Histopathological evaluation of treatment with chondroitin sulphate for osteoarthritis induced by continuous immobilization in rabbits

The aim of this study was to evaluate histologically the action of chondroitin sulphate in osteoarthritis experimentally induced by continuous immobilization. Fourteen young female Norfolk rabbits aged 2.5-3 months at the beginning of the experiment were divided into two equitable groups submitted to immobilization of the right knee for a period of 12 weeks. The treated group received 1.0 ml/animal/s.c. of 12% chondroitin sulphate, once a week for 12 weeks, and the untreated group did not receive any treatment. Two additional animals were not submitted to knee immobilization (sham group). Microscopical examination of knee preparations stained with haematoxylin-eosin and Masson trichrome showed lesions of both joints in treated and untreated groups, with no significant difference between the scores obtained for the right and left knees. Examination of preparations stained with picrosirius red showed collagen fibre alignment and misalignment in the right and left knees of the animals of all groups, but statistic analysis could not be performed. It was not possible to differentiate the proteoglycan concentration between limbs or groups (treated and untreated) by safrtanin O or toluidine blue staining. It was possible to conclude that the chondroitin sulphate was not able to reduce the histological changes induced by this osteoarthritis experimental model.

Resposta tecidual a implantes de discos de poliuretana de mamona nas formas pré-moldada ou biomassa moldada

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

End-to-end arterial anastomosis with fibrin glue in larger arteries: histology, hydroxyproline concentration and tensile strength study in carotids of rabbits

A anastomose arterial término-terminal é demorada, requer tempo prolongado de oclusão vascular e esta associada a necrose focal, infiltração leucocitária e, conseqüentemente, à fibrose e calcificação da parede arterial. A cola de fibrina é uma alternativa para a anastomose microvascular e pode evitar estas alterações com menor aderência aos tecidos vizinhos e melhor coaptação das bordas arteriais. OBJETIVO: Comparar o processo cicatricial de anastomoses convencionais com anastomoses feitas com cola de fibrina em artérias maiores. MÉTODOS: em 22 coelhos, ambas carótidas foram seccionadas transversalmente e reconstruídas por meio de anastomose término-terminal com 4 pontos simples de reparo e cola de fibrina de um lado (G1), e com 8 pontos separados do outro lado (G2). Após 3 e 15 dias, os animais foram destinados aleatoriamente para estudo de força tênsil concentração de hidroxiprolina (8 animais) e avaliação histológica das anastomoses (3 animais). As lâminas histológicas foram coradas pelo HE Masson e Picrossirius polarização (PSP). RESULTADOS: Após 3 e 15 dias a força tênsil aumenta em ambos os grupos, de 280,0± 32,6g para 432,2± 131,2g no Grupo 1 e de 221,4± 72,4g para 452,2± 132,0g no Grupo 2; sem diferença estatística entre os grupos em cada período. A concentração de hidroxiprolina expressa como razão hidroxiprolina/proteína, variou de 0,0816± 0,0651 para 0,0622± 0,0184 no Grupo 1 e de 0,0734± 0,0577 para 0,0460± 0,0271 no Grupo 2; sem diferença estatística entre os períodos e grupos. Os estudos histológicos mostraram discreto aumento das reações de inflamação e reparação no Grupo 2. A técnica PSP mostrou predomínio do colágeno tipo I em relação do colágeno tipo II nas anastomoses de ambos os grupos, sem diferença expressiva entre esses grupos. CONCLUSÃO: A anastomose com a cola de fibrina foi menos lesiva para a parede arterial do que a anastomose convencional. Mesmo usando menos pontos, as características de força tênsil e de cicatrização da anastomose com cola de fibrina foram similares em ambos os grupos. Os tempos de realização das anastomoses foram significativamente maiores do que na anastomose convencional.

Carcinoma de pequenas células do esôfago: estudo clínico patológico de dois casos

RACIONAL: O carcinoma de pequenas células primário do esôfago é tumor raro, agressivo, morfologicamente indistinguível de seu correspondente no pulmão. OBJETIVO: Apresentar os aspectos clínico-patológicos de dois pacientes com carcinoma de pequenas células do esôfago. RELATO DE CASOS: Paciente 1: masculino, 56 anos com disfagia progressiva há seis meses e emagrecimento, com antecedentes de tabagismo e etilismo. A endoscopia mostrou lesão vegetante dos 30 aos 40 cm da arcada dentária superior e o exame anatomopatológico, diagnosticou neoplasia maligna indiferenciada de pequenas células com marcadores imunoistoquímicos positivos para cromogranina e sinaptofisina, caracterizando a linhagem neuroendócrina da neoplasia. Após dois ciclos de quimioterapia (cisplatina e etoposide) associada à radioterapia ele apresentou remissão da disfagia. Paciente 2: masculino, 55 anos, com queixas de pirose, disfagia, rouquidão há seis meses, com emagrecimento de 10 kg no período. A endoscopia mostrou lesão vegetante à 30 cm da arcada dentária superior, obstrutiva. O exame anatomopatológico revelou carcinoma de pequenas células, com os mesmos marcadores imunoistoquímicos positivos para linhagem neuroendócrina. Tomografia computadorizada mostrou metástases hepáticas. Frente ao estadio avançado da doença optou-se pela indicação de gastrostomia. O paciente desenvolveu pneumonia e faleceu dois meses após o diagnóstico. CONCLUSÃO: A evolução dos portadores de carcinoma de pequenas células do esôfago depende do estadiamento da doença e apesar da alta agressividade biológica, este tumor apresenta boa resposta à quimioterapia associada à radioterapia.

Distribuição da hipovitaminose A no Brasil nas últimas quatro décadas: ingestão alimentar, sinais clínicos e dados bioquímicos

O presente estudo teve como objetivo o registro e a apresentação de trabalhos realizados no Brasil nos últimos 40 anos, relacionados com a investigação sobre a deficiência de vitamina A. Esta deficiência tem sido diagnosticada por um ou mais dos seguintes critérios: ingestão deficiente de alimentos fontes de vitamina A, exame clínico, níveis séricos de retinol abaixo dos aceitos como normais, concentração hepática de retinol, teste de adaptação ao escuro e corante de Rosa Bengala. A deficiência foi diagnosticada em grupos populacionais de vários Estados e capitais brasileiras em cidades grandes e pequenas e em zonas rurais. A maioria dos trabalhos foi desenvolvida em grupos populacionais de baixa renda. Quanto às conseqüências clínicas, relataram-se achados de sinais oculares leves, como cegueira noturna, manchas de Bitot e xerose conjuntival, encontrados principalmente na Região Nordeste. Alguns autores observaram, em menor número de casos, lesões graves, como lesões corneanas e ceratomalácia. Trabalhos da última década indicaram associação entre a hipovitaminose A e o aumento da morbidade e mortalidade, principalmente em crianças pré-escolares.

Long-term high-fat diet-induced obesity decreases the cardiac leptin receptor without apparent lipotoxicity

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Imuno-histoquímica para o diagnóstico precoce de vitiligo

O vitiligo é uma doença de pele freqüente que acomete 1% da população e é caracterizada por máculas despigmentadas conseqüentes à perda progressiva e localizada dos melanócitos da epiderme. Na maioria dos pacientes, o diagnóstico é feito por exame clínico. A biópsia da pele é realizada quando há necessidade de diagnóstico diferencial com doenças hipocromiantes. O diagnóstico histopatológico de vitiligo é difícil nos preparados corados por hematoxilina e eosina (HE). Há poucos estudos sobre a melhoria da qualidade diagnóstica no vitiligo. OBJETIVO: Avaliar a utilidade dos marcadores imuno-histoquímicos proteína S-100, human melanoma black-45 (HMB-45) e Melan-A para o diagnóstico precoce em casos clinicamente suspeitos ou duvidosos de vitiligo. Material e métodos: Lâminas histológicas de biópsias de pele sã e lesada de 10 pacientes com suspeita clínica de vitiligo coradas pelos métodos de HE, proteína S-100, HMB-45 e Melan-A. Utilizou-se contracoloração com Giemsa como modificação técnica para diferenciar a melanina da imunomarcação. RESULTADOS: Seis casos, com manifestação clínica recente, apresentaram infiltrado linfocitário, do tipo dermatite de interface, na pele lesada na HE. As colorações por S-100, HMB-45 e Melan-A marcaram os melanócitos da camada basal da pele sã, e a proteína S-100 evidenciou as células de Langerhans. Na pele lesada, os melanócitos estavam ausentes ou diminuídos quando comparados com a pele normal. A proteína S-100 demonstrou maior número de células de Langerhans, o que é característico das lesões de vitiligo. CONCLUSÃO: A imuno-histoquímica pode ser utilizada como método auxiliar no diagnóstico dos casos duvidosos de vitiligo.

Análise imuno-histoquímica de proteínas relacionadas às respostas Th1, Th2 e Th17 na doença periodontal

Periodontal disease is an inflammatory condition of infectious nature characterized by destruction of protecting and supporting dental tissues. It happens as a response produced by the host when attacked by microorganisms. Several factors are involved in this process. Among them, cytokines are key regulatory molecules in this immune response, playing a role either protective and/or destructive in lesion progression. Thus, this study investigated the immunohistochemical expression of IFN- , GATA-3, IL-17, IL-23, IL-6 and TGF- in gingival tissues of humans, in an attempt to gain a better understanding of the participation of Th1, Th2 and Th17 immune responses in the development of periodontal disease processes. To this end, eighty-two samples of gingival tissues were divided into three groups: Group 1 = 15 (samples of healthy gum tissue as controls), Group 2 = 36 (samples with chronic gingivitis) and Group 3 = 31 (samples with chronic periodontitis). All cases were submitted to morphological analysis from sections stained with hematoxylin and eosin and then subjected to staining by immunohistochemistry using the streptavidin-biotin method. Results showed positive labeling for all proteins. Nonetheless, we observed a greater expression of Th1 cytokines and Th17 cells in group 3. We found statistically significant difference between TGF- expression and the clinical condition of the samples (p=0.02). We conclude that Th1 and Th17 responses may act synergistically in the destructive process of periodontal tissue, overlapping the Th2 response that was also present in these tissues

Efeitos da laserterapia na atividade biológica de células de carcinoma epidermóide de língua humano

The low level laser therapy (LLLT) has shown to be effective in promoting the proliferation of different cells in vitro, including keratinocytes, osteoblasts, endothelial cells and stem cells. It has been speculated that the biostimulatory effect of LLLT could cause undesirable enhancement of tumor growth in neoplastic diseases, since the malignant cells are more susceptible to proliferative stimuli. Within this context, this study evaluated the effect of LLLT on epidermoid carcinoma of the tongue cell line (SCC25) proliferation and invasion. Cultured cells were irradiated with an InGaAIP diode laser, 660nm, 30mW using two energy densities (0.5J/cm2 and 1.0J/cm2). Proliferative activity was assessed through trypan blue staining method and through cell cycle analysis using flow cytometry. The invasive potential was measured through cell invasion assay using matrigel. Cyclin D1, E-cadherin, -catenin and MMP-9 expressions were analyzed by immunofluorescence and flow cytometry and related to the investigated biological activities. Proliferation curve demonstrated that SCC25 irradiated with 1.0J/cm2 had the highest proliferative rate when compared to the control group and the group irradiated with 0.5J/cm2 (p<0.05). LLLT affected cell cycle distribution and energy density of 1.0 J/cm2 promoted a higher percentage of cells in S/G2/M phases, with statistically significant differences at 24h interval (p<0.05). LLLT, mainly with 1.0J/cm2, revealed significantly higher potential for invasion and influenced the expression of cyclin D1, E-cadherin, -catenin and MMP-9, promoting the malignant phenotype. In conclusion, our results indicate that LLLT has an important stimulatory effect on proliferation and invasion of SCC25 cells, likely due to altered expression of proteins associated with these processes

Changes in apoptosis and Bcl-2 expression in human hyperglycemic, term placental trophoblast

Apoptosis and its associated regulatory mechanisms are physiological events crucial to the maintenance of placental homeostasis; imbalance of these processes, however, such as occurs under various pathological conditions, may compromise placenta function and, consequently, pregnancy success. Increased apoptosis occurs in the placentas of pregnant women with several developmental disabilities, while increased Bcl-2 expression is generally associated with pregnancy-associated tumors. Herein, we tested the hypothesis that apoptosis-associated disturbs might be involved in the placental physiopathology subjected to different maternal hyperglycemic conditions.Thus, in the present study we investigated and compared the incidence of apoptosis using TUNEL reaction and Bcl-2 expression, in term-placentas of normoglycemic, diabetic and daily hyperglycemic patients. Tissue samples were collected from 37 placentas, being 15 from healthy mothers with normally delivered healthy babies, and 22 from mothers with glucose disturbances. From these latter 22 patients, 10 showed maternal daily hyperglycemia and 12 were clinically diabetics. Both Bcl-2 expression and apoptotic DNA fragmentation were established and quantified in the trophoblasts of healthy mothers. Compared to these reference values, a higher apoptosis index and lower Bcl-2 expression were disclosed in the placentas of the diabetic women, while in the daily hyperglycemic group, values were intermediate between the diabetic and normoglycemic patients. The TUNEL/Bcl-2 index ratio in the placentas varied from 0.02 to 0.09 for pregnant normoglycemic and diabetic women, respectively, revealing a predominance of apoptosis in the diabetic group. Our findings suggest that hyperglycemia may be a key factor evoking apoptosis in the placental trophoblast, and therefore, is relevant to diabetic placenta function. (c) 2006 Elsevier B.V.. All rights reserved.

Evaluation of Cell Proliferation and Apoptosis in Placentas of Rats with Severe Diabetes

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Interleukin 18 messenger RNA and proIL-18 protein expression in chorioamniotic membranes from pregnant women with preterm prelabor rupture of membranes

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Vascular endothelial growth factor (VEGF) and VEGF-receptor expression in placenta of hyperglycemic pregnant women

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Large nuclear vacuoles are indicative of abnormal chromatin packaging in human spermatozoa

The aim of this investigation was to determine the presence of abnormal sperm chromatin packaging in spermatozoa with large nuclear vacuoles (LNV) selected via high magnification by analysing the pattern of chromomycin A3 (CMA3) staining. A prospective observational study was designed to analyse semen samples obtained from 66 men undergoing infertility diagnosis and treatment. The numbers of cells with normal (dull yellow staining of the sperm head/CMA3-negative) and abnormal (bright yellow fluorescence of the sperm head/CMA3-positive) chromatin packaging were determined on slides with normal and LNV spermatozoa. The presence of bright yellow fluorescence (CMA3-positive) was significantly higher (p < 0.0001) in spermatozoa with LNV than in normal spermatozoa (719/1351; 53.2% vs. 337/835; 40.3%, respectively), reflecting a higher percentage of abnormal chromatin packaging in spermatozoa with large LNV. Our data support the hypothesis that the presence of LNV reflects the presence of abnormal chromatin packaging, which may facilitate sperm DNA damage. As sperm nuclear vacuoles are evaluated more precisely at high magnifications using motile sperm organelle morphology examination (MSOME), the present results support the use of high-magnification sperm selection for intracytoplasmic sperm injection (ICSI).

Histopathological and immunohistochemical (cytokeratins AE1/AE3) study of the parametrium of patients with early stage cervical cancer

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)