938 resultados para indirect fluorescent


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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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As estratégias atuais de combate à malária estimulam o conhecimento mais profundo dos mecanismos de defesa humana antiplasmodiais. A cooperação de anticorpos citofilicos com monócitos sangüíneos facilitando a fagocitose de células infectadas, tem mostrado ser um mecanismo efetivo nesta defesa. Estudos comparativos entre populações semi-imunes e não imunes têm sido feitos a fim de identificar o padrão de imunoglobulinas nestas populações. Somando-se a estes, o presente trabalho objetivou avaliar a resposta de anticorpos IgG anti-P.vivax (lgG anti-PV), subclasses citofilicas: IgG1 e IgG3 e não citofilicas: IgG2, em crianças com malária por P.vivax. Foram avaliadas 34 crianças portadoras de malária vivax, diagnosticadas pela gota espessa, acompanhadas desde a fase aguda até o último controle de cura, as quais tiveram seus níveis de anticorpos IgG anti-PV e subclasses mensurados pela técnica de imunoflüorescência indireta. Os pacientes foram subdivididos em dois grupos: priminfectados (n=28) e pacientes com história de malária anterior o (n=6). A média geométrica dos títulos de anticorpos IgG anti-PV, foi o demonstrada nos diferentes períodos relativos ao controle de cura, sendo que o os níveis de anticorpos mensurados durante a fase aguda (dias zero e sete) foram comparados (teste t de Student). Níveis de anticorpos IgG anti-PV foram correlacionados com parasitemia e tempo de doença, (Correlação de Spearman). Sinais e sintomas clínicos foram descritos em ambos subgrupos. A proporção de indivíduos positivos e negativos quanto as subclasses foi comparada nos dois subgrupos (teste exato de Fisher). Os resultados mostraram um aumento inicial dos títulos de IgG anti-PV entre o dia zero (D0) e o dia sete (D7), sendo esta diferença significativa (p=0,027), independente de exposição anterior ou não à malária. Aos 60, 120 e 180 dias pós-tratamento, obteve-se uma curva descendente de títulos, com as seguintes proporções de respostas positivas: aos 60 dias: 95,2%, com títulos variando entre 40 e 2560; aos 120 dias: 62,5%, com variação de 40 e 320; e aos 180 dias apenas 28,5% de positivos, com variação entre 40 e 160. Foi encontrada correlação positiva entre tempo de doença e níveis de anticorpos totais entre indivíduos priminfectados. As médias geométricas dos títulos de anticorpos IgG anti-PV subclasses encontradas em D0 foram: IgG1 (598,41) > IgG3 (4,064) > IgG2 (1,422). Não ocorreram diferenças entre proporções de indivíduos positivos e negativos para as subclasses de IgG anti-PV, quando se comparou priminfectados e pacientes sem história anterior de malária. Concluiu-se que, no grupo estudado: 1) Ocorre inicialmente aumento de anticorpos IgG anti-PV entre o primeiro e oitavo dia de tratamento; 2) Os níveis de anticorpos totais anti-PV declinam gradativamente durante o controle de cura: 4,76% dos pacientes apresentaram resultados negativos até D60, 37,5% até D120, e 71,42% até 180 dias após o início do tratamento 3) Não há associação entre parasitemia assexuada no dia zero e títulos de anticorpos IgG anti-PV no primeiro e oitavo dias de tratamento; 4) Em crianças expostas a ataques anteriores, quanto maior o tempo de evolução da doença, maiores são os níveis de anticorpos, ao contrário do que ocorreu com crianças priminfectadas; 5) Não há correlação entre títulos de anticorpos anti-PV totais e presença de esplenomegalia; 6) Houve predominância de anticorpos citofilicos (lgG1 > IgG3), sobre os anticorpos não citofilicos, na amostra estudada.

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Para determinar a ocorrência de anticorpos IgG anti-Neospora caninum e Toxoplasma gondii em 14 unidades produtivas de búfalos, situadas em 13 municípios no estado do Pará, foram coletadas amostras de soro sanguíneo de 374 fêmeas adultas. Os soros foram submetidos à reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se os títulos 200 e 64, respectivamente como ponto de corte para N. caninum e T. gondii. Obteve-se 153 (40,9%) de animais soropositivos para N. caninum com 100% das propriedades com focos da infecção, enquanto que quatro búfalas (1,1%) foram soropositivas em quatro fazendas para T. gondii e uma búfala (0,27%) foi soropositiva para ambos parasitos. A presença de anticorpos é um indicativo da circulação desses protozoários em búfalos das propriedades estudadas, representando uma fonte de infecção para outros animais, assim como o possível envolvimento em distúrbios reprodutivos nessa espécie.

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

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Background Toxoplasmosis is a zoonosis caused by an obligate intracellular parasite, Toxoplasma gondii, which affects warm-blooded animals including humans. Its prevalence rates usually vary in different regions of the planet. Methods In this study, an analysis of the seroprevalence of toxoplasmosis among Brazilian students was proposed by means of IgG specific antibodies detection. The presence of anti-Toxoplasma gondiiantibodies by indirect fluorescent antibody test (IFAT) was also evaluated in order to compare it with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and to assess the use of 2,2′-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) and o-phenylenediamine dihydrochloride chromogens. Results The IFAT method showed a seroprevalence of 22.3%. These results were similar to those obtained by ELISA (24.1%). The seroprevalence was directly estimated from the IgG avidity, which showed that in a sample of 112 students, three of them had acute infection, an incidence of 1.6% in the studied population. Conclusion In this study, the use of different chromogenic substrates in immunoenzymatic ELISA assays did not display different sensitivity in the detection of T. gondii-reagent serum. The extrapolation of results to this population must be carefully considered, since the investigation was conducted on a reduced sample. However, it allows us to emphasize the importance of careful and well prepared studies to identify risk factors for toxoplasmosis, to adopt preventive measures and to offer guidance to at-risk populations about the disease.

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Toxoplasmosis and neosporosis have been recognized as economically important diseases with considerable impact on the livestock industry. Little is known concerning the occurrence of Toxoplasma gondii and Neospora caninum in sheep from Tocantins state, Brazil. Here, we investigated antibodies against these parasites and associated factors in 182 sheep from Araguaina, Santa Terezinha do Tocantins, Arguianopolis and Palmeiras do Tocantins districts, Tocantins. Sheep sera were assayed for T. gondii and N. caninum IgG antibodies by indirect fluorescence antibody test (IFAT), using cut-off point at a dilution of 1: 40 and 1: 25 respectively. The prevalence of seropositive animal for T. gondii was 13.74% and 13.74% for N. caninum. None of the characteristics studied including reproductive problems, presence of cats, presence of dogs and veterinary care (p>0.05) was associated with occurrence of T. gondii or N. caninum infection. Only breed was identified as associated factor for the occurrence of toxoplasmosis in sheep (p<0.05). The present study is the first report on serum occurrence of T. gondii and N. caninum in sheep from the state of Tocantins, Brazil.

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Visceral leishmaniasis is an emerging zoonosis and its geographic distribution is restricted to tropical and temperate regions. Most of the individuals infected in Latin America are in Brazil. Despite the control measures that have been adopted, the disease is spreading throughout new regions of the country. Domestic dogs are involved in the transmission cycle and are considered to be the main epidemiologic reservoir of Leishmania infantum (syn. L. chagasi). Our aim was to determine the prevalence of canine leishmaniasis (CL) and Ehrlichiosis infection in Presidente Prudente as well as the spatial dispersion of the disease in the western region of São Paulo state. Dogs underwent clinical examination and symptoms related to CL were recorded. Anti- Leishmania antibodies were detected using ELISA, rK39-immunocromatographic tests (DPP), and an indirect fluorescent antibody test (IFAT). Anti-E. canis antibodies were detected by IFAT. A follow-up was conducted in dogs that were positive in the ELISA at the baseline study. Data on the spatial distribution of L. longipalpis and CL in São Paulo state were obtained from Brazilian public health agencies. Serum samples from 4547 dogs were analyzed. The seroprevalence of CL was 11.2 % by ELISA and 4.5 % by IFAT. In the follow-up, seroprevalence was 32.9 % by ELISA, 15.3 % by IFAT, 11.8 % by DPP test, and 66.5 % for E. canis. There was a significant positive association between Leishmania and E. canis infection (P < 0.0001). In the follow-up, clinical examinations revealed symptoms compatible with CL in 33.5 % of the dogs. L. longipalpis was found in 24 and CL in 15 counties of the Presidente Prudente mesoregion. The dispersion route followed the west frontier of São Paulo state toward Paraná state. Low CL and high ehrlichiosis prevalence rates were found in Presidente Prudente city. This emerging focus of CL is moving through the western region of São Paulo state toward the border of Paraná state. Integrated actions to fight the vector, parasites, infected dogs, and humans are needed to monitor the disease and implement strategies for epidemiologic control.

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Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Neospora caninum is an apicomplexan protozoan parasite that is one of the most important infectious causes of abortion in both dairy and beef cattle in many countries. The objectives of this longitudinal study were to determine the prevalence, rates of vertical and horizontal transmission of N. caninum and hazard for culling of N. caninum-seropositive animals in three Brazilian dairy herds. Blood samples from all animals were collected nine times at each of the three farms over a two-year period. Serum was tested for antibodies against N. caninum using the indirect fluorescent antibody test with a cutoff value of 1:100. The percentage of N. caninum-positive samples at each sampling time ranged at Farm 1 from 3.32% to 11.71%, at Farm 11 from 3.90% to 22.06% and at Farm III from 3.90% to 22.06%. The number of positive serological reactions varied in relation to the number of repeated samples taken from individual animals at each farm. In all herds, there was a high degree (P < 0.05) of association between the N. caninum serological status of dams and daughters. The seropositive conversion rate was estimated as 0.37%, 3.00% and 6.94% per 100 cow-years at Farms I, II and III, respectively. The seronegative conversion rate was estimated as 31.58% and 11.11% per 100 cow-years at Farms 1 and III, respectively. In all herds, there was no difference (P > 0.05) in the culling rate between the cattle that were seropositive cattle and seronegative for N. caninum infection. The results from this study confirm the importance of vertical transmission in the epidemiology of N. caninum. Although a few positive seroconversions indicated horizontal transmission, it does not appear to be the major route of infection for N. caninum. (C) 2012 Elsevier B.V. All rights reserved.