Role of a GenoType MTBDRplus line probe assay in early detection of multidrug-resistant tuberculosis at a Brazilian reference center

Resistance to Mycobacterium tuberculosis is a reality worldwide, and its diagnosis continues to be difficult and time consuming. To face this challenge, the World Health Organization has recommended the use of rapid molecular tests. We evaluated the routine use (once a week) of a line probe assay (Genotype MTBDRplus) for early diagnosis of resistance and for assessment of the main related risk factors over 2 years. A total of 170 samples were tested: 15 (8.8%) were resistant, and multidrug resistance was detected in 10 (5.9%). The sensitivity profile took 3 weeks (2 weeks for culture and 1 week for rapid testing). Previous treatment for tuberculosis and the persistence of positive acid-fast smears after 4 months of supervised treatment were the major risk factors observed. The use of molecular tests enabled early diagnosis of drug-resistant bacilli and led to appropriate treatment of the disease. This information has the potential to interrupt the transmission chain of resistant M. tuberculosis.

B cells expressing IL-10 mRNA modulate memory T cells after DNA-Hsp65 immunization

In DNA vaccines, the gene of interest is cloned into a bacterial plasmid that is engineered to induce protein production for long periods in eukaryotic cells. Previous research has shown that the intramuscular immunization of BALB/c mice with a naked plasmid DNA fragment encoding the Mycobacterium leprae 65-kDa heat-shock protein (pcDNA3-Hsp65) induces protection against M. tuberculosis challenge. A key stage in the protective immune response after immunization is the generation of memory T cells. Previously, we have shown that B cells capture plasmid DNA-Hsp65 and thereby modulate the formation of CD8+ memory T cells after M. tuberculosis challenge in mice. Therefore, clarifying how B cells act as part of the protective immune response after DNA immunization is important for the development of more-effective vaccines. The aim of this study was to investigate the mechanisms by which B cells modulate memory T cells after DNA-Hsp65 immunization. C57BL/6 and BKO mice were injected three times, at 15-day intervals, with 100 µg naked pcDNA-Hsp65 per mouse. Thirty days after immunization, the percentages of effector memory T (TEM) cells (CD4+ and CD8+/CD44high/CD62Llow) and memory CD8+ T cells (CD8+/CD44high/CD62Llow/CD127+) were measured with flow cytometry. Interferon γ, interleukin 12 (IL-12), and IL-10 mRNAs were also quantified in whole spleen cells and purified B cells (CD43−) with real-time qPCR. Our data suggest that a B-cell subpopulation expressing IL-10 downregulated proinflammatory cytokine expression in the spleen, increasing the survival of CD4+ TEM cells and CD8+ TEM/CD127+ cells.

Tuberculosis in renal transplant patients: The experience of a single center in Medellín-Colombia, 2005-2013

Introduction: Tuberculosis is a common opportunistic infection in renal transplant patients. Objective: To obtain a clinical and laboratory description of transplant patients diagnosed with tuberculosis and their response to treatment during a period ranging from 2005 to 2013 at the Pablo Tobón Uribe Hospital. Methods: Retrospective and descriptive study. Results: In 641 renal transplants, tuberculosis was confirmed in 12 cases. Of these, 25% had a history of acute rejection, and 50% had creatinine levels greater than 1.5 mg/dl prior to infection. The disease typically presented as pulmonary (50%) and disseminated (33.3%). The first phase of treatment consisted of 3 months of HZRE (isoniazid, pyrazinamide, rifampicin and ethambutol) in 75% of the cases and HZME (isoniazid, pyrazinamide, moxifloxacin and ethambutol) in 25% of the cases. During the second phase of the treatment, 75% of the cases received isoniazid and rifampicin, and 25% of the cases received isoniazid and ethambutol. The length of treatment varied between 6 and 18 months. In 41.7% of patients, hepatotoxicity was associated with the beginning of anti-tuberculosis therapy. During a year-long follow-up, renal function remained stable, and the mortality rate was 16.7%. Conclusion: Tuberculosis in the renal transplant population studied caused diverse nonspecific symptoms. Pulmonary and disseminated tuberculosis were the most frequent forms and required prolonged treatment. Antituberculosis medications had a high toxicity and mortality. This infection must be considered when patients present with a febrile syndrome of unknown origin, especially during the first year after renal transplant.

Hanseníase multibacilar em paciente transplantado renal: relato de caso

O Brasil é um país onde a hanseníase ainda é um problema de saúde pública, apresentando mais de 30.000 novos casos por ano nos últimos anos. Apesar do crescente número de transplante de órgãos sólidos realizados no país, sobretudo o transplante renal, não são frequentes os relatos dessa micobacteriose em pacientes imunossuprimidos pelas medicações póstransplante. Os autores relatam um caso de hanseníase multibacilar manifestada 12 anos depois do transplante renal, acompanhado desde o diagnóstico, durante a poliquimioterapia, tratamento e seguimento do eritema nodoso hansênico.

Sensibilidad de Mycrobacterium tuberculosis a estreptomicina e isoniacida determinada por cromatografía de líquidos de alta resolución y por dilusión y siembra en placa

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Química Analítica) UANL

Diferenciación de actinomicetos mediante el análisis de ácidos micólicos

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Microbiología Médica) UANL

Determinación de la frecuencia de mutaciones en los genes katG Y

Tesis (Maestria en Ciencias con Especialidad en Biología Molecular e Ingeniería Genética) UANL

Asociación del patrón y polimorfismos de CD11c, CD14 Y TLR4 con la susceptibilidad a desarrollar tuberculosis pulmonar

Tesis (Doctor en Ciencias con Orientación en Inmunología) U.A.N.L., 2006

Transmission dynamics and tuberculosis control among HIV/AIDS patients

Introduction: Les efforts globaux pour contrôler la tuberculose sont présentement restreints par la prévalence croissante du VIH/SIDA. Quoique les éclosions de la tuberculose multi résistante (TB-MDR) soient fréquemment rapportées parmi les populations atteintes du SIDA, le lien entre VIH/SIDA et le développement de résistance n’est pas clair. Objectifs: Cette recherche visait à : (1) développer une base de connaissances concernant les facteurs associés à des éclosions de la TB-MDR parmi les patients atteints du VIH/SIDA; (2) utiliser ce cadre de connaissances pour accroître des mesures préliminaires pour mieux contrôler la tuberculose pulmonaire chez les patients atteints du VIH/SIDA; et (3) afin d’améliorer l’application des ces mesures, affiner les techniques bactériologiques existantes pour Mycobacterium tuberculosis. Méthodologie: Quatre études ont été réalisées : (1) Une étude longitudinale pour identifier les facteurs associés avec une éclosion de la TB-MDR parmi les patients atteints du SIDA qui ont reçu le traitement directement supervisé de courte durée (DOTS) pour la tuberculose pulmonaire au Lima et au Pérou entre 1999 et 2005; (2) Une étude transversale pour décrire différentes étapes de l’histoire naturelle de la tuberculose, la prévalence et les facteurs associés avec la mycobactérie qu’on retrouve dans les selles des patients atteints du SIDA; (3) Un projet pilote pour développer des stratégies de dépistage pour la tuberculose pulmonaire parmi les patients hospitalisés atteints du SIDA, en utilisant l’essaie Microscopic Observation Drug Susceptibility (MODS); et (4) Une étude laboratoire pour identifier les meilleures concentrations critiques pour détecter les souches MDR de M. tuberculosis en utilisant l’essaie MODS. Résultats : Étude 1 démontre qu’une épidémie de TB-MDR parmi les patients atteints du SIDA qui ont reçu DOTS pour la tuberculose pulmonaire ait été causée par la superinfection du clone de M. tuberculosis plutôt que le développement de la résistance secondaire. Bien que ce clone ait été plus commun parmi la cohorte de patients atteints du SIDA, il n’avait aucune différence de risque pour superinfection entre les patients avec ou sans SIDA. Ces résultats suggèrent qu’un autre facteur, possiblement associé à la diarrhée, peu contribuer à la prévalence élevée de ce clone chez les patients atteints du SIDA. Étude 2 suggère que chez la plupart des patients atteints du SIDA il a été retrouvé une mycobactérie dans leurs selles alors qu’ils étaient en phase terminale au niveau de la tuberculose pulmonaire. Or, les patients atteints du SIDA ayant été hospitalisés pendant les deux dernières années pour une autre condition médicale sont moins à risque de se retrouver avec une mycobactérie dans leurs selles. Étude 3 confirme que la tuberculose pulmonaire a été commune à tous les patients hospitalisés atteints du SIDA, mais diagnostiquée incorrectement en utilisant les critères cliniques présentement recommandés pour la tuberculose. Or, l’essaie MODS a détecté pour la plupart de ces cas. De plus, MODS a été également efficace quand la méthode a été dirigée aux patients soupçonnés d’avoir la tuberculose, à cause de leurs symptômes. Étude 4 démontre les difficultés de détecter les souches de M. tuberculosis avec une faible résistance contre ethambutol et streptomycine en utilisant l’essai MODS avec les concentrations de drogue présentement recommandées pour un milieu de culture. Cependant, l’utilité diagnostique de MODS peut être améliorée ; modifier les concentrations critiques et utiliser deux plaques et non une, pour des tests réguliers. Conclusion: Nos études soulèvent la nécessité d’améliorer le diagnostic et le traitement de la tuberculose parmi les patients atteints du SIDA, en particulier ceux qui vivent dans des régions avec moins de ressources. Par ailleurs, nos résultats font ressortir les effets indirects que les soins de santé ont sur les patients infectés par le VIH et qu’ils peuvent avoir sur le développement de la tuberculose.

Évaluation de la prévalence individuelle et de troupeau de quatre pathogènes d'importance dans les troupeaux laitiers biologiques du Québec

INTRODUCTION La production biologique contribue de façon significative aux défis du développement durable. Les infections à Mycobacterium avium sous-espèce paratuberculosis (MAP), Neospora caninum (NC), au virus de la diarrhée virale bovine (BVD) et au virus de la rhinotrachéite infectieuse bovine (IBR) sont bien reconnues pour affecter de manière significative la production dans les élevages laitiers. Il n’existe toutefois aucune donnée sur l’importance de ces pathogènes dans les troupeaux biologiques. HYPOTHESE Ces quatre pathogènes sont présents dans les troupeaux laitiers biologiques, mais leur prévalence est moindre par rapport à l’élevage conventionnel. OBJECTIFS Estimer les séroprévalences de NC, MAP, BVD, IBR dans les troupeaux laitiers biologiques québécois. MÉTHODOLOGIE Dans la province du Québec, 60 troupeaux laitiers biologiques ont été sélectionnés aléatoirement. Un échantillon sanguin a été prélevé sur 30 vaches adultes, pour l’évaluation de NC et MAP, et sur 5 animaux plus de 6 mois non vaccinés, pour l’évaluation de BVD et IBR. Une détection d’anticorps par ELISA, pour NC et MAP, et par séroneutralisation pour BVD et IBR a été réalisée sur les sérums obtenus. Un questionnaire a été rempli par chaque éleveur. RÉSULTATS La séroprévalence individuelle de NC et MAP, avec un intervalle de confiance de 95%, étaient de 4.1% (3.2%-5.2%) et 0.8% respectivement (0.0%-1.3%). La séroprévalence de troupeau de NC, MAP, BVD, IBR, si au moins un animal est positif dans un troupeau étaient de 50.8%, 20.3%, 37.3%, 31.0% respectivement. Ces séroprévalences étaient de 30.5%, 3.4%, 28.8% et 18.9%, respectivement, si au moins deux animaux sont positifs. La taille du troupeau a un effet significatif sur le statut de BVD (p=0.02) et il y a une bonne corrélation entre le statut BVD et IBR (Kappa-0.54). DISCUSSION/CONCLUSION La séroprévalence individuelle de NC, MAP, IBR semblent être moindre dans les troupeaux laitiers biologiques comparativement au conventionnel. Il ne semble pas y avoir de grandes différences entre la séroprévalence du BVD des troupeaux biologiques et celle des conventionnels.

Caractérisation épidémiologique de la maladie de Crohn au Québec

Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal.

Dynamic epigenetic changes in immune responses to infection in human dendritic cells

La méthylation de l'ADN est une marque épigénétique importante chez les mammifères. Malgré le fait que la méthylation de la cytosine en 5' (5mC) soit reconnue comme une modification épigénétique stable, il devient de plus en plus reconnu qu'elle soit un processus plus dynamique impliquant des voies de méthylation et de déméthylation actives. La dynamique de la méthylation de l'ADN est désormais bien caractérisée dans le développement et dans le fonctionnement cellulaire des mammifères. Très peu est cependant connu concernant les implications régulatrices dans les réponses immunitaires. Pour se faire, nous avons effectué des analyses du niveau de transcription des gènes ainsi que du profilage épigénétique de cellules dendritiques (DCs) humaines. Ceux-ci ont été faits avant et après infection par le pathogène Mycobacterium tuberculosis (MTB). Nos résultats fournissent le premier portrait génomique du remodelage épigénétique survenant dans les DCs en réponse à une infection bactérienne. Nous avons constaté que les changements dans la méthylation de l'ADN sont omniprésents, identifiant 3,926 régions différentiellement méthylées lors des infections par MTB (MTB-RDMs). Les MTB-RDMs montrent un chevauchement frappant avec les régions génomiques marquées par les histones associées avec des régions amplificatrices. De plus, nos analyses ont révélées que les MTB-RDMs sont activement liées par des facteurs de transcription associés à l'immunité avant même d'être infecté par MTB, suggérant ces domaines comme étant des éléments d'activation dans un état de dormance. Nos données suggèrent que les changements actifs dans la méthylation jouent un rôle essentiel pour contrôler la réponse cellulaire des DCs à l'infection bactérienne.

Ecophysiology of nontuberculous Mycobacteria in marine aquaculture ponds

The world demand for fish and fishery products is increasing steadily and it is generally accepted that it will not be possible to meet the heavy demand with resources exploited from capture fishery alone. Now aquaculture is well established and fastdeveloping industry in many countries and is a major focus sector for development. During recent decades, aquaculture has gained momentum, throughout the world especially in developing countries. According to Food and Agricultural Oganisation (FAO, 2000), global aquaculture production was 26.38 tones in 1996 have reached 32.9 million tonnes during 1999. Only marine aquaculture sector has contributed 13.1 million tonnes during 1999.India is a major fish producing country. About one half of lndia’s brackish water lands are currently being utilized for farming in order to reduce the gap between supply and demand for fish. Aquaculture has become a major source of livelihood for people and its role in integrated rural development, generation of employment and earning foreign exchange, thereby alleviating poverty is being greatly appreciated around the world.Among the infectious agents, bacteria are becoming the prime causal organisms for diseases in food fishes and other marine animals. Sindermann, (1970) reported that bacterial fish pathogen most commonly found among marine fishes is species of Pseudomonas, Vibrio and Mycobacterium. These can be categorized into primary pathogens; secondary invaders that may cause systemic disease in immunocompromised hosts; and normal marine flora which are not pathogenic but may occur on body surfaces or even within the tissues of the host. I-Iigh density of animals in hatchery tanks and ponds is conducive to the spread of pathogen and the aquatic environment with regular application of protein rich feed, is ideal for culturing bacteria. Bacteria, which are normally present in seawater or on the surface of fish, can invade and cause pathological effects in fishes, which are injured or subjected to other environmental stresses.Mycobacteria except parasites are known as nontuberculosis mycobacteria (NTM), atypical mycobacteria or mycobacteria other than tuberculosis(MO'l'l"). This group of mycobacteria includes opportunistic pathogens and saprophytes. Environmental mycobacteria are ubiquitous in distribution and the sources may include soil, water, warm-blooded as well as cold-blooded animals. Disease caused by environmental mycobacterial strains in susceptible humans (Goslee & Wolinsky, 1976; Grange, 1987), animals and fishes are increasingly attracting attention. Greatest importance of environmental mycobacteria is believed to be their role in immunological priming of humans and animals, thereby modifying their immune responses to subsequent exposure to pathogenic species.

Inmunoterapia en pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas versus terapia convencional. Revisión sistemática

RESUMEN Antecedentes y Justificación: El cáncer de pulmón es la principal causa de muerte relacionada con Cáncer en el mundo. El cáncer pulmonar de células no pequeñas (Non-Small-cell lung cancer NSCLC) representa el 85% de todos los cánceres de pulmón y en un 40% es diagnosticado tardíamente y con los tratamientos disponibles actualmente (cirugía, radioterapia y quimioterapia) presenta una supervivencia a 5 años entre el 10 y el 15%. En los últimos años han surgido nuevos tratamientos basados en la inmunoterapia que prometen mejorar la supervivencia de estos pacientes. Objetivo: Determinar la eficacia de la inmunoterapia en el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) con el fin de integrar la información disponible para su posterior uso en la clínica. Metodología: Se realizó búsqueda exhaustiva de la literatura disponible del 1 de Enero de 2003 al 31 de Diciembre de 2013. Se examinaron las siguientes bases de datos: Pubmed, Scielo, Medline, Lilacs, EMBASE, Bandolier, peDRO y Cochrane. Se utilizaron los términos MeSH de búsqueda: immunotherapy, NSCLC, clinical trials. Resultados: de 163 referencias identificadas en las bases de datos, 12 fueron seleccionadas para la revisión. Se identificaron 11 estrategias inmunoterapéuticas que fueron complementarias al uso de quimioterapia, radioterapia o ambas. No se encontró diferencia significativa entre la supervivencia global de los grupos de intervención y controles con excepción de 1 artículo. La mayoría de efectos secundarios fueron de leves a moderados y no hubo diferencias significativas entre los grupos. Discusión: no se evidenció un aumento significativo de la supervivencia global con la utilización de inmunoterapias, a excepción de la que emplea células asesinas inducidas por citocinas junto a células dendríticas. Sin embargo es necesario esperar resultados de estudios fase III en curso.