Treatment of non-resectable hepatocellular carcinoma with autologous tumor-pulsed dendritic cells

Background: The response of hepatocellular carcinoma (HCC) to therapy is often disappointing and new modalities of treatment are clearly needed. Active immunotherapy based on the injection of autologous dendritic cells (DC) co-cultured ex vivo with tumor antigens has been used in pilot studies in various malignancies such as melanoma and lymphoma with encouraging results. Methods: In the present paper, the preparation and exposure of patient DC to autologous HCC antigens and re-injection in an attempt to elicit antitumor immune responses are described. Results: Therapy was given to two patients, one with hepatitis C and one with hepatitis B, who had large, multiple HCC and for whom no other therapy was available. No significant side-effects were observed. The clinical course was unchanged in one patient, who died a few months later. The other patient, whose initial prognosis was considered poor, is still alive and well more than 3 years later with evidence of slowing of tumor growth based on organ imaging. Conclusions: It is concluded that HCC may be a malignancy worthy of DC trials and sufficient details in the present paper are given for the protocol to be copied or modified. (C) 2002 Blackwell Publishing Asia Pty Ltd.

The receptor tyrosine kinase regulator sprouty1 is a target of the tumor suppressor WT1 and important for kidney development

WT1 encodes a transcription factor involved in kidney development and tumorigenesis. Using representational difference analysis, we identified a new set of WT1 targets, including a homologue of the Drosophila receptor tyrosine kinase regulator, sprouty. Sprouty1 was up-regulated in cell lines expressing wild-type but not mutant WT1. WT1 bound to the endogenous sprouty1 promoter in vivo and directly regulated sprouty1 through an early growth response gene-1 binding site. Expression of Sprouty1 and WT1 overlapped in the developing metanephric mesenchyme, and Sprouty1, like WT1, plays a key role in the early steps of glomerulus formation. Disruption of Sprouty1 expression in embryonic kidney explants by antisense oligonucleotides reduced condensation of the metanephric mesenchyme, leading to a decreased number of glomeruli. In addition, sprouty1 was expressed in the ureteric tree and antisense-treated ureteric trees had cystic lumens. Therefore, sprouty1 represents a physiologically relevant target gene of WT1 during kidney development.

Provision of 4-1BB ligand enhances effector and memory CTL responses generated by immunization with dendritic cells expressing a human tumor-associated antigen

Up-regulation of receptor-ligand pairs during interaction of an MHC-presented epitope on dendritic cells (DCs) with cognate TCR may amplify, sustain, and drive diversity in the ensuing T cell immune response. Members of the TNF ligand superfamily and the TNFR superfamily contribute to this costimulatory molecule signaling. In this study, we used replication deficient adenoviruses to introduce a model tumor-associated Ag (the E7 oncoprotein of human papillomavirus 16) and the T cell costimulatory molecule 4-IBBL into murine DCs, and monitored the ability of these recombinant DO to elicit E7-directed T cell responses following immunization. Splenocytes from mice immunized with DCs expressing E7 alone elicited E7-directed effector and memory CTL responses. Coexpression of 4-1BBL in these E7-expressing DO increased effector and memory CTL responses when they were used for immunization. 4-1BBL expression up-regulated CD80 and CD86 second signaling molecules in DO. We also report an additive effect of 4-IBBL and receptor activator of NF-kappaB/receptor activator of NF-kappaB ligand coexpression in E7-transduced DC inummogens on E7-directed effector and memory CTL responses and on MHC class II and CD80/86 expression in DCs. Additionally, expression of 4-1BBL in E7-transduced DCs reduced nonspecific T cell activation characteristic of adenovirus vector-associated immunization. The results have generic implications for improved or tumor Ag-expressing DC vaccines by incorporation of exogenous 4-1BBL. There are also specific implications for an improved DC-based vaccine for human papillomavirus 16-associated cervical carcinoma.

Inhibition of early tumor growth requires Jα18-positive (natural killer T) cells

The role of natural killer T (NKT) cells in the immune response to tumor cells has been largely unexplored. As a model of adoptive tumor immunotherapy, cells from the draining lymph nodes of mice immunized with a tumor-specific or irrelevant antigen were transferred to naive recipients with established tumor. Inhibition of early tumor growth (day 4) required the transfer of both CD8(+) and Jalpha18(+) (NKT) cells from immunized animals without regard to immunogen. In contrast, CD8(+) cells, but not Jalpha18(+) cells, were necessary for the inhibition of late tumor growth (day 8). Thus, the developing tumor changes in sensitivity to NKT-mediated events and the role for NKT cells cannot be replaced by the presence of tumor-specific cells during early tumor growth. This suggests that recruitment/activation of Jalpha18(+) NKT cells is an important consideration during the immune therapy of early stage tumors.

Enhanced effector and memory CTL responses generated by incorporation of receptor activator of NF-kappa B(RANK)/RANK ligand costimulatory molecules into dendritic cell immunogens expressing a human tumor-specific antigen

The outcome of dendritic cell (DC) presentation of Ag to T cells via the TCR/MHC synapse is determined by second signaling through CD80/86 and, importantly, by ligation of costimulatory ligands and receptors located at the DC and T cell surfaces. Downstream signaling triggered by costimulatory molecule ligation results in reciprocal DC and T cell activation and survival, which predisposes to enhanced T cell-mediated immune responses. In this study, we used adenoviral vectors to express a model tumor Ag (the E7 oncoprotein of human papillomavirus 16) with or without coexpression of receptor activator of NF-kappaB (RANK)/RANK ligand (RANKL) or CD40/CD40L costimulatory molecules, and used these transgenic DCs to immunize mice for the generation of E7-directed CD8(+) T cell responses. We show that coexpression of RANK/RANKL, but not CD40/CD40L, in E7-expressing DCs augmented E7-specific IFN-gamma-secreting effector and memory T cells and E7-specific CTLs. These responses were also augmented by coexpression of T cell costimulatory molecules (RANKL and CD40L) or DC costimulatory molecules (RANK and CD40) in the E7-expressing DC immunogens. Augmentation of CTL responses correlated with up-regulation of CD80 and CD86 expression in DCs transduced with costimulatory molecules, suggesting a mechanism for enhanced T cell activation/survival. These results have generic implications for improved tumor Ag-expressing DC vaccines, and specific implications for a DC-based vaccine approach for human papillomavirus 16-associated cervical carcinoma.

Reatividade linfonodal e densidade microvascular nas metástases cervicais de carcinoma epidermóide com tumor primário oculto

INTRODUÇÃO: A neoangiogênese e a resposta imunológica são mecanismos importantes no desenvolvimento das metástases. OBJETIVO: Avaliar a reatividade linfonodal e a densidade microvascular nas metástases cervicais de carcinoma epidermóide com tumor primário oculto, considerando a sua relação com outras variáveis histológicas e clínicas. TIPO DE ESTUDO: Série de casos, retrospectiva. CASUÍSTICA E MÉTODO: 19 pacientes submetidos a esvaziamento cervical entre 1983 e 2000. Os linfonodos foram reavaliados quanto ao tipo de reatividade, considerando a área cortical e paracortical. Nas metástases foi avaliado o grau de diferenciação, desmoplasia, necrose, e densidade microvascular (CD34). Foi estabelecida a relação entre as diferentes variáveis histológicas e clínicas, incluindo o estadiamento e a evolução dos pacientes. RESULTADOS: A densidade microvascular apresentou mediana de 91 vasos/mm2, variando de 28 a 145. A reatividade paracortical foi mais freqüente nos pacientes com menos de 55 anos (90% x 44%, p= 0,05). A sobrevida livre de doença foi de 52% em 3 anos, sendo similar entre os pacientes com maior ou menor densidade microvascular tumoral. CONCLUSÕES: A densidade microvascular nas metástases de tumor primário oculto apresenta grande variação individual. Não foi possível estabelecer relação entre a densidade microvascular e as variáveis clínicas e histológicas estudadas.

Tumor odontogênico adenomatóide associado a cisto dentígero: relato de um caso incomum

O tumor odontogênico adenomatóide é uma lesão relativamente incomum, que acomete preferencialmente indivíduos do sexo feminino durante a segunda década de vida, exibindo como sítio de predileção a região anterior da maxila. A lesão geralmente está associada à coroa de um dente incluso, comumente o canino. Neste trabalho é relatado o caso de um tumor odontogênico adenomatóide associado a cisto dentígero ocorrendo na região maxilar esquerda, em paciente do sexo feminino com 13 anos de idade, discutindo-se, ainda, as características clínicas, radiográficas, histopatológicas e terapêuticas do caso.

Tumor do VIII nervo com apresentação incomum

Os Schwannomas vestibulares são responsáveis por 80 a 90% dos tumores do ângulo ponto-cerebelar. A atual incidência é estimada em 0,8% a 2,5% da população mundial. A hipoacusia unilateral e progressiva é o sintoma mais precoce e freqüente, sendo o tinido a segunda queixa mais comum. Estudos demonstram que apenas 5% dos pacientes com schwannoma vestibular têm exames audiométricos normais. No caso em foco é relatado hipoestesia da hemiface com diminuição do reflexo córneo palpebral ipsilateral, hipoestesia da porção póstero-superior do pavilhão auditivo (sinal de Hitzelberger positivo), diminuição do lacrimejamento, Romberg sensibilizado positivo. Observava-se discreto desvio da rima labial para a esquerda, não apresentando outras alterações nos demais pares cranianos. À acumetria, não havia alteração da sensibilidade auditiva em ambas as vias aéreas.

Tumor de células granulares da laringe na infância: relato de caso

O tumor de células granulares (TCG) é uma neoplasia incomum, de evolução lenta, na maioria dos casos de caráter benigno e que pode acometer qualquer órgão do corpo. Entre as hipóteses que tentam explicar sua origem, a teoria da gênese neural apresenta embasamento sólido e é a mais aceita atualmente. O TCG é mais comum na raça negra, entre a 4ª e 5ª décadas de vida, acometendo com maior freqüência a região da cabeça e pescoço. A localização laríngea é rara, e quando ocorre é mais comum na porção posterior. É muito raro em crianças em geral acomete a porção anterior da subglote, podendo estender-se para a glote. O sintoma predominante é a rouquidão, podendo ocorrer disfagia, dor, tosse, hemoptise, e estridor. Macroscopicamente o TCG se manifesta como nódulo de pequeno tamanho, firme, séssil ou pediculado, não-ulcerado, de coloração clara, e usualmente bem circunscrito, porém sem cápsula. À microscopia, as granulações citoplasmáticas são características, apresentando positividade para a imunoperoxidase S100 e para a enolase neurônio-específica. O tratamento do TCG laríngeo consiste na exérese cirúrgica. Neste trabalho descrevemos um caso pediátrico de TCG laríngeo e sua evolução clínica após a remoção cirúrgica, alertando para o diagnóstico do TCG na população pediátrica. Foi realizada revisão de literatura abrangendo as características clínicas e histopatológicas do TCG, assim como as formas atuais de tratamento.

Estudo mutacional em tumor de Wilms por sequenciação de nova geração

O Tumor de Wilms (TW) é o tumor renal mais comum da infância, com uma incidência de 1 em ~10000 crianças. Esta patologia é de etiologia genética complexa e diversificada. No entanto, cerca de um terço dos doentes apresenta mutações somáticas associadas aos genes WT1, CTNNB1, TP53 e/ou AMER1. Assim, foi desenvolvido um painel de amplicões destes 4 genes para a identificação de mutações num grupo de doentes portugueses com TW, através de uma metodologia baseada na sequenciação de nova geração. As bibliotecas de DNA foram preparadas a partir de amostras de sangue periférico e tumor de 36 doentes com TW e sequenciadas no MiSeq. Foram identificadas alterações somáticas em 7 dos 36 (19,4%) doentes estudados. Conclui-se que a sequenciação de um painel de genes é um método rápido para a deteção de mutações somáticas quando desenhado com cuidado de forma a serem evitados problemas de perda de cobertura.

Influência do volume vesical na diminuição da dose recebida na bexiga e no PTV em doentes com tumor de reto tratados com belly-board

Introdução: O cancro retal continua a ser um dos principais problemas de saúde a nível mundial, sendo a toxicidade gastro-intestinal e génito-urinária os efeitos tardios da radioterapia mais reportados. A utilização da Belly-Board para minimizar essa toxicidade, reduzindo o volume de bexiga e intestino delgado irradiados é recomendada. No entanto, o protocolo mais adequado para o volume vesical nestes doentes é ainda tema de controvérsia. Objetivo: Avaliar a influência do volume vesical na dose recebida na bexiga e no PTV, em doentes com tumor de reto, posicionados em decúbito ventral, com belly-board. Materiais e Métodos: 38 doentes com tumor de reto tratados no CHBM, agrupados em dois grupos: o 1º grupo, com 19 doentes que realizaram tratamento com bexiga cheia e o 2º grupo, com 19 doentes que realizaram tratamento com bexiga vazia. Os dados foram obtidos através dos HDV’s e foram comparadas as doses máximas no PTV e a percentagem de volume de bexiga que recebe 50Gy. Foi utilizado o teste estatístico U-Mann Whitney com um nível de significância de 0,05. A hipótese de pesquisa deste estudo propõe que os dois grupos diferem significativamente entre si e a hipótese nula propõe que os dois grupos não diferem significativamente entre si, para ambas as variáveis. Resultados: Não se observaram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos no que diz respeito à dose máxima no PTV. No que se refere à percentagem de volume de bexiga que recebe 50Gy verificaram-se diferenças estatisticamente significativas, tendo o grupo de doentes que realizaram tratamento com bexiga cheia apresentado valores mais baixos. Conclusões: Este estudo demonstrou o benefício da utilização do protocolo de bexiga cheia em doentes com tumor de reto tratados com belly-board, na diminuição da percentagem de volume de bexiga que recebe 50Gy.