Amphotericin B mediates killing in Cryptococcus neoformans through the induction of a strong oxidative burst

We studied the effects of Amphotericin B (AmB) on Cryptococcus neoformans using different viability methods (CFUs enumeration, XTT assay and propidium iodide permeability). After 1 h of incubation, there were no viable colonies when the cells were exposed to AmB concentrations >= 1 mg/L. In the same conditions, the cells did not become permeable to propidium iodide, a phenomenon that was not observed until 3 h of incubation. When viability was measured in parallel using XTT assay, a result consistent with the CFUs was obtained, although we also observed a paradoxical effect in which at high AmB concentrations, a higher XTT reduction was measured than at intermediate AmB concentrations. This paradoxical effect was not observed after 3 h of incubation with AmB, and lack of XTT reduction was observed at AmB concentrations higher than 1 mg/L. When stained with dihydrofluorescein, AmB induced a strong intracellular oxidative burst. Consistent with oxidative damage, AmB induced protein carbonylation. Our results indicate that in C. neoformans, Amphotericin B causes intracellular damage mediated through the production of free radicals before damage on the cell membrane, measured by propidium iodide uptake. (C) 2011 Institut Pasteur. Published by Elsevier Masson SAS. All rights reserved.

Comparative transcriptome analysis of Paracoccidioides brasiliensis during in vitro adhesion to type I collagen and fibronectin: identification of potential adhesins

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Dermatophyte-host relationship of a murine model of experimental invasive dermatophytosis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Trypanocidal action of eupomatenoid-5 is related to mitochondrion dysfunction and oxidative damage in Trypanosoma cruzi

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

High expression of human monocyte iNOS mRNA induced by Paracoccidioides brasiliensis is not associated with increase in NO production

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

A synthetic peptide selectively kills only virulent Paracoccidioides brasiliensis yeasts

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Esterilização de limas endodônticas com plasma de oxigênio

No presente trabalho, analisou-se a eficácia de uma nova técnica de esterilização de instrumental odontológico. Limas endodônticas contaminadas com Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus foram esterilizadas em plasma de oxigênio formado através de uma descarga elétrica contínua de 75 mA. Os resultados demonstraram efetiva eliminação dos microrganismos testados, utilizando-se um processo a baixas temperaturas e em tempos menores que os preconizados para processos convencionais (forno de Pasteur e autoclave). Microrganismos gram-negativos foram destruídos em 1 minuto de exposição e gram-positivos em 10 minutos.

Performance of a reciprocal shaker in mechanical dispersion of soil samples for particle-size analysis

A dispersão da amostra de solo é uma etapa fundamental da análise granulométrica, sendo realizada mediante o uso de dispersantes químicos e agitação mecânica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência de mesa agitadora reciprocante de baixa rotação na dispersão mecânica de amostras de solos de diferentes classes texturais. Foram realizadas análises granulométricas em 61 amostras com quatro repetições, empregando o método da pipeta para determinação da fração argila e tamisagem para determinação das frações areia grossa, areia fina e areia total, sendo o silte determinado por diferença. Na avaliação de desempenho, os resultados obtidos com uso da mesa agitadora reciprocante (MAR) foram comparados com dados disponíveis para as mesmas amostras oriundos de relatórios do Ensaio de Proficiência IAC para Laboratórios de Análises de Solos - Prolab/IAC. Análises de acurácia foram realizadas com base nos valores dos intervalos de confiança definidos para cada fração granulométrica componente de cada amostra ensaiada. Indicadores gráficos também foram utilizados na comparação de dados, por meio de dispersão e ajuste linear. A estatística descritiva indicou preponderância de baixa variabilidade em mais de 90 % dos resultados obtidos para as amostras de texturas arenosa, média e argilosa e em 68 % dos obtidos para as amostras de textura muito argilosa, indicando boa repetibilidade dos resultados obtidos com a MAR. Média variabilidade foi mais frequentemente associada à fração silte, seguida da fração areia fina. Os resultados das análises de sensibilidade indicam acurácia de 100 % nas três frações granulométricas - areia total, silte e argila - para todas as amostras analisadas pertencentes às classes texturais muito argilosa, argilosa e média. Para as nove amostras de textura arenosa, a acurácia média foi de 85,2 %, e os maiores desvios ocorreram em relação à fração silte. Nas aproximações lineares, coeficientes de correlação igual (silte) ou superiores (areia total e argila) a 0,93, bem como diferenças menores do que 0,16 entre os coeficientes angulares das retas e o valor unitário, indicam alta correlação entre os resultados de referência (Prolab/IAC) e os obtidos nos ensaios com a MAR. Conclui-se pelo desempenho satisfatório da mesa agitadora reciprocante de baixa rotação para dispersão mecânica de amostras de solo de diferentes classes texturais para fins de análise granulométrica, permitindo recomendar o uso alternativo do equipamento quando se emprega agitação lenta. As vantagens do uso do equipamento nacional incluem o baixo custo, a possibilidade de análise simultânea de grande número de amostras e o uso de frascos comuns, de vidro ou de plástico, baratos e de fácil reposição.

Atelectasia pulmonar em cães durante anestesia geral

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Antigenic typing of brazilian rabies virus samples isolated from animals and humans, 1989-2000

Amostras de vírus rábico isoladas de animais e humanos no período de 1989 a 2000 foram tipificadas antigenicamente com a utilização de um painel de anticorpos monoclonais contra a nucleoproteína viral, pré-estabelecido para o estudo da epidemiologia molecular do vírus rábico isolado nas Américas. As amostras testadas foram isoladas no laboratório de diagnóstico do Instituto Pasteur e outros centros de diagnóstico de raiva no Brasil. Além das cepas de vírus rábico fixo CVS-31/96-IP, mantida em cérebro de camundongos e a PV-BHK/97, mantida em cultura de células, cepas de vírus rábico isoladas de cães, gatos, bovinos, eqüinos, morcegos, ovinos, caprino, suínos, raposa, sagüí, coatí, guaxinim e humanos, totalizaram 330 amostras. Seis variantes antigênicas foram definidas, compatíveis com perfís observados no painel de anticorpos monoclonais pré-estabelecido utilizado, as de número 2 (cão), 3 (Desmodus rotundus), 4 (Tadarida brasiliensis), 5 (Vampiro da Venezuela), 6 (Lasiurus cinereus) e Lab (reagente a todos os anticorpos utilizados), além de outros seis perfís desconhecidos, não compatíveis com aqueles observados no painel utilizado. A maior variabilidade foi observada entre as amostras isoladas de morcegos insetívoros e a variante mais comum isolada entre as espécies foi a variante 3 (Desmodus rotundus). Estes fatos podem representar a existência de múltiplos ciclos de transmissão independentes, envolvendo diferentes espécies de morcegos.

Porphyromonas gingivalis-mediated shedding of extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN) by oral epithelial cells: a potential role in inflammatory periodontal disease

Extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN) or CD 147 is a transmembrane glycoprotein expressed by various cell types, including oral epithelial cells. Recent studies have brought evidence that EMMPRIN plays a role in periodontitis. In the present study, we investigated the effect of Porphyromonas gingivalis, a major pathogen in chronic periodontitis, on the shedding of membrane-anchored EMMPRIN and on the expression of the EMMPRIN gene by oral epithelial cells. A potential contribution of shed EMMPRIN to the inflammatory process of periodontitis was analyzed by evaluating the effect of recombinant EMMPRIN on cytokine and matrix metalloproteinase (MMP) secretion by human gingival fibroblasts. ELISA and immunofluorescence analyses revealed that P. gingivalis mediated the shedding of epithelial cell-surface EMMPRIN in a dose- and time-dependent manner. Cysteine proteinase (gingipain)-deficient P. gingivalis mutants were used to demonstrate that both Arg- and Lys-gingipain activities are involved in EMMPRIN shedding. Real-time PCR showed that P. gingivalis had no significant effect on the expression of the EMMPRIN gene in epithelial cells. Recombinant EMMPRIN induced the secretion of IL-6 and MMP-3 by gingival fibroblasts, a phenomenon that appears to involve mitogen activated protein kinases. The present study brought to light a new mechanism by which P. gingivalis can promote the inflammatory response during periodontitis. (C) 2011 Institut Pasteur. Published by Elsevier Masson SAS. All rights reserved.

Evaluation of aspiration method for bat brain collection for rabies diagnosis.

The diagnosis of rabies in bats is usually performed using the brain of suspected animals. The main hypothesis tested by the present study was whether the aspiration method using a plastic pipette (Pasteur type) was effective in the collection of bat brain sample for rabies diagnosis when compared to the skull-opening method. A total of 200 bats of 4 species were studied: Molossus rufus E. Geoffroy, 1805, Molossus molossus (Pallas, 1766), Artibeus lituratus (Olfers, 1818) and Myotis nigricans (Schinz, 1821). The proportion of brain weight compared to body weight was statistically higher when using the traditional method, although the brain mass collected by the aspiration method was enough for rabies diagnosis and did not damage any skull biometric characteristics. The results demonstrate that both collection methods detected positive samples, while the aspiration method has the advantage of skull preservation, permitting the identification of the species.

Caracterização antigênica e genotípica de isolados do vírus rábico, de quirópteros da cidade de Botucatu-SP e região

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Avaliação da infiltração bacteriana corono-apical de canais radiculares obturados com diferentes tipos de cimentos endodônticos

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Isolamento e reação em cadeia pela polimerase (PCR) para Leptospira spp. em amostras renais e hepáticas de ovinos sorologicamente positivos e negativos para leptospirose, abatidos em frigorífico, procedentes do estado de São Paulo

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)