Efeito de citocininas na senescência e abscisão foliar durante o cultivo in vitro de Annona glabra L.

A micropropagação de anonáceas tem sido limitada pela abscisão foliar precoce nas brotações, o que dificulta a manutenção e o desenvolvimento das plantas in vitro. Esse fato se deve, principalmente, ao acúmulo de etileno nos tubos fechados e à relação etileno/citocinina nas folhas. Assim sendo, avaliaram-se o efeito de fontes de citocinina sobre o retardo da senescência foliar em brotações de Annona glabra L. e suas implicações sobre o seu desenvolvimento. Segmentos nodais foram cultivados em tubo de ensaio contendo 15 mL do meio WPM, suplementado com 30g L-1 de sacarose, 500mg L-1 de benomyl e 1g L-1 de carvão ativado. A esse meio adicionaram-se 6-benzilaminopurina, thidiazuron, cinetina e zeatina, todos na concentração de 1mg L-1. Decorridos 45 dias após a inoculação, plantas foram submetidas à senescência em ambiente escuro, por um período de 9 dias, coletando-se folhas a cada três dias para quantificação de clorofila "a", clorofila "b", carotenóides, proteínas e açúcares solúveis totais. No final das fases de multiplicação e enraizamento, quantificaram-se a matéria seca, a área foliar e o número de folhas que sofreram abscisão nas plantas que não foram submetidas à senescência. Adotou-se o delineamento em blocos casualizados, sendo que cada período de senescência constituiu um bloco, com quatro repetições por tratamento. Os resultados mostraram que cinetina e zeatina, seguidas de thidiazuron e 6-benzilaminopurina, preservam maior teor de clorofilas "a", "b" e de carotenóides durante todo o período de senescência induzida. 6-benzilaminopurina e cinetina promoveram maior retenção da área foliar durante as fases de multiplicação e enraizamento de Annona glabra L.

Clonagem de quatro espécies de Annonaceae potenciais como porta-enxertos

O trabalho objetivou o estudo da capacidade de enraizamento de quatro espécies de Annonaceae potenciais como porta-enxertos (Annona glabra L., Annona montana Macfad, Rollinia emarginata e Rollinia mucosa Baill.) em três épocas do ano (verão, outono e inverno). Experimento conduzido em câmara de nebulização intermitente pertencente à UNESP/FCAV (21º15'22"S e 48º18'58"W), utilizando-se de estacas apicais enfolhadas em tratamento rápido (5 segundos) com ácido indolbutírico (IBA) (0; 1000; 3000; 5000 e 7000 mg.L-1), em esquema fatorial. Após 90 dias, avaliaram-se a porcentagem de estacas enraizadas, sobrevivência, comprimento e número de raízes. Como resultados, o IBA não incrementou a capacidade de enraizamento das espécies. A época do ano foi grande influente no sucesso de enraizamento, sendo o verão mais adequado. A. glabra e A. montana mostraram-se promissoras na propagação vegetativa via estaquia (clonagem). R. emarginata apresentou baixos valores para as características avaliadas, devendo ser intensificados experimentos na promoção do enraizamento em relação aos atuais valores obtidos. R. mucosa não apresentou resultados satisfatórios, ocorrendo necrose de tecido na base das estacas, devendo as causas serem melhor investigadas. O sucesso no enraizamento de Annonaceae é dependente da espécie, tendo aquelas do gênero Annona apresentado resultados superiores em relação às do gênero Rollinia.

Clonagem de quatro espécies de Annonaceae potenciais como porta-enxertos

O trabalho objetivou o estudo da capacidade de enraizamento de quatro espécies de Annonaceae potenciais como porta-enxertos (Annona glabra L., Annona montana Macfad, Rollinia emarginata e Rollinia mucosa Baill.) em três épocas do ano (verão, outono e inverno). Experimento conduzido em câmara de nebulização intermitente pertencente à UNESP/FCAV (21º15'22S e 48º18'58W), utilizando-se de estacas apicais enfolhadas em tratamento rápido (5 segundos) com ácido indolbutírico (IBA) (0; 1000; 3000; 5000 e 7000 mg.L-1), em esquema fatorial. Após 90 dias, avaliaram-se a porcentagem de estacas enraizadas, sobrevivência, comprimento e número de raízes. Como resultados, o IBA não incrementou a capacidade de enraizamento das espécies. A época do ano foi grande influente no sucesso de enraizamento, sendo o verão mais adequado. A. glabra e A. montana mostraram-se promissoras na propagação vegetativa via estaquia (clonagem). R. emarginata apresentou baixos valores para as características avaliadas, devendo ser intensificados experimentos na promoção do enraizamento em relação aos atuais valores obtidos. R. mucosa não apresentou resultados satisfatórios, ocorrendo necrose de tecido na base das estacas, devendo as causas serem melhor investigadas. O sucesso no enraizamento de Annonaceae é dependente da espécie, tendo aquelas do gênero Annona apresentado resultados superiores em relação às do gênero Rollinia.

Distribuição, tamanho populacional, hábitat e conservação do bicudinho-do-brejo Stymphalornis acutirostris Bornschein, Reinert e Teixeira, 1995 (Thamnophilidae)

The Marsh Antwren (Stymphalornis acutirostris) is restricted to the lowlands between Antonina Bay, in the coastal plain of the state of Paraná, and Itapocu river, in the northern coastal plain of the state of Santa Catarina (from 0 to c. 5 m a.s.l.). It doesn't occur continuously in this region, being found in eight populations that span over an total area of about 6,060 ha (= area of occupancy; 4,856.67 in Paraná and c. 1,200 in Santa Catarina). Nine habitat types used by the Marsh Antwren were defined, based on vegetation physiognomy, localization, dominancy of botanical species, dominant life-form and history of the region. Five of these are herbaceous (marshes), while four have an upper arboreal stratum and an herbaceous lower stratum with marsh plants. According to the classification criteria of the Brazilian vegetation proposed by the Radambrasil Project, they were classified as Pioneering Formation of Fluvial Influence, Pioneering Formation of Fluvial-marine Influence, and/or Pioneering Formation of Lacustrine Influence. They occur as patches or narrow strips ranging from 0.001 to 203.0 ha in the state of Paraná. They are found mainly in the interior of bays, in the lower courses of rivers that drain into bays, in alluvial plains, and between sand dunes in the coastal plain. Characteristic herbaceous species are cattail (Typha domingensis), bulrush (Scirpus californicus), Crinum salsum, Panicum sp. cf. P. mertensii, saw grass (Cladium mariscus) and Fuirena spp. Hibiscus pernambucensis is the characteristic bush species, and Calophyllum brasiliense, Tabebuia cassinoides, Annona glabra and Laguncularia racemosa are the characteristic arboreal species. The Marsh Antwren lives in herbaceous vegetation, but also uses bushes and branches of small tress. It has low flight capacity and a single flight of more than 25 m was never recorded. Territories of 0.25 ha were estimated in one kind of habitat (tidal marsh) (= 8 individuals per hectare) and of 3.2 ha in another one (saw grass marsh) (= 0.62 individual per hectare). The global population estimate is of about 17,700 mature individuals (13,700 in Paraná and 4,000 in Santa Catarina). The species is really under threat of extinction, mainly because of it's restricted geographical distribution and habitat loss by human activities and biological contamination caused by invasion of exotic grasses (Urochloa arrecta and Brachiaria mutica).

Avaliação in vitro da atividade antifúngica de óleos essenciais e extratos de plantas presentes na região amazônica sobre cepa de Candida albicans

A candidíase é uma doença fúngica oportunista causada pela proliferação de espécies de Candida, principalmente a Candida albicans, sendo a espécie mais patogênica em humanos. Muitos antifúngicos existentes no mercado apresentam efeitos colaterais indesejáveis ou podem induzir a resistência fúngica, principalmente em indivíduos imunodeprimidos. Em odontologia, as pesquisas com produtos naturais têm aumentado nos últimos anos, devido à busca por novos produtos com maior atividade farmacológica, com menor toxicidade e mais acessíveis à população. Dentro dessa perspectiva, o objetivo desta pesquisa foi avaliar in vitro a atividade antifúngica de óleos e extratos vegetais presentes na região Amazônica e determinar a concentração inibitória mínima das espécies que apresentaram atividade antifúngica frente à cepa padrão de Candida albicans (ATCC 90028). A atividade antifúngica dos óleos essenciais Copaifera multijuga, Carapa guianenses, Piper aduncum e Piper hispidinervum foi realizada pelo método de difusão em meio sólido utilizando cavidades em placa “in natura” e em diluições de 32 a 2% para determinação da concentração inibitória mínima. Os extratos Annona glabra, Azadiractha indica, Bryophyllum calycinum, Eleutherine plicata, Mammea americana, Psidium guajava e Syzygium aromaticum foram testados nas concentrações de 500mg/mL, 250mg/mL, 125mg/mL e 62,5 mg/mL e a atividade antifúngica foi realizada pelo método de difusão em meio sólido utilizando discos de papel filtro. Os óleos testados, não apresentaram efeito antifúngico sobre a cepa de Candida albicans, e dos extratos testados somente os extratos de Eleutherine plicata, Psidium guajava e Syzygium aromaticum apresentaram atividade antifúngica com concentração inibitória mínima, respectivamente, de 250mg/mL, 125mg/mL e 62,5mg/mL Diante dos resultados apresentados, os extratos de Eleutherine plicata, Psidium guajava e Syzygium aromaticum apresentam potencial efeito inibitório para crescimento de Candida albicans, servindo de guia para a seleção de plantas com atividades antifúngicas para futuros trabalhos toxicológico e farmacológico.

Propagação de espécies de Annonaceae com estacas caulinares

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Impact of Aqueous Plant Extracts on Trigona spinipes (Hymenoptera: Apidae)

The stingless bees are an important component of the insect biomass in many tropical areas, due to their collection of nectar and pollen. Trigona spinipes is a widely distributed species in South America, and described as a pollinator of many crops that can be used in a commercial pollinating system. The effects of plant extracts on insects are studied because of the demand for organic food and their selectivity to natural enemies. Plant insecticides are reported as a potential agent for the control of insect pests, however little is known about their impact on beneficial insects. This study investigated the survival of Trigona spinipes (Hymenoptera: Apidae, Meliponini) Fabricius, after exposure to the leaf extracts of Azadiracha indica (Meliaceae), Lippia sidoides (Verbenaceae), Sapindus saponaria (Sapindaceae), Anonna squamosa (Anonnaceae) Cymbopogon winterianum (Poaceae), Corimbia citriodora (Myrtaceae), Jatropha curcas (Euphorbiaceae) and Ricinus communis (Euphorbiaceae) and of seeds of Azadiracha indica, Ricinus communis Nordestina and AL Guarany varieties and Jatropha curcas. The extracts that had the greatest influence on the survival of the bees were A. indica at 3% and 7% of concentration, A. squamosa at a concentration of 10% with 68.89% survival and green leaf of R. communis at a concentration of 7%. The results show that although the extracts were effective in controlling pests, they may also affect the pollinator Trigona spinipes.

Odontopus brevirostris (Hustache, 1936) (Coleoptera, Curculionidae) associated with new host plants belonging to Annona (Annonaceae)

Odontopus brevirostris (Hustache, 1936) feeding on Annona squamosa L., A. cherimola Mill., A. glabra L., and A. muricata L. was observed. The last three host plants are recorded for the first time. The endophitic oviposition occurs in the veins of the ventral surface of the young leaves. The larvae, leaf miners, eat the parenchyma and the adults make small holes in the leaves. The pupation occurs in spherical cocoons protected by a sort of nest (pupation chamber) between the two epidermal layers.

Biotechnology applied to Annona species: a review

Annonaceae is an ancient family of plants including approximately 50 genera growing worldwide in a quite restricted area with specific agroclimatic requirements. Only few species of this family has been cultivated and exploited commercially and most of them belonging to the genus Annona such as A. muricata, A. squamosa, the hybrid A. cherimola x A. squamosa and specially Annona cherimola: the cherimoya, commercially cultivated in Spain, Chile, California, Florida, México, Australia, Ecuador, Peru, Brazil, New Zealand and several countries in South and Central America. The cherimoya shows a high degree of heterozygosis, and to obtain homogeneous and productive orchards it is necessary to avoid the propagation by seeds of this species. Additionally, the traditional methods of vegetative propagation were inefficient and inadequate, due to the low morphogenetic potential of this species, and the low rooting rate. The in vitro tissue culture methods of micropropagation can be applied successfully to cherimoya and other Annona sp to overcome these problems. Most of the protocols of micropropagation and regeneration were developed using the cultivar Fino de Jete, which is the major cultivar in Spain. First it is developed the method to micropropagate the juvenile material of cherimoya (ENCINA et al., 1994), and later it was optimized a protocol to micropropagate adult cherimoya genotypes selected by outstanding agronomical traits (PADILLA and ENCINA, 2004) and further it was improved the process through micrografting (PADILLA and ENCINA, 2011).At the present time we are involved in inducing and obtaining new elite genotypes, as part of a breeding program for the cherimoya and other Annonas, using and optimizing different methodologies in vitro: a) Adventitious organogenesis and regeneration from cellular cultures (ENCINA, 2004), b) Ploidy manipulation of the cherimoya, to obtain haploid, tetraploid and triploid plants (seedless), c) Genetic transformation, for the genes introduction to control the postharvest processes and the genes introduction to provide resistance to pathogen and insects and d) Micropropagation and regeneration of other wild Annona or related Annonaceae species such as: Annona senegalensis, A. scleroderma, A. montana, A. reticulata, A. glabra, A. diversifolia and Rollinia sp.

Florivory and sex ratio in Annona dioica St. Hil. (Annonaceae) in the Pantanal at Nhecolândia, southwestern Brazil

Annona dioica St. Hil. is a species that grows to approximately 2 m tall and is very widespread in the cerrados. Individual plants of this androdioecious species produce numerous hermaphroditic or male flowers, but few fruits. The aim of this study was to determine the sex ratio among the plants and to compare the frequency of herbivory between male and hermaphroditic flowers. The fieldwork was done by studying flowering plants in grasslands used as pasture for cattle at Fazenda Nhumirim. One hundred and forty-seven male plants and 71 hermaphroditic plants were examined and produced a total of 194 and 94 flowers, respectively, during the study period. The male:hermaphrodite sex ratio was 2.07:1, and was similar to the male:hermaphrodite flower ratio of 2.06:1. The frequency of florivory rate in hermaphrodites was significantly higher than in male flowers (33.0%, n = 31, and 25.7%, n = 50, respectively; G = 14.83; d.f. = 1; p < 0.001). The mean fresh weights of male and hermaphroditic flowers were significantly different (8.38 ± 2.40 g vs. 6.93 ± 2.68 g, respectively; 0 ± SEM; n = 50 each; t = 2.479; d.f. = 49; p = 0.017). These results indicate that the low fruit set in this species can be explained by the sex ratio, the greater herbivory of hermaphroditic flowers and the probable absence of pollinators.

Chemical constituents of the volatile oil from leaves of Annona coriacea and in vitro antiprotozoal activity

The essential oil of the leaves from Annona coriacea Mart., Annonaceae, was extracted by hydrodistillation in a Clevenger apparatus and analyzed by GC/MS and GC/FID. The oil yield was 0.05% m/m. Sixty compounds were identified, in a complex mixture of sesquiterpenes (76.7%), monoterpenes (20.0%) and other constituents (3.3%). Bicyclogermacrene was its major compound (39.8%) followed by other sesquiterpenes. Most of the monoterpenes were in low concentration (<1%). Only β-pinene and pseudolimonene presented the highest level of 1.6%. The volatile oil presented anti-leishmanial and trypanocidal activity against promastigotes of four species of Leishmania and trypomastigotes of Trypanosoma cruzi, showing to be more active against Leishmania (L.) chagasi (IC50 39.93 µ g/mL) (95% CI 28.00-56.95 µ g/mL).

Ipolamiide and fulvoipolarniide from Stachytarpheta glabra (Verbenaceae): A structural and spectroscopic characterization

The phenylethanoid glycoside acteoside and the iridoids ipolamiide and 4-methoxycarbonyl-7-methylcyclopenta[c]pyran (fulvoipolamiide) were isolated from the leaves of Stachytarpheta glabra. The solid state structure of fulvoipolamiide was confirmed by X-ray diffraction studies. The molecules of fulvoipolamiide are displayed in layers parallel to the crystallographic axis a. This molecule is planar with electron delocalization in the fused ring system and the pyran rings of adjacent layers in the solid state structure are involved in a pi-pi stacking interaction. Raman spectroscopy has also been used to characterize the most important bands present in the spectra of fulvoipolamiide and ipolamiide, and comparison made with literature allows the assignment of some key markers, specially the bands in the 1600-1700 cm(-1) range. (C) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

Relationship between fruit traits of custard apple trees (Annona squamosa L.)

The objective of this study was to estimate simple and partial coefficients of correlation, as well as to divide their effects into direct and indirect using path analysis for custard apple tree traits. Twenty half-sibling progenies were evaluated in a randomized block design with five replicates, and plots consisting of four plants. Six traits were evaluated in the first cropping season (mean number of seeds per fruit and mean weight of the pericarp, pulp, pedicel, seeds per fruit, and the whole fruit), while five traits were evaluated in the first three cropping seasons (mean fruit length and width, total number of fruits ha-1, mean fruit weight (in both types of analyses), and fruit yield in kg ha-1). The results of this work led to the conclusion that doing selection based on simple correlation estimates may not be convenient, since not always a cause and effect relationship can be verified between two traits. Positive correlations were obtained between number of seeds and seed weight, and between number of fruits and yield. The greatest direct effects were those obtained for pulp weight on fruit weight and for mean number and weight of fruits on fruit yield. The most important indirect effects were obtained for number of seeds and pericarp weight, obtained via pulp weight, on fruit weight, and for fruit length and width, obtained via mean fruit weight, on fruit yield.

Uso de fitorreguladores no desenvolvimento de frutos na atemoieira (Annona cherimola x A. squamosa cv. Gefner)

Este trabalho foi realizado com atemoieiras 'Gefner', com o objetivo de avaliar o efeito de fitorreguladores no pegamento de frutos. Foram realizados três experimentos, no município de Matias Cardoso, Minas Gerais. No primeiro, avaliaram-se quatro tipos de auxinas: os ácidos indol butírico (AIB), indol acético (AIA), naftaleno acético (ANA) e diclorofenoxiacético (2,4-D), combinados com três concentrações (150, 300 e 450 mg L-1). O ácido giberélico (GA3) também foi aplicado, na dosagem de 1 g L-1, aos 14 e 21 dias após a primeira aplicação das auxinas. No segundo experimento, testaram-se o AIA, AIB e ANA, combinados em duas concentrações (450 e 600 mg L-1). No terceiro experimento, avaliou-se a aplicação do ANA na dose de 450 mg L-1 associado com número de aplicações: semanal até 35 dias; semanal até 70 dias; semanal até 105 dias e a cada duas semanas. O GA3 foi utilizado na dosagem de 1 g L-1, em quatro aplicações, aos 13, 27, 41 e 54 dias após a primeira aplicação do ANA. Em todos os experimentos, a testemunha foram flores polinizadas artificialmente. ANA foi a auxina sintética que propiciou as maiores médias de pegamento dos frutos, com 8% até aos 148 dias após a primeira aplicação. A utilização de 2,4-D acarretou as menores percentagens de pegamento dos frutos; no 14° dia da aplicação, mais nenhum fruto foi observado. Independentemente do tipo de fitorregulador, os tratamentos não permitiram o desenvolvimento de frutos comerciais de atemoia.