Advances on the production of polyhydroxyalkanoates (PHA) by mixed microbial cultures from sugar cane molasses

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Biotecnologia

Synthesis and characterization of sugar containing hydrophilic and hydrophobic polymers with potential application in medicine

Dissertation toobtaina Master of Science degree in Bioorganics

Characterization and regulation of a bacterial sugar phosphatase of the HAD superfamily, AraL, from Bacillus subtilis.

AraL from Bacillus subtilis is a member of the ubiquitous haloalkanoate dehalogenase, HAD, superfamily. The araL gene has been cloned, over-expressed in Escherichia coli and its product purified to homogeneity. The enzyme displays phosphatase activity, which is optimal at neutral pH (7.0) and 65 °C. Substrate screening and kinetic analysis showed AraL to have low specificity and catalytic activity towards several sugar phosphates, which are metabolic intermediates of the glycolytic and pentose phosphate pathways. Based on substrate specificity and gene context within the arabinose metabolic operon, a putative physiological role of AraL in detoxification of accidental accumulation of phosphorylated metabolites has been proposed. The ability of AraL to catabolise several related secondary metabolites requires regulation at the genetic level. Here, by site- directed mutagenesis, we show that AraL production is regulated by a structure in the translation initiation region of the mRNA, which most probably blocks access to the ribosome-binding site, preventing protein synthesis. Members of HAD subfamily IIA and IIB are characterised by a broad-range and overlapping specificity that anticipated the need for regulation at the genetic level. In this study we provide evidence for the existence of a genetic regulatory mechanism controlling AraL production.

Atividade larvicida do óleo de Anacardium humile Saint Hill sobre Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera, Culicidae)

O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial do cajuzinho do cerrado (Anacardium humile) sobre larvas de Aedes aegypti. Os extratos hexânico, etanólico, aquoso e o óleo das folhas foram obtidos do material vegetal coletado em fragmento de cerrado. Estes foram testados nas concentrações 1%; 0,5%, 0,25%, 0,125%, 0,05% e 0,0125% diluídas em dimetil sulfóxido 1%. A contagem das larvas mortas foi realizada após 24 horas. Utilizou-se o método Probit de análise para obtenção das CL50 e respectivos intervalos de confiança. Conclui-se que apenas o óleo extraído de folhas de Anacardium humile causa 100% de mortalidade em larvas de 4º estádio de Aedes aegypti nas concentrações até 0,125%, o que parece indicar que os ingredientes ativos estão na fase mais apolar. O que indica a potencialidade de uso da planta como larvicida de Aedes aegypti, entretanto, novos testes deverão ser conduzidos utilizando outros órgãos vegetais, assim como outros métodos e solventes utilizados na extração.

Millennium BCP- The almond hill credit extension proposal

This Work Project is a case study on the credit lending process and loan pricing policy of Millennium bcp, one of the main Portuguese banks. The goal of the case study is to provide an opportunity to understand the above mentioned process and policy in a major bank and to explore the issues and interests at play when a relevant credit decision must be taken. I would like to thank Dr. José Miguel Pessanha without whom this project would not have been possible.

Reasons and benefits associated with ISO 9001 - Certification for sugar and ethanol companies

With increasing business competitiveness, companies have sought to adapt their processes and / or products to worldwide established quality standards in order to achieve a greater share of consumers having as favorable aspect the quality assurance of the products and/or services provided. It was observed that companies of different sizes have different challenges regarding the certification however, the degree of difficulty is the same for all of them. The objective of this paper is to verify the reasons for the implementation of ISO 9001, the obstacles encountered during the implementation, the benefits arising from the use of the quality management system and the degree of difficulty to implement this standard. This work was developed based on a survey involving companies certified with ISO 9001:2008 from the productive sector of sugar, ethanol and derivatives of sugarcane, located in all Brazilian states. It was observed that companies of different sizes have different challenges regarding the certification however the degree of difficulty is the same for all of them. Thus, we believe that expected results represent a very important contribution to examining the reasons, benefits and difficulties of the ISO 9001 to both, the companies and certification bodies, and to researchers.

Toxicidade de manipueira de mandioca (Manihot esculenta Crantz) e erva-de-rato (Palicourea marcgravii St. Hill) a adultos de Toxoptera citricida Kirkaldy (Homoptera: Aphididae)

A utilização de extratos de plantas pode ser uma alternativa para o controle de pragas. Dentre as plantas com atividade inseticida, destacam-se a erva-de-rato (Palicourea marcgravii) e o subproduto (manipueira) da produção de farinha de mandioca (Manihot esculenta), plantas comuns na região Amazônica. Esse trabalho teve, como principal objetivo, investigar o potencial inseticida da manipueira e do extrato de erva-de-rato sobre Toxoptera citricida (pulgão-preto do citros). Os extratos liofilizados de manipueira e de erva-de-rato foram pulverizados sobre plantas de citros contendo pulgões em cinco concentrações (10mg/ml, 20mg/ml, 30mg/ml, 40mg/ml e 50mg/ml). Todas as concentrações analisadas causaram mortalidade dos pulgões superior a 50%, sendo que a maior concentração causou a mortalidade de todos os insetos. O potencial destes extratos demonstrado no experimento coloca os mesmos como uma alternativa ao uso de inseticidas sintéticos no controle do pulgão-preto dos citros.

On the Hill estimator: a comparison of methods

Extreme value theory (EVT) deals with the occurrence of extreme phenomena. The tail index is a very important parameter appearing in the estimation of the probability of rare events. Under a semiparametric framework, inference requires the choice of a number k of upper order statistics to be considered. This is the crux of the matter and there is no definite formula to do it, since a small k leads to high variance and large values of k tend to increase the bias. Several methodologies have emerged in literature, specially concerning the most popular Hill estimator (Hill, 1975). In this work we compare through simulation well-known procedures presented in Drees and Kaufmann (1998), Matthys and Beirlant (2000), Beirlant et al. (2002) and de Sousa and Michailidis (2004), with a heuristic scheme considered in Frahm et al. (2005) within the estimation of a different tail measure but with a similar context. We will see that the new method may be an interesting alternative.

Durabilidade de madeira de eucalipto citriodora (Corymbia citriodora (Hook.) K.D. Hill & L.A.S. Johnson) tratada com CCA em ambiente amazônico

A intensa exploração econômica tem causado diminuição do estoque original das espécies madeireiras amazônicas, incluindo aquelas de alta durabilidade natural destinadas a usos em contato com o solo. A escassez dessas madeiras resulta na elevação do preço, inviabilizando economicamente seu uso, sendo uma alternativa a substituição por espécies plantadas de rápido crescimento tratadas com preservativos. Outra vantagem, além da econômica, de utilizar espécies plantadas em substituição às tradicionais é ambiental, pois reduzirá a pressão exploratória sobre aquelas. Este estudo teve por objetivo avaliar o grau de degradação biológica de madeira de eucalipto citriodora (Corymbia citriodora (Hook.) K.D. Hill & L.A.S. Johnson) tratado por processo a vácuo e pressão com arseniato de cobre cromatado (CCA) e exposta em ensaio de campo em Rio Branco-AC. O ensaio foi implantado em maio de 2005 com estacas tratadas ou não com CCA. As variáveis avaliadas foram: 1) degradação por fungos, 2) degradação por cupins, e 3) região ou parte da peça afetada. A partir da terceira avaliação (47 meses de ensaio), 100% dos corpos de prova não tratados foram classificados com o grau de degradação máximo e, ao contrário, 100% dos tratados com CCA, decorridos 60 meses de ensaio, foram classificados com o grau mínimo. As partes não tratadas com maior e menor grau de degradação foram, respectivamente, o topo inferior e a parte aérea acima de 10 cm do solo. A degradação provocada por fungos foi levemente inferior à dos cupins. O ensaio aponta para a viabilidade técnica do uso de madeira tratada de eucalipto em substituição às espécies tradicionais da Amazônia.

A amostragem da cana-de-açúcar para determinações tecnológicas

The authors carried out 3 experiments on the sampling of sugar cane for technological determinations, one with each of the varieties Co 419, CB 40-69 and CB 41-58, in Piracicaba, State of São Paulo, Brasil. The main intent of the project was to compare 2 methods of sampling, namely: 1) Method A, where the sample is a hill (CATANI et al, 1959) or, more generally, 20 stalks all together in a randomly selected point of the furrow; 2) Method B, where 20 stalks are taken, from 20 points evenly spread but on the whole plot. Coefficients of variation for 20 stalk samples Variety Characteristic 20 stalks per hill 1 stalk per hill Brix 4.8% 1.9% Pol 6.4% 2.5% CB 40-69 Coefficient of purity 2.1% 0.83% Available sucrose 7.3% 2.7% Weight 6.6% 6.9% Brix 5.3% 1.8% Pol 7.6% 2.6% Co 419 Coefficient of purity 2.9% 1.0% Available sucrose 8.6% 3.0% Weight 21.2% 6.5% Brix 2.8% 1.4% Pol 4.1% 1.9% CB 41-58 Coefficient of purity 1.8% 0.8% Available sucrose 5.0% 2.2% Weight 10.9% 6.2% For the 3 varieties studied and for the data on Brix, pol, coefficient of purity, available sucrose and weight, analyses of variance were carried out. Further computations led to the following coefficients of variation. For available sucrose, which is probably the most important characteristic studied, the average coefficient of variation for the 3 varieties was 2.7%, for the case of method B, that is, 20 stalk samples, one stalk per hill. Assuming this coefficient of variation, in a trial with 5 treatments and 6 replications, in randomised blocks, the least significant difference among treatment means, at the 5% level, would be 4.7% of available sucrose by Tukey's test, and 3.3% by the t test. For the case of method A the average coefficient of variation is 7.0% and, in similar conditions, the least significant difference would be 15.1% by Tukey's test, and 12.1% by the t test. Since differences of available sucrose among treatments in experiments with fertilizers seldom are higher than 3 or 4% of the mean (PIMENTEL GOMES & CARDOSO, 1958), method B with a 20 stalk sample per plot gives more or less the minimum amount of cane to be sampled for technological determinations. In experiments with varieties, however, where differences may be assumed to be higher, a sample of 10 to 20 stalks one per hill, can be enough.

Efeitos da aplicação de P, B, Zn e calagem no teor de boro e zinco das folhas de mudas de Eucalyptus grandis (Hill, Ex-Maiden) cultivadas em solo de cerrado

Foi desenvolvido em casa de vegetação, na E. S.A."Luiz de Queiroz", em Piracicaba (SP), um experimento, utilizando-se Latossol Vermelho Amarelo, fase arenosa, originalmente sob vegetação de cerrado, do município de Itirapina (SP), cujo objetivo foi estudar os efeitos de níveis de fósforo (0, 16 e 32 ppm), boro (0, 2 e 4 ppm), zinco (0, 3 e 6 ppm) e calagem (0 e 6,0 g CaCO3 + 2,5 g MgCO3) por vaso no teor de micronutrientes de folhas de Eucalyptus grandis (Hill, Ex-Maiden). O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado num esquema fatorial 3³ na presença e ausência de calagem. Cada parcela foi constituída de um vaso contendo 8,0 kg de terra e duas plantas. As adubações com boro e zinco aumentaram as concentrações desses micronutrientes nas folhas das plantas. Verificou-se acúmulo de boro nos tecidos das folhas, em níveis considerados tóxicos, quan do se adicionou ao solo 2 e 4 ppm de boro. A calagem diminuiu as concentrações de zinco das folhas das plantas.

Efeitos da aplicação de fósforo, boro, zinco e calagem na altura e na produção de matéria seca em mudas de Eucalyptus grandis (Hill, Ex-Maiden) cultivadas em um solo de cerrado

Foi desenvolvido um experimento em casa de vegetação na Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz", em Piracicaba (SP) utilizando-se Latossol Vermelho Amarelo, fase arenosa, originalmente sob vegetação de cerrado, do município de Itirapina (SP), com o objetivo de estudar o efeito de três níveis de P (0, 16 e 32 ppm), três níveis de B (0, 2 e 4 ppm), tres níveis de Zn (0, 3 e 6 ppm) e dois níveis de calagem (0 e 6,0 g CaCO3 + 2,5 g MgC0(3)) por cada vaso no crescimento em altura e na produção de matéria seca de mudas de Eucalyptus grandis (Hill, Ex-Maiden). A adubação fosfatada, provocou aumento no crescimento em altura e na produção de matéria seca das plantas. A adição de 2 e 4 ppm de boro ao solo, provocou efeitos de interação com calagem, fósforo e zinco, ocasionando alterações no crescimento em altura das plantas. A adição de 3 e 6 ppm de zinco ao solo, ocasionou interação com o boro e fósforo adicionados, diminuindo o crescimento em altura das plantas.

Efeitos da aplicação de fósforo, boro, zinco e calagem no teor de macronutrientes das folhas de mudas de Eucalyptus grandis (Hill, Ex-Maiden) Cultivadas em solo de cerrado

Utilizando-se um Latossol Vermelho Amarelo fase arenosa, originalmente sob vegetação de Cerrado do município de Itirapina (SP), foi desenvolvido um experimento em vasos, em casa de vegetação, na E. S.A. "Luiz de Queiroz", em Piracicaba (SP), com a finalidade de se verificar o efeito da aplicação de níveis de P (0, 16 e 32 ppm), níveis de B (0, 2 e 4 ppm), níveis de Zn (0, 3 e 6 ppm) e níveis de calagem (0 e 6,0 g CaCO3 + 2,5 g MgCO3) por cada vaso, na concentração de N, P, K, Ca e Mg das folhas de mudas de Eucalyptus grandis (Hill, Ex-Maiden), A calagem e as adubações fosfatadas, com boro ou com zinco, alteraram as concentrações dos macronutrientes dos tecidos foliares das plantas.

Biologia de Glena unipennaria unipennaria (Guenée, 1857) (Lepidoptera, Geometridae) em folhas de Eucalyptus grandis (Hill) Maiden

Este trabalho trata do estudo da biologia de Glena unipennaria unipennaria (Guenée, 1857) (Lepidoptera, Geometridae), cujas lagartas são desfolhadoras e consideradas como praga de grande importância econômica, em povoamentos homogêneos e implantados de Eucalyptus spp. (Myrtaceae), no Brasil. Os insetos foram criados em condições de laboratório (temperatura 25±3°C; UR:70±10; fotoperíodo de 12 horas), no Laboratório de Controle Biológico, do Departamento de Entomologia, da Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz"-USP, em Piracicaba, SP, em 1978. As lagartas foram alimentadas, exclusivamente, com folhas de Eucalyptus grandis (Hill) Maiden. Foram estudados os seguintes parâmetros: período e viabilidade das fases de ovo, lagarta (exceto viabilidade), pré-pupa; número e duração dos ínstares larvais e consumo foliar na fase larval; longevidade dos a dultos e proporção quanto ao sexo. Medidas lineares foram tomadas das cápsulas cefálicas das lagartas, comprimento e maior largura das pupas e envergadura das asas anteriores dos adultos. Aspectos relacionados com o comportamento e morfologia externa também foram observados.

Sugar and sugar making / by James B. McNair, Asst. Curator of Economic Botany.

no.13(1927)