Determination du niveau d'anticorps antitetaniques en donneurs de sang au moyen du test ELISA-TÉTANOS (São Paulo, SP, Bresil)

Le test ELISA-TÉTANOS (Biosys, France) a été utilisé pour le titrage des anti-corps tétaniques (sensibilité = 0,0025 UI/ml) en sérums humains de donneurs de sang, 566 hommes et 108 femmes, âges de 18 à 58 ans, moyenne de 29 ans, provenant de São Paulo, SP, Brésil. L'OMS, acceptant seulement la séroneutralisation sur souris (NT), la méthode de référence, pour les études sur la protection contre le tétanos, préconise le titre de 0,01 UI/ml comme minimum protecteur. BOURLEAUD & HUET ont proposé la limite de 0,06 UI/ml quand s'emploie le test ELISA, en attendant à une certaine discordance inévitable entre les méthodes. Parmi les 674 sérums étudiés, 178 (26,41%) n'ont pas présenté d'anticorps (< 0,0025 UI/ml); 413 (61,28%) ont présenté des résultats égaux ou supérieurs à 0,01 UI/ml et en 232 (34,42%) les titres ont été égaux ou supérieurs à 0,06 UI/ml. Le pourcentage d'individus protégés a été inversement proportionnel à 1'âge: environ 50% dans le groupe le plus jeune (hommes de 18 à 35 ans et femmes de 18 à 23 ans) contre environ 10% dans le groupe de plus de 42 ans ont présenté des titres sûrement protecteurs (> 0,06 UI/ml).

Anticorps antineuronaux: un domaine en plein développement [Anti-neuronal antibodies: a rapidly developing field].

Anti-neuronal antibodies are implicated in various neurological syndromes that are sometimes associated with tumors. Depending on the antigenic target (nuclear, cytoplasmic or extracellular cell-surface or synaptic) the clinical presentation is different. In neurological syndromes associated with antibodies specific for intracellular antigens, the T-cell mediated immunological response predominates as pathogenic effector and the response to treatment is typically poor. In contrast, in syndromes related to antibodies against extracellular targets, the role of the antibodies is pathogenic and the neurological syndrome often responds better to immunomodulatory treatment, associated or not with an anti-tumoral treatment. We review the spectrum of anti-neuronal antibodies and their corresponding clinical and therapeutic characteristics.

Caractéristiques cliniques des leucémies lymphoblastiques aiguës de type T immature (E-rosette négatif) détecté par l'anticorps monoclonal LAU-A1 [Clinical characteristics of immature T-type (negative E-rosette) acute lymphoblastic leukemia detected by LAU-A1 monoclonal antibody]

Immature T-ALL is a newly defined subgroup of ALL in which the blasts lack the receptor for sheep erythrocytes (ER) and the usual T-cell markers, but express the 40 kDa pan-T surface antigen recognized by our monoclonal antibody LAU-A1. Patients with immature T-ALL represent 10% of all cases of adult ALL. Leukocyte counts are lower and spleen, liver and lymph node enlargement is less prominent, but mediastinal enlargement is more frequent than in mature (ER-positive) T-ALL. 7 patients with immature T-ALL (median age 42 years, range 13-73) were treated with intensified chemotherapy regimens, and only one 47-year-old female entered a short-lived complete remission. The overall survival of our patients was poor (median 7.5 months, with only one patient surviving at 15 months) and seemed not to be influenced by age. Our study indicates that immature T-ALL can only be accurately identified by the use of monoclonal antibodies recognizing the 40 kDa pan-T antigen, and that immature T-ALL is a separate disease entity typified by a poor prognosis.

Les anticorps monoclonaux radiomarqués en tant que missiles anti-tumeurs, leurs succès diagnostiques, leur potentiel thérapeutique

While it is now well accepted that radiolabeled antibodies can be useful for tumour detection by immunoscintigraphy, the use of larger doses of more aggressive radioisotopes coupled to antibodies for radioimmunotherapy is still in its infancy. At the experimental level, our group has shown that the intravenous injection of large doses of 131I labeled F(ab')2 fragments from monoclonal anti-carcinoembryonic antigen (CEA) antibodies can eradicate well established human colon carcinoma xenografts in nude mice. At the clinical level, in a dosimetry study performed at the Institut Gustave Roussy, the same anti-CEA monoclonal antibodies and fragments, labeled with subtherapeutic doses of 131I, were injected in patients with liver metastases from colorectal carcinomas. Direct measurement of radioactivity in surgically resected liver metastases and normal liver confirmed the specificity of tumour localization of the antibodies, but also showed that the calculated radiation doses which could be delivered by injections of 200 to 300 mCi of 131I labeled antibodies or fragments, remained fairly low, in the range of 1,500 to 3,000 rads. This is obviously insufficient for a single modality treatment. An alternative approach is to inject radiolabeled antibodies intra peritoneally to treat peritoneal carcinomatosis. Several clinical studies using this strategy are presently under evaluation and suggest that positive results can be obtained when the tumour diameters are very small. In systemic radioimmunotherapy, positive results have been obtained in more radiosensitive types of malignancies such as B cell lymphomas by intravenous injection of antibodies directed against B cell differentiation markers or against idiotypic antigens from each lymphoma, and labeled with 131I or 90Y. The major directions of research for improvement of radioimmunotherapy include the design of genetically engineered new forms of humanized antibodies, the synthesis of original chelates for coupling new radioisotopes to antibodies and the development of two step strategies for immunolocalization of radioisotopes.

Utilisation en tomoscintigraphie d'anticorps monoclonaux radio-marqués pour la détection chez l'homme des cancers digestifs et des cancers médullaires de la thyroïde

Two 131-Iodine radiolabelled monoclonal antibodies were used to perform tomoscintigraphy in 42 patients: 11 patients bearing medullary thyroid cancers and 19 patients bearing gastrointestinal cancers received an antibody directed against carcino-embryonic antigen; 12 patients bearing gastro-intestinal cancers received an antibody directed against a non circulating antigen expressed by human colorectal cancers cell lines. Tomoscintigraphy is particularly useful for analysing the complex biodistribution of radiolabelled antibodies and the low contrast images encountered in immunoscintigraphy; the problems related to the true positive rate and to the clinical specificity of the method are discussed.

Production et évaluation de l'anticorps NIMP-R14 pour dépléter chroniquement les neutrophiles chez un modèle expérimental d'athérosclérose avancée : la souris ApoE-/- 2 reins-1clip (2K1C)

L'athérosclérose (ATS) est une maladie artérielle inflammatoire chronique à l'origine des nombreuses maladies cardiovasculaires que sont l'infarctus du myocarde, l'accident vasculaire cérébral ou encore l'artériopathie oblitérante des membres inférieurs. L'ATS se définit comme la formation de plaques fibro-lipidiques dans l'intima des artères. Les facteurs de risque majeurs associés à l'ATS sont l'hypertension, l'hypercholestérolémie, le tabagisme, le diabète, la sédentarité, ou encore des prédispositions génétiques. L'ATS peut être asymptomatique durant des années ou alors engendrer des complications aiguës pouvant parfois mettre le pronostic vital en jeu. Les complications les plus graves surviennent principalement lors de la rupture d'une plaque athéromateuse dite vulnérable ou instable. En effet, cette dernière peut se rompre et entraîner la formation d'un thrombus artériel occlusif avec, pour conséquence, l'ischémie/nécrose des tissus en aval. Prévenir le développement de la plaque vulnérable et/ou la « stabiliser » permettrait donc de prévenir les complications cliniques de l'ATS. Cet objectif requiert une connaissance éclairée des mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans la physiopathologie de l'ATS et de la plaque vulnérable. Les travaux expérimentaux menés au sein du laboratoire du service d'angiologie du CHUV sous la direction du Prof. Lucia Mazzolai ont montré que l'angiotensine II (ang II), produit final de la cascade du système rénine-angiotensine, joue un rôle majeur dans la « vulnérabilité » des plaques athéromateuses (1). Ces travaux ont été réalisés à partir d'un modèle animal original développant des plaques d'ATS vulnérables dépendantes de l'ang II: la souris ApoE-/- 2 reins-1 clip (2K1C). Plus récemment, le laboratoire d'angiologie a mis en évidence une implication directe des leucocytes, plus précisément des macrophages et des lymphocytes T CD4+, dans l'athérogenèse ang II-dépendante (2,3). Dernièrement, des travaux ont également suggéré un rôle possible des granulocytes neutrophiles dans l'ATS (4,5,6,7). Toutefois, les études sont encore limitées de sorte que le rôle exact des neutrophiles dans l'ATS et plus spécialement dans l'ATS induite par l'ang II reste à démontrer. Une des recherches actuelles menée dans le laboratoire est donc d'étudier le rôle des neutrophiles dans le développement de la plaque athéromateuse vulnérable à partir du modèle animal, la souris ApoE-/- 2K1C. Pour évaluer le rôle direct des neutrophiles chez notre modèle animal, nous avons choisi comme méthode la déplétion des neutrophiles circulants par l'utilisation d'un anticorps spécifique. Il a été reporté dans la littérature que l'anticorps monoclonal NIMP-R14 3 permettait de dépléter sélectivement in vivo les neutrophiles dans différents modèles murins (8,9). Cependant, ces études ont utilisé cet anticorps anti-neutrophiles majoritairement sur des périodes expérimentales de durées relativement limitées (12-14 jours) et la question s'est donc posée de savoir si cet anticorps pouvait aussi dépléter les neutrophiles chez notre modèle animal, qui requiert une période expérimentale de 4 semaines pour développer des plaques vulnérables (1). Le but de ce travail a donc été de produire l'anticorps NIMP-R14 et d'évaluer son efficacité chez la souris ApoE-/- 2K1C qui développe des plaque d'ATS vulnérables dépendantes de l'ang II.

L'immunoscintigraphie par les anticorps monoclonaux radiomarqués. Evolution d'une méthode de diagnostic du cancer et espoir d'une nouvelle forme de thérapie [Immunoscintigraphy using radio-labeled monoclonal antibodies. Development of a method of cancer diagnosis and hopes for a new form of therapy].

Personal results are presented to illustrate the development of immunoscintigraphy for the detection of cancer over the last 12 years, from the early experimental results in nude mice grafted with human colon carcinoma to the most modern form of immunoscintigraphy applied to patients, using I123 labeled Fab fragments from monoclonal anti-CEA antibodies detected by single photon emission computerized tomography (SPECT). The first generation of immunoscintigraphy used I131 labeled, immunoadsorbent purified, polyclonal anti-CEA antibodies and planar scintigraphy, as the detection system. The second generation used I131 labeled monoclonal anti-CEA antibodies and SPECT, while the third generation employed I123 labeled fragments of monoclonal antibodies and SPECT. The improvement in the precision of tumor images with the most recent forms of immunoscintigraphy is obvious. However, we think the usefulness of immunoscintigraphy for routine cancer management has not yet been entirely demonstrated. Further prospective trials are still necessary to determine the precise clinical role of immunoscintigraphy. A case report is presented on a patient with two liver metastases from a sigmoid carcinoma, who received through the hepatic artery a therapeutic dose (100 mCi) of I131 coupled to 40 mg of a mixture of two high affinity anti-CEA monoclonal antibodies. Excellent localisation in the metastases of the I131 labeled antibodies was demonstrated by SPECT and the treatment was well tolerated. The irradiation dose to the tumor, however, was too low at 4300 rads (with 1075 rads to the normal liver and 88 rads to the bone marrow), and no evidence of tumor regression was obtained. Different approaches for increasing the irradiation dose delivered to the tumor by the antibodies are considered.