Transcriptional modulation of mouse mu-opioid receptor distal promoter activity by Sox18

Previously, we reported the presence of dual promoters, referred to as distal (DP) and proximal, with a negative regulatory element between them in the mouse mu -opioid receptor (mor) gene. Here we have identified a positive regulatory element influencing mor DP transcription, which contains multiple consensus binding motifs for Sox factors (sex-determining Sry-like high mobility group box-containing genes). In gel supershift assays, the Sox family member Sox18 bound directly to the multiple Sox consensus binding motifs of the mor DP enhancer. Overexpression of Sox18 cDNA increased luciferase activity regulated by the mor DP, and did so in a Sox18 concentration-dependent manner. In contrast, overexpression of another Sox member, Sox5, triggered no such trans-activation of mor DP-driven luciferase activity or DNA-protein binding activity. These results suggest that Sox18 directly and specifically stimulates mor gene expression, by trans-activating the mor DP enhancer.

A normative study of distortion product otoacoustic emissions in six-year-old school children

Evoked otoacoustic emissions have demonstrated potential for application in the community-based hearing screening of paediatric populations. Distortion-product otoacoustic emissions (DPOAEs), as opposed to transient evoked otoacoustic emissions (TEOAEs), have not been extensively researched in this regard. The current study aimed to describe the range of DPOAE values obtained in a large cohort (1576 ears) of 6-year-old children in school settings and to examine possible ear asymmetry, gender and history of ear infection effects on the data. Results indicated a variety of significant effects, particularly in the high frequencies, for DPOAE signal-to-noise ratio. The measurement parameter, DPOAE amplitude (DP-amp), was found to display potentially less clinical applicability due to large standard deviation values. Use of descriptive normative data, as derived in the present investigation, may contribute toward future improvements in the hearing screening of 6-year-old schoolchildren

Role of peripheral afference during acquisition of a complex coordination task

It has long been supposed that the interference observed in certain patterns of coordination is mediated, at least in part, by peripheral afference from the moving limbs. We manipulated the level of afferent input, arising from movement of the opposite limb, during the acquisition of a complex coordination task. Participants learned to generate flexion and extension movements of the right wrist, of 75degrees amplitude, that were a quarter cycle out of phase with a 1-Hz sinusoidal visual reference signal. On separate trials, the left wrist either was at rest, or was moved passively by a torque motor through 50degrees, 75degrees or 100degrees, in synchrony with the reference signal. Five acquisition sessions were conducted on successive days. A retention session was conducted I week later. Performance was initially superior when the opposite limb was moved passively than when it was static. The amplitude and frequency of active movement were lower in the static condition than in the driven conditions and the variation in the relative phase relation across trials was greater than in the driven conditions. In addition, the variability of amplitude, frequency and the relative phase relation during each trial was greater when the opposite limb was static than when driven. Similar effects were expressed in electromyograms. The most marked and consistent differences in the accuracy and consistency of performance (defined in terms of relative phase) were between the static condition and the condition in which the left wrist was moved through 50degrees. These outcomes were exhibited most prominently during initial exposure to the task. Increases in task performance during the acquisition period, as assessed by a number of kinematic variables, were generally well described by power functions. In addition, the recruitment of extensor carpi radialis (ECR), and the degree of co-contraction of flexor carpi radialis and ECR, decreased during acquisition. Our results indicate that, in an appropriate task context, afferent feedback from the opposite limb, even when out of phase with the focal movement, may have a positive influence upon the stability of coordination.

beta-strand mimicking macrocyclic amino acids: Templates for protease inhibitors with antiviral activity

New amino acids are reported in which component macrocycles are constrained to mimic tripeptides locked in a beta-strand conformation. The novel amino acids involve macrocycles functionalized with both an N- and a C-terminus enabling addition of appendages at either end to modify receptor affinity, selectivity, or membrane permeability. We show that the cycles herein are effective templates within inhibitors of HIV-1 protease. Eleven compounds originating from such bifunctionalized cyclic templates are potent inhibitors of HIV-1 protease (Ki 0.3-50 nM; pH 6.5, I = 0.1 M). Unlike normal peptides comprising amino acids, five of these macrocycle-containing compounds are potent antiviral agents with sub-micromolar potencies (IC50 170-900 nM) against HIV-1 replication in human MT2 cells. The most active antiviral agents are the most lipophilic, with calculated values of LogD(6.5) greater than or equal to 4. All molecules have a conformationally constrained 17-membered macrocyclic ring that has been shown to structurally mimic a tripeptide segment (Xaa)-(Val/Ile)-(Phe/Tyr) of a peptide substrate in the extended conformation. The presence of two trans amide bonds and a para-substituted aromatic ring prevents intramolecular hydrogen bonds and fixes the macrocycle in the extended conformation. Similarly constrained macrocycles may be useful templates for the creation of inhibitors for the many other proteins and proteases that recognize peptide beta-strands.

Infusing the use of seasonal climate forecasting into crop management practice in North East Australia using discussion support software

Seasonal climate forecasting offers potential for improving management of crop production risks in the cropping systems of NE Australia. But how is this capability best connected to management practice? Over the past decade, we have pursued participative systems approaches involving simulation-aided discussion with advisers and decision-makers. This has led to the development of discussion support software as a key vehicle for facilitating infusion of forecasting capability into practice. In this paper, we set out the basis of our approach, its implementation and preliminary evaluation. We outline the development of the discussion support software Whopper Cropper, which was designed for, and in close consultation with, public and private advisers. Whopper Cropper consists of a database of simulation output and a graphical user interface to generate analyses of risks associated with crop management options. The charts produced provide conversation pieces for advisers to use with their farmer clients in relation to the significant decisions they face. An example application, detail of the software development process and an initial survey of user needs are presented. We suggest that discussion support software is about moving beyond traditional notions of supply-driven decision support systems. Discussion support software is largely demand-driven and can compliment participatory action research programs by providing cost-effective general delivery of simulation-aided discussions about relevant management actions. The critical role of farm management advisers and dialogue among key players is highlighted. We argue that the discussion support concept, as exemplified by the software tool Whopper Cropper and the group processes surrounding it, provides an effective means to infuse innovations, like seasonal climate forecasting, into farming practice. Crown Copyright (C) 2002 Published by Elsevier Science Ltd. All rights reserved.

Conformationally constrained macrocycles that mimic tripeptide beta-strands in water and aprotic solvents

The beta-strand conformation is unknown for short peptides in aqueous solution, yet it is a fundamental building block in proteins and the crucial recognition motif for proteolytic enzymes that enable formation and turnover of all proteins. To create a generalized scaffold as a peptidomimetic that is preorganized in a beta-strand, we individually synthesized a series of 15-22-membered macrocyclic analogues of tripeptides and analyzed their structures. Each cycle is highly constrained by two trans amide bonds and a planar aromatic ring with a short nonpeptidic linker between them. A measure of this ring strain is the restricted rotation of the component tyrosinyl aromatic ring (DeltaG(rot) 76.7 kJ mol(-1) (16-membered ring), 46.1 kJ mol(-1) (17-membered ring)) evidenced by variable temperature proton NMR spectra (DMF-d(7), 200-400 K). Unusually large amide coupling constants ((3)J(NH-CHalpha) 9-10 Hz) corresponding to large dihedral angles were detected in both protic and aprotic solvents for these macrocycles, consistent with a high degree of structure in solution. The temperature dependence of all amide NH chemical shifts (Deltadelta/T7-12 ppb/deg) precluded the presence of transannular hydrogen bonds that define alternative turn structures. Whereas similar sized conventional cyclic peptides usually exist in solution as an equilibrium mixture of multiple conformers, these macrocycles adopt a well-defined beta-strand structure even in water as revealed by 2-D NMR spectral data and by a structure calculation for the smallest (15-membered) and most constrained macrocycle. Macrocycles that are sufficiently constrained to exclusively adopt a beta-strand-mimicking structure in water may be useful pre-organized and generic templates for the design of compounds that interfere with beta-strand recognition in biology.

Regioselective synthesis of antiparallel loops on a macrocyclic scaffold constrained by oxazoles and thiazoles

[GRAPHICS] The regioselective syntheses and structures are reported for two tris-macrocylic compounds, each possessing two antiparallel loops on a macrocyclic scaffold constrained by two oxazoles and two thiazoles. NMR solution structures show the loops projecting from the same face of the macrocycle. Such molecules are shown to be prototypes for mimicking multiple loops of proteins.

Gerenciamento proteano de carreira entre universitários

A partir da segunda metade do século XX, mudanças no modo de produção capitalista começaram a afetar a relação que as empresas estabeleciam com o trabalhador. Diante de um mercado imprevisível, a carreira tradicional, marcada, entre outros aspectos, por empregos duradouros e com possibilidade de ascensão na hierarquia da organização, tornou-se menos recorrente. Paralelamente, começaram a despontar novas concepções sobre carreira, tendo a maioria um enfoque individualista. Dentre as novas proposições, o presente estudo tomou como referência a concepção de carreira proteana. Esse modelo, de origem norte-americana, tem como ideia central a noção de uma carreira que é gerida pelo indivíduo, e tem como meta o alcance do sucesso psicológico. Desta forma, ancora-se em duas principais dimensões: autogerenciamento e direcionamento para valores. Considerando os diversos estudos que descrevem as dificuldades enfrentadas por estudantes na transição da universidade para o mercado de trabalho, esta pesquisa objetivou compreender aspectos do gerenciamento proteano de carreira entre universitários brasileiros que já tinham concluído, pelo menos, a primeira metade do curso de graduação. Para tanto, o estudo foi dividido em dois artigos. O primeiro foi destinado ao desenvolvimento e validação da Escala de Atitudes de Carreira Proteana para universitários, tendo sido realizado com uma amostra de 1016 estudantes de 37 cursos diferentes, com idade variando entre 18 e 65 anos, e média de 24,52 (DP = 6,69 anos). O instrumento, denominado neste estudo de Escala de Gerenciamento Proteano de Carreira para Universitários (EGPC-U) atestou a estrutura de duas dimensões, evidenciada também na versão original da medida. Os índices de confiabilidade foram satisfatórios e superiores a 12 0,61, tendo o instrumento a possibilidade de ser utilizado em serviços de orientação profissional ou de carreira. O segundo artigo objetivou compreender como as dimensões do modelo proteano se relacionam com variáveis sóciodemográficas e com construtos psicossociais: personalidade, lócus de controle, saúde e satisfação com a vida, e envolveu alunos de duas áreas de conhecimento: humanas e exatas. A amostra foi composta por 525 alunos, sendo 245 da área de humanas e 280 de exatas, sendo 52% do sexo masculino. A idade dos participantes variou entre 18 e 30 anos e média de 22,59 anos (DP = 2,66 anos). A partir dos resultados do estudo 2, constatou-se que alunos da área de humanas, quando comparados a estudantes de exatas, tendem a apresentar média superior na dimensão de direcionamento para valores. Verificou-se ainda que os aspectos de conscienciosidade e lócus de controle interno são preditores significativos do autogerenciamento tanto entre alunos de humanas como de exatas e que a adoção de atitudes proteanas tende a impactar positivamente aspectos da saúde e da satisfação com a vida do indivíduo. O estudo, de um modo geral, permitiu verificar a existência de características proteanas entre universitários, como também possibilitou conhecer variáveis relacionadas às atitudes de autogerenciamento e direcionamento para valores. Destaca-se, porém, a necessidade de pesquisas complementares com a exploração de outras variáveis psicossociais que possam estar relacionadas ao gerenciamento proteano entre graduandos.

Emissões otoacústicas por produtos de distorção em crianças de 2 a 7 anos

Com a descoberta das Emissões Otoacústicas (EOA), tornou-se possível analisar e investigar as funções auditivas das células ciliadas externas do órgão da audição. Podem ser espontâneas, evocadas transientes ou por produto de distorção. O teste das EOAEs-DP caracteriza-se por ser um exame objetivo, rápido, indolor, não-invasivo e de fácil aplicação tanto para clínica como para programas de triagem auditiva. FORMA DE ESTUDO: Coorte transversal. MATERIAL E MÉTODO: Foram avaliadas 105 crianças entre 2 e 7 anos de idade da creche "Lar da Criança", de Marília, SP. A avaliação constou de exame otorrinolaringológico completo e EOAEs-DP. Todas estas crianças, após prévia autorização dos responsáveis, foram submetidas a exame otorrinolaringológico completo e EOAEs-DP. RESULTADOS: Os resultados demonstraram que das 105 crianças avaliadas, 44,76% apresentavam cerume. 12 crianças permaneceram com cerume mesmo após uso de ceruminolítico e lavagem auricular ou não apresentaram consentimento informado de seus responsáveis. Portanto, estas foram excluídas do trabalho sendo o restante, 93 crianças, submetidas a avaliação das EOAEs-DP Após a realização das EOAEs-DP, verificou-se que 5,37% das crianças apresentaram exames alterados, sendo que 60% destas eram do sexo masculino e 60% com acometimento bilateral. DISCUSSÃO: Os resultados encontrados foram inferiores aos citados na literatura, assim como o predomínio do sexo masculino. Além disso, notou-se alta prevalência de cerume nos pacientes testados. CONCLUSÃO: É essencial uma avaliação otorrinolaringológica completa prévia. O exame de EOAEs-DP pode ser realizado em crianças para detecção precoce e prevenção de falhas no desenvolvimento cognitivo e psicoemocional.

Anatomia endoscópica da artéria etmoidal anterior: estudo de dissecção em cadáveres

INTRODUÇÃO: a artéria etmoidal anterior (AEA) é um importante ponto de reparo anatômico para localização do seio frontal e da base de crânio. Entretanto, apesar de diversos estudos endoscópicos em cadáveres, ainda não temos um estudo anatômico sobre AEA na população ocidental. OBJETIVOS: Determinar pontos de reparo para localização da artéria, estudar sua relação com a base do crânio e grau de deiscência, assim como variações intra e interindividuais. CASUÍSTICA E MÉTODOS: Foram realizadas dissecções das fossas nasais em 25 cadáveres. RESULTADOS: O comprimento médio do trajeto intranasal da artéria etmoidal anterior foi de 5,82mm. O canal etmoidal anterior apresentou algum grau de deiscência em 66,7%. A distância média do ponto médio da artéria à espinha nasal anterior foi de 61,72mm (dp = 4,18mm); à axila nasal foi de 64,04mm (dp = 4,69mm); e à axila anterior do corneto médio foi de 21,14mm (dp = 3,25mm). Para todas as medidas, não houve diferença estatisticamente significativa quando comparados os lados direito e esquerdo (p>0,05). CONCLUSÕES: Concluímos que a axila da concha média é o ponto de reparo mais confiável para a localização da AEA.

Qualidade de vida em crianças com distúrbios obstrutivos do sono: avaliação pelo OSA-18

Distúrbios obstrutivos do sono (DOS) são prevalentes e existem evidências de afetarem a qualidade de vida das crianças. OBJETIVO: Avaliar a qualidade de vida de crianças com DOS antes e após adenoidectomia ou adenotonsilectomia. MATERIAL E MÉTODOS: Estudo prospectivo de intervenção, tipo antes e após, com componente avaliativo. Foi recrutada uma amostra consecutiva de crianças com indicação de adenoidectomia ou adenotonsilectomia em um ambulatório de otorrinolaringologia e aplicado aos cuidadores um questionário específico para a avaliação da qualidade de vida, o OSA-18, antes da cirurgia e com pelo menos 30 dias após. Foi realizado exame nasofibroscópico, otorrinolaringológico e questionário semi-estruturado sobre o perfil clínico e social da criança, em ambas as consultas. RESULTADOS: Foram avaliadas 48 crianças com média de idade de 5,93 anos (DP=2,43). A média de escolaridade do cuidador foi de 8,29 anos (DP=3,14). Os sintomas mais freqüentes foram: sono agitado, apnéia e ronco. A média de escore total do OSA-18 basal foi de 82,83 (grande impacto) e no pós-operatório, de 34,15. As diferenças nos escores total e dos domínios entre o OSA-18 basal e pós-operatório foram todas significantes (p<0,00). CONCLUSÃO: DOS apresentam impacto relevante na qualidade de vida e melhoram consideravelmente após o tratamento cirúrgico.

Regeneração pós-traumática do nervo facial em coelhos

A paralisia facial periférica traumática constitui-se em afecção freqüente. OBJETIVO: estudo da regeneração pós-traumática do nervo facial em coelhos, por avaliação funcional histológica dos nervos traumatizados comparados aos normais contralaterais. METODOLOGIA: Vinte coelhos foram submetidos à compressão do tronco do nervo facial esquerdo e sacrificados após duas (grupo AL), quatro (BL) e seis (CL) semanas da lesão. A comparação entre os grupos foi feita pelas densidades total e parcial de axônios mielinizados. ESTUDO ESTATÍSTICO: método de Tukey (p < 0,05). RESULTADOS: Houve recuperação funcional parcial após duas, e completa após cinco semanas. Na análise qualitativa, verificou-se em AL um padrão degenerativo, com maior processo inflamatório tecidual. Em BL, sinais de regeneração neural, praticamente completa em CL. Os nervos normais (N) apresentaram DT média de 15705,59 e DP média de 21800,75. O grupo BL revelou DT média de 10818,55 e DP média de 15340,56 e o CL, DT média de 13920,36 e DP média de 16589,15. BL obteve 68,88%, e o grupo CL, 88,63% da DT de N. N mostrou DP maior que os lesados; porém, esta não evidenciou diferença estatística entre BL e CL. A DT dos nervos revelou-se um método analítico mais fidedigno do que a DP estudada.

Achados otoneurológicos em pacientes com doença de Parkinson

O número de idosos vem aumentando consideravelmente em nossa população, com isso, as doenças crônico-degenerativas como a doença de Parkinson (DP), cuja sintomatologia relacionada ao equilíbrio é constante, torna-se cada vez mais freqüente na população idosa. OBJETIVO: Verificar os achados no exame labiríntico em pacientes com DP e correlacioná-los com a sintomatologia vestibular. Forma de Estudo: Corte contemporânea com corte transversal. MATERIAL E MÉTODO: Avaliaram-se trinta pacientes, vinte do sexo feminino e dez do sexo masculino na faixa etária de 48 a 84 anos. Procedimentos: anamnese, inspeção otológica e avaliação vestibular por meio da vectoeletronistagmografia (VENG). RESULTADOS: a) Com relação às queixas otoneurológicas referidas à anamnese, observou-se a prevalência do tremor (100,0%), da tontura (43,3%), do zumbido (40,0%), do desequilíbrio á marcha e queda (36,6%) em cada; b) Na avaliação da função vestibular, evidenciou-se diferença significativa na proporção de exames alterados (p=0,0000); c) A prevalência de alteração ocorreu no sistema vestibular periférico (93,3%) e na prova calórica com predomínio da hiporreflexia labiríntica bilateral (30,0%); d) Correlacionou-se o resultado do exame com a sintomatologia vestibular e observou-se que não existe diferença significativa. CONCLUSÃO: Este estudo permitiu verificar um número significativo de exames alterados independente da ocorrência da sintomatologia.

Achados clínicos e polissonográficos em pacientes com obesidade classe III

A Síndrome da apnéia/hipopnéia obstrutiva do sono (SAHOS) apresenta estreita correlação com a obesidade, porém não está estabelecida uma relação linear de gravidade principalmente em relação aos extremos como na obesidade mórbida. OBJETIVO: Avaliar os achados clínicos e polissonográficos em pacientes com obesidade classe III e correlacionar esses achados com a presença da SAHOS. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram selecionados consecutivamente 45 pacientes com índice de massa corpórea superior a 40Kg/m2. Todos foram submetidos a anamnese, exame físico antropométrico e polissonografia. Os achados foram comparados entre os pacientes com e sem SAHOS. RESULTADOS: 68,9% dos pacientes eram do sexo feminino e 31,1% do masculino. A idade média foi de 46,5 DP 10,8 anos, a média do IMC foi 49 DP 7Kg/m2 e a média da circunferência cervical foi 43,4 DP 5,1cm. Todos os pacientes eram roncadores habituais e 48,9% tinham queixa de hipersonolência diurna. Os achados polissonográficos mostraram que 77,8% apresentaram índice de apnéia/hipopnéia superior a cinco. Apresentaram correlação com a presença da SAHOS: idade mais jovem (p=0,02) e maior circunferência cervical (p=0,004). CONCLUSÃO: A prevalência de SAHOS foi elevada, ressaltando a importância da sua investigação em pacientes referenciados para cirurgia bariátrica. O principal marcador da SAHOS foi a circunferência cervical.

Resultados na qualidade de vida em longo prazo de crianças submetidas à adenoidectomia/adenotonsilectomia por distúrbios obstrutivos do sono

Os Distúrbios Obstrutivos do Sono (DOS) afetam significativamente a população pediátrica. Neste grupo, sua principal etiologia é a hiperplasia adenotonsilar, sendo adenoidectomia ou adenotonsilectomia indicadas para tratamento, reversão de seqüelas e melhora na qualidade de vida. OBJETIVO: Avaliar qualidade de vida de crianças com DOS após adenoidectomia/adenotonsilectomia. CASUÍSTICA E MÉTODO: Realizou-se estudo tipo prospectivo com 48 crianças, entre 2 e 11 anos, apresentando DOS e hiperplasia adenotonsilar obstrutiva com indicação cirúrgica. Aplicou-se o questionário OSA18 sobre qualidade de vida aos cuidadores destas crianças antes da cirurgia, cerca de trinta dias e com pelo menos onze meses após o procedimento. Pontuações elevadas no escore significam pior qualidade de vida. RESULTADOS: No pré-operatório, o escore OSA18 médio foi 82,83 (DP=12,57), com nota global média para a qualidade de vida de 6,04 (DP=1,66). Na avaliação pós-operatória inicial, obteve-se escore OSA18 de 34,3(DP=9,95) e nota global de 9,6 (DP=0,81), ambos tendo redução significativa (p<0,001). Na avaliação pós-operatória tardia, entre 11 e 30 meses (média=16,85,DP=5,16), trinta e quatro (70,83%) crianças foram reavaliadas, obtendo-se escore OSA18 de 35,44(DP=19,95) e nota global de 9,28 (DP=1,78). Não houve diferença significativa entre as avaliações pós-operatórias. CONCLUSÃO: A cirurgia promoveu melhora na qualidade de vida das crianças com DOS, mantendo-se esta em longo prazo.