Aplicação da técnica de imunofluorescência direta para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina em aspirado de linfonodo

Recentemente, foco de leishmaniose visceral canina (CVL) foi descrito na região noroeste do Estado de São Paulo - Brasil. O Hospital Veterinário - UNESP - Araçatuba, no ano de 2.000, desenvolveu 60 testes citopatológicos de casos suspeitos de leishmaniose usando aspirado por agulha fina (FNA). Os esfregaços de linfonodo foram corados pelo método de Romanowsky (Diff-Quik®) e observados em microscopia de luz. Os casos positivos mostraram formas amastigotas típicas de Leishmania livres ou em vacúolos de macrófagos. Sinais citopatológicos de reatividade do sistema linfo-histiocitário com ausência de parasitos foram também observados. Com o objetivo de implementar o diagnóstico da CVL, detectando parasitos e material antigênico nos esfregaços, aplicou-se a reação de imunofluorescência direta (IFD) usando anticorpo policlonal anti-Leishmania produzido em camundongo. Comparamos o método de IFD com a pesquisa direta do parasito em esfregaços corados pelo método de Romanowsky. Dos 60 cães com sinais clínicos da doença, o exame direto foi positivo em 50% (n=30), duvidoso em 36,7% (n=22) e negativo com reatividade do linfonodo em 13,3% (n=8). Quando os linfonodos foram submetidos a reação de IFD observamos reação positiva em 93,3% (n=56) e reação negativa em 6,7% (n=4). Nossos resultados mostraram que a reação de IFD apresentou alta sensibilidade quando comparada a pesquisa direta do parasito pela coloração de Romanowsky. A reação de IFD pode ser um método útil para confirmar os casos duvidosos da doença, onde as formas amastigotas não são identificadas com facilidade.

Avaliação do sistema de monitoramento computadorizado de digestão in vitro: 1. Testes preliminares

O objetivo deste trabalho foi testar o sistema de monitoramento computadorizado da produção de gás in vitro. Essa técnica facilita estudos da degradação das frações solúveis e insolúveis das forragens, quantificadas pela produção de gás (CO2 e CH4) oriunda do metabolismo microbiano e medida por sensor de pressão. Diversas quantidades de amostras (50 a 110 mg de feno de alfafa) e outros alimentos foram testadas. Também, a influência da quantidade de líquido ruminal (2,0 ou 3,0 mL), com ou sem barras magnéticas agitadoras nos frascos incubatórios, na digestibilidade de 100 mg de feno de alfafa, foi estudada. A quantidade de 100 mg de amostra, 2,0 mL de líquido ruminal e sem barra magnética agitadora, proporcionou os menores coeficientes de variação na produção de gás. em conclusão, 2,0 mL de líquido ruminal, sem barra e com 100 mg de amostra, apresentaram maior precisão na curva de digestão.

Histologia da pele da carpa prateada (Hypophtalmichthys molitrix) e testes de resistência do couro

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Suplementação de enzimas exógenas em dieta microparticulada para larvicultura do pacu

Este experimento foi realizado para avaliar os efeitos da suplementação de enzimas exógenas (pancreatina suína) em microdietas sobre o crescimento, a sobrevivência e as alterações morfológicas do trato digestório de larvas de pacu, Piaractus mesopotamicus. Foram testados oito programas alimentares: alimentação exclusiva com náuplios de Artemia (AV); alimentação exclusiva com dieta microparticulada com (DMP) ou sem (DM) suplementação enzimática; substituição, aos cinco dias, dos náuplios de Artemia por dietas inertes com (AV5DMP) ou sem (AV5DM) suplementação; e substituição dos náuplios aos dez dias por dietas com (AV10DMP) ou sem (AV10DM) suplementação. O experimento teve duração de 28 dias. Larvas que receberam o alimento vivo durante todo o período experimental apresentaram maiores médias de peso. O efeito negativo da supressão do alimento vivo sobre o crescimento das larvas foi verificado tanto na substituição aos cinco dias como aos dez dias. No entanto, nas avaliações biométricas subseqüentes, observaram-se efeitos positivos da suplementação enzimática; a partir do 20º dia de experimento, as larvas que receberam a dieta suplementada com enzima exógena apresentaram peso médio estatisticamente superior ao daquelas alimentadas com a dieta sem suplementação. As diferenças morfológicas mais evidentes proporcionadas pela suplementação enzimática foram observadas nas larvas que receberam substituição alimentar aos cinco dias. As diferenças foram relativas à quantidade de grânulos de zimogênio no pâncreas e às inclusões supranucleares no intestino. As larvas submetidas à transição alimentar aos dez dias de experimento já apresentavam diferenciação morfológica do sistema digestório mais avançada, assemelhando-se muito às larvas do tratamento com alimento vivo. Os resultados deste experimento indicam que a suplementação com pancreatina proporcionou efeitos positivos sobre o crescimento e a sobrevivência das larvas de pacu.

Avaliação do comportamento sexual em touros Nelore: comparação entre os testes da libido em curral e do comportamento sexual a campo

Objetivou-se determinar a eficiência do teste da libido realizado em curral em comparação ao teste realizado a campo e relacioná-los à taxa de gestação em estação de monta de 120 dias. Treze touros aptos à reprodução foram submetidos ao teste da libido em curral por 3 horas. Desses touros, nove foram submetidos à avaliação a campo na proporção touro:vaca de 1:33. A cada 21 dias, foi diagnosticada a gestação por meio de avaliações ultra-sonográficas. No teste em curral, observou-se que, quanto maior o tempo, maiores foram os escores de classificação e que nenhum touro efetuou serviço completo nos 10 minutos iniciais do teste. Com um touro classificado como muito bom obteve-se 84,80% de prenhez, porém touros questionáveis proporcionaram taxas de prenhez de 86,67 e 96,55% ao final da estação. As correlações entre características físicas e morfológicas do sêmen mantiveram-se próximas de zero ou foram nulas. Os principais sinais fisiológicos do comportamento sexual foram o ato de cheirar ou lamber o corpo da fêmea, cheirar ou lamber a vulva, seguidos ou não por reflexo de Flehmen. em animais da raça Nelore, o tempo de 30 minutos de observação mostrou-se mais eficiente para a realização do teste da libido em curral. O teste da libido realizado a campo no período diurno não foi eficaz em predizer a libido de todos os animais estudados, em decorrência, provavelmente, do comportamento sexual noturno de alguns reprodutores.

Relação da taxa de gestação com sêmen bovino congelado e testes de avaliação espermática in vitro

Avaliou-se a relação entre os testes complementares (teste hiposmótico, teste de termorresistência lento e teste de reação acrossômica) e os testes de avaliações convencionais (aspectos físicos e morfológicos) de sêmen bovino congelado/descongelado e os índices de prenhez. Os valores médios da motilidade espermática progressiva retilínea avaliados pelo teste de termorresistência foram de 53,48 (pós-descongelamento), 43,69 (60 minutos), 35,88 (120 minutos) e 33,04% (180 minutos) e a porcentagem de células reativas ao teste hiposmótico foi de 37,89%. Correlação positiva e de média intensidade foi encontrada para a motilidade espermática progressiva retilínea pós-descongelamento e o teste hiposmótico (0,21). Entretanto, a correlação da motilidade aos 180 minutos com o teste hiposmótico foi alta (0,64). A porcentagem de células que tiveram acrossoma reagido pós-descongelamento foi de 9,85%, apresentando correlações negativas de média e alta intensidade (-0,25 e -0,46, respectivamente) com a motilidade espermática progressiva retilínea pós-descongelamento e após 3 horas de incubação. Não houve correlação dos testes complementares e da motilidade pós-descongelamento com a taxa de gestação. Nenhum parâmetro considerado isoladamente serviu para avaliar a capacidade fertilizante do sêmen congelado/descongelado.

Crescimento pós-natal do coelho Norfolk: correlação entre parâmetros somáticos e área dos tipos de fibras musculares

Skeletal muscle fibers areas, the weight of body, carcass and muscle, the gastric content and the length of intestines and caecum of Norfolk rabbit from neonate to 26th week were measured. Types of fibers and areas were studied in -70-degrees-C frozen blocks of flexor carpo radialis muscle. Some sections were stained with Haematoxylin and Eosin and others were submitted to SDH, NADH-TR and m-ATPase, followed by acid and alkali preincubations. All parameters revealed a high degree of correlation. Carcass weight/body weight ratio reached 55,1% at 10th week. From neonate to 26th week, the areas of SO, FOG and FG muscle fibers increased of x9.1, x12.4 and x22.2. While SO and FOG fibers tend to stabilize their growth at 10th week, FG fibers were active at this age. Due to early stabilization of SO and FOG fibers growth, the additional increase in muscle tissue in attributed mainly to hypertrophy of FG fibers.

Melanocytes in the testes of Eupemphix nattereri (Anura, Leiuperidae): Histological, stereological, and ultrastructural aspects

Ectothermic vertebrates have a well-developed system of melanin-containing cells, which localize in several organs and tissues and compose an extracutaneous pigmentary system. This research aimed at characterizing histological and ultrastructural patterns of pigmented cells in the testes of the anura Eupemphix nattereri (Steindachner, 1963), including the stereological and quantitative evaluation of this cell type in the gonads. Ten adult males were collected in Nova Itapirema, São Paulo, Brazil, and submitted to morphological studies with light and transmission electron microscopy. The testis presents a great number of large cells with many brown granules and long cytoplasmic processes. The pigmented cells found in the testis are structurally similar to melanocytes, characterized by large amounts of melanosomes. The cells may be in intimate contact with the same cell type, with myoid cells surrounded by a large amount of collagen fibers, Leydig cells, and next to fibroblasts. The distribution and amount of extracutaneous melanocytes is variable when other organs and membranes are analyzed, allowing the establishment of species-specific patterns for the extracutaneous pigmentary system.

Influência dos períodos, seco e chuvoso, sobre os parâmetros clínicos em caprinos das raças Canindé e Moxotó

Os caprinos têm um sistema de termorregulação que visa manter a temperatura corporal constante dentro de certos limites, independente da temperatura ambiente. Quando esses limites são estabelecidos, eles são usados em diversos mecanismos fisiológicos para manter a temperatura corporal (TC) dentro dos limites normais. Assim, a produção animal pode diminuir devido ao estresse térmico causado por temperaturas elevadas, especialmente em áreas semi-áridas como o Nordeste do Brasil. Este trabalho teve como objetivo avaliar o comportamento fisiológico de diferentes grupos genéticos de caprinos nativos de acordo com a resposta fisiológica das varáveis temperatura retal (TR), frequência respiratória (FR), batimentos cardíacos (BC) e movimentos ruminais (MR), e estabelecer os parâmetros fisiológicos para estas raças sob as condições do semiárido do Nordeste do Brasil. Foram selecionados aleatoriamente 30 animais, sendo cinco machos e dez fêmeas da raça Canindé e cinco machos e dez fêmeas da raça Moxotó, dos quais foram aferidos as variáveis BC, FR e TR nos meses de abril e setembro/2007 e 2008. Observou-se influência significativa (P<0,05) do período do ano no BC, na FR e na TR na raça Canindé, sendo observados valores mais elevados de BC e TR no período chuvoso. Na raça Moxotó observou-se uma diferença significativa (P<0,05) quanto ao BC e TR entre os períodos estudados, sendo observadas na estação seca maiores valores para estas variáveis. Também se observou nesta raça, uma correlação negativa (47%) entre a temperatura ambiente (TA) e TR no período seco, enquanto que no período chuvoso, essa correlação foi positiva (28%). A correlação entre TA e BC foi negativa (21%) no período chuvoso e, positiva (25%) no período seco. Na raça Canindé observou-se correlação negativa (39%) entre TA e movimento ruminal (MR) na época chuvosa, enquanto que no período seco, essa correlação foi positiva (33%). Os parâmetros clínicos avaliados neste estudo encontram-se dentro da normalidade para a espécie caprina no semi-árido nordestino e a raça Moxotó apresentou comportamento condizente com uma maior tolerância ao clima da região e um maior grau de adaptabilidade.

Histology and morphometry of the testes of adult domestic cats (Felis catus)

Testicles of 30 mongrel cats were analyzed histologically and morphometrically, divided into three groups: G1 (1-2 years old), G2 (over 2 and up to 4 years old) and G3 (over 4 and up to 6 years old). After orchiectomy and histopathology, the morphometric parameters studied were: thickness of the tunica albuginea (72 mu m) and seminiferous epithelium (77.19 mu m), perimeter (53.81; 90.57 mu m), (54.80; 101.07 mu m); area (174.23; 494.55 mu m(2)), (176.68; 629.70 mu m(2)); maximum diameter (14.94; 28.02 mu m), (14.76; 31.66 mu m); minimum diameter (13.25; 21.92 mu m), (13.30; 24.52 mu m); and shape factor (index for regularity of the format) (1.36; 1.36), (1.39; 1.35) of the nucleus and cytoplasm of spermatogonia and Leydig cells, respectively. The results can be used for comparative studies and contribute knowledge concerning the height of the seminiferous epithelium, thickness of the tunica albuginea and size of spermatogonia and Leydig cells.

Hematologia e sinais clínicos de Piaractus mesopotamicus infectados experimentalmente com Aeromonas hydrophila

The purpose of this study was to evaluate the hematological response and clinical sign of Piaractus mesopotamicus infected by Aeromonas hydrophila. Were used 324 pacus, P. mesopotamicus weighing 102.84 [plus or minus] 27.1 g distributed in 27 water tanks with 300 L of capacity, 14 fish per tank. The fish were kept in the water tanks during one month, receiving appropriate diet. In this period was avoided stressing management. After this period, the fish were infected with 6 X 108 cfu of A. hydrophila fish-1, injected intraperitoneally. The blood collection was carried 24th before experimental infection and 2411 after its. The A. hydrophila infection in P. mesopotamicus is characterized by dark skin and clinical signs related to hemorrhage, hypochromic normocytic anemia, decrease on plasmatic proteins and globulins levels, leucopenia, lymphopenia, thrombocytopenia, eosinophilia, neutrophilia and monocytosis.

Isolamento e caracterização de candida albicans e outras leveduras de águas de recreação não marinha e de materiais clínicos

Candida albicans and other yeasts from recreational water or clinical materials were isolated. Sixty-six water samples, originating from eight swimming pools and five lakes with beaches were examined for the presence of these yeasts, by a membrane filter method and 'pour plate' technique. Sixty-two clinical materials from suspected cases of candidiasis were studied in the same period. Rhodotorula sp and C. albicans were more frequently isolated from lakes and swimming pools, respectively; C. albicans and C. parapsilosis from clinical materials. From 44 samples of C. albicans, 90,9% were serotype A, and 9,1%, serotype B; C. albicans from recreational waters belong only serotype A. No difference was observed in the M.I.C. of C. albicans strains from waters and clinical materials. All strains were susceptible to the antifungal drugs tested.