两种不同终止子在转基因鲤鱼中的促生长效应

转基因构建体中启动子的选择会直接影响转植基因的活性,近年来有研究表明转基因构建体中终止子的选择会一定程度地影响转植基因的活性。为了更好地筛选转基因构建体和培育快速生长的转"全鱼"生长激素(Growth hormone,GH)基因鱼,文章用鲤鱼β-actin基因终止子和生长激素基因终止子分别构建了转基因构建体,显微注射得到转"全鱼"GH基因鱼P0代养殖群体,比较两种不同终止子构建体的活性。统计分析发现,生长激素基因终止子构建体的养殖群体的体重频率呈正态分布且平均体重显著高于β-actin基因终止子构建体的养

嗜水气单胞菌感染的中华鳖主要器官差减cDNA文库的构建

以致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)人工感染的中华鳖(Trionyx sinensis)肝、脾、肾组织为材料,应用抑制性差减杂交(SSH)技术,构建了嗜水气单胞菌感染组织的差减cDNA文库。以中华鳖管家基因-βactin作为差减指标检测该文库差减效率达210倍,表明感染细菌后某些差异表达基因得到了相应倍数的富集。将获得的cDNA片段连接到pMD18-T载体并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。PCR阳性检测显示差减片段在150—800bp之间。该差减cDNA文库的构建为快速分离和鉴

Tantalum-oxide catalysed chemical vapour deposition of single- and multi-walled carbon nanotubes

Tantalum-oxide thin films are shown to catalyse single- and multi-walled carbon nanotube growth by chemical vapour deposition. A low film thickness, the nature of the support material (best results with SiO2) and an atmospheric process gas pressure are of key importance for successful nanotube nucleation. Strong material interactions, such as silicide formation, inhibit nanotube growth. In situ X-ray photoelectron spectroscopy indicates that no catalyst reduction to Ta-metal or Ta-carbide occurs during our nanotube growth conditions and that the catalytically active phase is the Ta-oxide phase. Such a reduction-free oxide catalyst can be technologically advantageous. © 2013 The Royal Society of Chemistry.

虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)组蛋白H_3启动子的分子克隆及在稀有(鱼句)鲫(Gobiocypris rarus)中的表达活性分析

使用高保真PCR方法从虹鳟鱼基因组中克隆得到虹鳟鱼组蛋白H3启动子.将虹鳟鱼组蛋白H3启动子插入启动子缺失的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-1中,构建成重组载体pRH3EGFP-1.通过显微注射法得到转pRH3EGFP-1稀有(鱼句)鲫.在荧光解剖镜下,可以清楚地观察到EGFP在发育到原肠胚的转pRH3EGFP-1稀有(鱼句)鲫中表达.在稀有(鱼句)鲫幼体鱼苗中也可以清楚地观察到EGFP在多个组织中的泛组织表达.比较CMV启动子、鲤鱼β-actin启动子、虹鳟鱼组蛋白H3启动子的EGFP表

鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库的构建

紫外线灭活的草鱼出血病病毒 (GCHV)能诱导鲫囊胚培养细胞 (CAB)产生高滴度的干扰素 ,从而诱导宿主细胞基因表达的改变并处于抗病毒状态。提取灭活病毒诱导未经病毒诱导的CAB细胞mRNA ,利用抑制性差减杂交技术 ,成功构建了鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库。以鲫管家基因α tubulin和 β actin作为差减指标 ,检测差减cDNA文库的差减效率分别高达 2 15和 2 7倍 ,表明经过病毒诱导后的细胞中 ,某些差异表达基因的富集效率也接近 2 15倍。鱼类抗病毒基因差减cDNA文库的建立

转基因异源四倍体鲫鲤F_1的研究

采用显微注射法将含有鲤鱼 β actin基因启动子的草鱼生长激素基因“全鱼”基因pCAgcGHc转入异源四倍体鲫鲤 ,然后使其自交得到转基因异源四倍体鲫鲤F1,对 15 0日龄F1体重和体长进行检测 ,可明显看见转基因异源四倍体鲫鲤F1的生长优势 ;取F12 0尾 ,提取尾鳍基因组DNA ,采用合适的引物 ,PCR方法检测转基因异源四倍体鲫鲤F1是否含有外源生长激素基因 ,结果 15 0日龄F1阳性率达到 90 % ,且有些雄性个体可以挤出少量精液 ,而普通 15 0日龄异源四倍体鲫鲤无此现象。文章阐明了

四倍体鱼的种质改良研究

β—actin基因启动子驱动的草鱼生长激素基因cDNA—“全鱼”基因 pCAgcGHc用显微注射方法导入四倍体鱼卵 ,获得了生长快 ,个体硕壮的转基因四倍体鱼。 2 4 0日龄时 ,转基因鱼平均体重为 30 2 7g ,是对照鱼的 3 1倍 ,平均体长是对照的 1 34倍 ,并可从部分转基因雄鱼挤出精液 ,而对照鱼尚无此现象。对 19尾转基因四倍体雄鱼的精液和尾鳍DNA做PCR检测 ,外源基因的阳性率分别为 94 7%和 52 6%。最后 ,展望了转基因四倍体鱼在转基因鱼产业化方面的应用前景