Degradação do fungicida carbendazin por Phanerochaete chrysosporium.

O fungo lignocelulebtico, agente causal de podridão branca em madeira, Phonerochacte chrysosperium resistente a benomil, tem se mostrado eficiente como degradador do fungicida carbendazim. O fungo foi cultivado em BD complementado com 100,9 ug/ml de metil benzimidazol-2-ylcarbamato (Carbendazim ou MBC) por 22 dias, sob agitação. A determinação dos resíduos, realizada a partir do segundo dia e quantificada por cromatografia liquida de alta eficiência demonstrou que o carbendazim e rapidamente degradado por P.chrysosperium, sendo que aproximadamente 76% ocorre nos primeiros 6 dias de incubação.

Phanerochaeta chrysosporium degradando fungicida carbendazin.

O basiodiomiceto Phanerochaeta chrysosporium tem sido proposto para ser usado como agente de biorremediação em áreas contaminadas por compostos poluentes complexos.Este fungo produz lacases e peroxidases, enzimas que normalmente estão envolvidas na degradação de lignina que e uma substancia poliaromática complexa. Estas enzimas são também responsáveis pela degradação de uma diversa faixa de compostos, entre eles alguns pesticidas por exemplo o DDT. O fungicida sistêmico carbendazin (MBC)apesar de relativamente resistente a biodegradação, sofre transformação pela ação de alguns microrganismos. O presente estudo tem por objetivo verificar o efeito do P. chrysosporium na degradação do carbendazin. O fungo foi incubado em meio de cultura liquido (batata-dextrose)enriquecido com 100 ppm de carbenzadin. A determinação quantitativa do fungicida apos 2,3,6 e 22 dias de incubação, foi conduzida por cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) apos extração e "clean-up" da amostra. A analise dos resíduos no meio de cultura, demonstrou que P.chrysosporium degrada 77,6% do carbendazim nos primeiros dias de incubação, permanecendo então este valor inalterado nas analises posteriores. A curva de crescimento dos meios de cultura liquido: BD e BD + MBC, demonstrou em que ambos os casos, o crescimento ótimo foi atingido ao terceiro e quarto dia, respectivamente.

Avaliação da população fúngica do solo e degradação do fungicida carbendazin.

Degradação acelerada esta geralmente associada a repetidas aplicações do mesmo ou de um pesticida estruturalmente relacionado. Os fungicidas sistêmicos do grupo dos benzimidazois se caracterizam por uma alta seletividade, agindo em poucos processos do metabolismo dos patógenos e seu uso indiscriminado podem causar sérios problemas de contaminação ambiental. Solos de três regiões agrícolas foram enriquecidos sucessivamente com 100ppm de benomil. Após incubação, isolamentos foram feitos em meio de cultura suplementado com o fungicida (100 ppm) e colonias individuais foram avaliadas quanto a resistência da população fúngica, com diferentes concentrações do ingrediente ativo. Treze isolados foram avaliados para observação da capacidade de degradação em meio de cultura liquido suplementado com carbendazin e nesta forma ele atua como fungicida. A extração de MBC foi feita com acetato de etila e acido clorídrico e a analise dos metabolitos efetuada através de HPLC. O fungo Alternaria alternata mostrou-se eficiente em degradar acima de 60% de MBC.

Comparison of fungicide dips efficacies for the control of mango postharvest diseases

The shelf-life of mangoes is limited by two main postharvest diseases when not consistently managed. These are anthracnose ( Colletotrichum gloeosporioides) and stem end rots ( Neofusicoccum parvum). The management of these diseases has often relied mainly on the use of fungicide applications either as field spray treatments and/or postharvest dips. Current postharvest dips are under continuous threats because of health concerns and the maximum residue levels allowed on treated fruit continuous to be reviewed and re-assessed. Research needs to keep up with the rate at which changes are occurring following some of these reviews. The recent withdrawal of carbendazin (Spinflo), as a postharvest dip being used to manage stem end rots necessitated the urgent search for a replacement fungicide to manage this disease. A study was therefore undertaken to compare the efficacy of current and potential products that could be used to fill the gap. The following products were evaluated: Carbendazin (Spinflo), Prochloraz (Sportak), Thiobendazole (TBZ) and Fludioxonil (Scholar). These products were tested both under ambient temperatures and as hot dips to identify one that was most effective. Scholar as a hot dip was the most effective product among the ones compared. It effectively controlled both anthracnose and stem end rots at highly significant levels when compared to the untreated control and even Spinflo which is being replaced. As a cold dip, it had some limited effect on anthracnose but had virtually no effect on stem end rots. Based on its performance in these experiments, the product has been recommended for rates and residue studies so that it can be registered as a hot dip for use in controlling postharvest diseases of mangoes.

捷安肽素对采后柑桔青绿霉菌抑制效果及作用机理研究

捷安肽素是一种由枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）ZK 产生的抗真菌多肽。本文以柑桔青霉菌（Penicillium italicum）和绿霉菌（Penicillium digitaum）为供试真菌，研究了捷安肽素的抑菌性能及作用机理，为捷安肽素开发为有效的生物杀菌剂提供理论依据。全文共分两部分：第一部分：捷安肽素对柑桔青霉菌和绿霉菌抑制效果研究。采用琼脂扩散法测定捷安肽素对柑桔青霉菌和绿霉菌的抑菌活性。53.9 µg/mL 捷安肽素对绿霉菌和青霉菌的抑菌圈直径分别为26.7mm 和24.1mm。结果表明捷安肽素能够抑制柑桔青绿霉菌的生长，柑桔绿霉菌比青霉菌对捷安肽素敏感。在柑桔果实上，研究了不同浓度、不同接入时间的捷安肽素对柑桔青霉病和绿霉病的防治效果，并与常用化学杀菌剂抑霉唑、咪鲜胺、甲基硫菌灵和多菌灵作比较。53.9 µg/mL捷安肽素处理柑桔果实，柑桔青霉病和绿霉病发病率分别为5.0 %和5.3 %,比对照低95.0 %和94.7 %；柑桔青霉病和绿霉病的病情指数分别为1.87 和2.18，比对照低73.73 和97.82。结果表明，捷安肽素能够有效地防治柑桔青绿霉病。与对照相比，捷安肽素先于或后于柑桔青绿霉菌接入时，对柑桔青绿霉菌均有抑制作用，但抑制效果随接入间隔时间的增长而降低。第二部分：捷安肽素对绿霉菌作用机理研究。首先在光学显微镜和透射电镜下观察捷安肽素处理后绿霉菌菌丝表面形态结构与菌丝体内超微结构的变化。形态观察发现，捷安肽素处理24h以内，绿霉菌菌丝结构无变化。捷安肽素作用36h后，绿霉菌菌丝不规则缢缩和膨大。48h后，在绿霉菌菌丝顶端、中部、末端的多处细胞均可发生畸形的球状结构，这种畸变结构随处理的延长而增加，致使细胞成为捻珠状。处理72 h后，畸变球形细胞开始断裂离解。处理96h后，镜下几乎无完整菌丝，成单个的球状细胞，部分细胞出现破裂。而对照菌丝表面光滑，结构完整。通过透射电镜观察发现，与对照相比，捷安肽素处理后，绿霉菌细胞壁、细胞膜轮廓模糊不清，细胞质外泄。推测捷安肽素能够使绿霉菌细胞膜通透性发生改变。进一步实验利用紫外-可见分光光度计检测捷安肽素作用后绿霉菌胞外液紫外吸光度的变化，表明捷安肽素作用于绿霉菌菌丝后，细胞内蛋白质、核酸缓慢泄漏。通过Atomscan Advantage单道扫描等离子体发射光谱仪(ICP)测定捷安肽素作用后菌丝体内K+浓度的改变，结果表明捷安肽素作用于柑桔绿霉菌1h内，菌丝体内K+含量迅速下降，为对照绿霉菌K+含量的37.53 %，1 h后菌丝体内K+含量变化趋于平缓。K+的迅速泄漏，以及蛋白质、核酸的泄漏表明捷安肽素通过迅速改变绿霉菌细胞膜通透性，使绿霉菌菌丝生长受到抑制。Jiean-peptide produced by Bacillus subtilis ZK has broad-spectrumresistance to plant pathogens. In this study, we investigated the antifungal propertyand the possible antifungal mechanism of jiean-peptide against two commonphytopathogenic fungi of citrus fruits: blue molds (P. italicum) and green molds (P.digitatum).The paper involved two parts:Part 1 is the study of the antifungal property of jiean-peptide against blue moldsand green molds of citrus fruits. The in vitro inhibition effect of jiean-peptide againstblue molds and green molds was detected by agar diffusion method. The diameters ofinhibition zones of green molds and blue molds are 26.7mm and 24.1mm respectivelyby treating with 53.9 µg/mL jiean-peptide. It shows that jiean-peptide effectivelyinhibits the both phytopathogenic fungi, and it is more effective for inhibiting greenmolds than blue molds. The effectiveness of jiean-peptde to inhibit green molds andblue molds in vivo was investigated compared with four conventional fungicides thatare imazalil, prochloraz, carbendazin and methylthiophanate. The result is that the incidences of the blue mold disease and green mold disease are 5.0 % and 5.3 %, thedisease severities are 1.87 and 2.18 respectively when citrus are inoculated with 53.9µg/ml jiean-peptide. The decay incidences and disease severities were significantlyreduced by treating with jiean-peptide compared with the control. The results indicateJiean-peptide is effective for controlling blue molds and green molds on citrus. Theoptimized inoculation time was also investigated. When inoculated with jiean-peptideat 0 h, 6 h, 12 h, 24 h and 48 h before or after pathogens’ inoculation, Jiean-peptidecan suppress the occurrence of blue molds and green molds compared with the control, but the effect of later inoculation decreases compared with the inoculation at the sametime.In Part 2, we investigated the possible antifungal mechanism against greenmolds of citrus. At first, we observed the exterior morphological changes andultrastructural changes of blue molds under light microscopy (LM) and transmissionelectron microscopy (TEM). Compared with untreated control cells which aregenerally uniform in shape, the appearances of treated hyphae change obviously. Itshows that some cells of hyphae irregularly shrink or enlarge when cultured for 36h.When the treating time of jiean-peptide increases, the aberrance of the hyphaebecomes more obvious, and hyphae exhibit the moniliform appearances. Finally, thereis no intact hypha leaved except only single cells, and some of which appear fractured.By transmission electron microscopy (TEM) observation, we find that the outline ofthe cell wall and the cell membrane of hyphae are blurry, and the cytoplasma oozesout. The observation result under LM and TEM suggests that jiean-peptide mightchange the permeability of the cell membrane. So we conducted further experiment todetect the change of permeability when the cells of blue molds were treated withjiean-peptide. And the effect of jiean-peptide on non-growing cells of blue molds wastested. By the spectrophotometer measurement, we found that compounds with lightabsorption at 260 nm and 280 nm were released and amounts increased within 12 hcompared with the control. Moreover, by the ICP measurement, the leakage of K+occurred immediately in the presence of jiean-peptide within 1 h, but with nearly nofurther change after 1 h. All these results indicate that jiean-peptide could change themembrane permeability of blue molds immediately and result in leaking nucleotides,proteins and K+ from cells.

Controle de Botryosphaeria ribis causador de seca de ponteiro em Corymbia citriodora, com extratos vegetais e fungicidas

A seca de ponteiros é uma doença que vem acarretando danos severos em plantas de eucalipto, causando cancros ao longo do ramo principal. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de fungicidas e extratos vegetais no controle de Botryosphaeria ribis. O teste in vitro dos fungicidas foi inteiramente casualizado com oito tratamentos: carbendazim, clorotalonil, difenoconazole, picoxystrobin + ciproconazole, ciproconazole, azoxystrobin, picoxystrobin e testemunha, quatro doses: 1 µg/mL, 10 µg/mL, 100 µg/mL e 1000 µg/mL; com cinco repetições. Após homogeneização do meio foram vertidas para as placas, repicado um disco de meio de cultura contendo o patógeno para estas placas e mantidas em BOD a 25°C por cinco dias. A avaliação foi feita através de medição diária do crescimento radial do micélio em centímetros. O delineamento experimental do controle químico a campo foi em fatorial 5x3, com cinco fungicidas e três métodos de aplicação (poda, pincelado e pulverizado), com quatro repetições. Foram feitas quatro aplicações, com intervalo de quinze dias. Os tratamentos foram: 1. azoxystrobin, 2. carbendazim, 3. clorotalonil + tiofanato-metílico, 4. difenoconazole e 5. testemunha. Simultaneamente foram feitas avaliações seguindo uma escala de notas de 1 a 6. O delineamento experimental do teste in vitro dos extratos vegetais foi em fatorial 5x4, com três repetições. Os tratamentos avaliados foram os extratos de: mil folhas, melão de são caetano, eucalipto , álcool e testemunha, nas concentrações de 5, 10, 15 e 20%. Os extratos e o álcool foram misturados ao meio de cultura previamente autoclavado, sendo estes colocados em placas de Petri. A avaliação foi feita através de medição diária do crescimento radial do micélio em centímetros. No teste com mudas o delineamento experimental foi em fatorial 2 x 2 x 4, sendo utilizado no experimento de duas procedências, dois modos de tratamento (preventivo e convencional) e quatro produtos para o controle (extrato de melão de são caetano, extrato de Corymbia citriodora, álcool e água). A inoculação do patógeno foi feita no caule das mudas. Foram feitas aplicações dos produtos e avaliações semanais. A avaliação foi feita através da contagem de plantas doentes. O ingrediente ativo carbendazin foi o que mostrou os melhores resultados in vitro diferindo estatísticamente dos outros tratamentos pelo teste Tukey a 1% de probabilidade; seguido pelo clorotalonil e difenoconazole. Todos os ingredientes ativos avaliados mostraram-se superiores a testemunha. A campo, azoxystrobin foi superior aos demais tratamentos e não houve diferença significativa entre os métodos de aplicação. In vitro, os extratos de mil folhas, melão e eucalipto não diferiram entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. O álcool proporcionou a maior inibição do crescimento micelial e diferiu estatisticamente dos outros tratamentos utilizados. As concentrações de 10, 15 e 20% dos extratos não diferiram entre si, mas foram superiores a concentração de 5%. No teste em mudas, a aplicação preventiva mostrou-se superior a aplicação curativa, sendo que o álcool e o extrato de C. citriodora não diferiram entre si, mas foram superiores ao extrato de melão-de-são-caetano. Todos os produtos foram superiores a testemunha.

Determination of pesticides multiresidues in shallow groundwater in a cotton-growing region of Mato Grosso, Brazil

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Qualidade fisiológica de sementes de soja tratadas com fungicidas durante e após o armazenamento

O presente trabalho teve o objetivo de avaliar o efeito do tratamento fungicida durante e após a armazenagem, na qualidade fisiológica de sementes de soja. Utilizaram-se sementes da cultivar BR-16, produzidas na safra de 1999/2000 e armazenadas em Marechal Cândido Rondon - PR. Para o tratamento utilizou-se a mistura de carbendazin + thiram, na dosage de 30 e 70g de i.a./100kg de semente, respectivamente. Realizou-se o tratamento de amostras mensalmente, de maio a dezembro de 2000, sendo as sementes analisadas imediatamente após o procedimento. Sementes sem tratamento representaram a testemunha. As amostras tratadas e armazenadas foram analisadas e comparadas com as tratadas e analisadas imediatamente antes da semeadura (dezembro de 2000). A qualidade das sementes foi avaliada através dos testes de germinação, de tetrazólio para vigor e viabilidade e emergência em campo. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro repetições por tratamento para cada teste. Realizou-se a comparação das médias através do teste de Tukey a 5% de probabilidade. O teste de germinação e o de tetrazólio não evidenciaram efeito negativo do tratamento fungicida anterior ao período de armazenagem sobre a qualidade das sementes. As sementes tratadas e não apresentaram decréscimo de viabilidade e de vigor, atingindo valores de germinação inferiores a 75%, em dezembro de 2000. Na emergência em campo, constatou-se que as sementes mantidas tratadas por mais de quatro meses apresentaram desempenho inferior comparativamente às tratadas nas demais épocas.

Multiresidue analysis of pesticides in water from rice cultures by on-line solid phase extraction followed by LC-DAD

An automated on-line solid phase extraction procedure followed by liquid chromatography with diode array detection was investigated for the determination of different classes of pesticides in water samples containing varied amount of humic substances. The different pesticides used were: carbendazin, carbofuran, atrazine, diuron, propanil, molinate, alachlor, parathion-ethyl, diazinon, trifluralin and the degradation products deisopropylatrazine and deethylatrazine. Humic substances extracted from a Brazilian sediment were used from 5 to 80 mg/l and their influence on recoveries was evaluated in neutral and acidic media. Recoveries higher than 70% were obtained for all the pesticides, from the preconcentration of 75 mi of aqueous sample fortified at 2 ng/ml using precolumns packed with PLRP-S. Good recoveries were obtained at neutral pH for most of the analytes up to 40 mg/l of humic acid. Only at 80 mg/l the recoveries were significantly affected, both at acidic and neutral pH. The method was applied to the determination of pesticides in river water spiked at 0.1 to 1 ng/ml. Detection limits obtained for water containing 10 mg/l of humic acid were between 0.05 and 0.3 ng/ml.

Qualidade fisiológica e sanitária de sementes de mamona submetidas a diferentes tratamentos químicos

The use of fungicides for treating seeds has become an essential measure in the control of pathogens. However, the effectiveness of many products is not well-known to some crops. The objective of this research was to evaluate the effect of different doses of carbendazin and carboxin + thiram fungicides for controlling pathogens and their interference on the physiologic quality of castor bean seeds. The test consisted of the following treatments (g i.a./100 kg of seeds): carbendazin (15, 30, and 60), carboxin + thiram (25 + 25, 50 + 50, and 100 + 100), formol 0.15% (v/v), and control (distilled water). The physiologic quality of the seeds was determined by germination, first counting, field emergence, speed emergence index, length, fresh and dry weight of the aerial part, and electrical conductivity. There were no statistical differences for germination and fresh and dry matter index. The treatment with formol provided lower values for first counting and field emergence. Seeds treated with fungicides presented higher values for electrical conductivity, but did not differ, statistically, among themselves. The fungi Cladosporium spp.; Bipolaris spp.; Curvularia spp.; Aspergillus flavus; Aspergillus niger; Rhizopus sp.; Penicillium sp.; Rhizoctonia sp.; Verticillium sp.; Fusarium sp.;Arthrobotrys sp.; and Epicocum sp. were identified. All tested products, independently of the dose, provided efficient control for pathogens.

Controle químico de patógenos e desempenho fisiológico de sementes de amendoim

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Avaliação da sensibilidade in vitro de isolados de Colletotrichum lindemuthianum a fungicidas

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Efeito do tratamento químico na qualidade sanitária e fisiológica de sementes de soja infectadas por Sclerotinia sclerotiorum

Pós-graduação em Agronomia (Proteção de Plantas) - FCA

Avaliação da contaminação de águas por resíduos de pesticidas em área de cultura de algodão: região de Primavera do Leste - MT

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Fisiologia e manejo de Corynespora cassiicola (Berk. & M. A. Curtis) C. T. Wei, causador da mancha alvo na cultura da acerola (Malpighia emarginata D. C.)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)