Detection of cytokines and nitric oxide synthase in skin lesions of Jorge Lobo`s disease patients

Studies investigating the immunopathological aspects of Jorge Lobo`s disease have shown that the inflammatory infiltrate consists mainly of histiocytes and multinucleated giant cells involving numerous yeast-like cells of Lacazia loboi, with the T lymphocytes more common than B lymphocytes and plasma cells. The quantification of cytokines in peripheral blood mononuclear cells culture supernatant has revealed alterations in the cytokines profile, characterized by predominance of a Th2 profile. In view of these findings and of the role of cytokines in cell interactions, the objective of the present study was to investigate the presence of the cytokines IL-10, TGF-ss 1 and TNF-alpha, as well as iNOS enzyme in granulomas induced by L. loboi. Histological sections obtained from skin lesions of 16 patients were analyzed by immunohistochemistry for the presence of these cytokines and iNOS. The results showed that TGF-ss 1 was the cytokine most frequently expressed by cells present in the inflammatory infiltrate, followed by IL-10. There was a minimum to discrete positivity of cells expressing TNF-alpha and iNOS. The results suggest that the presence of immunosuppressive cytokines in skin lesions of patients with the mycosis might be responsible for the lack of containment of the pathogen as demonstrated by the presence of numerous fungi in the granuloma.

MMP-9 and CD68(+) cells are required for tissue remodeling in response to natural hydroxyapatite

Large bone defects represent major clinical problems in the practice of reconstructive orthopedic and craniofacial surgery. The aim of this study was to examine, through immunohistochemistry approach, the involvement of MMP-9 and CD68(+) cells during tissue remodeling in response to natural hydroxyapatite (HA) implanted in rat subcutaneous tissue. Before experimentation, forty animals were randomly distributed into two experimental groups: Group-I (Gen-Ox (TM) micro-granules) and Group-II (Gen-Ox (TM) macro-granules). Afterwards, the biopsies were collected after 10, 20, 30, and 60 days post-implantation. Our results showed that at 10 days, a low-renewal foreign body type granuloma formation was observed in most of the cases. Macrophage- and fibroblast-like cells were the predominant type of cells positively stained for MMP-9 in both groups. Once macrophage-like cells seemed to be the major source of MMP9, antibody against pan-CD68 epitope was used to correlate these findings. In agreement, MMP-9 and CD68(+) cells were distributed at the periphery and the central region of the granuloma in all experimental periods, however no staining was observed in cell contacting to material. Besides macrophages, the lysosomal glycoprotein epitope recognized by CD68 antibodies can be expressed by mast cell granules and sometimes by fibroblasts. Taken together, our results suggest that xenogenic HA promotes extracellular matrix remodeling through induction of MMP-9 activity and presence of CD68(+) cells.

A mucosa oral na hanseníase: um estudo clínico e histopatológico

INTRODUÇÃO: a anseníase multibacilar pode causar comprometimento da mucosa oral, com ou sem lesões aparentes. Há poucos estudos que tratam deste assunto na era da multidrogaterapia. OBJETIVO: Verificar a freqüência do comprometimento da mucosa oral em pacientes de hanseníase multibacilar. CASUÍSTICA E MÉTODOS: Foi realizado um estudo transversal em vinte pacientes de hanseníase multibacilar, não-tratados, atendidos consecutivamente em Dracena, São Paulo, entre o período de 2000 e 2002. Foi realizado exame clínico completo da mucosa oral. Os pacientes foram submetidos a biópsias na mucosa jugal, na língua e no palato mole, em alteração ou em pontos pré-estabelecidos. Os cortes foram corados pelas técnicas da hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen. O encontro de granuloma e bacilos álcool-ácido-resistentes ao exame histopatológico determinou o comprometimento específico. RESULTADOS: O estudo envolveu 19 pacientes multibacilares com tempo médio de evolução de 2,5 anos. Ocorreu comprometimento histopatológico específico em apenas um paciente virchowiano, com mucosa oral clinicamente normal, na língua e no palato mole. CONCLUSÕES: 1. Alteração clínica na mucosa oral não implica em comprometimento pela doença, é necessário confirmação histopatológica. 2. Alterações clínicas específicas aparentes são raras. 3. A mucosa oral clinicamente normal pode exibir comprometimento histopatológico específico.

Descrição histológica de colesteatomas adquiridos: comparação entre amostras de crianças e de adultos

O colesteatoma é constituído de matriz, perimatriz e conteúdo cístico. Alguns autores afirmam que, em crianças, seu comportamento clínico é mais agressivo do que em adultos. OBJETIVOS: Comparar histologicamente colesteatomas de crianças e adultos. METODOLOGIA: Foram analisados 74 colesteatomas, sendo 35 de pacientes pediátricos (<18 anos) e 39 de adultos (>18 anos). Foram avaliados o número de camadas celulares e hiperplasia na matriz; espessura, epitélio delimitante, fibrose, inflamação e granuloma na perimatriz. A análise estatística foi realizada com o programa SPSS 10.0, utilizando os coeficientes de Pearson e de Spearman, testes t e de qui-quadrado. O número de camadas celulares na matriz foi de 8,2±4,2. A hiperplasia aparece em 17%, a fibrose em 65%, o granuloma em 12% e o epitélio delimitante em 21%. A perimatriz apresentou uma mediana de 80 micrômetros (37 a 232), valor mínimo zero e valor máximo 1.926. O grau histológico de inflamação foi considerado de moderado a acentuado em 60%. Ao aplicarmos o coeficiente de Spearman entre o grau de inflamação e média de camadas celulares da matriz com as variáveis sumarizadoras da medida de espessura da perimatriz encontramos correlações, significativas, com magnitudes de moderadas a grandes (rs=0,5 e P<0,0001). CONCLUSÃO: Não foram identificadas diferenças morfológicas entre os colesteatomas de adultos e crianças. Encontramos correlação entre a intensidade da inflamação e da média de camadas celulares da matriz com a espessura da perimatriz, o que pode predizer sua agressividade, mais estudos são necessários para definir o papel deste achado na patogênese do colesteatoma.

Tumores nasossinusais raros: série de casos e revisão de literatura

Os tumores nasossinusais são patologias pouco freqüentes na prática clínica. Aproximadamente 0,8% de todos os cânceres humanos localizam-se nessa região. Apesar de rara, a neoplasia nasossinusal manifesta-se habitualmente através de sintomas inespecíficos e comuns a inúmeras patologias inflamatórias. Este estudo se propõe a descrever uma série de casos de tumores nasossinusais não-epiteliais raros, incluindo estesioneuroblastoma, granuloma central de células gigantes, plasmocitoma extramedular, hemangiopericitoma sinonasal, neurofibroma e fibroma cemento-ossificante, diagnosticados no Hospital Geral de Fortaleza, SESA/SUS. Faz-se uma breve revisão de literatura de cada patologia, salientando-se a necessidade do diagnóstico anatomopatológico preciso para condução adequada de cada caso.

Aspectos clínicos, histológicos e de microscopia eletrônica dos granulomas de intubação das pregas vocais

Granulomas são lesões bilaterais e pediculadas das apófises vocais. Etiologias: intubação, refluxo, traumatismos, fonotraumatismo e idiopática. OBJETIVO: Analisar aspectos clínicos e morfológicos dos granulomas de intubação. MATERIAL E MÉTODOS: Estudo retrospectivo dos pacientes submetidos à microcirurgia por granulomas de intubação, atendidos na Instituição onde foi realizado, a partir de 2002. Analisaram-se: idade, sexo, indicação e tempo da intubação, sintomas, laudos de videolaringoscopia e número de biópsia. Realizou-se estudo histológico em todos os casos e de microscopia eletrônica em três deles. RESULTADOS: 10 pacientes (7 F e 3 M), idade entre 2 anos e 72 anos e tempo de intubação entre 4 horas e 21 dias. Rouquidão foi o principal sintoma. A histologia mostrou hiperplasia epitelial, intenso inflamação importante no corion e proliferação vascular. Na MEV observou-se epitélio escamoso com escassa descamação. À MET, junções intercelulares alargadas e desmossomos alterados. No corion havia lagos sanguíneos, intensa inflamação, e fibroblastos com alterações estruturais como núcleos irregulares e cisternas dilatadas. CONCLUSÕES: Granulomas pós-intubação aparecem em qualquer idade, mesmo em intubação por curto período, e causam rouquidão precocemente. As principais alterações morfológicas são observadas no corion, como proliferação vascular, inflamação e alterações estruturais em fibroblastos indicando disfunção e dano celular.

Relação entre a patogenicidade do Schistoma mansoni em camundongos e a susceptibilidade do molusco vetor: II. Número de ovos nas fezes e número e tamanho dos granulomas nas vísceras

Estudou-se a influência da susceptibilidade de moluscos vetores do S. mansoni no desenvolvimento da patogenicidade do trematódeo no hospedeiro definitivo. Foram utilizadas progênies de moluscos Biomphalaria tenagophila e Biomphalaria glabrata selecionadas para o caráter susceptibilidade ao S. mansoni das linhagens SJ e BH, respectivamente. Cercárias oriundas das gerações P, F1 F2, F3 e F4 foram usadas para a infecção de camundongos Swiss, que foram sacrificados oito semanas após a exposição às larvas. Por esta ocasião verificou-se o número de ovos nas fezes e o número de granulomas no fígado, baço e intestino. Avaliou-se também o tamanho das reações granulomatosas nestas vísceras. Concluiu-se que a maior susceptibilidade de B. tenagophila induziu a uma maior eliminação de ovos do parasita nas fezes. Verificou-se maior número de granulomas por área de tecido hepático em roedores infectados com cercárias oriundas de moluscos mais susceptíveis. Nos mesmos roedores, constatou-se relação inversa entre a área dos granulomas esplênicos, hepáticos e intestinais e a taxa de infecção dos moluscos que forneceram as cercárias para a infecção dos camundongos.

Linfadenites tuberculóides em suínos abatidos no Estado de São Paulo, Brasil: aspectos macroscópicos histopatológicos e pesquisa de micobactérias

INTRODUÇÃO: Como a ocorrência de linfadenites tuberculóides nos suínos oferece riscos à saúde pública, sobretudo em indivíduos imunocomprometidos, foi estudada a distribuição das lesões tuberculóides e a presença de micobactérias em linfonodos, tecido hepático e muscular de suínos de abate, no Estado de São Paulo, SP (Brasil), no período de 1993-1994. MATERIAL E MÉTODO: Foram estudadas 60 carcaças de suínos abatidos, sendo que, trinta apresentavam lesões tuberculóides macroscópicas (grupo A) e trinta estavam livres de tais lesões (grupo B ou controle). Foram analisadas seis localizações: linfonodos (retrofaríngeos, jejunais e mediastínicos), tecido hepático e tecido muscular (masséter e diafragma). Os exames executados foram: histopatologia e o cultivo para micobactérias. RESULTADOS: No grupo A, 14 em 30 carcaças apresentaram granuloma na histopatologia e, em 14, houve o isolamento de representantes do Complexo MAC (Mycobacterium avium-intracellulare). No grupo B não foram observadas lesões na histopatologia, e de quatro carcaças houve o isolamento de micobactérias de rápido crescimento. As lesões macroscópicas foram encontradas predominantemente nos linfonodos mesentéricos. O Complexo MAC foi isolado apenas em linfonodos do grupo com lesão, não sendo isolado em tecido hepático e muscular. CONCLUSÃO: Não foi possível o estabelecimento de relação entre o tipo de micobactéria isolada e as características macroscópicas das lesões.

Acute renal failure after rifampicin

A patient with miliary tuberculosis and a chronic urogenital focus is described, who had a borderline renal function at diagnosis and developed overt renal failure upon daily treatment with rifampin (RMP), isoniazid (INH) and ethambutol (EMB). This is the first Brazilian report of BMP induced renal damage. A renal biopsy taken on the third day of oliguria showed recent tubular necrosis with acute interstitial inflammation and granuloma formation. The aspect of the granulomatous lesion hightly suggested drug etiology because of the lack of palisading, high incidence of neutrophils and absence of facid-fast bacilli. This is the first presentation of an acute granulomatous interstitial nephritis probably due to RMP. Furthermore the pathogenesis of the renal damage caused by tuberculosis and RMP are discussed.

Histopatologia da leishmaniose tegumentar por Leishmania braziliensis braziliensis: 1. Padrões histopatológicos e estudo evolutivo das lesões

Os autores analisam material de biópsias de 378 casos de Leishmaniose Tegumentar, causada por Leishmania braziliensis braziliensis, da localidade endêmica de Três Braços (Estado da Bahia). O parásitos, embora escassos, foram encontrados em 63,7% dos casos da forma cutânea e em 37,5% dos casos da forma mucosa. As alterações dérmicas ou do córion da mucosa permitiram identificar cinco padrões histopatológicos: 1) Reação Exsudativa Celular, constituída por um infiltrado histiolinfoplasmocitário; 2) Reação Exsudativa e Necrótica, na qual ocorre uma necrose no seio do infiltrado inflamatório; 3) Reação Exsudativa e Necrótico-Granulomatosa, que corresponde ao quadro descrito como inflamação crônica granulomatosa com necrose; 4) Reação Exsudativa e Granulomatosa, onde se observa uma reação granulomatosa desorganizada, sem que esteja presente necrose tecidual; 5) Reação Exsudativa e Tuberculóide, caracterizada pelo granuloma tuberculóide. O estudo evolutivo realizado em 49 casos, mostrou que houve uma mudança de padrão histopatológico observada, em biópsias sucessivas, em 63,2% dos casos da forma cutânea e em 45,4% dos casos da forma mucosa. Através desse estudo, é possível afirmar-se que o padrão de Reação Exsudativa Celular constitui o quadro inicial e final da lesão, com os demais padrões aparecendo interposto durante a evolução da doença.

Histopatologia da leishmaniose tegumentar por Leishmania braziliensis braziliensis. 3. Reação celular nos tecidos

Os A.A. analisam as alterações histopatológicas observadas em 378 casos de Leishmaniose Tegumentar da localidade de Três Braços Estado da Bahia, dos quais 307 eram de portadores de lesões exclusivamente cutâneas, 54 de portadores de lesões exclusivamnte mucosas e 17 de portadores de lesões cutâneo-mucosas. A infiltração histiolinfoplasmocitária, na maioria dos casos, parece desempenhar o papel de resposta celular inespecífica à presença de um irritante tecidual, porém, nos casos de forma mucosa, não se pode afastar a possibilidade de que esse infiltrado esteja participando de uma reação de tipo autoagressivo. O plasmócito constitui um elemento quase constante nas lesões desenvolvidas, mas não tem sido observado nas lesões residuais, quer em via de cura ou já cicatrizadas; sua presença nestes casos denota, quase sempre, tendência à recidiva. Os mastdcitos foram observados em lesões tanto da forma cutânea como da forma mucosa, mas predominavam nas primeiras. Seu número foi significantemente maior no padrão de Reação Exsudativa e Neerótico Granulomatosa, onde os fenômenos necróticos são bem desenvolvidos. Os eosinófilos apresentaram associação significativa com os mastócitos, confirmando a existência de um eixo bidirecional entre estás duas células, o qual deve participar da modulação inflamatória, na Leishmaniose Tegumentar. Dois tipos de reação granulomatosa foram observados: um desorganizado, em relação, muitas vezes, com a necrose tissular, e outro organizado, mais raro, do tipo tuberculóide. O primeiro foi interpretado como de origem pós-necrótica, surgindo com a redução da carga parasitária, propiciada pelos fenômenos necróticos: eliminado o antígeno e mantidos os níveis de anticorpos, surgem as condições necessárias ao estabelecimento do granuloma, semelhante àquele observado nas lesões por imunocomplexo em excesso de anticorpos. O outro tipo de reação foi o granuloma de células epiteliódes, que surgiu em dois grupos de pacientes. Nos pacientes jovens, com doença de curto tempo de evolução e intradermorreação não exacerbada, este tipo de granuloma talvez seja a expressão da Hipersensibilidade Granulomatosa Específica, descrita por EPSTEIN (1977). No outro grupo de pacientes, havia em todos intradermorreação exacerbada. Nestes casos a hipersensibilidade granulomatosa, associando-se ã hipersensibilidade mediada por células — agora ampliada pelo seqüestro do antígeno —, reforçaria o processo granulomatoso, através da reverberação do estímulo antígênico; isso tornaria o tratamento mais difícil e pior o prognóstico para o caso.

Histopatologia da leishmaniose tegumentar por Leishmania braziliensis braziliensis: 4. Classificação histopatológica

Os A A. analisaram as alterações histológicas encontradas em 162 casos de Leishmaniose Tegumentar da localidade de Três Braços, Estado da Bahia, dos quais 131 (80,9%) eram de portadores de lesões cutâneas e 31 (19,1%) de portadores de lesões mucosas. Analisaram, também, o comportamento clínico dos cinco padrões histopatológicos, já antes descritos, em relação à terapêutica. O melhor prognóstico esteve sempre ligado ao padrão de Reação Exsudativa e Granulomatosa, ou seja, a uma fase na qual o organismo, tendo lançado mão de um mecanismo endógeno de lise parasitária, já circunscreveu a área de necrose por uma reação granulomatosa, e esta é agora apenas o elemento residual. A ação terapêutica nessa fase somente acelera a resolução natural do caso. O grupo seguinte é amplo, e compreende os casos em que a lesão pertence aos padrões de Reação Exsudativa Celular (formas cutâneas), Reação Exsudativa e Necrótica e Reação Exsudativa e Necrótico-Granulomatosa. Nesses casos, o mecanismo de auto-controle da lesão encontra-se ainda em curso, e a ação terapêutica encurta o período de evolução natural. Os f.asos do padrão de Reação Exsudativa e Tuberculóide tiveram um prognóstico variável. Houve boa resposta à terapêutica quando o granuloma tuberculóide característico desse padrão surgiu em pacientes jovens, com curto tempo de evolução da doença e intradermorreação não exacerbada. Nos demais casos tuberculóides —. principalmente em pacientes adultos, com longo tempo de evolução da doença e intradermorreação exacerbada —, a resposta foi menos satisfatória. Em último lugar, com prognóstico reservado, ficaram os casos da forma mucosa que apresentaram o padrão de Reação Exsudativa Celular, onde o infiltrado pode estar desempenhando papel de auto-agressão. O presente estudo evoluiu para a proposição de uma classificação da Leishmaniose Tegumentar, baseada nos padrões histopatológicos observados. Esta classificação, estritamente morfológica, deverá ser de fácil aplicação para o Patologista e, como apresenta também uma correspondência clínico-evolutiva poderá constituir auxílio valioso ao médico envolvido no diagnóstico e tratamento da Leishmaniose Tegumentar.

Histopathology of cutaneous and mucosal lesions in human paracoccidioidomycosis

Biopsies from cutaneous and mucosal lesions from 40 patients with active paracoccidioidomycosis, were studied histopathologically. All cases exhibited chronic granulomatous inflammation and 38 also presented suppuration; this picture corresponded to the mixed mycotic granuloma (MMG). Pseudoepitheliomatous hyperplasia and the transepidermic (or epithelial) elimination of the parasite, were observed in all cases. In paracoccidioidomycosis elimination takes place through formation of progressive edema, accompained by exocytosis. The edema gives rise to spongiosis, microvesicles and microabscesses which not only contain the fungus but also, various cellular elements. Cells in charge of the phagocytic process were essentialy Langhans giant cells; PMN's, epithelioid and foreign body giant cells were poor phagocytes. An additional finding was the presence of fibrosis in most biopsies.

Paracoccidioidomycosis: a sequential histopathologic study of lesions in experimentally-infected rats

Female albino rats were used for the sequential histopathological study of experimental paracoccidioidomycosis. The animals were inoculated intraperitoneally with a strain of Paracoccidioides brasiliensis in the yeast-like phase, and sacrificed at given intervals from 1 to 168 days after inoculation; each animal received an inoculum of 4 x 10(6) cells in 0.8 ml of saline. The control group received saline containing scrapings of the culture medium. Tissue from the inoculation site was examined. The cellular population, the extracellular matrix, and the presence and characteristics of fungi were analysed in the inflammatory granulomatous process by light microscopy. The results allowed to separate the kinetic of the inflammatory response into three stages: 1) neutrophilic or macrophagic-neutrophilic; 2) pre-granulomatous; 3) granulomatous. Synthesis of the extracellular matrix began with the depositing of fibrin-like material, and increased gradually with deposits of collagen, proteoglycans, and glycoproteins. Parasites were present in all of the examined periods. Recurrences of the disease were clearly shown through the concurrence of recently-formed granulomas with older granulomas, implying that this type of granulomatous process does not eliminate the disease, nor is it able to limit fungal dissemination over a prolonged period of time.

Cyclophosphamide effect on coccidioidomycosis in the rat

Coccidioidomycosis is a systemic mycosis, endemic in arid areas of the American continent. The rat was employed as an experimental host, since it had been shown to reproduce human lesions and present a chronic course of disease with granulomas mainly restricted to lungs. Given the influence of immunosuppressive therapy on the clinical course of human coccidioidomycosis, we studied the effect of cyclophosphamide (CY) in the experimental rat model. Accordingly, animals were inoculated with 400 Coccidioides immitis arthroconidia of the Acosta strain, by intracardiacal route. As single CY doses failed to alter the course of disease, three schedules were used: A) 4 daily doses of 20 mg/kg each, prior to C. immitis inoculation; B) 4 similar daily doses after infection; and C); 6 doses of 20 mg/kg each, given from day +1 to +4, then on days +8 and +9, post infection (pi), taking day 0 as the time of fungal inoculation. The first two schedules inhibited antibody formation up to day 28 pi, without modifying cellular response to coccidioidin as measured by foodpad swelling. Initially, there was greater fungal spread than in controls receiving C. immitis alone, which proved self-limiting in the latter. In contrast, schedule C led to 559r mortality, with both humoral and cellular response abrogation, accompanied by extensive C. immitis dissemination. Histology disclosed significant alterations, such as the persistence of primary infection sporangia, corresponding to the acute stage of coccidioidomycosis in the absence of granuloma development. Therefore, the observed depression in cellular immunity seems responsible for the lack of inflammatory reaction capable of restricting sporangia proliferation in tissues which, in turn, enhances pathogen spread and mortality rate.