Regeneração do autoimplante esplênico em ratos: avaliação morfofuncional e imuno-histoquímica

Diante da importância do baço, deve-se tentar a sua preservação sempre que possível e, nas situações em que a esplenectomia total é inevitável, a única alternativa para a preservação de sua função parece ser a realização do autoimplante esplênico. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi analisar o desenvolvimento da regeneração morfológica do tecido autoimplantado, sob microscopia de luz e por imunomarcação, e avaliar a regeneração funcional, por meio da depuração dos corpúsculos de Howell-Jolly, em ratos submetidos a esplenectomia total combinada com autoimplante esplênico. Foram utilizados 112 ratos Wistar albinos machos adultos, distribuídos aleatoriamente em 16 grupos. Semanalmente, durante 16 semanas, os sete animais de cada grupo foram submetidos a coleta sanguínea, sendo preparadas lâminas para avaliação da presença de corpúsculos de Howell-Jolly (avaliação funcional), que estiveram presentes durante as 15 primeiras semanas, sendo que, a partir da oitava semana, houve uma diminuição significativa, mas somente não foram mais identificados na 16 semana. Em seguida à coleta sanguínea, os animais correspondentes a cada semana foram mortos por sobredose anestésica e submetidos a relaparotomia para retirada do tecido esplênico autoimplantado regenerado. Posteriormente, esse tecido regenerado foi analisado sob microscopia de luz, onde, sob coloração de hematoxilina-eosina, observou-se regeneração morfológica completa do tecido autoimplantado a partir da oitava semana, sendo encontrado um tecido morfologicamente idêntico ao baço normal. Com a técnica de resorcina-fucsina de Weigert, identificaram-se fibras do sistema elástico, demonstrando elastogênese intensa no processo de regeneração do tecido esplênico autoimplantado. Na imunomarcação com antígeno de proliferação celular nuclear (PCNA), observou-se proliferação celular, evidenciando uma expressão gradativa das células a partir da 2 semana, sendo que, nas 9 e 10 semanas, observou-se aumento significativo na imunodensidade, quando comparadas às demais, o que não ocorreu com a técnica para caspase-3, onde a apoptose mais intensa ocorreu nas primeiras semanas. Nossos resultados mostram que, com oito semanas, existe regeneração morfológica do autoimplante esplênico, assemelhando-se a um baço normal, no mesmo momento em que parece iniciar-se a sua regeneração funcional.

Influência de um extrato aquoso de Coriandrum sativum na marcação in vitro de constituintes sanguíneos com tecnécio-99m e de sua associação com vibração gerada por plataforma oscilante na biodistribuição do radiofármaco Na99mTcO4 e na concentração de biomarcadores em ratos Wistar

Coriandrum sativum, conhecido popularmente como coentro, é um vegetal usado na alimentação humana. Também é utilizado como planta medicinal para tratamento de diabetes, complicações gastrintestinais, e como um antiedêmico, antisséptico e emenagogo. Em investigações acerca dos efeitos do extrato de plantas, é importante a determinação de alguns parâmetros físico-químicos. Diversos modelos experimentais têm sido usados, inclusive com o emprego de radionuclídeos. Em procedimentos da Medicina Nuclear que auxiliam o diagnóstico de doenças, o tecnécio-99m (99mTc) é o radionuclídeo mais utilizado. Hemácias marcadas com 99mTc estão entre as várias estruturas celulares que podem ser marcadas com este radionuclídeo e usadas como radiofármaco. Para a marcação com 99mTc é necessária a presença de um agente redutor, e o mais utilizado é o cloreto estanoso (SnCl2). As terapias com drogas e condições de dieta além de doenças podem alterar a marcação de constituintes sanguíneos, bem como a biodistribuição de diferentes radiofármacos. A exposição às vibrações geradas por plataforma oscilatória produz exercícios de corpo inteiro. O objetivo deste estudo foi caracterizar a preparação de um extrato do Coriandrum sativum, através de parâmetros físico-químicos, verificar os efeitos desse produto natural na radiomarcação de constituintes sanguíneos e em associação à vibração gerada pela plataforma na biodistribuição de Na99mTcO4 e na concentração de alguns biomarcadores. O extrato de coentro teve a o pico de absorbância em 480 nm. O extrato de coentro foi inversamente correlacionado com a concentração na condutividade elétrica. Foi encontrado o maior valor de pH na menor concentração do extrato (0,5 mg/mL). Não houve uma alteração significativa na marcação de constituintes sanguíneos com 99mTc. E a associação do extrato de coentro e vibração gerada por plataforma com frequência de 12 Hz teve efeito no baço, como observado na fixação do radiofármaco nesse órgão e ação em alguns órgãos alternando a concentração de alguns biomarcadores. Em conclusão, parâmetros físico-químicos podem ser úteis para caracterizar o extrato estudado. Provavelmente, as propriedades redox associadas com substâncias desse extrato podem ser os responsáveis pela ausência do efeito na radiomarcação de constituintes sanguíneos. A determinação da captação do Na99mTcO4 em diferentes órgãos permite verificar que o extrato de coentro sozinho não foi capaz de interferir na biodistribuição do radiofármaco. Contudo o tratamento de animais com vibração gerada pela plataforma alterou significativamente a fixação do pertecnetato de sódio no baço e a concentração do colesterol, triglicerídeo, CK e bilirrubina.

Tuberculosis in seals caused by a novel member of the Mycobacterium tuberculosis complex: Mycobacterium pinnipedii sp. nov.

A comparison of Mycobacterium tuberculosis complex isolates from seals (pinnipeds) in Australia, Argentina, Uruguay, Great Britain and New Zealand was undertaken to determine their relationships to each other and their taxonomic position within the complex. Isolates from 30 cases of tuberculosis in six species of pinniped and seven related isolates were compared to representative and standard strains of the M. tuberculosis complex. The seal isolates could be distinguished from other members of the M. tuberculosis complex, including the recently defined ‘Mycobacterium canettii’ and ‘Mycobacterium caprae’, on the basis of host preference and phenotypic and genetic tests. Pinnipeds appear to be the natural host for this ‘seal bacillus’, although the organism is also pathogenic in guinea pigs, rabbits, humans, Brazilian tapir (Tapirus terrestris) and, possibly, cattle. Infection caused by the seal bacillus is predominantly associated with granulomatous lesions in the peripheral lymph nodes, lungs, pleura, spleen and peritoneum. Cases of disseminated disease have been found. As with other members of the M. tuberculosis complex, aerosols are the most likely route of transmission. The name Mycobacterium pinnipedii sp. nov. is proposed for this novel member of the M. tuberculosis ...

Estudo de fatores prognósticos em pacientes submetidos ao transplante de medula óssea para tratamento de leucemia mielóide crônica.

O presente estudo compreende 96 transplantes de medula óssea (TMO) de doadores HLA-idênticos em pacientes portadores de Leucemia Mielóide Crônica, no período de Junho de 1986 a Junho de 1998. A autora selecionou diversas covariáveis para serem estudadas como fatores prognósticos de cinco desfechos principais: ocorrência de doença enxerto contra hospedeiro (DECH) aguda e crônica, incidência de recaída, sobrevida livre de doença (SLD) e sobrevida global (SG). As covariáveis estudadas foram: idade, sexo, escolaridade, tempo entre o diagnóstico e o transplante, fase da doença ao transplante, regime de condicionamente, profilaxia de DECH, compatibilidade de sexo entre doador e receptor, sexo do doador, tamanho do baço e do fígado, percentagem de blastos e número de plaquetas no sangue periférico na primeira consulta ao CEMO, ocorrência e grau de DECH aguda, ocorrência de DECH crônica e tempo para recuperação de plaquetas após o TMO. Não foi encontrada associação estatisticamente significativa num nível de 95% de confiança entre qualquer das covariáveis e a ocorrência de DECH crônica ou de recaída. A ocorrência de DECH aguda mostrou-se associada apenas com a fase da doença ao transplante. As covariáveis que se mostraram associadas com a sobrevida global e a sobrevida livre de doença foram: a percentagem de blastos no sangue periférico e tamanho do baço na primeira consulta ao CEMO, a fase da doença ao transplante, o tipo de profilaxia de DECH, a ocorrência e o grau de DECH aguda e o tempo para recuperação de plaquetas num nível acima de 20 x 103/mm3.

Alterações no tecido esplênico de camundongos esquistossomóticos com desnutrição calórica e protéica induzida no período de lactação

Apesar de significativos avanços obtidos no estudo da esquistossomose mansônica, as relações existentes entre esquistossomose e má-nutrição ainda não se acham completamente esclarecidas. Sendo a fase de lactação um período de vida de extrema importância para o indivíduo, alterações metabólicas na gestante podem afetar diretamente o desenvolvimento do feto sugerindo uma programação (imprinting) no metabolismo deste indivíduo em resposta adaptativa aos fatores ambientais encontrados em períodos iniciais de desenvolvimento. Este trabalho teve como objetivo avaliar as características do baço na fase aguda da infecção esquistossomótica de camundongos programados metabolicamente por restrição calórica e restrição protéica. Os baços dos animais eutanasiados na 9 semana de infecção foram submetidos a cortes histológicos (5m) e corados com hematoxilina-eosina. Foi realizada avaliação histopatológica, análise morfométrica e estereologia. A análise estatística foi realizada utilizando-se o programa Graph Pad Instat. Foi observada desorganização estrutural da polpa branca e da polpa vermelha nos grupos programados, independente da presença de infecção. Animais infectados apresentaram hiperplasia e hipertrofia da polpa branca e maior quantidade de pigmentos dispersos no tecido esplênico, bem como a presença de eosinófilos no interior de estruturas vasculares. A polpa branca dos grupos infectados tanto de restrição calórica quanto de restrição protéica apresentaram medidas morfométricas maiores quando comparados aos grupos não infectados. Os resultados estereológicos mostraram que o grupo de restrição calórica infectado apresentou menor densidade de volume de polpa vermelha, enquanto não houve diferenças significativas na densidade de volume de polpa branca. Megacariócitos foram vistos em maior quantidade nos grupos infectados, com ênfase no grupo de restrição protéica. Estes dados sugerem que a programação pela desnutrição materna na lactação e a infecção esquistossomótica provocam desorganização do tecido esplênico.

Modulação por Sucupira (Pterodon polygalaeflorus, Benth) da distribuição de Linfócitos T ativados e T de memória em linfonodos (LN) de camundongos com Artrite Induzida por Colágeno tipo II (CIA) e da mielopoiese em baços de camundongos primados com Adjuvante Completo de Freund (AFC)

Sementes de árvores do gênero Pterodon, conhecidas principalmente pelo nome Sucupira, são utilizadas popularmente para o tratamento de doenças reumáticas. Na presente dissertação, temos como objetivo estudar a possível ação do extrato hidroalcoólico de sementes de Pterodon polygalaeflorus (EHPp) no tratamento de Artrite Induzida por Colágeno tipo II (CIA) em camundongos DBA/1J. Verificou-se a distribuição de Linfócitos T CD4+ com fenótipo de memória em linfonodos de animais com CIA; a possível interferência do tratamento no segundo aumento de células mielóides (Mac-1+) esplênicas gerado pela segunda injeção de colágeno tipo II (CII) para indução da CIA e confirmou-se o fenótipo granulocítico dessas células mielóides. Além disso, através de outro modelo experimental de 10 dias de duração, objetivou-se estudar as células mielóides Mac-1+: se o tratamento com EHPp interfere na mielopoese esplênica induzida somente pela injeção de Adjuvante de Freund Completo (AFC) em camundongos DBA1/J e avaliar uma eventual diferença entre o grau de ativação dessas células em animais primados com AFC tratados ou não com EHPp. A CIA foi induzida em camundongos DBA/1J machos, por injeção intradérmica (i.d.) de CII em AFC com reforço intraperitonial de CII três semanas após a primeira injeção. O tratamento oral, diário, com EHPp por cerca de 30 dias foi iniciado no dia do reforço com CII. No modelo de curta duração, com o intuito de verificar o possível aumento de células Mac-1+ no baço, os animais foram tratados oralmente com EHPp, por 9 dias, sendo o AFC injetado, i.d., no 5o dia do tratamento e os animais sacrificados no 10o. Os resultados obtidos foram: o tratamento com EHPp interfere na distribuição de Linfócitos T com fenótipo de memória em animais com indução de CIA; resultados preliminares sugerem que o tratamento com EHPp não interfere no segundo aumento de células mielóides no baço no modelo CIA; a maioria das células mielóides presentes no baço de animais sadios ou de animais com CIA apresenta fenótipo granulocítico (GR.1+); o tratamento com EHPp reduz significantemente a mielopoese esplênica induzida pela injeção de AFC; a fração significante de células Mac-1+ no baço de animais primados com AFC apresenta aumento de produção de Espécies Reativas de Oxigênio em relação aos animais sadios ou tratados com EHPp. Em conjunto, estes resultados permitem identificar uma possível ação anti-inflamatória do EHPp ao impedir o aumento de células inflamatórias no baço de animais primados com AFC, bem como uma atividade imunossupressora, evidenciada pela redução de Linfócitos com perfil de recém ativação e de Linfócitos com perfil de memória nos LNs em relação aos animais com CIA, sugerindo o seu envolvimento nos processos de ativação e de migração linfocitários.

Histological distribution and ultrastructure of exocrine pancreas in Indian major carp (Labeo rohita Ham.) and its alteration in aflatoxicosis

The distribution pattern of exocrine pancreas in Labeo rohita besides its general location along the course of intestinal mesentery was studied. It is evenly distributed within the liver around portal vessels and also within the spleen near a blood vessel. On ultrastructure, two cell types of different degrees of staining intensities containing abundant rough endoplasmic reticulum, mitochondria, pre-zymogen and zymogen granules were marked. During aflatoxicosis, the mesenteric pancreas and hepatic pancreas were mostly affected revealing necrotic changes to acini. The zymogen granular activities were markedly reduced. Ultra structurally, the rough endoplasmic reticulum was fully dilated and formed whorled pattern. The damage to the exocrine pancreas might be affecting digestive enzymes' secretion which may be one of the causes of aflatoxin-induced anorexia in fish.

Indices and fecundity of a threatened freshwater catfish Mystus montanus

Fecundity of threatened catfish Mystus montanus was estimated from a collection of gravid females, which ranged from 290 to 27,972 according to body length and weight. The relationship between fecundity and BL, BW, GL and GW was analyzed by linear regression, which showed both positive and negative correlation. Gonado-somatic index (GSI), hepato-somatic index (HSI) and spleen-somatic index (SSI) ranged from 0.135 to 21.28, 0.358 to 21.33 and 0.126 to 1.08 in females and the corresponding values for males were 0.17 to 10.68, 0.619 to 3.25 and 1.25 to 2.33 respectively.

Immnunomodulatory and cytotoxic effects of aqueous leaf extracts of certain plants on common carp, Cyprinus carpio

Effect of aqueous leaf extracts of Catheranthus roseus, Calotropis gigantium and Datura stromoneum on common carp, Cyprinus carpio were investigated. C. carpio were separately fed with 1 and 2% aqueous extracts of these three plant leaves for a period of seven days. In 1% Catheranthus roseus of leaf extract fed group no significant tissue level changes were recorded. One and 2% of other two species fed treated group showed mild to severe necrotic and cellular changes in liver, kidney and spleen. Immunologically, significant rise in antibody titre and respiratory burst activity was recorded for 1% Catheranthus roseusfed group.

Health and disease status of Thai pangas, Pangasius hypophthalmus cultured in rural ponds of Mymensingh, Bangladesh

Thai pangas, Pangasius hypophthalmus is one of the important aquaculture species in Bangladesh. Over the last few years spectacular development has been taking place in Thai pangas farming in Mymensingh district. Due to availability of easy breeding and culture techniques as well as quick return, more and more people are converting their rice fields into pangas farms overnight. The present study was carried out to examine health and disease status of Thai pangas mainly through clinical, histopathological and bacteriological techniques. In addition, for collecting primary data on disease and health status of Thai pangas and the resultant socioeconomic impacts on rural households, questionnaire interview and participatory rural appraisal tools were used with selected farming households in three upazilas of Mymensingh district. The most prevalent diseases as reported by the farmers were red spot, followed by anal protrusion, tail and fin rot, pop eye, dropsy and gill rot. Other conditions like cotton wool type lesion, ulceration and white spot were reported but with lower incidence. Four isolates of Aeromonas hydrophila were recovered from kidney and lesion of diseased fish. Hemorrhage over the body especially near mouth and caudal region was noticed in the fishes associated with aeromonad infection. Internally, kidney, liver and spleen became swollen and enlarged. The isolates varied with their pathogenicity. All the four isolates were sensitive to Nitrofurantoin, Cotrimoxazole and Tetracycline but were resistant to Amoxycilline. An attempt was made to treat diseased fish with extracts from neem leaf, garlic and turmeric. Recovery of infection was monitored through mortality and histopathology. General histopathological changes of different organs were also studied. Extract from neem (Azadirachta indica) leaf gave better result. Telangiectasis, lamellar hypertrophy and hyperplasia hemorrhage, lamellar fusion, necrosis of lamellar epithelial cells, presence of parasites and their cysts were the major pathology of gills. Hemorrhagic lesion, pyknotic nuclei and melanomacrophage centers (MMC) were found in the liver of fish. Major pathologies in kidney of fish included presence of MMC, necrotic and ruptured kidney tubules, severe haemopoietic necrosis, and hemorrhage. The economic loss due to disease in Thai pangas farming was estimated from the difference between expected production and actual production. On an average, Thai pangas farmers of Mymensingh incur a loss of Tk. 23,104/ha/cycle due to fish disease (3.6% of expected total production). The loss, however, varied with location and size of farms, type of farmers and management practices. The study also highlighted fish health management related problems and recommended further work for the development of user-friendly farmer-oriented fish health management packages.

Distribution of 5'-nucleotidase activity in the tissues of a freshwater teleost, Ophicephalus striatus Bloch

Homogenates of tissues have been analysed for the presence of 5'-nucleotidase activity. Sexes are not treated individually since no significant differences were observed. All organs showed marked activity, the highest being in the cardiac tissues, then the kidney, spleen, brain, and low values in the liver and muscles. Comparison with data from other fish studied shows a marked difference between O. striatus and O. punctatus.

Mercury bioaccumulation in pike (Esox lucius) food chain from Anzali Lagoon, Iran

A number of wide-ranging monitoring studies have been performed in order to estimate the degree of mercury (Hg) contamination in freshwater ecosystems. Knowledge regarding contamination of different levels of the food chain is necessary for estimation of total pollutant input fluxes and subsequent partitioning among different phases in the aquatic system. The growing international concern about this environmental data is closely related to the strongly developing ecological risk assessment activities. In addition,freshwater monitoring outputs hold a key position in the estimation of the Hg dose consumed by the human population as it is highly dependent on fish consumption. So monitoring of Hg in the tissue of edible fish is extremely important because of contaminated fish has caused serious neurological damage to new born babies and adults. Mercury tends to accumulate in fish tissue, particularly, in the form of methyl mercury, which is about 10 times more toxic than inorganic mercury. The Anzali lagoon is one of the biggest wetland of Guilan province, which joins to the Caspian sea. Many Chemical and industrial factories plus agricultural runoffs and urban and rural sewages are major polluting sources of the Anzali wetland. Since many of those polluting sources drain their wastes directly or indirectly into the Anzali wetland and their sewages may be polluted with Hg, this study was conducted to find out the bioaccumulation of Hg bioaccumulation in pike (Esox lucius) food chain from Anzali lagoon, Iran. Sampling were carried out from July 2004 to July 2005, in addition 318 speciments of 9 fish species were collected. T-Hg was measured by LECO AMA 254 Advanced Mercury Analyzer (USA) according to ASTM standard No D-6722. Each sample was analyzed 3 times. Accuracy of T-Hg analysis was checked by running three samples of Standard Reference Materials; SRM 1633b, SRM 2711 & Sra 2709. Detection limit was 0.001 mg/kg in dry weight. The Accuracy degree of analyzor equipment with RSD<%0.05 (N=7) was between %95.5 and %105. In overal eigth fish species were distingushed in the gut content of 87 speciments of pike with age 1-5 year and maximum length 550mm. The max. and min. concentration of T-Hg in dorsal muscle of pjke was 0.2ppm in one year and 1.2ppm in five year class. The mean of T-Hg significantly increased with age and length increased (P<0.05).Mercury accumulation pattern in pike was as well as muscle > liver > spleen (P<0.05). THg content in female was higher than male(P<0.05). In contrast the mean of THg concentration in dorsal muscle of eigth fish species as prey was 0.282, 0.261, 0.328, 0.254, 0.256, 0.286, 0.322 and 0.241 ppm for Carassius auratus gibelio, Hemiculter leucisculus, Blicca bjoerkna transcaucasica, Chalcalburnus mossulensis, Rhodeus sericeus amarus, Gambusia holbrooki, Alburnus charusini hohenackeri & Scardinius Erythrophthalmus respectively.Liner regresion indicated that high degree of relationship between age of pike and Uptak/Intake ratio (R2=%99.12) and indicated that the mercury bioaccumulation in the pike dorsal muscle increased with age increased. BFA was >1 and and indicating the mercury biomagnification in the pike food chain. Trophy level of pike in the Anzali lagoon was estimated as well as 3.5 and 4 . It is generally agreed that Hg concentration in carnivorous fish are higher than in noncarnivorous species.

兔抗人外周血单核细胞、兔抗猴脾脏淋巴细胞免疫血清的制备及其在分离人和猕猴胚胎内细胞团中的应用

采用梯度离心的方法用淋巴细胞分离液从浓缩的人白细胞悬液中分离人外周血单核细胞，从猕猴新 鲜脾脏中研磨分离猕猴脾脏淋巴细胞；分别将人外周血单核细胞和猕猴脾脏淋巴细胞作为免疫原，每次通过耳 缘静脉注射4×10s个细胞免疫日本大耳白兔，每周免疫一次，共免疫3次，制备兔抗人外周血单核细胞和兔抗 猕猴脾脏淋巴细胞免疫血清。体外培养人和猕猴胚胎至囊胚，采用制备的免疫血清，分离人和猕猴囊胚内细胞 团，用于建立人和猕猴胚胎干细胞系。结果如下：(1)用半微量细胞毒实验法测得兔抗人外周血单核细胞免疫 血清和兔抗猕猴脾脏淋巴细胞免疫血清的效价分别为1：320和1：640；(2)两种免疫血清成功地裂解了15个人 囊胚和33个猕猴囊胚的滋养层细胞，分离出了内细胞团，表明免疫血清的制备取得了成功，为建立人和猕猴 胚胎干细胞系奠定了基础。

Effect of organophosphate, diazinon on some immunophysiological, haematological and histological variable of Rutilus frisii kutum (Kamensky,1901)

The acute toxicity and effects of diazinon on some haematological parameters of kutum (Rutilus frisii kutum, Kamensky, 1901) weighing 613.33 g±157.06 g were studied under static water quality conditions at 15°C ± 2ºC in winter and spring 2009. The effective physical and chemical parameters of water were pH= 7-8.2, dh= 300mg/L (caco3), DO= 7 ppm and T= 15°C±2ºC. The first test was primarily to determine the effects of acute toxicity (LC5096 h) of the agricultural toxicant diazinon (emulsion 60%) on kutum male brood stocks. For this purpose, 4 treatments were used to test toxicity; each treatment was repeated in 3 tanks with 9 fish per treatment and with 180 litres water capacity. After obtaining the final results, the information was analysed statistically with Probit version 1.5 (USEPA, 1985), and we determined the LC10, LC50 and LC90 values at 24 hours, 48 hours, 72 hours and 96 hours; the maximum allowable concentration value (LC5096 h divided by 10) (TRC, 1984); and the degree of toxicity. The second stage of testing consists of four treatments: LC0= 0 as experimental treatment, treatment A with a concentration of LC1= 0.107 mg/L, treatment B with concentration of LC5= 0.157 mg/L, treatment C with concentration of MAC value= 0.04 mg/L. Male brood stocks of kutum were treated with these concentrations for 45 days. Experiments were carried out under static conditions based on the standard TRC, 1984 method over 45 days. Our results show that long-term exposure to diazinon causes a decrease in the erythrocyte count (RBC), haemoglobin (Hb), haematocrit (PCV), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular haemoglobin (MCH), mean corpuscular haemoglobin concentration (MCHC), leucocyte count (WBC), lymphocyte, testosterone, iron (Fe), sodium (Na), lactate dehydrogenase (LDH), and cholinesterase (CHeS). In addition, diazinon also causes an increase in prolymphocyte, aspartate aminotransferase (AST), cholesterol, alkaline phosphatase (ALP) and adrenaline (P<0.05). There are no significant effects on monocyte, eosinophil, magnesium (Mg), chloride (Cl), glucose (BS), urea (BUN), uric acid (U.A), triglyceride (TG), calcium (Ca), albumin (Alb), total protein (TP), cortisol, noradrenaline and high density lipoprotein (HDL) levels in kutum male brood stocks (P>0.05). Pathology results showed toxin diazinon no effect on average weight and fish body length, the average weight of heart, brain, spleen, liver, kidney and liver index but caueses decrease of gonad weigth and gonad index and also, cause complications of tissue necrosis, vascular congestion, inflammation in the liver, a sharp reduction in the number of glomeruli, necrosis, vascular congestion and haemorage in the kidney, capsule thickening and fibrosis, atrophy, vascular congestion, macrophages release increased, increasing sediment Hemosiderine and thickening of artery walls in the spleen, atrophy, fibrosis and necrosis in testis , vascular congestion, increased distance between the myocardium and fibrous string in heart and neuronal loss, vascular congestion and edema in the brain of kutum male brood stocks.

SECRETORY MONOCLONAL IGA ANTIBODY TO HUMAN SPERM PRODUCED BY GASTROINTESTINAL IMMUNIZATION INHIBITS HUMAN SPERM ACTIVITY AND MOUSE INVITRO FERTILIZATION

BALB/c mice were immunized intragastrically with human sperm. Cells from the Peyer's patches and spleens of the immunized mice were for the preparation of hybridomas secreting antisperm monoclonal IgA (mcIgA). The specific ratio of IgA-secreting cells in Peyer's patches was much higher than that in spleen. The binding site on human sperm of 9 of 19 mcIgA was in the post-acrosomal region using an immunofluorescent assay. Two of eight selected mcIgA caused strong human sperm agglutination and three of them produced significant inhibition of mouse in vitro fertilization. No mcIgA tested caused obvious human sperm immobilization or inhibited mouse in vivo fertilization. In vitro assembly of selected mcIgA in ascites with mouse secretory component (SC) caused no significant changes in effects on sperm function and in vitro fertilization. By use of Western blotting, dimer or higher polymers were demonstrated in all selected mcIgAs and corresponding protein antigens in 6 of 8 selected mcIgAs. These results suggest that human sperm function may be inhibited and fertilization rate reduced by specific secretory IgA to human sperm and that secretory immunity to protein antigens of human sperm could be induced by intragastrointestinal immunization.