Caracterização da resposta imunológica de Aedes aegypti e Culex quinquefasciatus à infecção pelo sorotipo 1 do Dengue vírus

Os insetos podem atuar como pragas agrícolas e vetores de patógenos causadores de doenças ao homem e outros animais. Investigações a respeito do sistema imunológico de Ae. aegypti e Cx. quinquefasciatus poderão contribuir para o desenvolvimento de métodos de controle das doenças veiculadas por estes insetos, principalmente a dengue, enfermidade causadora de sério problema de saúde pública no mundo. Apesar de Ae. aegypti ser a única espécie vetora confirmada na transmissão do vírus Dengue no Brasil, considera-se também importante um melhor entendimento dos mecanismos imunológicos de Cx. quinquefasciatus tido como refratário ao vírus. Neste estudo foram utilizadas linhagens de Ae. aegypti e Cx. quinquefasciatus mantidas no Insetário do Departamento de Entomologia do CPqAM/FIOCRUZ. Três grupos experimentais de fêmeas com 10 dias de idade foram formados para cada espécie. Grupo I, composto por fêmeas alimentadas com solução sacarose (10 por cento); grupo II, fêmeas alimentadas com sangue limpo e grupo III, fêmeas alimentadas com sangue infectado com o sorotipo DENV-1. De cada grupo foram obtidos hemolinfa, glândula salivar, intestino médio e corpo gorduroso para avaliação da expressão dos antimicrobianos defensina e transferrina. Essa avaliação foi realizada através de PCR em Tempo Real utilizando o kit QuantiFast SYBR Green - One-Step qRT-PCR. A avaliação da hemodinâmica foi realizada utilizando 10 microlitros de hemolinfa de cada grupo, através da contagem das células em câmara de Neubauer. Nossos resultados demonstraram que o Cx. quinquefasciatus tem um maior aumento da expressão de defensina e um maior número total de hemócitos quando infectados com DENV-1 em relação ao Ae. aegypti e a transferrina teve sua expressão alterada somente no Ae. aegypti. Em ambas as espécies estudadas, apenas a alimentação sanguínea não interfere na produção de hemócitos ou quanto na indução de defensina e transferrina. Esses dados sugerem que fêmeas de Cx. quinquefasciatus parecem apresentar uma resposta imune celular e humoral mais intensa do que Ae. aegypti quando infectados com DENV-1

Avaliação da expressão das isoformas da molécula HLA-G e do perfil da resposta imune em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico juvenil (LESJ)

O lúpus eritematoso sistêmico juvenil (LESJ) é uma doença inflamatória crônica causada pela produção de autoanticorpos, que reconhecem como estranhos antígenos próprios do organismo, e possuem alta morbidade e mortalidade em relação à doença no adulto. Em sua patogênese estão envolvidos fatores ambientais, hormonais, imunológicos e genéticos. Estudos de associação genética demonstraram que a susceptibilidade ao lúpus é poligênica, e entre os genes envolvidos está o HLA-G que é responsável pela regulação da resposta imune. No estudo, foi analisada a expressão de isoforma da molécula HLA-G e observamos o perfil de resposta imune em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico juvenil. Os pacientes que participaram do estudo foram selecionados no serviço de Reumatologia do Hospital das Clínicas e foi coletado sangue periférico de 10 pacientes no momento ativo e inativo do LESJ. O estudo comparou a expressão do mRNA do HLA-G5, IL-10 e TNF, os níveis plasmáticos de sHLA-G e citocinas Th1, Th2 e Th17 entre os grupos com a doença ativa, inativa e o grupo de crianças saudáveis aplicando os testes de Mann-Whitney U e Kruskal-Wallis. Os resultados mostraram que pacientes com LESJ ativo apresentaram níveis elevados das citocinas IL-10 (p=0,004) e IL-6 (p=0,011), além de apresentarem expressão de mRNA do TNF mais elevada em relação ao grupo inativo (p0,05). Mesmo com número reduzido, foi possível caracterizar que houve mudança do perfil de citocinas durante a ativação do LESJ, e a relação dessa ativação com a expressão de HLA-G solúvel, além de servir como base para proposta de um modelo de regulação imunológica, que poderá ser validado em futuros experimentos

Avaliação da resposta clínica, inflamatória e infecciosa de crianças submetidas à cirurgia de coarctação da aorta com ou sem uso de precondicionamento isquêmico por pinçamento da aorta torácica descendente

Introdução: O precondicionamento isquêmico é o mais poderoso método experimental de proteção celular e pode ser aplicado em cirurgias que ocasionem isquemia tecidual como na correção de coarctação da aorta. Objetivo: Avaliar os resultados clínicos, inflamatórios e infecciosos de crianças submetidas à cirurgia de coarctação da aorta com ou sem uso de precondicionamento isquêmico por pinçamento da aorta torácica. Como desfechos primários foram avaliados os Eventos Adversos Principais (EAP) e o óbito em até 30 dias. Método: Foram analisados retrospectivamente os dados clínicos de 104 pacientes submetidos consecutivamente a cirurgia de coarctação da aorta entre dezembro de 2007 e dezembro de 2012 no Instituto Nacional de Cardiologia, Centro Pediátrico da Lagoa e Hospital Prontobaby na cidade do Rio de Janeiro. Foram constituídos dois grupos, G PRE: 27 pacientes submetidos ao precondicionamento e G CONT: 77 pacientes de controle Resultados: Houve predomínio do sexo masculino, 62,5%, a média de peso foi de 4,04±3,07 kg e 11,53% tinham peso < 2,5kg. A média de idade foi de 3,82±2, com mediana de 1,04 meses. A cirurgia foi realizada em caráter de emergência em 81,48% no G PRE (p<0,001) e o Basic e o Comprehensive Aristotle Score foram maiores no G CONT (p<0,001). A bandagem da artéria pulmonar foi realizada em 37,9% do G PRE contra 9,09% do G CONT e 81,48% do G PRE tiveram anastomose estendida no arco aórtico (p<0,001). As complicações aconteceram em 66,23% no G CONT e em 22,22% no G PRE (p<0,001). Os tempos de entubação traqueal, internação no CTI e internação hospitalar do G CONT foram 3 vezes (p=0,281), 2,44 vezes (p=0,175) e 1,7 vezes (p=0,196) maior que do G PRE. Os EAP aconteceram somente no G CONT (p>0,05), sendo mais comuns os abdominais (8,65%). Ocorreram três óbitos cirúrgicos (2,88%) todos no Grupo CONT (3,90%) (p=0,401). Nove pacientes (8,65%) tiveram óbito na internação da cirurgia, um do G PRE (3,70%) e oito do G CONT (10,39%) (p=0,265). As curvas livres de desfecho em 30 dias (100%) e 60 meses (74,07%) foram favoráveis para o Grupo PRE (p=0,007 e p=0,017). A análise multivariada de COX demonstrou que as variáveis: cateterismo venoso prévio, interrupção de arco aórtico, ventrículo único, hipertensão arterial pulmonar e a dupla via de saída de VD estão associados ao aumento de risco para desfecho nos pacientes do G PRE (p<0,05). Conclusão: Os pacientes do G PRE apresentaram maior complexidade e risco operatório e menores índices de complicação. Os desfechos foram mais comuns no G CONT mesmo sem diferença estatística. A evolução livre de desfecho com 30 dias e até 60 meses foi favorável para o G PRE. A análise multivariada revelou grupo de variáveis em que o pré- condicionamento é desfavorável para aparecimento de desfecho em 30 dias

An item response analysis of the motor and behavioral subscales of the unified Huntington's disease rating scale in huntington disease gene expansion carriers

Although the Unified Huntington's Disease Rating Scale (UHDRS) is widely used in the assessment of Huntington disease (HD), the ability of individual items to discriminate individual differences in motor or behavioral manifestations has not been extensively studied in HD gene expansion carriers without a motor-defined clinical diagnosis (ie, prodromal-HD or prHD). To elucidate the relationship between scores on individual motor and behavioral UHDRS items and total score for each subscale, a nonparametric item response analysis was performed on retrospective data from 2 multicenter longitudinal studies. Motor and behavioral assessments were supplied for 737 prHD individuals with data from 2114 visits (PREDICT-HD) and 686 HD individuals with data from 1482 visits (REGISTRY). Option characteristic curves were generated for UHDRS subscale items in relation to their subscale score. In prHD, overall severity of motor signs was low, and participants had scores of 2 or above on very few items. In HD, motor items that assessed ocular pursuit, saccade initiation, finger tapping, tandem walking, and to a lesser extent, saccade velocity, dysarthria, tongue protrusion, pronation/supination, Luria, bradykinesia, choreas, gait, and balance on the retropulsion test were found to discriminate individual differences across a broad range of motor severity. In prHD, depressed mood, anxiety, and irritable behavior demonstrated good discriminative properties. In HD, depressed mood demonstrated a good relationship with the overall behavioral score. These data suggest that at least some UHDRS items appear to have utility across a broad range of severity, although many items demonstrate problematic features.

On the relationships between molecular conformations and intermolecular contacts toward crystal self-assembly of mono-, di-, tri-, and tetra-oxygenated xanthone derivatives

Oxygenated xanthones have been extensively investigated over the years, but there are few reports concerning their crystal structure. Our chemical investigations of Brazilian plants resulted in the isolation of four natural products named 1-hydroxyxanthone (I), 1-hydroxy-7-methoxyxanthone (II), 1,5-dihydroxy-3-methoxyxanthone (III), and 1,7-dihydroxy-3,8-dimethoxyxanthone (IV). The structures of these compounds were established on the basis of single crystal X-ray diffraction. The xanthone nucleus conformation is essentially planar with the substituents adopting the orientations less sterically hindered. In addition, classical intermolecular hydrogen bonds (O-H center dot center dot center dot O) present in III and IV give rise to infinite ribbons. However, the xanthone I does not present any intermolecular hydrogen bonds, meanwhile the xanthone II presents only a non-classical one (C-H center dot center dot center dot O). The crystal packing of all xanthone structures is also stabilized by pi-pi interactions. The fingerprint plots, derived from the Hirshfeld surfaces, exhibited significant features of each crystal structures.

Antifungal activity of tri- and tetra-thioureido amino derivatives against different Candida species

The in vitro antifungal activity of six thioureido substituted amines (P1-P6) was evaluated against Candida species, including Candida albicans, C. glabrata, C. krusei and C. parapsilosis. These tri- and tetra-thioureido amino derivatives with different methylation levels were synthesised through easy synthetic routes to evaluate their antifungal properties against Candida species. Among all studied derivatives, the tri-(2-thioureido-ethyl)-amine (P1) was the most active compound inhibiting C. albicans and C. glabrata at a concentration of 0.49 mu g ml(-1); P3, the N,N `,N ``,N ```-hexamethyl-derivative, also showed inhibitory activity against C. albicans and C. glabrata, but in higher concentrations (250 mu g ml(-1)). The N,N `,N ``,N ```-tetramethylated amine (P5) only inhibited the growth of C. glabrata, but its corresponding N,N `,N ``,N ```-octamethyl derivative (P6) was also active against C. glabrata (125 mu g ml(-1)) and it was the only compound active against C. parapsilosis. P2 and P4 showed no significant antifungal activity. The structure-activity relationship of the thioureido-substituted derivatives indicates that the molecular branching and the alkylation levels can influence the antifungal activity. This study demonstrated that thioureido derivatives exhibited significant antifungal activity against Candida species and that they can be considered as a very promising bioactive lead compound to develop novel antifungal agents.