Estudo taxonômico de Sapotaceae Juss. do litoral Paraense

Este trabalho consiste no tratamento taxonômico de Sapotaceae Juss. nas restingas do litoral paraense. Com auxilio de estereomicroscópio foram feitas as descrições morfológicas das partes vegetativas e reprodutivas. Utilizou-se literatura especializada, coleções identificadas por especialistas para confirmar as características diferenciais dos táxons e montada uma chave de identificação para as espécies. Foram descritas cinco espécies e quatro subespécies, distribuídas em quatro gêneros: Manilkara bidentata subsp. bidentata, M. bidentata subsp. surinamensis, M. triflora, M. paraensis; Micropholisvenulosa, M. gnaphaloclados; Pouteria ramiflora, P. reticulata subsp. reticulata and Pradosia schomburgkiana subsp. schomburgkiana. O gênero Manilkara Adans.foi o mais representativo com duas espécies e duas subespécies. A formação floresta de restinga foi o ecossistema que apresentou o maior número de táxons.

Antimicrobial activity of wax and hexane extracts from Citrus spp. peels

Antibacterial and antifungal properties of wax and hexane extracts of Citrus spp. peels were tested using bioautographic and microdilution techniques against three plant pathogenic fungi (Penicillium digitatum, Curvularia sp., and Colletotrichum sp.), two human pathogens (Trichophyton mentagrophytes and Microsporum canis), and two opportunistic bacteria (Escherichia coli and Staphylococcus aureus). Two polymethoxylated flavonoids and a coumarin derivative, were isolated and identified from peel extracts, which presented antimicrobial activity especially against M. canis and T. mentagrophytes: 4',5,6,7,8-pentamethoxyflavone (tangeritin) and 3',4',5,6,7,8-hexamethoxyflavone (nobiletin) from C. reticulata; and 6,7-dimethoxycoumarin (also known as escoparone, scoparone or scoparin) from C. limon.

Antimicrobial activity of Brazilian copaiba oils obtained from different species of the Copaifera genus

The antimicrobial activity of copaiba oils was tested against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeast, and dermatophytes. Oils obtained from Copaifera martii, Copaifera officinalis, and Copaifera reticulata (collected in the state of Acre) were active against Gram-positive species (Staphylococcus aureus, methicillin-resistant S. aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus subtilis, and Enterococcus faecalis) with minimum inhibitory concentrations ranging from 31.3-62.5 µg/ml. The oils showed bactericidal activity, decreasing the viability of these Gram-positive bacteria within 3 h. Moderate activity was observed against dermatophyte fungi (Trichophyton rubrum and Microsporum canis). The oils showed no activity against Gram-negative bacteria and yeast. Scannning electron microscopy of S. aureus treated with resin oil from C. martii revealed lysis of the bacteria, causing cellular agglomerates. Transmission electron microscopy revealed disruption and damage to the cell wall, resulting in the release of cytoplasmic compounds, alterations in morphology, and a decrease in cell volume, indicating that copaiba oil may affect the cell wall.

The life history of Pygidiopsis macrostomum Travassos, 1928 (Digenea: Heterophyidae)

The life history of the trematode Pygidiopsis macrostomum Travassos, 1928 is described for the first time. Rediae and cercariae were obtained from naturally infected snails Heleobia australis (d´Orbigny), a new first intermediate host. Metacercariae were found encysted in the mesenteries of three naturally infected guppies, Phalloptychus januarius (Hensel), Jenynsia multidentata (Jenyns) (new host records) and Poecilia vivipara Bloch and Schneider. Experimental infections were successfully completed in the intermediate hosts H. australis and Poe. vivipara reared in the laboratory and hamsters Mesocricetus auratus Waterhouse were utilised as a definitive host.

Differential transgene expression profiles from rAAV2/1 vectors using the tetON and CMV promoters in the rat brain.

The biodistribution of transgene expression in the CNS after localized stereotaxic vector delivery is an important issue for safety of gene therapy for neurological diseases. The cellular specificity of transgene expression from rAAV2/1 vectors using the tetON expression cassette in comparison with the CMV promoter was investigated in the rat nigrostriatal pathway. After intrastriatal injection, although GFP was mainly expressed into neurons with both vectors, the relative proportions of DARPP-32+ projection neurons and parvalbumin+ interneurons were respectively 13:1 and 2:1 for the CMV and tetON vectors. DARP32+ neurons projecting to the globus pallidus were strongly GFP+ with both vectors, whereas those projecting to the substantia nigra pars reticulata (SNpr) were efficiently labeled by the CMV but poorly by the tetON vector. Numerous GFP+ cells were evidenced in the subventricular zone with both vectors. However, in the olfactory bulb (OB), GFP+ neurons were observed with the CMV but not the tetON vector. We conclude that the absence of significant amounts of transgene product in distant regions (SN and OB) constitutes a safety advantage of the AAV2/1-tetON vector for striatal gene therapy. Midbrain injections resulted in selective GFP expression in tyrosine hydroxylase+ neurons by the tetON vector whereas with the CMV vector, GFP+ cells covered a widespread area of the midbrain. The biodistribution of GFP protein corresponded to that of the transcripts and not of the viral genomes. We conclude that the rAAV2/1-tetON vector constitutes an interesting tool for specific transgene expression in midbrain dopaminergic neurons.

Efeitos da temperatura e do alimento no desenvolvimento de Dysdercus maurus Distant (Hemiptera, Pyrrhocoridae)

Dysdercus maurus Distant, 1901 (Hemiptera, Pyrrhocoridae) é uma importante praga de Gossypium spp. (algodoeiro), Citrus Sinensis Osbeck (Rutaceae) (laranjeira) e Citrus reticulata (Rutaceae) (tangerineira), além de sementes de Chorisia speciosa St. Hil. (paineira). Este trabalho objetivou avaliar os efeitos da temperatura e do alimento no desenvolvimento de D. maurus. Foram realizados oito tratamentos, seis em que os percevejos foram alimentados com sementes de paineira e mantidos a 15, 18, 20, 25 e 30 ± 1ºC, UR 80 ± 3% e fotofase de 12 h ou em condições ambientais de laboratório (23,5 ± 2,6ºC, UR 73,3 ± 9,9 %), e dois em que foram alimentados com sementes de algodão variedade IAC-22 e mantidos a 25 e 30ºC. Em todos os tratamentos foram observados cinco estágios imaturos. O aumento da temperatura proporcionou diminuição do tempo de desenvolvimento. A temperatura de 15ºC foi letal para ovos e ninfas de D. maurus. A menor mortalidade de ninfas ocorreu quando os percevejos foram alimentados com sementes de algodão a 25ºC (24,07%). A menor temperatura base (Tb) foi obtida para o 1º ínstar (11,54ºC) e a maior para o 2º ínstar (15,33ºC). As fêmeas de D. maurus necessitam de maior quantidade de graus-dias (329,93 graus-dias) que os machos (300,49 graus-dias) para atingir o estádio adulto.

Differential transgene expression profiles in rat brain, using rAAV2/1 vectors with tetracycline-inducible and cytomegalovirus promoters.

The biodistribution of transgene expression in the CNS after localized stereotaxic vector delivery is an important issue for the safety of gene therapy for neurological diseases. The cellular specificity of transgene expression from rAAV2/1 vectors (recombinant adeno-associated viral vectors pseudotyped with viral capsids from serotype 1) using the tetracycline-inducible (TetON) expression cassette in comparison with the cytomegalovirus (CMV) promoter was investigated in the rat nigrostriatal pathway. After intrastriatal injection, although green fluorescent protein (GFP) was expressed mainly in neurons with both vectors, the relative proportions of DARPP-32-positive projection neurons and parvalbumin-positive interneurons were, respectively, 13:1 and 2:1 for the CMV and TetON vectors. DARP32-positive neurons projecting to the globus pallidus were strongly GFP positive with both vectors, whereas those projecting to the substantia nigra pars reticulata (SNpr) were efficiently labeled by the CMV vector but poorly by the TetON vector. Numerous GFP-positive cells were evidenced in the subventricular zone with both vectors. However, in the olfactory bulb (OB), GFP-positive neurons were observed with the CMV vector but not the TetON vector. We conclude that the absence of significant amounts of transgene product in distant regions (SN and OB) constitutes a safety advantage of the AAV2/1-TetON vector for striatal gene therapy. Midbrain injections resulted in selective GFP expression in tyrosine hydroxylase-positive neurons by the TetON vector whereas with the CMV vector, GFP-positive cells covered a widespread area of the midbrain. The biodistribution of GFP protein corresponded to that of the transcripts and not of the viral genomes. We conclude that the rAAV2/1-TetON vector constitutes an interesting tool for specific transgene expression in midbrain dopaminergic neurons.

Fungos micorrízicos arbusculares em campos de murundus após a conversão para sistemas agrícolas no cerrado

Os campos de murundus são fitofisionomias de ocorrência no bioma Cerrado com funções ecológicas importantes para a manutenção da sustentabilidade do solo; e a conversão para sistemas agrícolas pode provocar alterações nos atributos físicos, químicos e biológicos do solo ainda não avaliados, como a redução da biodiversidade de fungos micorrízicos arbusculares. O objetivo deste estudo foi avaliar como a conversão dos campos de murundus em áreas de sistema agrícola altera a comunidade de fungos micorrízicos arbusculares (FMAs). Os tratamentos constituíram-se de três áreas agrícolas submetidas ao mesmo manejo e uso agrícola em uma cronossequência (7, 11 e 14 anos) e duas na área referência [campo de murundus, em topo (TM) e entre os murundus (EM)]. Os esporos de FMAs foram extraídos, contados, e as espécies de FMAs identificadas pelas características morfológicas. O total de FMAs recuperado foi de 27 espécies, sendo nove espécies da família Acaulosporaceae, uma Ambisporaceae, sete Glomeraceae, duas Claroideoglomeraceae e oito Gigasporaceae. Desse total, as espécies Acaulospora scrobiculata, Glomus macrocarpum, e Gigaspora sp. ocorreram em todas as áreas nos dois anos estudados. As espécies Acaulospora mellea, Acaulospora cavernata, Acaulospora colombiana, Glomus diaphanum, Scutellospora reticulata e Scutellospora sp. só foram encontradas nos campos de murundus. A conversão de campos de murundus em área agrícola modificou a ocorrência e composição da comunidade de FMAs; as espécies Acaulospora scrobiculata, Glomus macrocarpum, Claroideoglomus etunicatus e Gigaspora sp ocorreram em todas as áreas e a não ocorrência de algumas espécies nas áreas de cultivo, como as espécies Acaulospora cavernata, Acaulospora colombiana, Rhizophagus diaphanus, Scutellospora reticulata e Scutellospora sp. representa perda de diversidade desses fungos. Portanto, este estudo tratou-se do primeiro relato da ocorrência e da estrutura da comunidade de FMAs em fitofisionomia de campos de murundus, contribuiu para o maior entendimento dos FMAs no bioma Cerrado e demonstrou que as alterações promovidas pela conversão da área alteraram a ocorrência e a diversidade dos fungos micorrízicos arbusculares.

Freqüência de híbridos em cruzamento entre tangerina 'cravo' e laranja 'pêra': análise de marcadores morfológicos e RAPD

Os objetivos deste trabalho foram avaliar a freqüência de híbridos de cruzamento entre tangerina 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) e laranja 'Pêra' (Citrus sinensis (L.) Osbeck), o uso de marcadores morfológicos e moleculares (RAPD) na identificação precoce de plantas zigóticas, e a variabilidade dos híbridos. A porcentagem de híbridos foi maior na população germinada em placas de Petri (19,4%). Verificou-se que quanto maior a competição entre os "seedlings" por espaço e nutrientes, menor a freqüência de plantas híbridas. A identificação dos híbridos não foi possível apenas com o uso de marcadores morfológicos. A análise morfológica dos híbridos revelou elevada variabilidade.

Diversidade genética entre híbridos de tangerina 'Cravo' e laranja 'Pêra'

Marcadores moleculares RAPD foram utilizados para avaliar a diversidade genética em uma população de 94 híbridos de tangerina 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) com laranja 'Pêra' (C. sinensis (L.) Osbeck), obtidos por polinização controlada. Nas reações de amplificação foram usados 102 "primers" decâmeros de seqüência arbitrária, que amplificaram 640 fragmentos, sendo 77,2% monomórficos entre os parentais. Utilizou-se o coeficiente de Jaccard para estimar a similaridade genética entre os híbridos, o método UPGMA para gerar o fenograma (NTSYS 1,7) e o software BOOD para determinar a consistência de cada agrupamento. Verificou-se que a laranja 'Pêra' apresenta maior heterozigosidade que a tangerina 'Cravo', sendo, respectivamente, 180 e 126 os números observados de loci em heterozigose. Houve alta similaridade genética entre os parentais, caracterizada pelo baixo polimorfismo de marcadores RAPD. Não houve a formação de agrupamentos estatisticamente significativos dos híbridos entre si e com os parentais, demonstrando que a constituição genética dos híbridos foi originada pela segregação independente das marcas RAPD, sendo quebrado o efeito de ligação em função do tamanho amostral em estudo. Híbridos com maior similaridade genética em relação à tangerina 'Cravo' e laranja 'Pêra' podem ser facilmente selecionados a partir de marcadores RAPD.

Selection processes in a citrus hybrid population using RAPD markers

The objective of this work was to evaluate the processes of selection in a citrus hybrid population using segregation analysis of RAPD markers. The segregation of 123 RAPD markers between 'Cravo' mandarin (Citrus reticulata Blanco) and 'Pêra' sweet orange (C. sinensis (L.) Osbeck) was analysed in a F1 progeny of 94 hybrids. Genetic composition, diversity, heterozygosity, differences in chromosomal structure and the presence of deleterious recessive genes are discussed based on the segregation ratios obtained. A high percentage of markers had a skeweness of the 1:1 expected segregation ratio in the F1 population. Many markers showed a 3:1 segregation ratio in both varieties and 1:3 in 'Pêra' sweet orange, probably due to directional selection processes. The distribution analysis of the frequencies of the segregant markers in a hybrid population is a simple method which allows a better understanding of the genetics of citrus group.

Genetic linkage maps of 'Pêra' sweet orange and 'Cravo' mandarin with RAPD markers

The objective of this work was to construct linkage maps of 'Pêra' sweet orange [Citrus sinensis (L.) Osbeck] and 'Cravo' mandarin (Citrus reticulata Blanco) using RAPD markers and the pseudo-testcross strategy. The parents were chosen according to the resistance/susceptibility to citrus variegate chlorosis (CVC). The segregation of 176 markers was analyzed in 94 progeny of F1 hybrids, which were obtained from controlled crossings. The linkage map of 'Pêra' sweet orange had 117 markers defined by 12 linkage groups, which spanned 612.1 cM. Only six markers could not be linked to the linkage group and 48.7% of the markers showed segregation distortion. The linkage map of 'Cravo' mandarin had 51 markers defined by 12 linkage groups, which spanned 353.3 cM. Only two markers did not link to the groups and 15.7% showed segregation distortion. The construction of linkage maps is relevant to future mapping studies of the inheritance of CVC, citrus canker and leprosis.

Respostas da fotossíntese de três espécies de citros a fatores ambientais

Foram avaliadas as respostas das trocas gasosas à irradiância, à temperatura, ao déficit de pressão de vapor e à concentração interna de CO2 em plantas jovens de laranjeira 'Valência', tangor 'Murcote' e lima ácida 'Tahiti', sob condições controladas. As taxas máximas de assimilação de CO2 foram de 9,8, 12,8 e 13,0 µmol m-2 s-1 em 'Valência', 'Murcote' e 'Tahiti', respectivamente. Diferenças na taxa de assimilação de CO2 foram relacionadas com a condutância estomática e com a eficiência instantânea de carboxilação. A saturação da fotossíntese pela luz foi em torno de 750 µmol m-2 s-1 em 'Valência'. Em 'Murcote' e 'Tahiti', não houve um ponto evidente de saturação lumínica, pois houve pequenos aumentos da assimilação de CO2 acima de 1.000 µmol m-2 s-1. Os pontos de compensação de CO2 foram 4,8, 5,8 e 5,4 Pa em 'Valência', 'Murcote' e 'Tahiti', respectivamente. Temperaturas das folhas entre 25ºC e 30ºC corresponderam à faixa ótima para a fotossíntese em 'Valência' e ao redor de 30ºC em 'Murcote' e 'Tahiti'. Quedas das taxas de assimilação de CO2 em temperaturas acima ou abaixo da ideal ocorreram em razão de quedas parciais na condutância estomática e na eficiência instantânea de carboxilação. A taxa de assimilação de CO2 também decresceu com o aumento do déficit de pressão de vapor de 1,5 para 3,5 kPa. Este efeito foi mais acentuado quando a temperatura aumentou de 28ºC para 35ºC.

Diversidade genética entre híbridos de laranja-doce e tangor 'Murcott' avaliada por fAFLP e RAPD

O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade genética em uma população de 148 híbridos de tangor 'Murcott' (Citrus reticulata Blanco x C. sinensis L. Osbeck) e laranja 'Pêra' (C. sinensis L. Osbeck) obtidos por polinização controlada, pelo uso de marcadores fAFLP e RAPD. Marcadores polimórficos (416 marcadores fAFLP e 33 RAPD) foram utilizados para avaliar a similaridade genética entre os híbridos, calculada com o coeficiente Jaccard pelo método UPGMA. A consistência de cada agrupamento foi determinada pelo programa BOOD. Houve alta similaridade genética entre os parentais. A laranja 'Pêra' apresentou maior número (132) de loci em heterozigose em relação ao tangor 'Murcott' (105), corroborando a teoria de origem híbrida para a laranja-doce. Observaram-se dois grupos distintos de plantas, e um deles abrangeu 80% dos híbridos com maior similaridade com a laranja 'Pêra'. A análise bootstrap não revelou consistência estatística entre esses grupos. Marcadores fAFLP são mais eficientes na avaliação do polimorfismo, sendo indicados para seleção de indivíduos híbridos mais próximos a um dos parentais.

Diverging Cave- and River-Dwelling Newts Exert the Same Mate Preference in their Native Light Conditions

When colonizing a new habitat, populations must adapt their sexual behaviour to new ecological constraints. Because caves display drastically different conditions from surface habitats and cave animals are deprived from visual information, hypogean populations are expected to have modified their mate preference and signalling behaviour after cave colonization. Here, we experimentally examined the female preference and the sexual behaviour of brook newts Calotriton asper from different cave and river populations, either in light or in darkness. Our results suggest that females prefer large individuals in both hypogean and epigean populations, but that this preference is only expressed in the light conditions of their native habitat. Hence, some mate choice criteria would be maintained across genetically divergent populations and throughout dissimilar habitats. However, this sexual behaviour is likely to be expressed via a different sensory pathway in the different habitats, suggesting that a sensory shift has occurred in cave populations, enabling animals to communicate through a non-visual channel.