Desenvolvimento de uma plataforma analítica para aquisição de imagens moleculares em tecidos animais

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Manifestações oculares na leishmaniose

The Canine Visceral Leishmaniasis is a chronic disease of endemic character, caused by Leishmania Chagasi in Americas. The inoculation of the promastigote form in the individual triggers a local and widespread immune reaction with formation of inflammatory infiltrates and deposition of immune complexes in tissues. Initial clinical symptoms of the disease are: weight reduction, hepatomegaly, splenomegaly and, according to the disease chronicity, signs such as alopecia, erythema, onychogryphosis, arthropathies, renal diseases, pyoderma, seborrheic dermatitis, muscle atrophy and Ocular diseases. Ocular diseases are often reported and are result of the direct parasitism or immune-mediated mechanisms caused by the disease. The Leishmania spp have greater affinity for the anterior segment, so that anterior uveitis is one of the most frequently diagnosed injuries. Blepharitis diffuse and Keratoconjunctivitis also appear as important ocular changes. In histological section, inflammatory infiltrates and macrophages with amastigote form are observed in all ocular tissues, with the exception of the retina and optical nerve. In the clinical analysis and disease diagnosis, should be considered the differential diagnosis, such as Ehrlichiosis and systemic hypertension, because these may cause some ocular manifestations similar to those observed in leishmaniasis

Estudo citogenético em neoplasias e lesões proliferativas ósseas

A busca pela identificação de fatores que possam apontar o diagnóstico, a resposta terapêutica e sobrevida dos pacientes portadores de neoplasias ósseas tem sido incessante. Poderá ser de grande valia na escolha da proposta terapêutica presumir a agressividade tumoral, capacidade de invasão tecidual, propensão ao desenvolvimento de metástases e resposta ao tratamento. As neoplasias ósseas constituem um grupo heterogêneo de tumores, considerando-se os sítios anatômicos e a etiologia. Existe uma grande dificuldade para se estabelecer o prognóstico nestas patologias. Estudos citogenéticos possibilitam um melhor conhecimento antecipado dessas doenças. Embora fatores ambientais e dietéticos contribuam para a etiologia do câncer, as neoplasias se originam de um processo de múltiplos passos envolvendo alterações de genes e seleção clonal da progênie variante. Estas mutações ocorrem em classes de genes reguladores da proliferação celular como os oncogenes, genes supressores de tumor, fatores de crescimento, vias de sinalização e genes de reparo de DNA. Este projeto tem por objetivo detectar e descrever alterações cromossômicas consistentes e recorrentes através da utilização da citogenética clássica e o seu envolvimento no prognóstico em neoplasias ósseas, de pacientes do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP. Os conhecimentos sobre a biologia molecular melhoram o entendimento sobre os múltiplos aspectos da carcinogênese. Entretanto, embora, as perspectivas permaneçam, não houve até agora benefícios significativos em termos de prevenção, diagnóstico tratamento e seguimento dos pacientes com lesões ósseas. Este projeto visa estudos na tentativa de contribuir para um melhor entendimento e, por conseqüência, gerar dados para posteriores empregos em terapias mais eficazes para melhorar as taxas de sobrevida e beneficiar maior número de pacientes com neoplasias ósseas

Expansão ex vivo de células uroteliais em scaffolds 3D

Malformations and possible damages to the urogenital system can be originated in the embryonic period. Moreover, fire guns, knives and accidents, where there is the disruption of the urethra, also cause these lesions. The objective was to analyze the contribution of tissue engineering in the construction of neo-urethra, developed by bioengineering. We performed an urothelial ex vivo expansion of cells in 3D scaffolds (platelet gel matrix and acellular porcine aorta) to assess the contribution of this technique in the construction of a neo-urethra. Mechanical dissociation was made of the inner wall of 10 North Folk rabbit’s bladder, weighing 2.5 to 3.0 kg. After dissociation the cell content was centrifuged and obtained a pellet of urothelial cells. The pellet was ressuspended in culture medium DMEM F12 and cells were maintained in culture for 15 days. Immunohistochemical analysis characterized the urothelial culture. The cells were then implanted in the scaffold - platelet gel. In a second experiment using aortic porcine acellular matrix were implanted urothelial cells alone and urothelial cells on platelet gel, on the inner wall of the scaffold - aorta, with space for setting bordered by a urethral probe. The complex probe - cells - aorta and probe - cells in platelet gel - aorta, were sealed with suture material and culture were maintained in a humidified 37ºC incubator with 5% CO2 in air for 12 days to subsequent histological analysis of urothelium cell adhesion to the scaffolds. By observation under an optical microscope, we could see the growth of cells in the scaffold platelet gel, from a monolayer in to a three-dimensional structure. In the acellular porcine aortic matrix containing the platelet gel, we could observe a few quantity of urothelial cells adhered. However with the acellular porcine aortic matrix in which was implanted only the urothelial cells, we have obtained adhesion to the wall

Classificação e quantificação de tecidos Biológicos para construção de fantomas pediátricos

Paediatric diagnostic radiology can be considered as a separate specialty and with distinct characteristics of the radiology applied in adult patients. This in reason of the variability in the anatomical structures size and bigger sensitivity of tissues. The literature present in its majority methodologies for segmentation and tissue classification in adult patients, and works on tissue quantification are rare. This work had for objective the development of a biological tissue classifier and quantifier algorithm, from histograms, and that converts the quantified average thickness of these tissues for its respective simulator materials. The results will be used in the optimization process of paediatrics images, in future works, since these patients are frequently over exposed to the radiation in the repeated attempts of if getting considered good quality radiographic images. The developed algorithm was capable to read and store the name of all the archives, in the operational system, to filter artifacs, to count and quantify each biological tissues from the histogram of the examination, to obtain the biological tissues average thicknesses and to convert this value into its respective simulator material. The results show that it is possible to distinguish bone, soft, fat and pulmonary tissues from histograms of tomographic examinations of thorax. The quantification of the constituent materials of anthropomorphic phantom made by the algorithm, compared with the data of literature shows that the biggest difference was of 21,6% for bone. However, the literature shows that variations of up to 30% in bone thickness do not influence of significant form in the radiographic image quality. The average thicknesses of biological tissues, quantified for paediatrics patients, show that one phantom can simulate patients with distinct DAP ranges, since variations... (Complete abstract click electronic access below)

Análise da atividade de peroxidases e polifenoloxidases em diferentes órgãos vegetativos de espécies arbóreas nativas de diferentes grupos sucessionais

As formações vegetais são altamente dinâmicas e dependem principalmente da taxa de crescimento das espécies vegetais, entretanto, esta está intimamente relacionada e suscetível a estresses abióticos, como elevada ou baixa radiação solar, temperaturas extremas, e bióticos, como taque de patógenos e de herbívoros, o que faz com que as plantas necessitem de um sistema de defesa altamente eficiente o qual consiste na atuação de compostos secundários, e de enzimas como por exemplo peroxidases e polifenoloxidases. A atividade das peroxidases constitui a mais importante via do sistema de defesa vegetal a patógenos no que se refere a cicatrização de ferimentos e à herbivoria, propiciando um aumento da lignificação nos tecidos lesados, o que aumenta a resistência dos mesmos, dificultando assim a ocorrência de novas lesões. Quanto às polifenoloxidases, também pertencentes ao grupo das oxidorredutases, são enzimas que também atuam diretamente na via de defesa das plantas ao ataque de patógenos e na cicatrização de ferimentos e processos de senescência. Por meio da extração e análise da atividade de Peroxidases e Polifenoloxidases em porção de raiz, caule, ápice e em folhas de indivíduos de Erythrina speciosa Andrews, Eugenia uniflora L., Hevea brasiliensis M. Arg., Hymenaea courbaril L. var. stilbocarpa (Hayne) Lee et Lang, Joannesia princeps Vell., Licania tomentosa (Benth.) Fritsch, Pachira aquatica Aubl. e Psidium guajava L., obteve-se comportamento pioneiro para as espécies Eugenia uniflora L., Hymenaea courbaril L. var. stilbocarpa (Hayne) Lee et Lang, Joannesia princeps Vell. e Psidium guajava L., e comportamento não-pioneiro para as espécies Erythrina speciosa Andrews, Hevea brasiliensis M. Arg., Licania tomentosa (Benth.) Fritsch e Pachira aquatica Aubl.. Dessa maneira foi possível verificar que a análise da atividade peroxidásica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Avaliação da expressão proteica de PTEN, MDM2, P53 e AR em lesões proliferativas da próstata canina

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

O papel da proteína TET2 no enriquecimento do DNA genômico em 5-hidroximetilcitosina em lesões elanocíticas pré-malignas e pré-metastáticas com fenótipo stem cell-like

Durante a transformação maligna dos melanócitos, padrões de metilação do DNA encontram-se alterados, afetando a expressão gênica. As citosinas metiladas (5mC) podem ser hidroxiladas pelas dioxigenases dependentes de 2-oxoglutarato e Fe(II), Tet1, 2 e 3, resultando na formação de 5-hidroximetilcitosina (5hmC) (Globisch et al., 2010; Ko et al., 2010). A 5hmC pode agir tanto como um produto intermediário na desmetilação ativa do DNA quanto na desmetilação passiva ao longo de sucessivas replicações, o que pode contribuir com a dinâmica da metilação do DNA (Tahiliani et al., 2009). Além disso, demonstrou-se que Tet1 e Tet2 são expressas em células tronco embrionárias (Ito et al., 2010) e que 5hmC desempenha importante papel na manutenção e diferenciação destas células (Koh et al., 2011). No entanto, o papel da 5hmC e das proteínas Tet tanto na fisiologia normal quanto em doenças como o câncer ainda não está claro. Utilizando um modelo linear de progressão do melanoma, observamos aumento na expressão gênica de Tet1 nas linhagens celulares correspondendo a melanócitos pré-malignos (4C) e células de melanoma não metastático (4C11-), comparado a melanócitos não tumorigênicos (melan-a) e células de melanoma metastático (4C11+). Em relação à expressão proteica, há um aumento da expressão de Tet1 nas linhagens 4C e 4C11+, o que pode ser relacionado às fases de transição epitélio-mesênquima (EMT) e mesênquima-epitélio (MET), respectivamente. Além disso, constatamos aumento na expressão gênica e proteica de Tet2 na linhagem metastática 4C11+, o que pode indicar diferenças funcionais entre as proteínas Tet1 e Tet2. Também verificamos aumento significativo do conteúdo de 5hmC na linhagem 4C11+, o que se correlaciona com maior expressão gênica e proteica de Tet2. Por fim, linhagens humanas de melanoma metastático menos agressivas apresentaram aumento significativo na expressão dos genes TET1 ...

Terapia fotodinâmica - Aplicações em lesões cutâneas

Photodynamic therapy is a method of healing skin lesions , in addition to radiotherapy and brachytherapy are commonly used in the treatment of skin cancers , but it is still little known in Brazil , consisting of the application to the skin of a drug in the form of cream or lotion ( photosensitizer ) . It is absorbed by tumor cells and subsequently activated by light device , that wavelength of light in the order of 630 nanometers , promoting the selective destruction of cancer cells while preserving healthy cells around the lesion . It can be considered highly effective for treatment of skin cancer types of non-melanoma ( basal cell carcinoma , 85-100 % success in curing [ 3 ] , and Bowen's disease), actinic keratoses , which are precancerous lesions and still no studies that prove also action in the treatment of acne and aging caused by the sun . And the advantage of this treatment is that , when indicated , replace the surgical procedure , selectively treating the diseased cells . Thus, it offers better cosmetic results, reducing the risk of scarring [ 4 ]

Análise biomecânica do chute frontal de karatê: implicações em lesões nos membros inferiores

Pós-graduação em Engenharia Mecânica - FEG

Identificação de Neutrophil Extracellular Traps em lesões tegumentares de pacientes com Paracoccidiodomicose e análise da formação de NETs in vitro por neutrófilos humanos desafiados com Paracoccidioides brasiliensis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Estudo comparativo do efeito da terapia fotodinâmica e uso de antibióticos em lesões podais (Bumblefoot) em pinguins de Magalhães (Spheniscus magellanicus)

Pós-graduação em Biotecnologia Animal - FMVZ

Effect of platele-rich plasma on healing of class III furcation defects treated with autogenous bone grafting and guided tissue regeneration: a histomorphometric sutdy in dogs

Objective: The purpose of this study was to evaluate the effects of the platelet-rich plasma (PRP) when used in combination with autogenous bone graft and bioabsorbable membrane (Resolut® ) in the treatment of Class  III furcation defects in dogs. Material and method: Class III furcation defects (5 mm in height and in depth) were surgically created in the mandibular third premolars of five mongrel dogs. After nine weeks, the lesions were treated with scaling and root planning and each defect received one of the following treatments: autogenous bone graft + membrane (group C) or PRP + autogenous bone graft + membrane (group T). After a healing period of 90 days, the animals were sacrificed. Routine histological processing and staining with hematoxilyn and eosin and Masson trichrome were performed and a histomorphometric analysis determined the effect of the treatments on periodontal tissue regereneration. Data were analyzed by Hotelling’s T-squared (p < 0.05). Result: No statistically significant difference between C and T groups was observed by the histomorphometric analysis of the furcation area. Both treatment groups demonstrated similar regenerative results with the furcation defects partially filled and periodontal regeneration limited to the experimental notches of the lesions. (p > 0.05). Conclusion: According to the present results, PRP does not enhance the periodontal regeneration in class III furcation defects treated with autogenous bone graft and bioabsorbable membrane.

Effect of platelet-rich plasma on healing of class III furcation defects treated with autogenous bone grafting and guided tissue regeneration: a histomorphometric study in dogs

The purpose of this study was to evaluate the effects of the platelet-rich plasma (PRP) when used in combination with autogenous bone graft and bioabsorbable membrane (Resolut® ) in the treatment of Class  III furcation defects in dogs. Material and method: Class III furcation defects (5 mm in height and in depth) were surgically created in the mandibular third premolars of five mongrel dogs. After nine weeks, the lesions were treated with scaling and root planning and each defect received one of the following treatments: autogenous bone graft + membrane (group C) or PRP + autogenous bone graft + membrane (group T). After a healing period of 90 days, the animals were sacrificed. Routine histological processing and staining with hematoxilyn and eosin and Masson trichrome were performed and a histomorphometric analysis determined the effect of the treatments on periodontal tissue regereneration. Data were analyzed by Hotelling’s T-squared (p < 0.05). Result: No statistically significant difference between C and T groups was observed by the histomorphometric analysis of the furcation area. Both treatment groups demonstrated similar regenerative results with the furcation defects partially filled and periodontal regeneration limited to the experimental notches of the lesions. (p > 0.05). Conclusion: According to the present results, PRP does not enhance the periodontal regeneration in class III furcation defects treated with autogenous bone graft and bioabsorbable membrane.