999 resultados para Hipernutrição Teses
Resumo:
Estudos com eletrodos modificados foram conduzidos utilizando dois sistemas porfirnicos supramoleculares diferentes. O primeiro foi baseado na modificao de eletrodo de carbono vtreo com uma porfirina de nquel tetrarrutenada, [NiIITPyP{RuII(bipy)2Cl}4]4+. A modificao do eletrodo foi realizada por meio de sucessivos ciclos voltamtricos em meio alcalino (pH 13), gerando um eletrodo com caracterstica similar a eletrodos modificados com α-Ni(OH)2. A caracterizao qumica do filme formado foi realizada atravs das tcnicas de voltametria cclica, ressonncia paramagntica eletrnica, espectroscopia eletrnica por reflectncia e espectroscopia Raman com ensaio espectro-eletroqumico. Os resultados sugerem a formao de um polmero de coordenao, [µ-O2-NiIITPyP{RuII(bipy)2Cl}4]n, composto por subunidades porfirnicas ligadas entre si por pontes µ-peroxo axialmente coordenadas aos tomos de nquel (Ni-O-O-Ni). O crescimento do filme apresentou dependncia da alcalinidade do meio pela formao do precursor octadrico [Ni(OH)2TRPyP]2+ em soluo, pela coordenao de OH- nas posies axiais do tomo de nquel. O processo de eletropolimerizao indicou a participao de radical hidroxil, gerado por oxidao eletrocataltica da gua nos stios perifricos da porfirina contendo o complexo de rutnio. O mesmo eletrodo foi aplicado como sensor eletroqumico para anlise amperomtrica de cido flico em comprimidos farmacuticos. O sensor foi associado a um sistema de Batch Injection Analysis (BIA) alcanando considervel rapidez e baixo limite de deteco. Para as anlises das amostras tambm foi proposto um mtodo para a remoo da lactose, que agia como interferente. O segundo estudo envolveu a modificao de eletrodos de carbono vtreo com diferentes hemoglobinas, naturais (HbA0, HbA2 e HbS) e sintticas (Hb-PEG5K2, αα-Hb-PEG5K2 e BT-PEG5K4), para a avaliao da eficincia na reduo eletrocataltica de nitrito mediada por FeI-heme. Os filmes foram produzidos pela mistura de solues das hemoglobinas com brometo de didodecildimetiltrimetilamnio (DDAB), aplicados nas superfcies com consecutiva evaporao, formando filmes estveis. Os valores de potencial redox para os processos do grupo heme e a sua associao com a disponibilidade do grupo na protena foram avaliados por voltametria cclica. Os valores das constantes de velocidade, k, para reduo de nitrito foram obtidos por cronoamperometria em -1,1 V (vs Ag/AgCl(KCl 3M)) que foram utilizados para estudo comparativo entre as espcies sintticas para eventual aplicao clnica.
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Prope-se mtodo novo e completo para anlise de acetona em ar exalado envolvendo coleta com pr-concentrao em gua, derivatizao qumica e determinao eletroqumica assistida por novo algoritmo de processamento de sinais. Na literatura recente a acetona expirada vem sendo avaliada como biomarcador para monitoramento no invasivo de quadros clnicos como diabetes e insuficincia cardaca, da a importncia da proposta. Entre as aminas que reagem com acetona para formar iminas eletroativas, estudadas por polarografia em meados do sculo passado, a glicina apresentou melhor conjunto de caractersticas para a definio do mtodo de determinao por voltametria de onda quadrada sem a necessidade de remoo de oxignio (25 Hz, amplitude de 20 mV, incremento de 5 mV, eletrodo de gota de mercrio). O meio reacional, composto de glicina (2 molL-1) em meio NaOH (1 molL-1), serviu tambm de eletrlito e o pico de reduo da imina em -1,57 V vs. Ag|AgCl constituiu o sinal analtico. Para tratamento dos sinais, foi desenvolvido e avaliado um algoritmo inovador baseado em interpolao de linha base por ajuste de curvas de Bzier e ajuste de gaussiana ao pico. Essa combinao permitiu reconhecimento e quantificao de picos relativamente baixos e largos sobre linha com curvatura acentuada e rudo, situao em que mtodos convencionais falham e curvas do tipo spline se mostraram menos apropriadas. A implementao do algoritmo (disponvel em http://github.com/batistagl/chemapps) foi realizada utilizando programa open source de lgebra matricial integrado diretamente com software de controle do potenciostato. Para demonstrar a generalidade da extenso dos recursos nativos do equipamento mediante integrao com programao externa em linguagem Octave (open source), implementou-se a tcnica da cronocoulometria tridimensional, com visualizao de resultados j tratados em projees de malha de perspectiva 3D sob qualquer ngulo. A determinao eletroqumica de acetona em fase aquosa, assistida pelo algoritmo baseado em curvas de Bzier, rpida e automtica, tem limite de deteco de 3,510-6 molL-1 (0,2 mgL-1) e faixa linear que atende aos requisitos da anlise em ar exalado. O acetaldedo, comumente presente em ar exalado, em especial, aps consumo de bebidas alcolicas, d origem a pico voltamtrico em -1,40 V, contornando interferncia que prejudica vrios outros mtodos publicados na literatura e abrindo possibilidade de determinao simultnea. Resultados obtidos com amostras reais so concordantes com os obtidos por mtodo espectrofotomtrico, em uso rotineiro desde o seu aperfeioamento na dissertao de mestrado do autor desta tese. Em relao dissertao, tambm se otimizou a geometria do dispositivo de coleta, de modo a concentrar a acetona num volume menor de gua gelada e prover maior conforto ao paciente. O mtodo completo apresentado, englobando o dispositivo de amostragem aperfeioado e o novo e efetivo algoritmo para tratamento automtico de sinais voltamtricos, est pronto para ser aplicado. Evoluo para um analisador porttil depende de melhorias no limite de deteco e facilidade de obteno eletrodos slidos (impressos) com filme de mercrio, vez que eletrodos de bismuto ou diamante dopado com boro, entre outros, no apresentaram resposta.
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A Espectroscopia Raman Intensificada pela Superfcie (SERS) um efeito de intensificao da intensidade Raman de uma molcula adsorvida numa superfcie metlica nanoestruturada. Esta caracterstica permite a utilizao do SERS na caracterizao vibracional de sistemas como junes moleculares (JM) (JM so sistemas constitudos de fios moleculares sintetizados em junes do tipo metal|fiomolecular|metal) e, no entendimento de quais caractersticas morfolgicas de agregados metlicos mais influenciariam no sinal SERS obtido. Portanto, esta tese apresenta os seguintes objetivos: (a) sntese e caracterizao de substratos SERS ativos, nanoesferas (AuNE) e nanobastes (AuNB) de ouro e eletrodo de ouro ativado eletroquimicamente; (b) sntese e caracterizao SERS de fios moleculares em JM; (c) estudo do acoplamento plasmnico entre as superfcies metlicas em JM; (d) correlao entre SERS - morfologia de agregados individuais de AuNB. Os fios moleculares estudados foram os da famlia das oligofeniliminas (OPI) e, no melhor do nosso entendimento, esta foi a primeira vez que fios moleculares desta famlia foram caracterizados por Raman e SERS. As JM apresentaram um comportamento SERS no esperado. Enquanto para o modo vibracional, v(CS), a intensidade da banda se apresentou constante com o aumento do espaamento entre as nanoestruturas metlicas (para distncias de at 5 nm), o modo vibracional, β(CH), teve a intensidade de sua banda aumentada. Este comportamento foi explicado considerando a diferente natureza da interao dos plasmons nas JM, sendo estas interaes do tipo, ressonncia de plasmon de superfcie (LSPR) - dipolo imagem, para ambos os modos. No entanto, para o modo β(CH) existe tambm uma intensificao extra devido ao aumento da polarizabilidade dos fios moleculares com o aumento do nmero de unidades. A correlao SERS - morfologia dos agregados de AuNB indicam que, para agregados onde predominam interaes ponta a ponta, os espectros SERS apresentavam uma maior intensidade quando comparados com aqueles em que interaes lado a lado predominavam. No entanto, este comportamento no foi observado para agregados contendo mais do que cinco nanopartculas onde estes dois tipos de interaes ocorrem indicando que deve existir um acoplamento dos plasmons destes dois tipos de interaes contribuindo para maiores valores de intensidade SERS.
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Eletrodos de ouro foram utilizados para preparao de eletrodos modificados com monocamadas auto arranjadas de tiis. A limpeza do substrato metlico fundamental para que a arquitetura molecular superficial possa ser efetuada com boa estabilidade e reprodutibilidade, alm de fornecer dados utilizados no clculo de rea ativa, necessrios na normalizao dos valores de recobrimento superficial obtidos nas determinaes de dessoro do agente modificador interno, o cido 3-mercaptopropinico. Os eletrodos modificados consistiram no recobrimento de transdutores de ouro com cido 3-mercaptopropinico atravs da imerso do eletrodo de Au em soluo 25 mmolL-1 deste composto e, em seguida, com molculas de cistena, atravs da imerso do eletrodo de Au/3-MPA em soluo 0,1 molL-1 deste composto, originando um sensor do tipo Au/3-MPA/CSH. As molculas de cistena foram utilizadas como agente redutor para obteno de nanopartculas de Au na superfcie do eletrodo modificado, atravs da aplicao de 20 µL de soluo de HAuCl4. Aps a confirmao da ausncia do par tilico superficial responsvel pela reduo das nanopartculas, o eletrodo Au/3-MPA/CSH/AuNp foi utilizado na determinao de perxido de hidrognio em solues de concentraes crescentes em tampo fosfato 0,1 molL-1 pH 7,2.
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Nanopartculas bimetlicas de AuPd tm mostrado excelente atividade cataltica em reaes de oxidao. O entendimento dos efeitos da variao da composio e morfologia das nanopartculas bimetlicas em suas propriedades catalticas fundamental para a preparao de catalisadores cada vez mais ativos e seletivos. Neste trabalho foram estudadas nanopartculas bimetlicas de AuPd de composio varivel suportadas sobre um suporte constitudo por nanopartculas de magnetita revestidas por slica. O efeito da calcinao e da reduo com hidrognio sobre a morfologia e composio das nanopartculas bimetlicas foi acompanhado pelas tcnicas de TEM, XEDS, XAS, XRD e XPS. A correlao entre estrutura, composio e atividade cataltica dos catalisadores preparados foi estudada pelo acompanhamento de reaes de oxidao de monxido de carbono e de oxidao de lcool benzlico. As amostras no calcinadas apresentaram segregao metlica em todas as composies estudadas. Aps a etapa de calcinao, maior segregao metlica foi encontrada, com a formao de xido de paldio na superfcie das nanopartculas, exceto na amostra mais rica em ouro. O tratamento das amostras oxidadas com hidrognio foi capaz de reduzir os metais oxidados na superfcie das nanopartculas, mas um enriquecimento em paldio na superfcie e maior segregao entre ouro e paldio foram observados. Uma melhora na atividade cataltica na oxidao de monxido de carbono foi observada juntamente com um aumento na composio de paldio, alm disso, observou-se uma maior atividade cataltica em relao s nanopartculas no calcinadas para as amostras calcinadas e reduzidas. Para a oxidao de lcool benzlico um aumento na atividade cataltica de at cinco vezes foi observado aps a calcinao dos catalisadores, com maior atividade para a amostra de composio Au1Pd2. A queda na atividade cataltica aps a reduo dos catalisadores mostrou que a presena de xido de paldio na superfcie das nanopartculas fundamental para que seja observada uma maior atividade cataltica.
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O exossomo um complexo multiproteico conservado evolutivamente de archaea a eucariotos superiores que desempenha funes celulares essenciais tais como: atividade exoribonucleoltica 3\'→5\', regulao dos nveis de mRNA, maturao de RNAs estruturais e controle de qualidade de RNAs durante os vrios estgios do mecanismo de expresso gnica. Em Archaea, o exossomo composto por at quatro subunidades diferentes, duas com domnios de RNase PH, aRrp41 e aRrp42, e duas com domnios de ligao a RNAs, aCsl4 e aRrp4. Trs cpias das protenas aRrp4 e/ou aCsl4 se associam com o ncleo hexamrico cataltico do anel de RNase PH e completam a formao do complexo. A protena PaNip7 um cofator de regulao do exossomo da archaea Pyrococcus abyssi e atua na inibio do complexo enzimtico ligando-se simultaneamente ao exossomo e a RNAs. Neste projeto, a reconstituio in vitro do exossomo da archaea Pyrococcus abyssi formado pela protena de topo PaCsl4 foi obtida. Para tanto foram realizadas anlises de interao proteica usando as tcnicas de cromatografia de afinidade, gel filtrao e SDS-PAGE. Em adio formao da isoforma PaCsl4-exossomo, um fragmento peptdico correspondente regio C-terminal da PaNip7 foi sintetizado pelo mtodo da fase slida, purificado por RP-HPLC e o purificado foi caracterizado por LC/ESI-MS almejando realizar futuros experimentos de interao com o exossomo.
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Compreender a correlao entre as caractersticas de um catalisador particular e seu desempenho cataltico tem sido um dos principais objetos da pesquisa em catlise heterognea a fim de usar esse conhecimento para o desenho racional de catalisadores mais ativos, seletivos e estveis. A seletividade um dos fatores mais importantes a ser controlado pelo desenho de catalisadores, podendo ser alcanada de diversas maneiras, levando-se em considerao mudanas do tipo estrutural, qumica, eletrnica, de composio, de cintica e de energia. O trabalho descrito nessa tese de doutorado compreende a sntese e caracterizao de catalisadores compostos de nanopartculas de xido de cobre, paldio e cobre-paldio e seu estudo em reaes de hidrogenao e oxidao seletivas de hidrocarbonetos insaturados. Os catalisadores foram preparados atravs da deposio de nanopartculas dos metais cataliticamente ativos sobre suportes magneticamente recuperveis compostos de nanopartculas de magnetita revestidas por slica com superfcies funcionalizada com diferentes grupos orgnicos. A natureza magntica do suporte permitiu a fcil separao do catalisador do meio reacional pela simples aproximao de um m na parede do reator. O catalisador pde ser completamente separado da fase lquida, fazendo com que a utilizao de outros mtodos de separao como filtrao e centrifugao, comumente utilizados em sistemas heterogneos lquidos, fossem completamente dispensados. Os catalisadores foram inicialmente testados em reaes de hidrogenao de alquenos e alquinos. As reaes de hidrogenao foram realizadas utilizando hidrognio molecular como agente redutor, dispensando a utilizao de agentes redutores mais agressivos. Os catalisadores compostos de NPs de Pd mostram excelente atividade e capacidade de reutilizao na hidrogenao de cicloexeno, podendo ser utilizados em at 15 ciclos sem perda de atividade. Nas reaes de hidrogenao de alquinos, os catalisadores que contm cobre mostraram maior seletividade para a obteno dos produtos de semi-hidrogenao, com destaque para o catalisador composto de NPs de CuPd, que no apresenta nem traos do produto de hidrogenao completa na amostra final. Esse catalisador bimetlico alia as caractersticas do paldio (elevada atividade) e do cobre (elevada seletividade) para fornecer um catalisador ativo e seletivo para a transformao desejada. Alm disso, os grupos funcionais presentes na superfcie do suporte cataltico mostraram influncia na atividade e seletividade para a hidrogenao de alquenos e alquinos. Os catalisadores sintetizados tambm foram testados na reao de oxidao de cicloexeno e mostraram seletividade para a produo do composto carbonlico α,β-insaturado, cicloex-2-en-1-ona, que um reagente de partida de grande interesse para a sntese de diversos materiais na indstria qumica. As reaes de oxidao foram realizadas utilizando-se apenas O2 como oxidante primrio, dispensando o uso de oxidantes txicos como cromatos, permanganatos ou compostos halogenados, que no so recomendados do ponto de vista ambiental. Os catalisadores sintetizados puderam ser reutilizados em sucessivos ciclos de oxidao, mostrando seletividade para a formao dos produtos allicos em todos os ciclos. Os catalisadores foram estveis sob as condies reacionais e no apresentaram problemas de lixiviao da espcie ativa para o meio reacional, que comum na catlise heterognea. Um estudo cintico mostrou que, mesmo no incio da reao, o catalisador tem seletividade para a ocorrncia de oxidao allica em detrimento da reao de oxidao direta que d origem ao epxidos correspondente, e se mostrou condizente com o mecanismo proposto na literatura para a reao de oxidao de alquenos via radicalar.
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A acne vulgar uma das doenas cutneas mais comuns, apresentando como um de seus fatores fisiopatolgicos primrios a colonizao pelo microrganismo Propionibacterium acnes. Atualmente, tm-se buscado terapias alternativas para o combate ao P. acnes, destacando-se alguns cidos graxos, como o cido larico (LA). O LA uma molcula pouco solvel em gua, sendo possvel sua incorporao em lipossomas. Os lipossomas apresentam capacidade de encapsulao/ liberao de ativos e impedem a desidratao da pele, tornando-se ingredientes inovadores na rea de cosmticos. Foram preparados lipossomas de dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC) contendo diferentes concentraes de LA, que variaram de 0 a 50% da concentrao total em mol, em quatro pHs: 9,0, 7,4, 5,0 e 3,0. Nestes pHs o estado de protonao do LA muda variando de 0 a -1. Os lipossomas foram extrusados por filtros com poros de 100 nm de dimetro visando obteno de vesculas unilamelares grandes (LUV). As LUV foram caracterizadas quanto a sua estabilidade em condies de prateleira, temperatura de transio de fase da bicamada, encapsulamento no interior aquoso, liberao do LA, difuso das vesculas na pele e seus aspectos morfolgicos foram caracterizados por espalhamento de raios-X a baixo ngulo (SAXS) e crio-microscopia eletrnica de transmisso. Estudos de estabilidade mostraram que independentemente da concentrao de LA, as formulaes so mais estveis em pHs mais altos, quando LA est em sua maioria na forma de laurato. Os experimentos de DSC revelaram que em pHs 3,0 e 5,0 e concentraes maiores de LA, a interao deste cido graxo com as bicamadas favorecida, havendo um aumento da temperatura de transio de fase (Tm) e diminuio da cooperatividade. Anlises de taxa de incorporao de sondas hidroflicas confirmaram a presena de um compartimento aquoso interno para as vesculas de DPPC:LA. O LA conseguiu permear a pele no perodo avaliado e pouco LA foi liberado das vesculas em condies de temperatura ambiente. A morfologia das LUV se mostrou bem diferente da esperada e se observaram vesculas com mais de uma bicamada e outros formatos que no o esfrico. Estes resultados podem auxiliar na otimizao das condies para uma formulao que poder ser usada no tratamento da acne, aumentando a eficcia do LA no stio alvo.
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O trabalho descrito nesta tese mostra de forma detalhada a fabricao e caracterizao de diferentes microssensores eletroqumicos os quais tm sido recentemente utilizados como sondas em grupo de tcnicas conhecida como Scanning Electrochemical Probe Microscopy (SEPM). Desta forma, a caracterizao de superfcies pode ser feita explorando diferentes fenmenos interfaciais relevantes Cincia. Neste sentido, as interfaces de materiais cristalinos como hidroxiapatita (materiais dentrios) e calcita foram o foco de estudo neste trabalho. Assim, diferentes tcnicas SEPM foram exploradas no sentido de se obter informaes relevantes relacionadas aos processos dentrios, como a eroso cida e hipersensibilidade. Inicialmente, microeletrodos de platina foram desenvolvidos empregando uma metodologia convencional na qual so utilizados microfibras encapsuladas em capilares de vidro. Scanning Electrochemical Microscopy (SECM) no modo amperomtrico foi utilizada para obteno de informaes com relao s alteraes de topografia do esmalte dentrio causadas pelo contato com substncias cidas. Adicionalmente, SECM foi empregada no estudo do transporte de espcies eletroativas em amostras de dentina e investigaes relacionadas ao bloqueio dos tbulos empregando-se cremes dentais comerciais foram realizadas. A permeao de perxido de hidrognio pela dentina tambm foi estudada. Os resultados de SECM foram comparados com imagens SEM obtidas nas mesmas condies experimentais. Microeletrodos de membrana ionfora on-seletiva (Ion Selective Microelectrodes-ISMEs) sensveis a ons clcio tambm foram desenvolvidos e caracterizados, com subsequente aplicao em SECM no modo potenciomtrico. A dissoluo cida de esmalte bovino (eroso dentria) foi investigada em diferentes valores de pH (2,5; 4,5; 6,8). Alm disso, o transporte de ons clcio atravs de membranas porosas sintticas foi avaliado a uma distncia tip/substrato de 300µm. Alteraes no fluxo de ons clcio foram correlacionadas em experimentos realizados na presena e ausncia de campos magnticos gerados por nanopartculas de magnetita incorporadas membrana porosa. Microcristais de calcita facilmente sintetizados pelo mtodo de precipitao foram utilizados como superfcie modelo para investigaes interfaciais, cujos resultados podem ser correlacionados aos materiais dentrios. Desta forma, nanopipetas de vidro preenchidas com eletrlito suporte foram fabricadas e utilizadas como sonda em Scanning Ion Conductance Microscopy (SICM). O mapeamento topogrfico de alta resoluo espacial da superfcie de um microcristal de calcita foi obtido utilizando o modo de varredura hopping mode. Adicionalmente, sondas multifuncionais ISME-SICM tambm foram desenvolvidas e caracterizadas para investigaes simultneas com relao s alteraes topogrficas e quantificao de ons clcio sobre a superfcie de um microcristal de calcita. A adio de reagentes cidos no canal SICM promoveu a dissoluo da superfcie do microcristal, sendo obtidos dados cinticos de dissoluo. Investigaes em meio neutro tambm foram realizadas utilizando a sonda ISME-SICM. Os resultados experimentais obtidos tambm foram comparados com aqueles oriundos de simulao computacional.
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Neste trabalho, anticorpos anti-IgGh foram conjugados s nanopartculas de prata (NPAg) para detectar imunoglobulina G humana (IgGh). Um imunoensaio colorimtrico baseado na diminuio da agregao devido ao aumento da repulso eletrosttica aps a interao ligante-alvo. A agregao induzida pela variao da fora inica e uma mudana da colorao da suspenso coloidal de amarelo para vermelho pode ser observada. Na presena de IgGh, a agregao inibida e a colorao da suspenso coloidal no se altera. As nanopartculas foram obtidas por meio de cinco procedimentos diferentes e caracterizadas por espectroscopia UV-Vis, espalhamento dinmico de luz, difrao de raios-X e microscopia eletrnica. Glicose e borohidreto de sdio foram utilizados como agentes redutores, enquanto CTAB e β-ciclodextrina foram utilizados como estabilizantes. Citrato de sdio foi utilizado como agente redutor e/ou estabilizante. Nanoesferas de carbono foram obtidas por tratamento hidrotrmico de uma soluo aquosa de glicose e tambm foram utilizadas no preparo das nanopartculas. As nanopartculas foram funcionalizadas com cido mercaptossuccnico e a conjugao ocorreu devido interao entre grupos aminas e grupos carboxlicos ionizados, presentes no anticorpo e agente de acoplamento, respectivamente. A estabilidade dos conjugados e o efeito da adio de IgGh foram avaliados para todos os sistemas preparados. As nanopartculas de prata preparadas com borohidreto de sdio e citrato de sdio foram selecionadas para serem aplicadas no desenvolvimento do imunoensaio e as condies experimentais foram avaliadas. Em condies timas, observou-se uma correlao linear entre a diminuio da agregao do sistema (NPAg-anti-IgGh) e a concentrao de IgGh (0 a 200 ng mL-1). O limite de deteco foi estimado em 25 ng mL-1. O mtodo colorimtrico apresentou boa seletividade para a deteco de IgGh. Alm disso, foi obtido um resultado satisfatrio ao aplicar o mtodo para determinao do fator IX de coagulao. Foi desenvolvido tambm um mtodo para determinao de ATP baseado na agregao de nanopartculas de ouro. Aptmeros foram utilizados como elemento de reconhecimento. Em princpio, o mtodo pode ser aplicvel determinao de outros analitos, por meio da substituio do aptmero utilizado neste trabalho pelo oligonucleotdeo especfico para o alvo de interesse.
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Receptores purinrgicos e canais de clcio voltagem-dependentes esto envolvidos em diversos processos biolgicos como na gastrulao, durante o desenvolvimento embrionrio, e na diferenciao neural. Quando ativados, canais de clcio voltagem-dependentes e receptores purinrgicos do tipo P2, ativados por nucleotdeos, desencadeiam transientes de clcio intracelulares controlando diversos processos biolgicos. Neste trabalho, ns estudamos a participao de canais de clcio voltagem-dependentes e receptores do tipo P2 na gerao de transientes de clcio espontneos e sua regulao na expresso de fatores de transcrio relacionados com a neurognese utilizando como modelo clulas tronco (CTE) induzidas diferenciao em clulas tronco neurais (NSC) com cido retinico. Descrevemos que CTE indiferenciadas podem ter a proliferao acelerada pela ativao de receptores P2X7, enquanto que a expresso e a atividade desse receptor precisam ser inibidas para o progresso da diferenciao em neuroblasto. Alm disso, ao longo da diferenciao neural, por anlise em tempo real dos nveis de clcio intracelular livre identificamos 3 padres de oscilaes espontneas de clcio (onda, pico e unique), e mostramos que ondas e picos tiveram a frequncia e amplitude aumentadas conforme o andamento da diferenciao. Clulas tratadas com o inibidor do receptor de inositol 1,4,5-trifosfato (IP3R), Xestospongin C, apresentaram picos mas no ondas, indicando que ondas dependem exclusivamente de clcio oriundo do retculo endoplasmtico pela ativao de IP3R. NSC de telencfalo de embrio de camundongos transgnicos ou pr-diferenciadas de CTE tratadas com Bz-ATP, o agonista do receptor P2X7, e com 2SUTP, agonista de P2Y2 e P2Y4, aumentaram a frequncia e a amplitude das oscilaes espontneas de clcio do tipo pico. Dados, obtidos por microscopia de luminescncia, da expresso em tempo real de gene reprter luciferase fusionado Mash1 e Ngn2 revelou que a ativao dos receptores P2Y2/P2Y4 aumentou a expresso estvel de Mash1 enquanto que ativao do receptor P2X7 levou ao aumento de Ngn2. Alm disso, clulas na presena do quelante de clcio extracelular (EGTA) ou do depletor dos estoques intracelulares de clcio do retculo endoplasmtico (thapsigargin) apresentaram reduo na expresso de Mash1 e Ngn2, indicando que ambos so regulados pela sinalizao de clcio. A investigao dos canais de clcio voltagem-dependentes demonstrou que o influxo de clcio gerado por despolarizao da membrana de NSC diferenciadas de CTE decorrente da ativao de canais de clcio voltagem-dependentes do tipo L. Alm disso, esse influxo pode controlar o destino celular por estabilizar expresso de Mash1 e induzir a diferenciao neuronal por fosforilao e translocao do fator de transcrio CREB. Esses dados sugerem que os receptores P2X7, P2Y2, P2Y4 e canais de clcio voltagem-dependentes do tipo L podem modular as oscilaes espontneas de clcio durante a diferenciao neural e consequentemente alteram o padro de expresso de Mash1 e Ngn2 favorecendo a deciso do destino celular neuronal.
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Diversos biomateriais podem ser aplicados como suportes na imobilização de células totais de fungos filamentosos ou enzimas isoladas, visando a manutenção e o prolongamento da atividade enzimática em processos biocatalíticos. Exemplos promissores de biomateriais são a fibroína da seda e o alginato de sódio. A fibroína é um material protéico com alta estabilidade térmica, elasticidade, resistência à tensão, não sofre ataque microbiano, baixo custo de purificação e alta tenacidade, o alginato é um biopolímero versátil, devido a suas propriedades gelificantes em soluções aquosas. Assim, neste trabalho empregou-se micélios do fungo derivado de ambiente marinho, Penicillium citrinum CBMAI 1186, livres e imobilizados em biopolímeros (fibra de algodão, fibra de fibroína da seda e fibra de paina) na biorredução quimiosseletiva, regiosseletiva e enantiosseletiva da ligação α,β-C=C de enonas α,β-, α,β,γ,δ- e di-α,β-insaturadas previamente sintetizados pela a reação de condensação aldólica. Foi possível a utilização do fungo P. citrinum CBMAI 1186 na redução quimiosseletiva, regiosseletiva e enantiosseletiva da ligação dupla carbono-carbono de sistemas α,β-insaturados. A imobilização do fungo P. citrinum CBMAI 1186 em biopolímeros (algodão, fibroína da seda, paina e quitosana) permitiu a prolongamento da atividade celular do fungo. O protocolo desenvolvido foi capaz de obter compostos até então descritos apenas por síntese clássica. Também foi realizado reações de resolução enzimática de derivados de haloidrinas por diferentes lipases microbianas de: Pseudomonas fluorescens, Candida cylindracea, Rhizopus niveus e Aspergillus niger. A lipase de P. fluorescens foi imobilizada em esferas de fibroína do bicho da seda (método 1, via adsorção) e em blenda com alginato de cálcio (método 2, via encapsulação) em diferentes condições, tais como, variação de solvente, variação da quantidade de enzima imobilizada e tempo de reação. As condições otimizadas foram empregadas em diferentes haloidrinas, rendendo elevados excessos enantioméricos (ee > 99%) e alta razão enanantiomérica (E > 200) para os produtos acetilados. Foi possível desenvolver um protocolo simples, barato e prático para a síntese enantiosseletiva de haloidrina reforçando a versatilidade da fibroína e do alginato como suportes de imobilização para catalisadores heterogêneos. Também foi possível utilizar a lipase imobilizada (método 2) na reação de transesterificação para obtenção do biodiesel etílico. As melhores condições para o bom funcionamento do biocatalisador foram: 30% do biocatalisador, 20% de n-hexano, relação óleo e etanol de 1:4 a 32 ºC por 48 h em agitação magnética (400 rpm). Essas condições permitiram a formação de 42% de rendimento do biodiesel etílico. O biocatalisador apresentou algumas limitações reacionais, tais como, fragilidade frente a elevadas temperaturas (> 32 ºC) e prolongado tempo de agitação magnética. Porém, permaneceu apto no meio por 4 ciclos consecutivas. Conclui-se que os biomateriais (fibroína, alginato e quitosana) podem ser utilizados como alternativas versáteis na imobilização de micélios de fungos filamentoso e de enzimas isoladas para aplicações em biocatalíticas.
Resumo:
INTRODUO - A obesidade uma preocupao de sade pblica cada vez mais importante, em todo o mundo. A obesidade infantil, por sua vez, vem sendo associada a um alto risco de agravos infantis e de obesidade e doenas crnicas no transmissveis na fase adulta. Admite-se que o incio da vida seja um momento crtico e determinante para o risco do indivduo desenvolver sobrepeso ou obesidade. Entretanto, no est definido se existe algum perodo de maior vulnerabilidade na fase ps-natal e qual seria o melhor marcador do crescimento da criana para indicar uma possvel interveno precoce que possa minimizar o risco de desenvolver excesso de peso ou obesidade. OBJETIVO - Analisar as relaes existentes entre indicadores antropomtricos de crescimento no primeiro ano de vida e o desenvolvimento de excesso de peso no incio da idade escolar. MTODOS - Estudo de uma coorte histrica de uma unidade bsica de sade em So Paulo, Brasil. Os momentos analisados foram aos trs, seis e doze meses e aos sete anos de idade. Avaliou-se a velocidade de crescimento e o crescimento alcanado durante o primeiro ano de vida frente aos desfechos: excesso de peso e obesidade aos sete anos de idade. As variveis foram analisadas estatisticamente atravs do Coeficiente de Correlao de Pearson e das curvas ROC, alm de terem sido estimadas a sensibilidade, a especificidade e o risco relativo. RESULTADOS - Os Coeficientes de Correlao de Pearson do ganho de peso por ganho de comprimento nos perodos de 0 a 3 meses, 0 a 6 meses e 0 a 12 meses foram, respectivamente, 0,23 (IC 95 por cento : 0,13 a 0,33), 0,29 (IC 95 por cento : 0,19 a 0,39) e 0,34 (IC 95 por cento : 0,24 a 0,43), todos significantes estatisticamente. Os Coeficientes de Correlao de Pearson do escore z do ndice de Massa Corprea (IMC) para 3, 6 e 12 meses foram, respectivamente, 0,39 (IC 95 por cento : 0,29 a 0,48), 0,41 (IC 95 por cento : 0,32 a 0,50) e 0,42 (IC 95 por cento : 0,33 a 0,51). Para excesso de peso na idade escolar, a utilizao do marcador escore z do IMC aos 12 meses maior que 0,49 apresentou sensibilidade de 68,29 por cento (IC 95 por cento : 59,3 por cento a 76,4 por cento ), especificidade de 63,51 por cento (IC 95 por cento : 56,6 por cento a 70,0 por cento ) e risco relativo estimado de 2,31 (IC 95 por cento : 1,69 a 3,17). Para obesidade, o mesmo marcador apresentou sensibilidade de 76,47 por cento (IC 95 por cento : 62,5 por cento a 87,2 por cento ), especificidade de 56,89 por cento (IC 95 por cento : 50,9 por cento a 62,7 por cento ) e risco relativo estimado de 3,49 (IC 95 por cento : 1,90 a 6,43). CONCLUSES - O primeiro trimestre de vida se revelou como sendo o perodo mais crtico, entre os estudados, para o desenvolvimento de sobrepeso ou obesidade no incio da idade escolar. No entanto, o escore z do IMC acima de 0,49 aos 12 meses de vida se mostrou como o melhor marcador para esses dois desfechos.
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Diversas espcies de anuros da famlia Leptodactylidae se reproduzem em corpos dgua sazonais, temporrios e mantidos exclusivamente por chuvas. Em perodos de estiagem prolongada a poa pode secar completamente, ocasionando elevadas taxas de mortalidade de ovos e girinos dessas espcies, podendo exercer forte presso seletiva na evoluo de mecanismos de resistncia e sobrevivncia nas fases iniciais do desenvolvimento. Algumas espcies de girinos conseguem sobreviver cerca de cinco dias fora dgua o que pode proporcionar uma adaptao vantajosa, porque possibilita a sobrevivncia dos girinos por um perodo que pode ser suficiente para a reincidncia de novas chuvas e restabelecimento do corpo dgua. Apesar dessa capacidade de sobrevivncia, pouco se sabe sobre as possveis modificaes que a desidratao pode causar na locomoo e na morfologia durante o desenvolvimento desses animais. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do estresse hdrico: (1) no nvel de sobrevivncia e perda de massa corprea; (2) no desempenho locomotor; (3) na morfologia externa (morfometria linear) e interna, analisando tanto o volume total quanto o volume visceral (estereologia); e (4) no tempo at metamorfose aps o estresse. Utilizamos girinos de duas espcies de anuros, Leptodactylus fuscus (Leptodactylinae) e Physalaemus nattereri (Leiuperinae), ambas as espcies se reproduzem em corpos dgua temporrios, em reas com estao seca definida estando, portanto sujeitas as mesmas presses seletivas. Alm disso, as duas espcies apresentam modos reprodutivos diferentes, podendo apresentar diferentes graus de resistncia ao estresse hdrico. Os girinos das duas espcies foram divididos em dois grupos, os que ficaram em gua (grupo controle) e os que foram submetidos ao estresse hdrico (grupo tratamento), por trs perodos de tempo (12, 24 e 72 horas). Houve diferenas significativas para valores de perda de massa entre os grupos controle e tratamento em ambas as espcies, sendo o grupo tratamento que mais perdeu massa corprea em todos os perodos, alm disso, quase metade dos girinos de P. nattereri morreram em 36 horas de estresse. No houve diferenas significativas para os dados de desempenho locomotor e volume total entre os grupos testado para girinos de L. fuscus, mas houve diferenas morfometricas significantes nos componentes relacionados a cauda e no volume visceral, onde, o intestino do grupo tratamento foi menor que do controle. J em P. nattereri, houve diferenas significativas entre os grupos testados para desempenho locomotor, volume total, morfometria da cauda e volume visceral, sendo o estomago e anexo do tratamento maior que do controle. Nossos resultados sugerem que a exposio ao estresse hdrico no afeta significativamente a morfologia e o desempenho locomotor dos girinos de L. fuscus. No entanto, girinos de P. nattereri apresentaram uma sensibilidade ao estresse hdrico prolongado, principalmente sobre o seu desempenho locomotor.
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Introduo - O abuso sexual de crianas constitui um problema de sade pblica, com aproximadamente 73 milhes de casos de meninos e 150 milhes de meninas registrados anualmente no mundo. O abuso sexual gera consequncias negativas e condutas de risco que contribuem com algumas das principais causas de morte, doena e deficincia nas vtimas do abuso. Pais ou cuidadores primrios so fundamentais no processo de orientao e de cuidado das crianas abusadas, no sentido de prevenir as consequncias cognitivas, comportamentais e emocionais evidenciadas no futuro dessas crianas. Entretanto, as habilidades das famlias de cuidadores para lidar com a problemtica ainda so insuficientes. Objetivo - Descrever os processos e significados da experincia vivida pelos pais ou cuidadores primrios de crianas abusadas sexualmente. Mtodo - Os dados empricos foram tratados utilizando-se o Discurso do Sujeito Coletivo (DSC), fundamentado na Teoria das Representaes Sociais, que viabiliza a emergncia das representaes sociais por meio da construo dos discursos coletivos obtidos de depoimentos de um grupo especfico. Foram avaliados 60 pais ou cuidadores primrios no estupradores, que responderam cinco situaes-problema, cada uma com questes correspondentes, residentes nos municpios de Cajic e Tabio de Bogot, Colmbia. O processamento e a anlise dos dados foram realizados no sofware Qualiquantisoft, associado metodologia do DSC. Resultados - Na primeira situao-problema, que aborda o porqu do silncio do filho sobre o abuso, os entrevistados enfatizaram que fundamental o relacionamento pais e filhos (45,7 por cento , n = 43), bem como melhorar o papel de pais por meio da escuta, do dilogo e do confiar, dedicando mais tempo s crianas; tambm acham que o silncio se deve ao medo por parte das crianas e a ameaas e intimidao por parte do abusador, Na situao-problema 2, relativa identificao do abuso sexual como problema real, o significado atribudo configura cadeias que se repetem por transmisso intergeracional (26,9 por cento , n = 21). Na situao-problema 3, o que fazer no futuro, 53,3 por cento dos entrevistados (n = 32) acham que a criana est comprometida comportamentalmente e enfatizam a homossexualidade com perda da identidade como consequncia da violncia sexual. Na situao-problema 4, que enfatiza o papel da rede social quanto ao cuidado da criana, os entrevistados acreditam que a soluo dar proteo (29,1 por cento ; n = 32), com aes que visem a afastar a criana do ambiente agressor, dar orientao, apoio e segurana criana e famlia. A quinta situao-problema que diz respeito ao cuidado das crianas abusadas; 34,26 por cento dos entrevistados (n = 37) enfatizam o apoio e a ajuda com a intervenincia da rede de apoio social e afetivo. Concluso - Para os pais ou cuidadores primrios de crianas abusadas sexualmente, os significados se expressam como afetivo, coragem, superao, no ter medo e saber reconhecer as falhas dos pais. Em funo dos resultados, que identificam posturas tradicionais dos respondentes, recomenda-se programas inovadores com um alto componente educativo, onde se contextualize o abuso sexual por meio de situaes reais em escolas, delegacias, nas famlias e na comunidade, com intervenincia das redes de apoio social; enfatiza-se igualmente a necessidade de formao mais humanizada dos profissionais de apoio social.
