996 resultados para C template metaprogramming
Resumo:
A matriz extracelular (MEC) capaz de modular a adeso celular, induzindo processos de sinalizao celular. No estado de aderncia intermediria, induzido por protenas matricelulares, as clulas tendem a se diferenciar, migrar e proliferar. A tenascina-C uma protena matricelular amplamente secretada em gliomas que est envolvida na proliferao e angiognese tumoral. A MEC de gliomas, possui elevada incorporao de tenascina-C (TN-C), uma glicoprotena matricelular desadesiva que compete com a glicoprotena adesiva fibronectina (FN), desestabilizando os contatos focais e induzindo proliferao celular em gliomas. Neste trabalho ns nos propusemos a investigar o papel da TN-C tumoral no fentipo angiognico de clulas endoteliais. Recentemente em um trabalho publicado pelo nosso grupo observamos que as clulas endoteliais semeadas sobre matrizes de glioma (U373 MG) aderem menos e so deficientes na capacidade de formar tubos quando comparadas com quelas plaqueadas sobre MEC de HUVECs. No entanto, neste trabalho, reproduzimos este fentipo semeando as clulas endoteliais em suportes de TN-C /FN mimticos da composio da matriz tumoral nativa. Por western blotting, observamos um aumento na fosforilao em treonina 638 da protena PKCα, um possvel stio inibitrio, e um aumento na ativao de PKCδ. O efeito antagnico na regulao dessas isoformas de PKC foi demonstrado quando usamos inibidores seletivos de PKC α e δ e um ativador de PKCα (PMA). Observamos que quando tratamos as HUVECs plaqueadas sobre MEC de U373 com PMA, resgatamos a capacidade dessas clulas de formar tubos, o pr-tratamento dessas HUVECs com inibidor de PKC δ (rotlerina) resgatou parcialmente a capacidade tubulognica dessas clulas. O pr-tratamento das HUVECs que foram semeadas sobre MEC da HUVEC (que formam tubos normalmente) com um inibidor de PKC α (RO320432) levou a diminuio da capacidade tubulognica. Alm disso, esta matriz tambm induz ativao de ERK e AKT. Investigamos tambm se o bloqueio dos diferentes domnios da TN-C na matriz derivada de glioma poderia, de alguma forma, reverter o defeito angiognico das clulas, propiciado pela interao com a matriz extracelular de gliomas. O pr-tratamento da matriz extracelular de glioma com anticorpos anti-TN-C (contra os domnios FNIII 1-3, 4-5 FNIII e N-terminal) resgatou parcialmente a capacidade das clulas endoteliais de formar tubos. Nossos dados sugerem que a induo do fentipo vascular observado em muitos gliomas, com predomnio de vasos mal formados e sub-funcionais, pode ser parcialmente devido ao comprometido da sinalizao mediada por PKCs em clulas endoteliais, bem como do aumento da ativao das vias de ERK e Akt.
Resumo:
Neisseria meningitidis sorogrupo C (MenC) tem sido causador de surtos no Brasil, desde 2005. Vacinas conjugadas contra MenC esto disponveis desde 1999 nos pases desenvolvidos e mais recentemente no Brasil. So vacinas eficazes em pacientes imunologicamente normais, mas pouco se conhece sobre o impacto em pacientes HIV+. O objetivo principal deste estudo foi investigar se h alguma correlao entre a resposta de LT CD4+ de memria e a resposta de anticorpos especficos para o MenC, assim como conhecer as populaes de memria dos LT CD8+, em crianas e adolescentes infectados pelo HIV respondedores ou no vacina MenC conjugada. Amostras de sangue de 36 pacientes HIV+ foram coletadas antes e aps imunizao, para anlises laboratoriais, soros e clulas coletadas foram congelados e enviados ao nosso laboratrio para a anlise da resposta imune humoral e celular. Utilizamos o ensaio bactericida para avaliar a resposta humoral e dividir a populao de estudo em soroconversor positivo e soroconversor negativo. A citometria de fluxo foi aplicada para identificao das seis subpopulaes de LT CD4+ e T CD8+ e avaliao do perfil de ativao. No encontramos mudanas no perfil de distribuio das subpopulaes antes e aps a vacinao. A subpopulao LT CD4+ Int correlacionou positivamente com os ttulos de anticorpos e a ativao, de um modo geral, estava elevada nos respondedores, conferindo certa importncia para essa clula. Semelhanas foram observadas entre as subpopulaes LT CD4+ e T CD8+. Em suma, este estudo revelou importantes associaes entre a resposta de anticorpos bactericidas aps a vacinao, o perfil de distribuio das subpopulaes de LT CD4+ LT CD8+ e seu status de ativao.
