Functionalization of microstructured open-porous bioceramic scaffolds with human fetal bone cells.

Bone substitute materials allowing trans-scaffold migration and in-scaffold survival of human bone-derived cells are mandatory for development of cell-engineered permanent implants to repair bone defects. In this study, we evaluated the influence on human bone-derived cells of the material composition and microstructure of foam scaffolds of calcium aluminate. The scaffolds were prepared using a direct foaming method allowing wide-range tailoring of the microstructure for pore size and pore openings. Human fetal osteoblasts (osteo-progenitors) attached to the scaffolds, migrated across the entire bioceramic depending on the scaffold pore size, colonized, and survived in the porous material for at least 6 weeks. The long-term biocompatibility of the scaffold material for human bone-derived cells was evidenced by in-scaffold determination of cell metabolic activity using a modified MTT assay, a repeated WST-1 assay, and scanning electron microscopy. Finally, we demonstrated that the osteo-progenitors can be covalently bound to the scaffolds using biocompatible click chemistry, thus enhancing the rapid adhesion of the cells to the scaffolds. Therefore, the different microstructures of the foams influenced the migratory potential of the cells, but not cell viability. Scaffolds allow covalent biocompatible chemical binding of the cells to the materials, either localized or widespread integration of the scaffolds for cell-engineered implants.

Virucidal activity of Colombian Lippia essential oils on dengue virus replication in vitro

The inhibitory effect of Lippia alba and Lippia citriodora essential oils on dengue virus serotypes replication in vitro was investigated. The cytotoxicity (CC50) was evaluated by the MTT assay and the mode of viral inhibitory effect was investigated with a plaque reduction assay. The virus was treated with the essential oil for 2 h at 37ºC before cell adsorption and experiments were conducted to evaluate inhibition of untreated-virus replication in the presence of oil. Antiviral activity was defined as the concentration of essential oil that caused 50% reduction of the virus plaque number (IC50). L. alba oil resulted in less cytotoxicity than L. citriodora oil (CC50: 139.5 vs. 57.6 μg/mL). Virus plaque reduction for all four dengue serotypes was observed by treatment of the virus before adsorption on cell. The IC50 values for L. alba oil were between 0.4-32.6 μg/mL and between 1.9-33.7 μg/mL for L. citriodora oil. No viral inhibitory effect was observed by addition of the essential oil after virus adsorption. The inhibitory effect of the essential oil seems to cause direct virus inactivation before adsorption on host cell.

Effects of triamcinolone acetonide on vessels of the posterior segment of the eye.

PURPOSE: This study investigates the effects of triamcinolone acetonide (TA) on retinal endothelial cells in vitro and explores the potential vascular toxic effect of TA injected into the vitreous cavity of rats in vivo. METHODS: Subconfluent endothelial cells were treated with either 0.1 mg/ml or 1 mg/ml TA in 1% ethanol. Control cells were either untreated or exposed to 1% ethanol. Cell viability was evaluated at 24 h, 72 h, and five days using the tetrazolium 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 phenyltetrazolium bromide test (MTT) and lactate dehydrogenase (LDH) assays. Cell proliferation was evaluated by 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) test. Apoptosis was evaluated by terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling assay (TUNEL assay), annexin-binding, and caspase 3 activation. Caspase-independent cell deaths were investigated by immunohistochemistry using antibodies against apoptosis inducing factor (AIF), cytochrome C, microtubule-associated protein (MAP)-light chain 3 (MAP-LC3), and Leukocyte Elastase Inhibitor/Leukocyte Elastase Inhibitor-derived DNase II (LEI/L-DNase II). In vivo, semithin and ultrathin structure analysis and vascular casts were performed to examine TA-induced changes of the choroidal vasculature. In addition, outer segments phagocytosis assay on primary retinal pigment epithelium (RPE) cells was performed to assess cyclooxygenase (COX-2) and vascular endothelial growth factor (VEGF) mRNAs upregulation with or without TA. RESULTS: The inhibitory effect of TA on cell proliferation could not explain the significant reduction in cell viability. Indeed, TA induced a time-dependent reduction of bovine retinal endothelial cells viability. Annexin-binding positive cells were observed. Cytochrome C was not released from mitochondria. L-DNase II was found translocated to the nucleus, meaning that LEI was changed into L-DNase II. AIF was found nuclearized in some cells. LC3 labeling showed the absence of autophagic vesicles. No autophagy or caspase dependent apoptosis was identified. At 1 mg/ml TA induced necrosis while exposure to lower concentrations for 3 to 5 days induced caspase independent apoptosis involving AIF and LEI/L-DNase II. In vivo, semithin and ultrathin structure analysis and vascular casts revealed that TA mostly affected the choroidal vasculature with a reduction of choroidal thickness and increased the avascular areas of the choriocapillaries. Experiments performed on primary RPE cells showed that TA downregulates the basal expression of COX-2 and VEGF and inhibits the outer segments (OS)-dependent COX-2 induction but not the OS-dependent VEGF induction. CONCLUSIONS: This study demonstrates for the first time that glucocorticoids exert direct toxic effect on endothelial cells through caspase-independent cell death mechanisms. The choroidal changes observed after TA intravitreous injection may have important implications regarding the safety profile of TA use in human eyes.

Basic calcium phosphate crystals induce monocyte/macrophage IL-1(beta) secretion through the NLRP3 inflammasome in vitro.

Basic calcium phosphate (BCP) crystals are associated with severe osteoarthritis and acute periarticular inflammation. Three main forms of BCP crystals have been identified from pathological tissues: octacalcium phosphate, carbonate-substituted apatite, and hydroxyapatite. We investigated the proinflammatory effects of these BCP crystals in vitro with special regard to the involvement of the NLRP3-inflammasome in THP-1 cells, primary human monocytes and macrophages, and mouse bone marrow-derived macrophages (BMDM). THP-1 cells stimulated with BCP crystals produced IL-1β in a dose-dependent manner. Similarly, primary human cells and BMDM from wild-type mice also produced high concentrations of IL-1β after crystal stimulation. THP-1 cells transfected with short hairpin RNA against the components of the NLRP3 inflammasome and mouse BMDM from mice deficient for NLRP3, apoptosis-associated speck-like protein, or caspase-1 did not produce IL-1β after BCP crystal stimulation. BCP crystals induced macrophage apoptosis/necrosis as demonstrated by MTT and flow cytometric analysis. Collectively, these results demonstrate that BCP crystals induce IL-1β secretion through activating the NLRP3 inflammasome. Furthermore, we speculate that IL-1 blockade could be a novel strategy to inhibit BCP-induced inflammation in human disease.

Päihtyneen potilaan jatkohoitoon siirtämisen kriteerit : kehitystyö Malmin sairaalan päivystyspoliklinikalle

Työn tarkoituksena oli tuottaa Malmin sairaalan päivystyspoliklinikan henkilökunnan käyttöön päihtyneen potilaan jatkohoitoon siirtämisen kriteeristö, jonka avulla voidaan arvioida päihtyneen potilaan tilannetta ja jatkohoitoon siirtämistä sekä tukea jatkohoitoon siirtämisen yhteydessä annettavaa potilasraporttia. Päihtyneen potilaan jatkohoitoon siirtämisen kriteerit muodostuivat kirjallisuuskatsauksen sekä Malmin sairaalan asiantuntijatyöryhmän avulla. Kirjallisuuskatsaukseen käytettiin pääosin vuosina 1996-2005 julkaistua materiaalia koskien päivystyspolikliinista hoitotyötä sekä päihtyneen potilaan hoitoa tässä ympäristössä. Kirjallisen materiaalin pääpainon pyrin pitämään maksimissaan viiden vuoden ikäisessä materiaalissa. Kirjallisuuskatsauksen mukaan päihteidenkäyttö kasvoi maassamme alkoholin osalta runsaasti vuoden 2003 suoritetun alkoholin veronalennuksen jälkeen kasvattaen siitä seuraavia terveyshaittoja sekä kuormittaen sosiaali- ja terveysalan palveluita. Huumausaineiden käyttäjien määrä pysyi tutkimuksien mukaan ennallaan koko 2000-luvun ajan, tosin ongelmakäyttö lisääntyi viime vuosina. Akuuttitilanteiden hoitoon liittyvät hoitojaksot ovat lisääntyneet, kuten myös niistä seuraavat sairaalahoitojaksot. Kirjallisuuskatsauksen mukaan yleisimpinä päihtyneiden potilaiden sekä päihteiden suurkuluttajien hoitoonhakeutumisen syinä olivat elimelliset sairaudet sekä niiden paheneminen, voimakas päihtymystila tai päihdemyrkytys, vieroitusoireet, vaikeat infektiot, psyykkiset ongelmat ja mielenterveyden häiriöt. Myös tapaturmat olivat merkittäviä hoitoon hakeutumisen syitä. Kehitetyn kriteeristön tarkoituksena on myös auttaa henkilökuntaa arvioimaan potilaan hoidon tuloksellisuutta ja ennakoimaan sen tarvetta tulevaisuudessa. Tulevan hoidon tarpeen arvointi auttaa määrittelemään minkälaiselle osastolle potilas olisi tarkoituksenmukaisinta siirtää jatkohoitoa ajatellen. Ennen potilaan siirron toteuttamista asianmukainen kriteeristö auttaa henkilökuntaa arvioimaan ovatko potilaan tila, suoritetut toimenpiteet ja potilaan ennuste sellaiset että hänet voidaan siirtää jatkohoidosta vastaavalle osastolle. Tavoitteena on myös helpottaa Malmin sairaalan päivystyspoliklinikalla työskentelevän henkilökunnan työtä, sekä lisätä joustavuutta päihtyneen potilaan jatkohoitoon siirtymisessä ja sen järjestelyissä.

Maahanmuuttajat työntekijöinä Palmian catering-palveluissa

Opinnäytetyössä selvitettiin Palmian catering-palveluissa työskentelevien maahanmuuttajien taustoja ja heidän vaikutuksiaan työpaikkojensa toimintaan. Tavoitteena oli saada tietoa maahanmuuttajien koulutuksen kehittämiseksi. Saadun tiedon toivottiin auttavan niin Palmiaa kuin muitakin yrityksiä henkilöstövalinnoissaan. Kyselytutkimus osoitettiin Palmian catering-palveluiden esimiehille sähköpostitse. Maahanmuuttajien vaikutukset työpaikoilla perustuivat heidän näkemyksiinsä. Palmiaa kysyttiin yhteistyöhön, koska se toimi pääosin Helsingissä, missä asuu lähes puolet maamme maahanmuuttajista. Palmia oli myös riittävän suuri yritys tarpeellisen vastausmäärän saamiseksi. Vastausten analysoinnissa merkittävimmiksi tekijöiksi muodostuivat kielitaito ja koulutus, joiden osuutta peilattiin työsuhteen pituuteen, maahanmuuttajan motivaatioon, työpaikan ilmapiiriin ym. työhön vaikuttaviin tekijöihin. Maahanmuuttajien vaikutukset työpaikoilla olivat suurimmaksi osaksi myönteisiä ja he olivat pidettyjä työntekijöitä. Tutkimuksen maahanmuuttajista lähes 80 prosenttia työskenteli ruokapalvelutyöntekijöinä. Suurimpana yksittäisenä ongelmana tuli esille heikko suomen kielen osaaminen. Maahanmuuttajat, joilla oli huono kielitaito ja joilla ei ollut aikaisempaa alan koulutusta tai työkokemusta, työllistyivät kuitenkin parhaiten pysyviin työsuhteisiin. Koulutettujen ja kielitaitoisten maahanmuuttajien huomattiin vaikuttavan kaikkein myönteisimmin työpaikoilla. Tutkimus osoitti, että yritysten kannattaisi palkata kielitaitoisia ja koulutettuja maahanmuuttajia ennakkoluulottomasti, sillä heidän vaikutuksensa työpaikoilla olivat hyvin myönteisiä. Maahanmuuttajien kielitaidon kehittämiseen ja koulutukseen olisi panostettava uudella tavalla. Tutkimuksen mukaan ruokapalvelutyöntekijöiksi voidaan palkata heikosti suomea osaavia ihmisiä vailla aikaisempaa alan kokemusta. Heille olisi hyödyllistä opiskella kieltä rinnakkain työn kanssa, koska silloin heidän kommunikointi- ja yhteistyötaidot sekä edellytykset kouluttautua paranisivat. Olisi ilmeistä, että maahanmuuttajan usko parempaan huomiseen vaikuttaisi myönteisesti työpaikoilla. Kielenopiskelun ja työnteon yhdistäminen kannustavalla tavalla vaatisi uusia koulutuksellisia päätöksiä asian mahdollistamiseksi. Tehtävä voitaisiin antaa tutkimuksen valmistumisen kanssa samaan aikaan järjestäytyvän Suomen hallituksen uudelle opetusministerille työryhmineen.

Tähtiä ja ihmisiä : kuukauden kirja

Tapio Markkanen

First international workshop for small animal arthroscopy : matkakertomus

Jarmo Rintasalo, Pentti Tapio

A participatory approach to tactical forest planning

Jyrki Kangas ... [et al.]

Nauloilla laadittu laki : työväentalojen sulkemiset 1929-1932

Summary: A law nailed down with force : the shutting down of labour halls in 1929-1932

Ämmänlängistä vesijohtoihin : Suomen vesihuollon kehityslinjat 1850-1994

Tapio S. Katko ja Jussi Lehtonen