Insulated retroviral vectors towards safe and efficient genetic modification of stem cells

In otherwise successful gene therapy trials for the treatment of SCID patients and others, insertional mutagenesis has resulted in leukemia development. Besides the integration of vectors that including strong enhancers, more recently, SIN-vectors have been shown to partially retain oncogenic potential. The identification of genetic elements which would both prevent such activation effects and shield the transgene from silencing, is a main challenge. Previous attempts met with difficulties in producing the vectors and poor efficacy of the insulators (GIE). The improvement of integrating vectors safety has been investigated using new candidate synthetic GIEs. The latter have been introduced in retroviral and lentiviral vectors. Native LTRs, SIN-LTRs, and SIN-insulated constructs have been designed and compared, using two sets of internal promoter, i.e. strong and housekeeping. We could establish that a specific insulator translates at best into functional activity and boundary effect in both vector types. We could also determine that other genetic elements are key determinants in order to achieve accurate expression and viral titre, from these insulated vectors. A dramatic shift in the expression profile is observed in target cells, with a homogenous pattern including data on both cell-lines and primary HSCs from cord blood. The assessment of potential genotoxicity will be presented, based on the comparison of the integration patterns ingenuity in human target cells sampled over a three months period with both reference LTRs and SIN versus test insulated vectors, using high-throughput pyro-sequencing.

[Pylônes dédiés à la victoire de l'Ourq, préparation dans le cadre de la fête de la Victoire quartier des Champs-Élysées] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 54824

[Installation du cénotaphe sous l'Arc de triomphe à l'occasion de la fête de la Victoire] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 54822

[Installation du cénotaphe sous l'Arc de triomphe à l'occasion de la fête de la Victoire] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 54819

[Préparatifs à l'occasion de la fête de la Victoire, quartier des Champs-Élysées] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 54817

[Installation du cénotaphe sous l'Arc de triomphe à l'occasion de la fête de la Victoire] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 54814

[9/7/19, rond-point des Champs-Élysées, canons allemands entassés pour les préparatifs de la Victoire] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 54808

M. [Eugène] Pierre, secrétaire général de la Présidence de la Chambre [des députés] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 57103

[Costante] Girardengo [coureur cycliste italien disputant une course au vélodrome d'hiver le 7-12-19] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 57116

[Orlando] Piani [coureur cycliste italien disputant une course au vélodrome d'hiver le 30-11-19] : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 57117

Institut Pasteur, laboratoire du professeur [Jean] Danysz, préparation du virus contre les rats, 1re préparation du bouillon de culture : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 57064

31/11/19 [i.e. 1er décembre], rue Olivier de Serres, [Football] Association, équipe Légion St Michel : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 57084

31/11/19 [i. e. 1er décembre], rue Olivier de Serres, [Football] Association, équipe Légion St Michel : [photographie de presse] / [Agence Rol]

Référence bibliographique : Rol, 57085