Aplicación del sistema de recombinación específica de secuencia β-six al estudio de la regulación de la expresión génica en células eucariotas y modelos animales

Las recombinasas específicas de secuencia son herramientas muy valiosas en la generación de modificaciones génicas condicionales. Estos sistemas permiten controlar la recombinación de forma específica de tejido, temporalmente, o ambas, y sortean diversas limitaciones de los sistemas de knockout (KO) convencionales, como la letalidad embrionaria o la generación de mecanismos compensatorios. Actualmente los sistemas Cre/loxP y Flp/FRT son los más empleados tanto en modelos animales como vegetales. La necesidad de realizar modificaciones más complejas en un mismo organismo hace que sea primordial caracterizar otras recombinasas que complementen a las existentes. La b recombinasa (b-rec) es originaria del plásmido pSM19035 de Streptococcus pyogenes. A diferencia de Cre y Flp, que en ausencia de factores adicionales catalizan la integración en un nuevo sustrato, la b-rec necesita un sustrato superenrollado y un cofactor de la reacción, una proteína asociada a la cromatina (como la procariota Hbsu o la eucariota HMG1). Se ha demostrado que la b-rec cataliza de forma específicamente intramolecular (resolución o inversión) la recombinación en células eucariotas, tanto de sustratos episomales como integrados en la cromatina, lo que indica que el entorno eucariota es capaz de proveer del cofactor y del superenrollamiento necesarios para que la b-rec realice su función. En este trabajo hemos determinado que la tasa de recombinación mediada por la b-rec no se ve afectada en absoluto por la deficiencia en el cofactor HMG1, alcanzando el mismo valor de recombinación en MEF KO en HMG1 que en wt. Este y otros datos confirman que en el entorno eucariota hay otras proteínas accesorias que pueden actuar de cofactores y sugiere que estas reacciones pueden ocurrir en la mayor parte de tejidos y tipos celulares. Para estudiar detalladamente el potencial de la b-rec en eucariotas desarrollamos un sistema de RAGE (activación génica mediada por recombinación) dependiente de la actividad b-rec; este sistema ha resultado funcional tanto en sustratos episomales como en sustratos integrados en la cromatina. También hemos generado un vector retroviral que porta la proteína de fusión b-Egfp, permitiendo de forma rápida y eficiente la integración y expresión funcional de nuestra proteína...

Nuevos modelos animales para el estudio de la infección por "Neospora caninum" durante la gestación

Neospora caninum es un parásito intracelular apicomplejo causante de la neosporosis, una enfermedad considerada como una de las principales causas de aborto en el ganado bovino. Esta parasitosis origina cuantiosas pérdidas económicas a nivel mundial, presentando una amplia distribución y una elevada prevalencia en el ganado bovino en la mayoría de países donde se ha estudiado. Actualmente, la inmunoprofilaxis se considera como la medida más importante para el control de la enfermedad, aunque, desafortunadamente, no existe una vacuna eficaz disponible. La única vacuna comercializada hasta el momento (Neoguard) ha sido retirada del mercado hace años debido a la baja eficacia mostrada. Por tanto, el esfuerzo de muchos grupos de investigación se centra hoy en día en el desarrollo de nuevas vacunas y fármacos eficaces y seguros frente a la neosporosis bovina. Con este fin, los modelos animales, además de ser de gran utilidad para estudiar la relación parásito-hospedador, la respuesta inmunitaria o la patogenia, son herramientas esenciales para realizar una evaluación adecuada de la eficacia y seguridad de vacunas y fármacos. Sin embargo, no existe un modelo normalizado, ya que aquellos descritos en la literatura se han llevado a cabo bajo condiciones experimentales muy variables. Estas diferencias incluyen, entre otras, la raza o estirpe de los animales empleados, el aislado de N. caninum, la manipulación del parásito para la inoculación, la vía de administración y la dosis utilizada en el ensayo. Además, en el caso de los modelos gestantes, el momento de la gestación en el cual se infecta a los animales supone una importante variable adicional. Por lo tanto, es necesario el desarrollo de modelos animales consensuados entre los diferentes laboratorios de investigación que permitan comparar y validar los resultados obtenidos en cada uno de ellos...

Efectos de la terapia asistida con animales en dominios cognitivos en pacientes con esquizofrenia

Esta investigación tiene como objetivo determinar la efectividad de incorporar un programa de terapia asistida con animales (TAA) al tratamiento farmacológico y programa individualizado de rehabilitación psicosociolaboral en pacientes con esquizofrenia que acuden a recursos de atención social de la red de atención pública de la Comunidad de Madrid. Hay dos momentos, un primer estudio en el que la investigación se centra en evaluar la mejora de dominios clínicos, psicosociales y cognitivos y un segundo estudio en el que la evaluación se centra en comprobar la mejora en dominios cognitivos utilizando una prueba específica de evaluación de procesos cognitivos en pacientes con esquizofrenia (MATRICS). Se plantean dos hipótesis en la medida en que se han realizado dos estudios. En un primer estudio se plantea que los cambios en las puntuaciones de variables clínicas, psicosociales y cognitivas del grupo con TAA serán mayores y significativas entre evaluaciones pre y post y frente a las del grupo sin TAA. El segundo estudio se centra, casi exclusivamente, en que la mejora de los dominios cognitivos del grupo con TAA será mayor y significativa entre evaluaciones pre y post y frente a las del grupo sin TAA...

Aspectos ecogenéticos y legislativos aplicados a la transgénesis de animales y alimentos

Bioethics ecology suggests the birth of a mentality which proposes, among other things: a human certain asceticism in relation to the environment around us, based on moderation; brutal renounce consumerism that is converted into primary need so most of the time is just superfluous. Social and economic developments affecting the existing globalization process in all areas of our existence. Ignorance conditions the quality of our relationship with the people and the environment. Parallel to this, the concept of social justice is not out of the problem of the environment. At present the environmental field has been filled by qualified professionals, resulting in a coprofesionalism, and an openness to the metadiscipline or shares from trades, knowledge and non-formal learning, which should make a concerted effort to be familiar with the delicate aimed at balancing the instability that is the Middle multidisciplinary environment and seem to be witnessing a passive object of global change. It is known as transgenesis process of transferring genes into an organism. Transgenesis is currently used to make transgenic plants and animals. Several methods of transgenesis as using gene guns or the use of virus or bacteria as vectors to transfer genes.

A Mechanical Analysis of Suspensory Locomotion in Primates and Other Mammals

For primates, and other arboreal mammals, adopting suspensory locomotion represents one of the strategies an animal can use to prevent toppling off a thin support during arboreal movement and foraging. While numerous studies have reported the incidence of suspensory locomotion in a broad phylogenetic sample of mammals, little research has explored what mechanical transitions must occur in order for an animal to successfully adopt suspensory locomotion. Additionally, many primate species are capable of adopting a highly specialized form of suspensory locomotion referred to as arm-swinging, but few scenarios have been posited to explain how arm-swinging initially evolved. This study takes a comparative experimental approach to explore the mechanics of below branch quadrupedal locomotion in primates and other mammals to determine whether above and below branch quadrupedal locomotion represent neuromuscular mirrors of each other, and whether the patterns below branch quadrupedal locomotion are similar across taxa. Also, this study explores whether the nature of the flexible coupling between the forelimb and hindlimb observed in primates is a uniquely primate feature, and investigates the possibility that this mechanism could be responsible for the evolution of arm-swinging.

To address these research goals, kinetic, kinematic, and spatiotemporal gait variables were collected from five species of primate (Cebus capucinus, Daubentonia madagascariensis, Lemur catta, Propithecus coquereli, and Varecia variegata) walking quadrupedally above and below branches. Data from these primate species were compared to data collected from three species of non-primate mammals (Choloepus didactylus, Pteropus vampyrus, and Desmodus rotundus) and to three species of arm-swinging primate (Hylobates moloch, Ateles fusciceps, and Pygathrix nemaeus) to determine how varying forms of suspensory locomotion relate to each other and across taxa.

From the data collected in this study it is evident the specialized gait characteristics present during above branch quadrupedal locomotion in primates are not observed when walking below branches. Instead, gait mechanics closely replicate the characteristic walking patterns of non-primate mammals, with the exception that primates demonstrate an altered limb loading pattern during below branch quadrupedal locomotion, in which the forelimb becomes the primary propulsive and weight-bearing limb; a pattern similar to what is observed during arm-swinging. It is likely that below branch quadrupedal locomotion represents a “mechanical release” from the challenges of moving on top of thin arboreal supports. Additionally, it is possible, that arm-swinging could have evolved from an anatomically-generalized arboreal primate that began to forage and locomote below branches. During these suspensory bouts, weight would have been shifted away from the hindlimbs towards forelimbs, and as the frequency of these boats increased the reliance of the forelimb as the sole form of weight support would have also increased. This form of functional decoupling may have released the hindlimbs from their weight-bearing role during suspensory locomotion, and eventually arm-swinging would have replaced below branch quadrupedal locomotion as the primary mode of suspensory locomotion observed in some primate species. This study provides the first experimental evidence supporting the hypothetical link between below branch quadrupedal locomotion and arm-swinging in primates.

Internal carotid arterial canal size and scaling in Euarchonta: Re-assessing implications for arterial patency and phylogenetic relationships in early fossil primates.

Primate species typically differ from other mammals in having bony canals that enclose the branches of the internal carotid artery (ICA) as they pass through the middle ear. The presence and relative size of these canals varies among major primate clades. As a result, differences in the anatomy of the canals for the promontorial and stapedial branches of the ICA have been cited as evidence of either haplorhine or strepsirrhine affinities among otherwise enigmatic early fossil euprimates. Here we use micro X-ray computed tomography to compile the largest quantitative dataset on ICA canal sizes. The data suggest greater variation of the ICA canals within some groups than has been previously appreciated. For example, Lepilemur and Avahi differ from most other lemuriforms in having a larger promontorial canal than stapedial canal. Furthermore, various lemurids are intraspecifically variable in relative canal size, with the promontorial canal being larger than the stapedial canal in some individuals but not others. In species where the promontorial artery supplies the brain with blood, the size of the promontorial canal is significantly correlated with endocranial volume (ECV). Among species with alternate routes of encephalic blood supply, the promontorial canal is highly reduced relative to ECV, and correlated with both ECV and cranium size. Ancestral state reconstructions incorporating data from fossils suggest that the last common ancestor of living primates had promontorial and stapedial canals that were similar to each other in size and large relative to ECV. We conclude that the plesiomorphic condition for crown primates is to have a patent promontorial artery supplying the brain and a patent stapedial artery for various non-encephalic structures. This inferred ancestral condition is exhibited by treeshrews and most early fossil euprimates, while extant primates exhibit reduction in one canal or another. The only early fossils deviating from this plesiomorphic condition are Adapis parisiensis with a reduced promontorial canal, and Rooneyia and Mahgarita with reduced stapedial canals.

Animales sueltos en los espacios públicos : una lectura para El torito de los Muchachos

En El Torito de los Muchachos aparece, desde el título mismo, un despliegue de figuras animales, las cuales se exponen sostenidas en el concepto de enemigo, de fuerte connotación para la situación política del contexto de publicación del periódico. Al mismo tiempo, presenta la singularidad de que el uso de animalizaciones, tradicionalmente orientadas al no letrado, son aplicadas desde una voz plebeya y federal al sujeto que representa a la civilización y la ciudad, el unitario. El periódico escenifica una arena pública en sus páginas teniendo presente un público particular, sostenido en lecturas orales. En un marco de fusiones e intercambios entre la literatura y la prensa periódica, este trabajo propone una lectura para este periódico gauchesco.

Animales sueltos en los espacios públicos : una lectura para El torito de los Muchachos

En El Torito de los Muchachos aparece, desde el título mismo, un despliegue de figuras animales, las cuales se exponen sostenidas en el concepto de enemigo, de fuerte connotación para la situación política del contexto de publicación del periódico. Al mismo tiempo, presenta la singularidad de que el uso de animalizaciones, tradicionalmente orientadas al no letrado, son aplicadas desde una voz plebeya y federal al sujeto que representa a la civilización y la ciudad, el unitario. El periódico escenifica una arena pública en sus páginas teniendo presente un público particular, sostenido en lecturas orales. En un marco de fusiones e intercambios entre la literatura y la prensa periódica, este trabajo propone una lectura para este periódico gauchesco.

Actuación del laboratorio clínico para la mejora del manejo del déficit de vitamina B12 en atención primaria

Programa de doctorado: Salud pública (Epidemiología, Planificación y Nutrición). La fecha de publicación es la fecha de lectura

Valutazione dell’efficacia di barriere chimiche contro l’umidita’ da risalita capillare nelle murature mediante modelli di laboratorio

La risalita capillare di umidità nelle murature storiche è la principale responsabile del degrado dei materiali. La metodologia ad oggi più utilizzata in tale campo è quella basata sull’iniezione di prodotti chimici in grado di formare barriere artificiali che blocchino il flusso ascendente dell’acqua, ma è ancora in fase di perfezionamento. Per potere svolgere tale perfezionamento, è utile disporre di una metodologia attendibile per la valutazione dell’esito dei trattamenti, ossia un metodo standardizzato che possa garantire una corretta misurazione del contenuto di umidità nelle murature pre e post iniezioni. Nella presente tesi, che ha lo scopo di valutare l’efficacia di alcuni prodotti per barriere chimiche nelle murature, si è utilizzato un metodo di laboratorio standardizzato proposto dai ricercatori del LASTM (DICAM), che permette di riprodurre in laboratorio il processo di risalita dell’umidità e, allo stesso tempo, permette di potere svolgere le misurazioni del contenuto d’acqua interno ai materiali con il metodo diretto. I trattamenti, svolti in collaborazione con la Azienda inglese “Safeguard”, produttrice di resine impermeabilizzanti, sono stati effettuati su vari modelli, costituiti di laterizi e malta, preventivamente sottoposti a differenti condizioni ambientali. Successivamente si è svolto un monitoraggio periodico per potere determinare sia l’efficacia dell’intervento che l’attendibilità del modello. Dopo avere studiato un sistema di controllo delle condizioni di laboratorio, si è ritenuto opportuno svolgere anche alcune prove di caratterizzazione dei materiali utilizzati nella costruzione dei vari modelli, per conoscerne appieno le caratteristiche e potere valutare con maggiore attendibilità i risultati dei trattamenti. Infine, per approfondire le dinamiche di diffusione dei formulati chimici all’interno dei materiali, si sono svolte prove su travetti di malta.

Utilización del extracto Arrabidaea chica (Mashashte) para el diagnóstico de laboratorio clínico de estructuras morfológicas de microorganismos en Microbiología Médica.

Objetivos del estudio: Encontrar propiedades de la Planta Natural Arrabidae chica para el diagnóstico de laboratorio de estructuras morfológicas de microorganismos en Microbiología Médica. Se procedió en varias fases, la primera fase: preparación de microorganismos, como: Parásitos, Hongos y Bacterias, entre ellos: 1. Protozoos Intestinales: Quistes y Trofozoitos de Amebas, Giardia lamblia, Entamoeba coli, Trichuris trichiura; Strongyloides stercoralis, 2. Micosis: M. canis, M. gypseum, 3. Bacterias: Eschericihia coli, S. aureus, S. Epidermidis.