) - FCAV

Carboidratos foliares durante a floração e os estádios iniciais de crescimento de frutilhos em tangerineira 'Ponkan'

O objetivo deste trabalho foi avaliar os teores de carboidratos foliares em tangerineira 'Ponkan' (Citrus reticulata), durante o pleno florescimento e os estádios iniciais de crescimento dos frutilhos, e identificar a melhor época para realização do raleio químico. O experimento foi realizado durante dois anos de produção (2009/2010 e 2010/2011), com quatro épocas de amostragem de folhas: 0, 30, 60 e 90 dias após o pleno florescimento. Utilizou-se o delineamento de blocos ao acaso, com parcelas subdivididas no tempo, quatro repetições e quatro plantas por parcela. Para determinar a utilização dos carboidratos pelas plantas, foram avaliados os teores de açúcares solúveis, açúcares redutores e amido na matéria seca das folhas. Nas mesmas épocas de amostragem foliar, o tamanho dos frutilhos também foi determinado. Os teores foliares de carboidratos solúveis aumentam e os de amido diminuem entre 35 e 50 dias após o pleno florescimento. No final da fase de fixação dos frutilhos, a partir dos 50 dias após o pleno florescimento, os teores de açúcares solúveis nas folhas diminuem. A melhor época para a realização do raleio químico em tangerineira 'Ponkan' é logo após a fase de queda fisiológica, quando os frutilhos atingirem cerca de 18 mm de diâmetro, aos 50 dias após o pleno florescimento.

Diferenciação floral, alternância de produção e uso de ácido giberélico em tangerineira 'Montenegrina' (Citrus deliciosa Tenore)

A alternância de produção é um problema na cultura da tangerina 'Montenegrina' (Citrus deliciosa Ten.). Objetivou-se testar o uso do ácido giberélico e épocas de aplicação na inibição floral e conseqüente diminuição da alternância. O experimento foi executado no período de abril de 2004 a agosto de 2005, no município de Eldorado do Sul, Estado do Rio Grande do Sul, em pomar de 20 anos com plantas enxertadas sobre Poncirus trifoliata Raf. Noventa e seis plantas uniformes, em alternância de produção e com poucos frutos foram selecionadas e arranjadas em delineamento de blocos ao acaso, com quatro repetições e duas plantas úteis por parcela. Os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial com quatro concentrações de AG3 (0; 20; 40 e 60 mg/L) e três épocas de aplicação (30 de abril, 20 de maio e 10 de junho), nos anos de 2004 e 2005. Nenhum tratamento inibiu a floração, nem afetou o número e a massa dos frutos colhidos. Observações histológicas de cortes longitudinais de gemas, feitas quinzenalmente, evidenciaram que a diferenciação de gemas de flor, perceptível pela emissão das primeiras sépalas, só ocorre na primeira quinzena do mês de agosto, indicando que a indução da diferenciação floral deve verificar-se em julho, bem depois das aplicações de AG3 feitas nesta pesquisa.

Florescimento de tangerineiras 'Ponkan' (Citrus reticulata Blanco) submetidas a diferentes períodos de temperatura invernal

O trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o efeito do acúmulo de temperaturas abaixo de 20° C, sobre a floração de tangerineiras 'Ponkan' (Citrus reticulata Blanco). Foi adotado o delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos foram formados por sete datas de transferência das mudas, mantidas a céu aberto, para a câmara de crescimento. Foram utilizadas plantas de tangerineira 'Ponkan' enxertadas sobre limoeiro 'Cravo', cultivadas em recipientes, que inicialmente foram mantidas a céu aberto. O experimento foi iniciado no dia 16-05-2007 (início do período de redução da temperatura na região) e conduzido até 17-08-2005. Quinzenalmente, quatro plantas que estavam a céu aberto foram transferidas para câmara de crescimento, com temperaturas de 27°C/20°C (dia/noite), umidade relativa de 75%, fotoperíodo de 12 horas e radiação fotossinteticamente ativa de 170 µmol m-2 s-1. Foram avaliados a data do florescimento e o número total de flores de todas as plantas. Quanto maior foi o tempo de permanência das plantas a céu aberto em temperaturas inferiores a 20° C, maiores foram a antecipação do florescimento e o número de flores produzidas.

Genome Sequence Of Streptomyces Wadayamensis Strain A23, An Endophytic Actinobacterium From Citrus Reticulata.

The actinobacterium Streptomyces wadayamensis A23 is an endophyte of Citrus reticulata that produces the antimycin and mannopeptimycin antibiotics, among others. The strain has the capability to inhibit Xylella fastidiosa growth. The draft genome of S. wadayamensis A23 has ~7.0 Mb and 6,006 protein-coding sequences, with a 73.5% G+C content.

Enzymatic differences between the endophyte Guignardia mangiferae (Botryosphaeriaceae) and the citrus pathogen G. citricarpa

The endophyte Guignardia mangiferae is closely related to G. citricarpa, the causal agent of citrus black spot; for many years these species had been confused with each other. The development of molecular analytical methods has allowed differentiation of the pathogen G. citricarpa from the endophyte G. mangiferae, but the physiological traits associated with pathogenicity were not described. We examined genetic and enzymatic characteristics of Guignardia spp strains; G. citricarpa produces significantly greater amounts of amylases, endoglucanases and pectinases, compared to G. mangiferae, suggesting that these enzymes could be key in the development of citrus black spot. Principal component analysis revealed pectinase production as the main enzymatic characteristic that distinguishes these Guignardia species. We quantified the activities of pectin lyase, pectin methylesterase and endopolygalacturonase; G. citricarpa and G. mangiferae were found to have significantly different pectin lyase and endopolygalacturonase activities. The pathogen G. citricarpa is more effective in pectin degradation. We concluded that there are significant physiological differences between the species G. citricarpa and G. mangiferae that could be associated with differences in pathogenicity for citrus plants.

Fluorescence images combined to statistic test for fingerprinting of citrus plants after bacterial infection

The citrus greening (or huanglongbing) disease has caused serious problems in citrus crops around the world. An early diagnostic method to detect this malady is needed due to the rapid dissemination of Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas) in the field. This analytical study investigated the fluorescence responses of leaves from healthy citrus plants and those inoculated with CLas by images from a stereomicroscope and also evaluated their potential for the early diagnosis of the infection caused by this bacterium. The plants were measured monthly, and the evolution of the bacteria on inoculated plants was monitored by real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) amplification of CLas sequences. A statistical method was used to analyse the data. The selection of variables from histograms of colours (colourgrams) of the images was optimized using a paired Student's t-test. The intensity of counts for green colours from images of fluorescence had clearly minor variations for healthy plants than diseased ones. The darker green colours were the indicators of healthy plants and the light colours for the diseased. The method of fluorescence images is novel for fingerprinting healthy and diseased plants and provides an alternative to the current method represented by PCR and visual inspection. A new, non-subjective pattern of analysis and a non-destructive method has been introduced that can minimize the time and costs of analyses.

Production of the refolded oligopeptide-binding protein (OppA) encoded by the citrus pathogen Xanthomonas axonopodis pv. citri

The oligopeptide-binding protein, OppA, binds and ushers oligopeptide substrates to the membrane-associated oligopeptide permease (Opp), a multi-component ABC-type transporter involved in the uptake of oligopeptides expressed by several bacterial species. In the present study, we report the cloning, purification, refolding and conformational analysis of a recombinant OppA protein derived from Xanthomonas axonopodis pv. citri (X. citri), the etiological agent of citrus canker. The oppA gene was expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) strain under optimized inducing conditions and the recombinant protein remained largely insoluble. Solubilization was achieved following refolding of the denatured protein. Circular dichroism analysis indicated that the recombinant OppA protein preserved conformational features of orthologs expressed by other bacterial species. The refolded recombinant OppA represents a useful tool for structural and functional analyses of the X. citri protein.

Optical fiber laser induced fluorescence spectroscopy as a citrus canker diagnostic

Citrus canker is a serious disease caused by Xanthomonas citri subsp. citri bacteria, which infects citrus plants (Citrus spp.) leading to large economic losses in citrus production worldwide. In this work, laser induced fluorescence spectroscopy (LIF) was investigated as a diagnostic technique for citrus canker disease in citrus trees at an orchard using a portable optical fiber based spectrometer. For comparison we have applied LIF to leaves contaminated with citrus canker, citrus scab, citrus variegates chlorosis, and Huanglongbing (HLB, Greening). In order to reduce the noise in the data, we collected spectra from ten leaves with visual symptoms of diseases and from five healthy leaves per plant. This procedure is carried out in order to minimize the environmental effect on the spectrum (water and nutrient supply) of each plant. Our results show that this method presents a high sensitivity (similar to 90%), however it does present a low specificity (similar to 70%) for citrus canker diagnostic. We believe that such poor performance is due to the fact that the optical fiber collects light from only a small part of the leaf. Such results may be improved using the fluorescence imaging technique on the whole leaf. (C) 2010 Optical Society of America

Detection of mechanical and disease stresses in citrus plants by fluorescence spectroscopy

We have investigated the detection of mechanical and disease stresses in citrus plants (Citrus limonia [L.] Osbeck) using laser-induced fluorescence spectroscopy. Due to its economic importance we have chosen to investigate the citrus canker disease, which is caused by the Xanthomonas axonopodis pv. citri bacteria. Mechanical stress was also studied because it plays an important role in the plant's infection by such bacteria. A laser-induced fluorescence spectroscopy system, composed of a spectrometer and a 532 nm 10 mW excitation laser was used to perform fluorescence spectroscopy. The ratio of two chlorophyll fluorescence bands allows us to detect and discriminate between mechanical and disease stresses. This ability to discriminate may have an important application in the field to detect citrus canker infected trees. (c) 2008 Optical Society of America.

Novel insights into the genomic basis of citrus canker based on the genome sequences of two strains of Xanthomonas fuscans subsp aurantifolii

Background: Citrus canker is a disease that has severe economic impact on the citrus industry worldwide. There are three types of canker, called A, B, and C. The three types have different phenotypes and affect different citrus species. The causative agent for type A is Xanthomonas citri subsp. citri, whose genome sequence was made available in 2002. Xanthomonas fuscans subsp. aurantifolii strain B causes canker B and Xanthomonas fuscans subsp. aurantifolii strain C causes canker C. Results: We have sequenced the genomes of strains B and C to draft status. We have compared their genomic content to X. citri subsp. citri and to other Xanthomonas genomes, with special emphasis on type III secreted effector repertoires. In addition to pthA, already known to be present in all three citrus canker strains, two additional effector genes, xopE3 and xopAI, are also present in all three strains and are both located on the same putative genomic island. These two effector genes, along with one other effector-like gene in the same region, are thus good candidates for being pathogenicity factors on citrus. Numerous gene content differences also exist between the three cankers strains, which can be correlated with their different virulence and host range. Particular attention was placed on the analysis of genes involved in biofilm formation and quorum sensing, type IV secretion, flagellum synthesis and motility, lipopolysacharide synthesis, and on the gene xacPNP, which codes for a natriuretic protein. Conclusion: We have uncovered numerous commonalities and differences in gene content between the genomes of the pathogenic agents causing citrus canker A, B, and C and other Xanthomonas genomes. Molecular genetics can now be employed to determine the role of these genes in plant-microbe interactions. The gained knowledge will be instrumental for improving citrus canker control.