Preliminary studies investigating the occurrence of Biomphalaria cousini in Brazil

Specific genetic profiles of Brazilian Biomphalaria species were previously standardized by molecular taxonomy through the analysis of restriction fragments, which were generated by digesting the internal transcribed spacer region of rDNA with the DdeI endonuclease. Biomphalaria amazonica displayed three distinct profiles. To investigate these distinct profiles, the same molecular technique, polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism, was used with different endonucleases. In addition, morphological data were also used to compare B. amazonica specimens that were collected from Brazil, Colombia and Bolivia. The morphological characters of Bolivian molluscs were similar to B. amazonica, displayed a molecular profile of five restriction fragments and morphological data, whereas the Colombian mollusc population showed morphological characters similar to Biomphalaria cousini and a molecular profile of three restriction fragments, similar to B. cousini. The Brazilian specimens showed the B. amazonica and B. cousini molecular profiles as well as a third profile, which resembled a combination of the Colombian and Bolivian molecular profiles.

Hybridism between Biomphalaria cousini and Biomphalaria amazonica and its susceptibility to Schistosoma mansoni

Molecular techniques can aid in the classification of Biomphalaria species because morphological differentiation between these species is difficult. Previous studies using phylogeny, morphological and molecular taxonomy showed that some populations studied were Biomphalaria cousini instead of Biomphalaria amazonica. Three different molecular profiles were observed that enabled the separation of B. amazonica from B. cousini. The third profile showed an association between the two and suggested the possibility of hybrids between them. Therefore, the aim of this work was to investigate the hybridism between B. cousini and B. amazonica and to verify if the hybrids are susceptible to Schistosoma mansoni. Crosses using the albinism factor as a genetic marker were performed, with pigmented B. cousini and albino B. amazonica snails identified by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. This procedure was conducted using B. cousini and B. amazonica of the type locality accordingly to Paraense, 1966. In addition, susceptibility studies were performed using snails obtained from the crosses (hybrids) and three S. mansoni strains (LE, SJ, AL). The crosses between B. amazonica and B. cousini confirmed the occurrence of hybrids. Moreover, hybrids can be considered potential hosts of S. mansoni because they are susceptible to LE, SJ and AL strains (4.4%, 5.6% and 2.2%, respectively). These results indicate that there is a risk of introducing schistosomiasis mansoni into new areas.

Planorbidae, Lymnaeidae and Physidae of Ecuador (Mollusca: Basommatophora)

In the course of a trip to Ecuador I had the opportunity of collecting topotypic specimens of the following nominal species of pulmonate molluscs: Biomphalaria cousini Paraense, 1966; Planorbis equatorius Cousin, 1887; P. canonicus Cousin, 1887; Lymnaea cousini Jousseaume, 1887 and P. boetzkesi Miller, 1879. Additional findings were: Helisoma trivolvis (Say, 1817), Biomphalaria peregrina (Orbigny 1835), Drepanotrema anatinum (Orbigny, 1835), D. kermatoides (Orbigny, 1835), D. lucidum (Pfeiffer, 1839), D. surinamense (Clessin, 1884), Lymnaea columella Say, 1817 and Physa acuta Draparnaud, 1805. P. boetzkesi and P. canonicus are considered junior synonyms of Gyraulus hindsianus (Dunker, 1848) and Biomphalaria peregrina (Orbigny, 1835), respectively.

Behaviour of albino and melanic variants of Biomphalaria glabrata Say, 1818 (Mollusca: Planorbidae) following infection by Schistosoma mansoni Sambon, 1907

The behaviour of the albino and melanic variants of Biomphalaria glabrata of Belo Horizonte (MG. Brazil) was studied comparatively, in terms of their respective susceptibilities to infection by Schistosoma mansoni of the same origin, through observation of the elimination of cercariae for a three-month period and the calculation of mortality and infection rates, in control and in infected snails. The number of amoebocytes, granulocytes and hyalinocytes in the circulating hemolymph during different periods of infection was analyzed. The evolution of the infection in the tissues was observed by means of histological cross-sections. The melanic variant showed greater susceptibility to infection and a higher mortality rate. The albino variant showed a higher number of circulating amoebocytes, both granulocytes and hyalinocytes. A higher number of degenerated sporocysts were seen in the histological cross-sections of the albino variant. The results suggest that the melanic variant of B. glabrata was more susceptible to infection by S. mansoni than was the albino variant.

The effects of the experimental infection from a focus of transmission of Schistosoma mansoni in a population of Biomphalaria tenagophila (D'Orbigny, 1835) in the region of "Vale do Ribeira de Iguape", Brazil

To observe the effects of the parasitic infection on the biology of B. tenagophila, field and laboratory populations of this mollusk from Itariri, in Vale do Ribeira, Brazil, were experimentally infected. Each mollusk received 10 miracidia of Schistosoma mansoni (SJ lineage) and was observed throughout the parasite's development. The biological variables were compared according to the criteria "group" and "infectious phase". The main damage caused by the parasitic infection manifested itself in reproduction, longevity and lesions on the shell of the mollusks in the patent phase. An infection rate of 58.8% was observed. Microanatomical study of the mollusk's digestive gland and ovotestis revealed the presence of evolving larval forms and cercariae. It was concluded that the effects of the parasitic infection on both populations were moderate, despite the low survival rate of the infected mollusks, the damage did not prevent either reproduction or the elimination of cercariae, which continued for a long time.

The effects of the experimental onfection from a focus of transmissopn of Schistosoma mansoni in a population of Biomphalaria tenagophila (D'Orbigny, 1835) in the region of "Vale do Ribeira de Iguape", Brazil

Com objetivo de observar os efeitos da infecção parasitária na biologia de B. tenagophila, foram realizadas infecções experimentais em populações de campo e laboratório, ambas procedentes de Itariri, Vale do Ribeira, Brasil. Cada molusco recebeu 10 miracídios de Schistosoma mansoni (linhagem SJ), sendo observado durante o desenvolvimento dos parasitos. As variáveis biológicas foram comparadas segundo os critérios "grupo" e "fase de infecção". Os principais danos decorrentes do parasitismo se manifestaram na reprodução, na longevidade e em lesões na concha dos moluscos na fase patente. Foi encontrada uma taxa de infecção de 58,8 por cento. O estudo microanatômico da glândula digestiva e do ovoteste do molusco revelou a presença de formas larvárias em evolução e cercárias. Concluiu-se que os efeitos da infecção parasitária, sobre as duas populações, foram moderados, uma vez que os danos não impediram a reprodução e a eliminação de cercárias que se manteve por um longo período, apesar da baixa sobrevivência dos moluscos parasitados

Molluscicidal and ovicidal activities of plant extracts of the Piperaceae on Biomphalaria glabrata (Say, 1818)

Schistosomiasis is a tropical disease caused by Schistosoma and occurs in 54 countries, mainly in South America, the Caribbean region, Africa and the eastern Mediterranean. Currently, 5 to 6 million Brazilian people are infected and 30,000 are under infection risk. Typical of poor regions, this disease is associated with the lack of basic sanitation and very frequently to the use of contaminated water in agriculture, housework and leisure. One of the most efficient methods of controlling the disease is application of molluscicides to eliminate or to reduce the population of the intermediate host snail Biomphalaria glabrata. Studies on molluscicidal activity of plant extracts have been stimulated by issues such as environmental preservation, high cost and recurrent resistance of snails to synthetic molluscicides. The aim of this study was to determine the molluscicide action of extracts from Piperaceae species on adult and embryonic stages of B. glabrata. Fifteen extracts from 13 Piperaceae species were obtained from stems, leaves and roots. Toxicity of extracts was evaluated against snails at two different concentrations (500 and 100 ppm) and those causing 100% mortality at 100 ppm concentration were selected to obtain the LC(90) (lethal concentration of 90% mortality). Piper aduncum, P. crassinervium, P. cuyabanum, P. diospyrifolium and P. hostmannianum gave 100% mortality of adult snails at concentrations ranging from 10 to 60 ppm. These extracts were also assayed on embryonic stages of B. glabrata and those from P. cuyabanum and P. hostmannianum showed 100% ovicidal action at 20 ppm.

Dispersão de Biomphalaria straminea, hospedeira intermediária do Schistosoma mansoni, através da distribuição de peixes

Foi focalizado, pela primeira vez o encontro de B. straminea no Estado de São Paulo. Esta espécie vem juntar-se aos planorbídeos já assinalados em nosso Estado. Foram descritos os criadouros, onde a B. straminea foi coletada, localizados em tanques de criação de peixes nas Estações de Piscicultura de Barra Bonita e Americana, Estado de São Paulo, e em um aquário particular na capital dêsse Estado. Fêz-se referência ao transporte de peixes oriundos de zonas do país onde ocorre aquela espécie, Amazonas e Ceará, como responsável pela introdução daquele molusco no Estado. Destacou-se êsse achado pelo perigo que representa a distribuição de peixes da maneira como vem sendo feita atualmente em nosso país, tendo sido julgado necessário o estabelecimento de quarentena para aquêles vindos de zonas infestadas por espécies hospedeiras intermediárias do S. mansoni. Foram relatadas as medidas de combate aos caramujos efetuadas imediatamente após aquela descoberta e os resultados obtidos. Conclui-se que a dispersão passiva da B. straminea pelo transporte de peixes, deve ampliar a distribuição geográfica dêsse planorbídeo, já assinalado na Venezuela, Guianas e no Brasil, sendo que neste último ocorre em tôdas as Unidades Federativas, exceto, no Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Rio de Janeiro e Territórios.

Anomalias em conchas de Biomphalaria straminea (Dunker, 1848), criadas em laboratório. (Pulmonata, Planorbidae)

Assinala-se o encontro de anomalias em conchas de 90 espécimens de Biomphalaria straminea, traduzidas por acentuada deformação da última espiral. Os exemplares pertencem à população criada em laboratório e procedente de Curvelo, Minas Gerais, Brasil.

Estudo da suscetibilidade da Biomphalaria glabrata de Ourinhos (SP), à infecção pelo Schistosoma mansoni de Belo Horizonte (MG), e de São José dos Campos (SP)

Foi estudada a suscetibilidade da Biomphalaria glabrata de um foco de Schistosoma mansoni no município de Ourinhos, (SP, Brasil). Concluiu-se pela alta capacidade desses moluscos à infecção pelas cepas de S. mansoni de Belo Horizonte, Minas Gerais e de São José dos Campos, São Paulo.

Estudo sobre a cópula interespecífica entre moluscos planorbídeos Biomphalaria glabrata e B. tenagophila

Foi estudada a freqüência da cópula interespecífica entre espécimes de Biomphalaria glabrata e B. tenagophila. Os resultados da experiência levaram a conclusão de que há preferência pela cópula intraespecífica, ocorrendo, contudo, cópulas interespecíficas.

Observação do comportamento biológico de Biomphalaria glabrata de concha anômala

Foi encontrado na criação de Biomphalaria glabrata em laboratório, um caramujo vivo com anomalia na concha. A anomalia consiste na mudança de nível das voltas. O exemplar foi isolado para estudo de seu comportamento biológico. Depois foi juntado a outro exemplar com a mesma anomalia. Os resultados mostraram que suas funções biológicas eram normais. A anomalia é de caráter genético. Na F1 houve aparecimento de 0,01% de anomalia nos embriões. Em vinte e cinco meses de observação dos descendentes desses caramujos foram isolados treze embriões anômalos. Um dos embriões chegou ao estado adulto, mas não desovou.

Alguns aspectos da biologia de Biomphalaria glabrata (Say, 1818) e Biomphalaria tenagophila (D'Orbigny, 1835) (Pulmonata, Planorbidae): I - Duração do período embrionário

Foram realizadas observações sobre a duração do período embrionário de Biomphalaria glabrata e Biomphalaria tenagophila, durante um ano, em condições de laboratório. As médias, expressas em dias, encontradas para Biomphalaria glabrata e Biomphalaria tenagophila foram respectivamente de 7,6 e 8,0 dias. Essas diferenças não foram significativas ao nível de 5%. O desenvolvimento mais rápido dos embriões até a eclosão verificou-se na estação quente, em ambas as espécies, quando a temperatura média da água foi de aproximadamente 28°C. Após a análise da matriz de correlação verificou-se que a influência da temperatura sobre o tempo de desenvolvimento embrionário foi pouco intensa: Biomphalaria glabrata apresentou maior correlação com a temperatura mínima do ambiente (36,2%) e com a temperatura da água (36,0%) enquanto Biomphalaria tenagophila apresentou maior correlação com a temperatura mínima do ambiente (27,0%).

Alguns aspectos da biologia de Biomphalaria glabrata (Say, 1818) e Biomphalaria tenagophila (D'Orbigny, 1835) (Pulmonata, planorbidae): II - Fecundidade e fertilidade

Foi realizada, comparativamente, a avaliação do número de cápsulas ovíferas e ovos por caramujo e do número de ovos por desova (fecundidade) e a verificação da taxa de eclosão e de ovos férteis (fertilidade) de Biomphalaria glabrata e Biomphalaria tenagophila, no período de um ano, em condições de laboratório. Verificou-se que a média do número de ovos por desova foi significativamente maior em B. glabrata (19,9) do que em B. tenagophila (16,2), constatando-se que ambas as espécies apresentavam maior fecundidade no mês de abril, embora os fatores ambientes tenham influído pouco no parâmetro em questão. A fecundidade traduzida pelo número de desovas por caramujo-dia, mostrou-se maior em B. glabrata (0,65) do que em B. tenagophila (0,56), o mesmo acontecendo em relação ao número de ovos por caramujo-dia pois B. glabrata apresentou média de 13,4 e B. tenagophila média de 9,9. Considerando-se a fertilidade como a percentagem de eclosão dos caramujos, B. glabrata apresentou média de 95,8% e B. tenagophila a média de 90,5% de eclosão, sendo esta diferença significativa ao nível de 5%. As taxas mais elevadas de eclosão em B. glabrata foram verificadas nos meses de nomais elevadas de eclosão em B. glabrata foram verificadas nos meses de novembro a janeiro (98,0%) e em B. tenagophila nos meses outubro-novembro (95,0%) embora não tenham sido observados ritmo sazonal nem influência da temperatura na eclosão dos planorbídeos estudados.

Seleção de linhagens de Biomphalaria tenagophila e Biompnalaria glabrata visando maior suscetibilidade ao Schistosoma mansoni

Utilizando um esquema de seleção individual em progenies autofecundadas, foram obtidas, após quatro gerações, populações de Biomphalaria tenagophila e de Biomphalaria glabrata, altamente suscetíveis às linhagens do Schistosoma mansoni do Vale do Rio Paraíba do Sul, SP e de Belo Horizonte, MG (Brasil), respectivamente. Os rápidos ganhos genéticos obtidos confirmam ser a suscetibilidade de moluscos à infecção esquistossomótica, uma característica de alta herdabilidade, sendo aparentemente condicionada por um pequeno número de genes.