中华卤虫滞育卵发育和重金属刺激相关蛋白质组学研究

卤虫(Artemia)是一种广温、耐高盐的小型甲壳动物，广泛分布于内陆盐湖和沿海盐田中。卤虫的无节幼体作为重要的蛋白优质饵料，被广泛的应用于水产养殖生产。卤虫具有特殊的生物学特性，是研究甲壳动物胚胎发育的良好的实验材料，同时也是一种研究动物抗逆机制的模式动物。卤虫有卵生和卵胎生两种繁殖后代的方式，当环境条件适宜时，卤虫倾向于采取卵胎生方式，即直接产生无节幼体；而在恶劣的环境条件下，卵生方式占主要地位，产生处于滞育状态的、具有复杂外壳的休眠卵。卤虫的滞育卵具有独特的生物学特性和特殊的生理生化特点。其发育停滞，细胞分裂停止，酶活力下降，代谢活动受到抑制并可耐受各种极端恶劣环境，如缺氧、低温、紫外线、干燥等。即使在最适的环境中滞育卵的孵化率也很低，只有受到某些特定的非生物信号的刺激才自能终止这种滞育状态，恢复生理代谢；当环境条件适宜时，能够继续发育孵化成无节幼体。因此，卤虫的滞育卵在卤虫的整个生活史中占有重要的地位。另一方面，卤虫是极端环境生物，能够抵抗各种恶劣环境胁迫刺激，因此是研究抗逆机理的良好的实验动物。 本论文利用蛋白质组学技术，研究了卤虫滞育卵及滞育卵发育过程中的蛋白质组表达情况，并研究了卤虫幼体在重金属刺激后蛋白表达的变化情况。得到如下结果： 建立了中华卤虫滞育卵可溶性总蛋白的双向凝胶电泳对照图谱。在pH 4–7、分子量10-100 kDa范围内，检测到约 233个蛋白点，并利用高效液相色谱-质谱联用（LC-ESI-MS/MS）技术鉴定了其中的48个丰度较大及感兴趣的蛋白点，根据这些蛋白的生物学功能进行分类，功能类别包括细胞防御蛋白、抗氧化蛋白、细胞骨架蛋白、代谢相关蛋白等。在卤虫滞育卵中共分离鉴定到6个分子量和等电点存在差异的小热休克蛋白p26的异构体，生物信息学分析表明该蛋白有三种不同的功能位点，分别是蛋白激酶C磷酸化位点，Casein 激酶II磷酸化位点及 N-myristoylation 位点。 采用低温脱水的方法对滞育卵进行激活刺激，并对活化卵和滞育卵蛋白表达图谱进行了对比分析。结果表明对卤虫滞育卵的激活刺激引起了其蛋白表达的明显变化。活化卵图谱中蛋白点总数比滞育卵中明显增多，特别是在pI<5.5范围内。约70个蛋白点在激活刺激后上调表达，包括部分只在激活卵中表达的蛋白；25个下调表达，包括部分只在滞育卵中表达的蛋白；其余约60％（占滞育卵蛋白点数目百分比）的蛋白点表达量基本恒定。热休克蛋白家族、抗氧化蛋白家族成员等蛋白变化明显，小热休克蛋白p26、小热休克蛋白ArHsp21蛋白以及过氧化物还原酶异构体在激活卵中特异表达。 活化卵孵化过程中不同发育时期的蛋白表达又呈现出不同的特点，分别在孵化后6h、12h、18h和24h的蛋白质组学图谱上检测到267、285、195和210个蛋白点。孵化后6h和12h休眠卵蛋白表达个数相对较多，与胚胎发育过程中的器官发生和剧烈的形态变化相适应；孵化后18h和24h休眠卵蛋白表达明显下降，部分蛋白的表达关闭，部分蛋白开始富集表达。 利用双向凝胶电泳技术分析了中华卤虫幼体受到急性硫酸铜刺激后的蛋白表达变化情况。通过图谱对比分析，检测到了5mM硫酸铜刺激24h后，卤虫幼体中14个差异表达的蛋白点。利用LC-ESI-MS/MS技术鉴定了其中的7个蛋白，其中3个蛋白上调表达，分别是热休克蛋白70（7.5倍）, 肌动蛋白（2.3倍）和伴侣分子亚基1（3.0倍）。3个蛋白下调表达，分别是：精氨酸激酶（2.8倍）, 延伸因子2 (2.0倍） 和富含甘氨酸蛋白(2.0倍）。硫酸铜刺激后特异表达的一个蛋白被鉴定为过氧化物还原酶(Peroxiredoxin，Prx)。根据质谱检测提供的蛋白肽段信息和其他生物过氧化物还原酶保守氨基酸序列设计简并引物，结合RACE技术，从中华卤虫幼体中克隆到了过氧化物还原酶基因，该基因的cDNA全长为756个碱基，其中开放阅读框为594个碱基，编码198个氨基酸，其蛋白理论分子量为22.0 kDa，理论等电点为6.98。多序列比对结果显示中华卤虫Prx基因的推导氨基酸序列与美国卤虫和中国对虾的同源性高达98%和94%。实时荧光定量PCR结果显示，硫酸铜刺激后，该基因在卤虫无节幼体中的转录水平明显升高，在24h达到正常水平的3.0倍。

Life history cycles of flatfish species in the Bohai Sea, China

This paper provides basic information on the general ecology and life history cycles of various flatfish species in the Bohai Sea, China. The species studied are Paralichthys olivaceus (Temminck & Schlegel), Cleisthenes herzensteini (Schmidt), Eopsetta grigorjewi (Herzenstein), Verasper variegatus (Temminck & Schlegel), Pleuronichthys cornutus (Temminck & Schlegel), Pseudopleuronectes yokohamae (Gunther), Pseudopleuronectes herzensteini (Jordan & Snyder), Kareius bicoloratus (Basilewsky), Zebrias zebra (Bloch), Cynoglossus semilaevis Gunther, Cynoglossus abbreviatus (Gray) and Cynoglossus joyneri Gunther. Information on reproduction, eggs and larval distribution, growth and adult abundance is presented. Based on the biology and ecology of these flatfish, artificial enhancement of the commercial species in the Bohai Sea is discussed.

Antioxidant activity of different sulfate content derivatives of polysaccharide extracted from Ulva pertusa (Chlorophyta) in vitro

Polysaccharide extracted from Ulva pertusa (Chlorophyta) is a group of sulfated heteropolysaccharide; for simplicity, the sulfated polysaccharide is referred to as ulvan in this paper. In this study, different sulfate content ulvans were prepared with sulfur trioxide/N,N-diinethylformamide (SO3-DMF) in formamide, and their antioxidant activities were investigated including scavenging activity of superoxide and hydroxyl radicals, reducing Power and metal chelating ability. As expected, we obtained several satisfying results, as follows: firstly, high sulfate content ulvans had more effective scavenging activity on hydroxyl radical than natural ulvan. Secondly, comparing with natural ulvan, high sulfate content ulvans exhibited stronger reducing power. Thirdly, HU4 (sulfate content, 30.8%) and HU5 (sulfate content, 32.8%) showed more pronounce chelating ability on ferrous ion at high concentration than other samples. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.

采用垂穗披碱草恢复青藏铁路取土场植被的试验研究

为恢复青藏铁路取土场植被,试验研究垂穗披碱草在青藏铁路取土场植被恢复中的应用。试验结果表明,垂穗披碱草具有较好的抗寒冷、抗干旱及耐盐碱等特性,在取土场的自然出苗率可达60%,越冬成活率和第2年植物群落盖度均达50%以上,群落地上生物量和地下生物量也分别达到（195.74±41.78）g•m~(-2),（438.56±160.33）g•m~(-2)。在种子萌发和植物越冬、植物个体生长发育以及人工植物群落特征等方面,垂穗披碱草在青藏铁路取土场表现出较好的适应性。采用高原乡土植物垂穗披碱草以及相应的植被恢复技术措施,实现青藏铁路取土场次生裸地植被的快速恢复是可行而有效的。

陇西栽培蒙古黄芪酯酶同工酶数量分析

为了对陇西栽培蒙古黄芪的优质高产和良种选育提供一定依据，采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对该地区栽培蒙古黄芪种子酯酶同工酶进行了研究．结果表明：该地栽培蒙古黄芪是一个复杂的异质群体；种子酯酶同工酶电泳技术是检验蒙古黄芪种内变异的一种有效手段．

降水对青藏高原高寒灌丛冷季CO_2通量的影响

利用涡度相关系统CO_2通量观测数据,分析了青藏高原高寒灌丛生态系统冷季CO_2通量对降水事件的响应(以2003～2005年10月和11月份为例).结果表明:在降水事件过后的较短时间尺度内,青藏高原高寒灌丛生态系统CO_2通量会显著增加,而且增加量明显大于降水前平衡态下的正常波动值;一般经过较长的无降水时间段后的降水会显著促进土壤呼吸,从而使高寒灌丛生态系统CO_2通量明显增加.

青海湖地区围栏封育芨芨草种子形态及其萌发特性

以青海湖地区三角城种羊场的芨芨草(Achnatherum splendens)为观测对泉,研究围栏内外芨芨草的种子外观特征差异,及其在5,10,15,20,25,30℃时的萌发特性,以期评价围栏封育对种子形态和萌发特性的影响.结果表明,围栏内芨芨草种子无论是颗粒大小,还是饱满程度均好于围栏外;在温度低于5℃时,芨芨草种子将不萌发,随着温度的升高,发芽率不断上升,高于25℃发芽率有下降的趋势.低温或高温均不利于种子萌发,即低于20℃或超过25℃萌发均受到不同程度抑制,芨芨草种子萌发适宜温度为20～25℃.围栏内芨芨草种子的萌发状况好于围栏外.

江河源区牛、羊舍饲育肥经济与生态效益核算--以青海省玛沁县为例

阐明江河源区是我国生态环境保护的战略要地,开展牛、羊舍饲育肥缩短牲畜存栏时间,可减轻放牧压力,保护天然草场,提高牧户抗灾越冬能力,增加牧民收入.对该区牛、羊舍饲育肥经济与生态效益核算结果表明,牛、羊舍饲育肥经济收益分别为256.5元/头和34.25元/只,其年生态效益价值为15953.31元/头和5301.85元/只.

基于数据仓库的银行CRM系统的设计与实现

90年代Gartner Group提出客户关系管理（CRM）的概念，CRM可以说是针对一系列与客户有关的问题的处理方案。随着中国加入WTO，许多企业已经认识到了CRM的重要性，银行就是其中一个典型的例子。利用CRM的管理理论，建立适合银行的CRM系统是本文要研究的问题。 在CRM系统的实施过程中，涉及到几类必不可少的相关技术。数据仓库的实施是CRM系统实施的基石，为实现对客户资料的分析与知识的挖掘奠定了数据的组织基础。联机分析处理技术（OLAP）和数据挖掘技术的运用则是CRM系统有效实施的核心，合理的分析结果是CRM系统建设成功的关键。 按照辽宁省工商银行提出的需求，主要完成绩效考核管理、降低营销成本以及进行风险控制的目标。本文旨在通过将数据仓库技术、OLAP和数据挖掘技术的结合，构建一个完整的、高效的银行CRM系统，为银行的加快信息化建设提供帮助。 通过系统的设计与实现，本文完成的主要工作成果有： (1)根据可以获得的银行数据以及系统目标确立分析主题，以主题为依据组织数据，进行数据仓库的模型设计。 (2)设计并实现了银行数据仓库的ETL系统，改善了现有ETL工具的不足，实现了数据的自动抽取，使用配置文件增强了系统的灵活性，在系统恢复等几方面优化了系统的性能，完成了高效，准确，安全的ETL过程。 (3)结合具体分析目标，选择合适的统计学方法、OLAP技术和数据挖掘技术运用于系统中，设计并实现了系统的五个分析模型，分别为绩效考核管理模型，客户价值评价模型，客户分类模型，交叉销售模型以及信贷风险分析模型。并以实际数据为依据，得到了较好的分析结果。 (4)在信贷风险分析模型中，对现有决策树算法C45算法做出了改进。通过对测试属性选择的控制，在一定程度上提高了算法的准确性和预测性，并给出了模型结果的比较分析。 本文设计并实现了完整的基于数据仓库技术的银行CRM系统，较好的完成了系统的分析目标。本文的研究对商业银行充分利用客户资源，提高竞争力具有十分重要的意义。

液压系统在水下机器人的应用

本文结合在中型、大型水下机器人液压系统的设计、安装、调试的经验和体会,阐述液压系统在水下机器人应用的技术特点和技术措施,为水下液压系统设计提供借鉴.

生态建设中的喀斯特石漠化分级问题

提出石漠化土地景观＋成因的两级分类模型,根据景观现状进行第一级分类,按石漠化土地的成因类型进行第二级分类,采用＂景观＋成因＂对石漠化土地进行命名.景观分类是利用遥感影像特征解译石漠化强度和分布面积所必不可少的;石漠化土地成因类型与恢复治理模式密切相关,有必要在石漠化土地现状调查时考虑石漠化土地的成因类型.

云南会泽麒麟厂铅锌矿床八号矿体的发现

在大量综合分析研究和会泽铅锌矿长期实践的基础上，通过控矿构造等规律的深入研究，在成矿理论和找矿实践上取得新进展。在成矿理论认识上，提出主要的成矿构造体系、构造控矿型式及控矿构造模式及矿床成矿模式，明确指出麒麟厂矿床主矿体向SW向侧伏的规律。在找矿实践上，应用构造地球化学找矿方法，提出矿体定位靶位为1571中段44-62勘探线间深部。通过工程验证发现八号隐伏矿体。

湘中锡矿山式锑矿成矿地质条件分析

湘中锡矿山式锑矿彤成于晚白垩一古新世，空间上与岩脉关系密切．各锑矿床、 矿化点都伴有或附近发育有煌斑岩盟中一酸性岩脉群．在锑矿成矿同期地质事件中，还有周缘一些中一新生代红色盆地的形成及基性火l JI岩喷发，据之，提出湘中锡矿山式锑矿成矿与燕山晚期拉张构造一岩浆活化作用有关 锑矿床(点)基车七都产}ij于两组或两组以卜断裂的交汇点附近，3组断裂的交汇部位对应于最主要的锑矿床(点)。矿体具体受断裂交汇部位附近的次级短轴背斜轴部、倾伏背斜的倾伏端及其翼部被纵向陡倾角断裂构造所切穿的部位控制，是断裂导矿与背斜构造圈闭的体现。岩性组合控矿表现为易于硅化蚀变交代的砂质碳酸盐岩与隔挡层泥质岩所构成的岩性圈闭=根据包裹体均一温度和盐度澳l定成果．推算成矿压力为(200～300)×1旷Pa，成矿深度约为1km 。

会泽超大型铅锌矿田方解石Sm-Nd等时线年龄及其地质意义

云南会泽超大型铅锌矿田由麟麒厂和矿山厂两个独立的铅锌矿床组成，方解石是两个矿床矿石中唯一的脉石矿物。本文利用方解石Sm-Nd等时线测定了麒麟厂6号矿体和矿山厂1号矿体的成矿时代。结果表明，会泽超大型铅锌矿田两个矿床的成矿时代一致，麒麟厂矿床为226±15Ma，矿山厂矿床为225±38Ma，如果把来自两个矿体的所有13个样品的数据作为一条等时线计算，在等时线图上仍然表现良好的线性关系，等时线年龄为222±14Ma；结合地质、地球化学资料，认为两个矿床为同期同源成矿作用的产物。本文获得的会泽超大型铅锌矿床成矿时代与西南大面积峨眉山玄武岩成岩时代(250Ma左右)在误差范围内接近，为“峨眉山玄武岩浆活动与铅锌成矿存在成因联系”提供了年代学证据.