Confecção e ampliação do painel sorológico de HTLV

A verificação da qualidade dos kits de diagnóstico para detecção do HTLV-I/II é essencial, uma vez que são utilizados tanto em rotinas laboratoriais como em Serviços de Hemoterapia para aprovar a doação de sangue. Os conjuntos diagnósticos constituem uma ferramenta fundamental para diagnóstico por possuírem uma alta sensibilidade e especificidade, garantindo a confiabilidade dos resultados. Pela variedade de conjuntos diagnósticos encontrados no mercado, é necessário um rigoroso controle de qualidade para evitar possíveis erros analíticos como resultados falso-positivos, causando problemas emocionais e sociais no doador. O presente trabalho foi realizado no intuito de caracterizar unidades de plasma obtidas de Serviços de Hemoterapia de diversas regiões do país para compor e ampliar um painel de referência para HTLV que será utilizado na verificação do controle de qualidade dos kits de diagnóstico para o HTLV-I/II, aumentando a capacidade analítica do Laboratório de Sangue e Hemoderivados (LSH), localizado no Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS)/Fiocruz. Desta forma, foram analisadas no período de 2000 a 2013, 3.559 unidades de plasma. Das unidades que foram encaminhadas para o INCQS, 109 foram enviadas como reagentes para HTLV, sendo recaracterizadas pela triagem de marcadores para HIV-1/2, hepatite C, HBsAg, anti-HBc, Doença de Chagas e Sífilis. A princípio foram realizados dois testes para HTLV-I/II. As unidades de plasma com reatividade apenas para anti-HTLV-I/II foram testadas através da técnica de ELISA e nas amostras com resultado reativo, a confirmação foi realizada por Western Blot. Todos os testes realizados seguiram rigorosamente as técnicas descritas nos manuais de instrução de cada fabricante. Por fim, foram obtidas76 amostras com reatividade para anti-HTLV-I/II, possibilitando a ampliação do painel de referência já existente no LSH e consequentemente a capacidade analítica do laboratório.

The role of myeloid receptors on murine plasmacytoid dendritic cells in induction of type I interferon

This study tested the hypothesis that a set of predominantly myeloid restricted receptors (F4/80, CD36, Dectin-1, CD200 receptor and mannan binding lectins) and the broadly expressed CD200 played a role in a key function of plasmacytoid DC (pDC), virally induced type I interferon (IFN) production. The Dectin-1 ligands zymosan, glucan phosphate and the anti-Dectin-1 monoclonal antibody (mAb) 2A11 had no effect on influenza virus induced IFNα/β production by murine splenic pDC. However, mannan, a broad blocking reagent against mannose specific receptors, inhibited IFNα/β production by pDC in response to inactivated influenza virus. Moreover, viral glycoproteins (influenza virus haemagglutinin and HIV-1 gp120) stimulated IFNα/β production by splenocytes in a mannan-inhibitable manner, implicating the function of a lectin in glycoprotein induced IFN production. Lastly, the effect of CD200 on IFN induction was investigated. CD200 knock-out macrophages produced more IFNα than wild-type macrophages in response to polyI:C, a MyD88-independent stimulus, consistent with CD200's known inhibitory effect on myeloid cells. In contrast, blocking CD200 with an anti-CD200 mAb resulted in reduced IFNα production by pDC-containing splenocytes in response to CpG and influenza virus (MyD88-dependent stimuli). This suggests there could be a differential effect of CD200 on MyD88 dependent and independent IFN induction pathways in pDC and macrophages. This study supports the hypothesis that a mannan-inhibitable lectin and CD200 are involved in virally induced type I IFN induction.