Microwave decontamination of eyelid warming devices for the treatment of meibomian gland dysfunction

PURPOSE: The role of bacteria in meibomian gland dysfunction is unclear, yet contamination of compresses used as treatment may exacerbate this condition. This study therefore determined the effect of heating on bacteria on two forms of compress. METHODS: Cotton flannels and MGDRx EyeBags (eyebags) were inoculated by adding experimental inoculum (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa; one species for each set of 3 eyebags and flannels). One of each were then randomised in to 3 groups: no heating (control); therapeutic (47.4±0.7°C); or sanitisation (68±1.1°C). After treatment, bacteria cell numbers were calculated. The experiment was repeated in triplicate. RESULTS: There was a statistically significant difference between each treatment with the eyebag for S. aureus (control=7.15±0.11logC/ml, therapeutic heating=5.24±0.59logC/ml, sanitisation heating=3.48±1.43logC/ml; P<0.001) and S. pyogenes (7.36±0.13, 5.73±0.26, 4.75±0.54; P<0.001). P. aeruginosa also showed a significant reduction (P<0.001) from control (6.39±0.34) to therapeutic (0.33±0.26) and sanitisation (0.33±0.21), but the latter were similar (P=1.000). For the flannels, there was significant difference between each treatment for S. aureus (6.89±0.46, 3.96±1.76, 0.42±0.90; P<0.001). For S. pyogenes, there was a significant reduction (P<0.001) from control (7.51±0.10) to therapeutic (5.91±0.62) and sanitisation (5.18±0.8), but the latter were similar (P=0.07). For P. aeruginosa, there was a significant difference (P<0.001) from control (7.15±0.36) to sanitisation (5.83±0.44); but not to therapeutic (6.84±0.31) temperatures (P=0.07). CONCLUSIONS: Therapeutic heating produces a significant reduction in bacteria on the eyebags, but only sanitisation heating appears effective for flannels. However, patients should be advised to heat the eyebag to sanitisation temperatures on initial use.

Characterization of L-Serine Deaminase and its Potential Role in the Pathogenicity of Pseudomonas aeruginosa

All pathogens require high energetic influxes to counterattack the host immune system and without this energy bacterial infections are easily cleared. This study is an investigation into one highly bioenergetic pathway in Pseudomonas aeruginosa involving the amino acid L-serine and the enzyme L-serine deaminase (L-SD). P. aeruginosa is an opportunistic pathogen causing infections in patients with compromised immune systems as well as patients with cystic fibrosis. Recent evidence has linked L-SD directly to the pathogenicity of several organisms including but not limited to Campylobacter jejuni, Mycobacterium bovis, Streptococcus pyogenes, and Yersinia pestis. We hypothesized that P. aeruginosa L-SD is likely to be critical for its virulence. Genome sequence analysis revealed the presence of two L-SD homo logs encoded by sdaA and sdaB. We analyzed the ability of P. aeruginosa to utilize serine and the role of SdaA and SdaB in serine deamination by comparing mutant strains of sdaA (PAOsdaA) and sdaB (PAOsdaB) with their isogenic parent P. aeruginosa P AO 1. We demonstrated that P. aeruginosa is unable to use serine as a sole carbon source. However, serine utilization is enhanced in the presence of glycine and this glycine-dependent induction of L-SD activity requires the inducer serine. The amino acid leucine was shown to inhibit L-SD activity from both SdaA and SdaB and the net contribution to L-serine deamination by SdaA and SdaB was ascertained at 34% and 66 %, respectively. These results suggest that P. aeruginosa LSD is quite different from the characterized E. coli L-SD that is glycine-independent but leucine-dependent for activation. Growth mutants able to use serine as a sole carbon source were also isolated and in addition, suicide vectors were constructed which allow for selective mutation of the sdaA and sdaB genes on any P. aeruginosa strain of interest. Future studies with a double mutant will reveal the importance of these genes for pathogenicity.

Aplicación del sistema de recombinación específica de secuencia β-six al estudio de la regulación de la expresión génica en células eucariotas y modelos animales

Las recombinasas específicas de secuencia son herramientas muy valiosas en la generación de modificaciones génicas condicionales. Estos sistemas permiten controlar la recombinación de forma específica de tejido, temporalmente, o ambas, y sortean diversas limitaciones de los sistemas de knockout (KO) convencionales, como la letalidad embrionaria o la generación de mecanismos compensatorios. Actualmente los sistemas Cre/loxP y Flp/FRT son los más empleados tanto en modelos animales como vegetales. La necesidad de realizar modificaciones más complejas en un mismo organismo hace que sea primordial caracterizar otras recombinasas que complementen a las existentes. La b recombinasa (b-rec) es originaria del plásmido pSM19035 de Streptococcus pyogenes. A diferencia de Cre y Flp, que en ausencia de factores adicionales catalizan la integración en un nuevo sustrato, la b-rec necesita un sustrato superenrollado y un cofactor de la reacción, una proteína asociada a la cromatina (como la procariota Hbsu o la eucariota HMG1). Se ha demostrado que la b-rec cataliza de forma específicamente intramolecular (resolución o inversión) la recombinación en células eucariotas, tanto de sustratos episomales como integrados en la cromatina, lo que indica que el entorno eucariota es capaz de proveer del cofactor y del superenrollamiento necesarios para que la b-rec realice su función. En este trabajo hemos determinado que la tasa de recombinación mediada por la b-rec no se ve afectada en absoluto por la deficiencia en el cofactor HMG1, alcanzando el mismo valor de recombinación en MEF KO en HMG1 que en wt. Este y otros datos confirman que en el entorno eucariota hay otras proteínas accesorias que pueden actuar de cofactores y sugiere que estas reacciones pueden ocurrir en la mayor parte de tejidos y tipos celulares. Para estudiar detalladamente el potencial de la b-rec en eucariotas desarrollamos un sistema de RAGE (activación génica mediada por recombinación) dependiente de la actividad b-rec; este sistema ha resultado funcional tanto en sustratos episomales como en sustratos integrados en la cromatina. También hemos generado un vector retroviral que porta la proteína de fusión b-Egfp, permitiendo de forma rápida y eficiente la integración y expresión funcional de nuestra proteína...

An investigation of the molecular interactions between statins and bacterial pathogens, and their combined impact on the human immune system

Statins are a class of drug that inhibits cholesterol biosynthesis, and are used to treat patients with high serum cholesterol levels. They exert this function by competitively binding to the enzyme 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoenzymeA reductase (HMGR), which catalyses the formation of mevalonate, a rate-limiting step in cholesterol biosynthesis. In addition, statins have what are called “pleiotropic effects”, which include the reduction of inflammation, immunomodulation, and antimicrobial effects. Statins can also improve survival of patients with sepsis and pneumonia. Cystic fibrosis (CF) is the most common recessive inherited disease in the Caucasian population, which is characterised by factors including, but not limited to, excessive lung inflammation and increased susceptibility to infection. Therefore, the overall objective of this study was to examine the effects of statins on CFassociated bacterial pathogens and the host response. In this work, the prevalence of HMGR was examined in respiratory pathogens, and several CF-associated pathogens were found to possess homologues of this enzyme. HMGR homology was analysed in Staphylococcus aureus, Burkholderia cenocepacia and Streptococcus pneumoniae, and the HMGR of B. cenocepacia was found to have significant conservation to that of Pseudomonas mevalonii, which is the most widely-characterised bacterial HMGR. However, in silico analysis revealed that, unlike S. aureus and S. pneumoniae, B. cenocepacia did not possess homologues of other mevalonate pathway proteins, and that the HMGR of B. cenocepacia appeared to be involved in an alternative metabolic pathway. The effect of simvastatin was subsequently tested on the growth and virulence of S. aureus, B. cenocepacia and S. pneumoniae. Simvastatin inhibited the growth of all 3 species in a dose-dependent manner. In addition, statin treatment also attenuated biofilm formation of all 3 species, and reduced in vitro motility of S. aureus. Interestingly, simvastatin also increased the potency of the aminoglycoside antibiotic gentamicin against B. cenocepacia. The impact of statins was subsequently tested on the predominant CF-associated pathogen Pseudomonas aeruginosa, which does not possess a HMGR homologue. Mevastatin, lovastatin and simvastatin did not influence the growth of this species. However, sub-inhibitory statin concentrations reduced the swarming motility and biofilm formation of P. aeruginosa. The influence of statins was also examined on Type 3 toxin secretion, quorum sensing and chemotaxis, and no statin effect was observed on any of these phenotypes. Statins did not appear to have a characteristic effect on the P. aeruginosa transcriptome. However, a mutant library screen revealed that the effect of statins on P. aeruginosa biofilm was mediated through the PvrR regulator and the Cup fimbrial biosynthesis genes. Furthermore, proteomic analysis demonstrated that 6 proteins were reproducibly induced by simvastatin in the P. aeruginosa swarming cells. The effect of statins on the regulation of the host-P. aeruginosa immune response was also investigated. Statin treatment increased expression of the pro-inflammatory cytokines IL-8 and CCL20 in lung epithelial cells, but did not attenuate P. aeruginosa-mediated inflammatory gene induction. In fact, simvastatin and P. aeruginosa caused a synergistic effect on CCL20 expression. The expression of the transcriptional regulators KLF2 and KLF6 was also increased by statins and P. aeruginosa, with the induction of KLF6 by simvastatin proving to be a novel effect. Interestingly, both statins and P. aeruginosa were capable of inducing alternative splicing of KLF6. P. aeruginosa was found to induce KLF6 alternative splicing by way of the type 3 secreted toxin ExoS. In addition, a mechanistic role was elucidated for KLF6 in the lung, as it was determined that statin-mediated induction of this protein was responsible for the induction of the host response genes CCL20 and iNOS. Moreover, statin treatment caused a slight increase in infection-related cytotoxicity, and increased bacterial adhesion to cells. Taken together, these data demonstrate that statins can reduce the virulence of CFassociated bacterial pathogens and alter host response effectors. Furthermore, novel statin effectors were identified in both bacterial and host cells.

Bioengineering of nisin to enhance functionality against dairy pathogens

The bacteriocin class of antimicrobial peptides have emerged as a viable alternative to at least partially fill the void created by the end of the golden age of antibiotic discovery. Along with this potential use in a clinical setting, bacteriocins also play an important role as bio-preservatives in the food industry. This thesis focuses on a specific bacteriocin group, the lantibiotics (Lanthionine-containing antibiotics). Their numerous methods of appliance in a food setting and how their gene-encoded nature can be modified to improve on overall bioactivity and functionality are explored here. The use of a lantibiotic (lacticin 3147) producing starter culture to control the Crohn’s disease-linked pathogen Mycobacterium paratuberculosis was assessed in a raw milk cheese. Although lacticin 3147 production did not effectively control the pathogen, the study provided an impetus to employ a variety of PCR-based mutagenesis techniques with a view to the creation of enhanced lantibiotic derivatives. Through the use of these techniques, a number of enhanced derivatives were generated from the ‘hinge’ region of the nisin peptide. Furthermore, a derivative in which the three hinge amino acids were replaced with three alanines represents the first enhanced derivative of nisin to have been designed through a rational process. This derivative also formed the backbone for the creation of an active, trypsin resistant, variant. Through the employment of further mutagenesis methods a derivative was created with potential use as an oral anti-bacterial in the future. Finally a number of lead nisin derivatives were investigated to assess their anti- Streptococcus agalactiae ability, a mastitis associated pathogen. Also a system was developed to facilitate the large scale production of these candidates, or other nisin derivatives, from dairy substrates.

A influência dos hábitos parentais no aparecimento de cárie precoce da infância grave

Introdução: A doença cárie é uma das mais comum em crianças de idade pré-escolar, e desenvolve-se logo após a erupção dentária. Na literatura está descrito que para o aparecimento e desenvolvimento desta lesão é necessário a presença de um hospedeiro susceptível, microflora cariogénica, a dieta e o tempo. No entanto, a Cárie Precoce da Infância Grave não é uma lesão de progressão normal, e sim rompante e afecta crianças, até aos três anos de idade. Os hábitos que a família tem, em especial a mãe, são responsáveis pela transmissão de bactérias que podem influenciar o aparecimento de lesões de cáries nas crianças. Simples actos como o testar a temperatura da comida antes de dar à criança, limpar a chupeta com a boca e a partilha de utensílios podem aumentar o risco de Cárie Precoce da Infância. Através de uma revisão de literatura, pretende-se explorar a influência parental no aparecimento desta doença e saber se existe fundamentos para preocupação e assim efectuar uma mais adequada prevenção junto dos pais ou encarregados de educação. Metodologia: Nesta revisão narrativa de literatura fez-se a pesquisa nas bases de dados electrónicas PubMed e SciELO; recorreu-se aos repositórios bibliográficos das universidades; páginas institucionais e referências bibliográficas de artigos; livros de Medicina Dentária Preventiva e de Odontopediatria. Discussão: Os hábitos parentais como o provar ou testar a comida das crianças antes da alimentação e a partilha de talheres durante as refeições são considerados factores de risco para o aumento dos níveis de bactérias, como o Streptococcus mutans. Em relação aos hábitos como limpar a chupeta com a boca, o contacto físico intrafamiliar e dos pais beijarem os filhos há pouca evidência científica e é necessário fazer estudos mais conclusivos nestas áreas. Conclusão: Com esta revisão de literatura foi possível identificar quais os hábitos parentais que aumentam o risco dos filhos desenvolverem Cárie Precoce da Infância Grave.

Utilización de la solución hipertónica (agua de mar), para el tratamiento de la mastitis bovina en la Finca “Las Cañas”, del municipio de la Trinidad, departamento de Estelí 2015

El presente estudio se realizó con el objetivo de evaluar el efecto de la utilización de la solución hipertónica (agua de mar) en el tratamiento de la mastitis bovina en la finca “Las Cañas” del Municipio de la Trinidad, departamento de Estelí, ubica a una latitud norte de 14° 30.71", longitud oeste de 58° 51.79" a 517 msnm, temperatura media anual de 25°C, clima tropical seco con poca precipitación pluvial . Se trabajó con 18 hembras bovina con dos y tres meses de lactación, positivas a mastitis sub - clínicas, mediante la pru eba de Mastitis California Test (MCT) . Los tratamientos evaluados fueron Tratamiento 1 A gua de mar 10 ml; T ratamiento dos 2 químico Cloxacilina - Ampicilina ( Masticen Pomada ® ) 10 ml . Durante tod o el muestreo el cuarto más afectado fue el cuarto anterior izquierdo (CAI) con (35.25%). Según el examen bacteriológico realizado a las muestras enviadas al laborator io, los microorganismos identificados de la mastitis en la finca, fueron: Streptococcus spp, Staphilococcus aureus , y Pseudomonas spp, E . coli ). Los dos tratamientos presentaron buenos resultados en el control de la mastitis bovina, donde el tratamiento TI (agua de mar 10ml) alcanzó s u mayor efecto a la quinta semana con un (34.3%) con respecto a mastitis subclínica y con un (11.4%) Con respecto a mastitis clínica - crónica y el Tratamiento TII (Masticen Pomada 10ml) alcanzó su mayor ef ecto a la quinta semana con un (33.3%) con respecto a mastitis sub clínica y con un (8.3%) con respec to a mastitis clínica - crónica

Développement, validation et nouvelles applications d’un modèle d’analyse des modes normaux basé sur la séquence et la structure de protéines

Les protéines existent sous différents états fonctionnels régulés de façon précise par leur environnement afin de maintenir l‘homéostasie de la cellule et de l‘organisme vivant. La prévalence de ces états protéiques est dictée par leur énergie libre de Gibbs alors que la vitesse de transition entre ces états biologiquement pertinents est déterminée par le paysage d‘énergie libre. Ces paramètres sont particulièrement intéressants dans un contexte thérapeutique et biotechnologique, où leur perturbation par la modulation de la séquence protéique par des mutations affecte leur fonction. Bien que des nouvelles approches expérimentales permettent d‘étudier l‘effet de mutations en haut débit pour une protéine, ces méthodes sont laborieuses et ne couvrent qu‘une fraction de l‘ensemble des structures primaires d‘intérêt. L‘utilisation de modèles bio-informatiques permet de tester et générer in silico différentes hypothèses afin d‘orienter les approches expérimentales. Cependant, ces méthodes basées sur la structure se concentrent principalement sur la prédiction de l‘enthalpie d‘un état, alors que plusieurs évidences expérimentales ont démontré l‘importance de la contribution de l‘entropie. De plus, ces approches ignorent l‘importance de l‘espace conformationnel protéique dicté par le paysage énergétique cruciale à son fonctionnement. Une analyse des modes normaux peut être effectuée afin d‘explorer cet espace par l‘approximation que la protéine est dans une conformation d‘équilibre où chaque acide aminé est représenté par une masse régie par un potentiel harmonique. Les approches actuelles ignorent l‘identité des résidus et ne peuvent prédire l‘effet de mutations sur les propriétés dynamiques. Nous avons développé un nouveau modèle appelé ENCoM qui pallie à cette lacune en intégrant de l‘information physique et spécifique sur les contacts entre les atomes des chaînes latérales. Cet ajout permet une meilleure description de changements conformationnels d‘enzymes, la prédiction de l‘effet d‘une mutation allostérique dans la protéine DHFR et également la prédiction de l‘effet de mutations sur la stabilité protéique par une valeur entropique. Comparativement à des approches spécifiquement développées pour cette application, ENCoM est plus constant et prédit mieux l‘effet de mutations stabilisantes. Notre approche a également été en mesure de capturer la pression évolutive qui confère aux protéines d‘organismes thermophiles une thermorésistance accrue.

Conversão da lactose e síntese de galacto-oligossacarídeos: uma abordagem experimental e teórica

O presente trabalho avaliou, na etapa experimental, um processo simultâneo de catálise e fermentação láctica visando obter um iogurte com potenciais características nutracêuticas e, na sua etapa teórica, estabeleceu uma interlocução entre a vivência experimentalista e a teoria da cinética enzimática, no que se refere à conversão da lactose e à síntese de galactooligossacarídeos (GOS). Na abordagem experimental, para um substrato específico, avaliouse biocatálise conduzida simultaneamente à fermentação, defasando a adição da enzima em relação ao início do processo fermentativo. A fermentação foi realizada a partir de cultura láctica liofilizada comercial contendo dois micro-organismos probióticos, Bifidobacterium animalis e Lactobacillus acidophilus, associados aos micro-organismos característicos do iogurte, Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus. Foi utilizado um preparado enzimático contendo -galactosidases obtidas de duas origens distintas: Kluyveromyces lactis e Aspergillus niger. Foram avaliados os efeitos da concentração da enzima e do tempo de adição da enzima em um planejamento experimental 2 2 . As respostas foram às concentrações, ao final do processo, de lactose, de GOS, de glicose e de galactose e a hidrólise dos galactooligossacarídeos ao longo do tempo. No que se refere à abordagem teórica, o presente trabalho considerou modelos matemáticos de hidrólise de dissacarídeos e conversão da lactose, em que a inibição foi representada a partir do incremento da concentração dos produtos da reação. No que se refere à conversão da lactose e síntese de GOS, o presente trabalho buscou estabelecer um modelo matemático em que a inibição ocorreu por efeito do incremento das concentrações de glicose e de galactose, comparando-o com os modelos conhecidos na literatura. Verificou-se que o desempenho do modelo obtido no presente trabalho foi robusto em relação às premissas estabelecidas. Na comparação com resultados experimentais de conversão enzimática, o modelo mostrou-se capaz de minimizar o erro e de ajustar-se aos dados experimentais.

The biofilm inhibitor Carolacton inhibits planktonic growth of virulent pneumococci via a conserved target

New antibacterial compounds, preferentially exploiting novel cellular targets, are urgently needed to fight the increasing resistance of pathogens against conventional antibiotics. Here we demonstrate that Carolacton, a myxobacterial secondary metabolite previously shown to damage Streptococcus mutans biofilms, inhibits planktonic growth of Streptococcus pneumoniae TIGR4 and multidrug-resistant clinical isolates of serotype 19A at nanomolar concentrations. A Carolacton diastereomer is inactive in both streptococci, indicating a highly specific interaction with a conserved cellular target. S. mutans requires the eukaryotic-like serine/threonine protein kinase PknB and the cysteine metabolism regulator CysR for susceptibility to Carolacton, whereas their homologues are not needed in S. pneumoniae, suggesting a specific function for S. mutans biofilms only. A bactericidal effect of Carolacton was observed for S. pneumoniae TIGR4, with a reduction of cell numbers by 3 log units. The clinical pneumonia isolate Sp49 showed immediate growth arrest and cell lysis, suggesting a bacteriolytic effect of Carolacton. Carolacton treatment caused a reduction in membrane potential, but not membrane integrity, and transcriptome analysis revealed compensatory reactions of the cell. Our data show that Carolacton might have potential for treating pneumococcal infections.

Estudio comparativo para el tratamiento de la amigdalitis recidivante, entre el uso de penicilinas y amigdalectomizados, en el H.V.C.M. Cuenca Enero-Junio, 1994

La amigdalitis es una de las infecciones más comunes generalmente acusada por el estreptococo bata hemofílico del grupo A y con menor frecuencia debido a infecciones víricas. La amigdalitis recidivante es desde hace muchos años, la indicación más frecuente para practicar amigdalotomía aunque esta intervención tiene escasa complicaciones, su utilidad en la prevención de las recidivas no ha sido demostrada prospectivamente hasta estudios actuales en el que se compara la eficacia del tratamiento quirúrgico con una pauta antibiótica clásica la penicilina. Varios son los estudios en cuales se ha puesto en evidencia la incapacidad de la penicilina para acabar con el estado de portador del estreptococo beta hemolítico del grupo A. Entre las posibles explicaciones de esta aparente pérdida de eficacia de la penicilina, la más aceptada supone que la administración repetida del antibiótico selecciona flora productora de beta lactamasa. Los objetivos del tratamiento de la amigdalitis recidivante incluyen tanto la resolución de los signos clínicos y los síntomas de infección y la erradicación del agente causal de la cavidad oro faríngeo, por otro lado será importante evitar las complicaciones supurativas y no suporativas. La penicilina G es el agente antimicrobiano más efectivo para el tratamiento de la amigdalitis y debe emplearse almenos que el paciente sea alérgico lo que evita en lo posterior complicaciones

Evaluación fitoquímica y microbiológica de extractos naturales y su incorporación en nanopartículas poliméricas para su aplicación odontológica

La caries dental es la principal enfermedad oral que padece la población a nivel mundial. Su prevención se basa en educación sobre higiene oral, además del uso complementario de agentes antimicrobianos. Entre las alternativas de prevención una área prometedora incluye el empleo de extractos de plantas como agentes antimicrobianos incorporados en nanopartículas poliméricas (NP), las cuales, puedan funcionar como vehículos de liberación de extractos, mejorando el desempeño de estos agentes activos naturales. El objetivo de este trabajo fue obtener extractos de plantas de Ocimum basilicum (Albahaca) Calendula officinalis (Cálendula) y aceites esenciales de Syzigium aromaticum (Clavo) y Thymus vulgaris (Tomillo). Se realizó su caracterización fitoquímica y se evaluó su actividad antimicrobiana mediante dilución en tubo contra células plantónicas de Streptococcus gordonii, Streptococcus mutans y Candida albicans (ATCC), determinando la concentración mínima inhibitoria (CMI). El extracto con mayor actividad fue incorporado en NP mediante el método de nanoprecipitación (NP) y las nanopartículas se caracterizaron en base a su tamaño e índice de polidispersidad por espectroscopia de relación fotónica; el porcentaje y la eficiencia de encapsulación y mecanismo de liberación del eugenol contenido en el aceite encapsulado, se realizó mediante cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas (GSMC). En la presente investigación, se determinó que el aceite esencial de clavo mostró la mayor actividad antimicrobiana con respecto a los demás extractos evaluados. Por medio de GSMC se identificó al eugenol como el componente principal del aceite esencial obtenido por hidrodestilación. Se obtuvieron NP esféricas con tamaño alrededor de 157 nm, el porcentaje y la eficiencia de encapsulación de eugenol presente en el aceite encapsulado fue de 73.16 % y 47 % respectivamente; además de mostrar una liberación in vitro de eugenol del 50 % a las 24 horas. Finalmente, la CMI del aceite de clavo sin encapsular e incorporado en NP, correspondió a 125 y 75 μg/mL respectivamente. En base a los resultados obtenidos, es factible incorporar extractos vegetales en NP para su liberación sostenida, siendo una terapia antimicrobiana prometedora dentro del área odontológica.

Estudo do papel da proteína multifuncional APE1/Ref-1 sobre a resposta inflamatória na meningite bacteriana

Despite advances in antibiotic therapy, bacterial meningitis (BM) remains with high mortality and morbidity rates in worldwide. One important mechanism associated to sequels during disease is the intense inflammatory response which promotes an oxidative burst and release of reactive oxygen species, consequently leading to cell death. Activation of DNA repair enzymes during oxidative stress has been demonstrated in several neurological disorders. APE1/Ref-1 is a multifunctional protein involved in DNA repair and plays a redox function on transcription factors such as NFkB and AP-1.The aim of this study was assess the role of APE1/Ref-1 on inflammatory response and the possibility of its modulation to reduce the sequels of the disease. Firstly it was performed an assay to measure cytokine in cerebrospinal fluid of patients with BM due to Streptococcus pneumoniae and Neisseriae meningitides. Further, a cellular model of inflammation was used to observe the effect of the inhibition of the endonuclease and redox activity of APE1/Ref-1 on cytokine levels. Additionally, APE1/Ref-1 expression in cortex and hippocampus of rat with MB after vitamin B6 treatment was evaluated. Altogether, results showed a similar profile of cytokines in the cerebrospinal fluid of patients from both pathogens, although IFNy showed higher expression in patients with BM caused by S. pneumoniae. On the other hand, inhibitors of APE1/Ref-1 reduced cytokine levels, mainly TNF-α. Reduction of oxidative stress markers was also observed after introduction of inhibitors in the LPS-stimulated cell. In the animal model, BM increased the expression of the protein APE1/Ref-1, while vitamin B6 promoted reduction. Thereby, this data rise important factors to be considered in pathogenesis of BM, e.g., IFNy can be used as prognostic factor during corticosteroid therapy, APE1/Ref-1 can be an important target to modulate the level of inflammation and VIII oxidative stress, and vitamin B6 seems modulates several proteins related to cell death. So, this study highlights a new understanding on the role of APE1/Ref-1 on the inflammation and the oxidative stress during inflammation condition

Actividad bactericida, antifúngica y antiviral de nanopartículas de bismuto contra patógenos orales

De acuerdo con un anuncio publicado por el NIH (National Institute of Health, EUA), los biofilms o biocapas son un problema de salud pública muy importante en el área médica, ya que representan más del 80% de las infecciones microbianas en el cuerpo humano. Los tratamientos antimicrobianos estándar, típicamente fallan para erradicarlos. Por tanto, existe una creciente necesidad de desarrollo de nuevos fármacos con nuevas y mejores capacidades que puedan controlar a los biofilms. Hoy en día, la nanoterapeútica ofrece opciones innovadoras para controlar enfermedades infecciosas incluyendo la cavidad oral, contrarrestando el crecimiento de microorganismos patógenos tales como, Streptococcus mutans, Candida albicans y herpesvirus. En el área médica, algunos derivados del bismuto, como el subsalicilato, han sido empleados en el área médica para contrarrestar el vómito, náuseas, diarrea y dolor de estómago. En esta investigación determinamos la actividad antimicrobiana de nanopartículas de bismuto (BiNPs) contra patógenos orales. La actividad antibacteriana y antifúngica lo evaluamos por el ensayo de MTT y microscopía de fluorescencia. Demostramos que las BiNPs inhibieron el crecimiento de Streptococcus mutans con un 69% de efectividad así mismo obtuvimos un 85% de inhibición con Candida albicans, además fueron capaces de inhibir la formación del biofilm de ambas cepas. Por otra parte, determinamos la actividad antiviral en un modelo de rotavirus mediante el ensayo de inmunoperoxidasa presentando 90% de control de infección con el tratamiento de BiNPs. Finalmente, se evaluó la posible citotoxicidad de BiNPs en células epiteliales de riñón de mono mediante microscopía de fluorescencia y no mostró evidencias de citotoxicidad a 24 horas de exposición.

Utilidad de los criterios de predicción clínica y del test rápido antigénico para el manejo de la faringitis aguda en un servicio de urgencias

Objetivo: Validar los criterios de CENTOR modificados (CENTOR-m) y los tests rápidos de detección del antígeno de Estreptococo del Grupo A (SGA) en la faringitis aguda. Diseño: Estudio de validación de pruebas diagnósticas. Emplazamiento y participantes: Ciento un pacientes elegibles, que consultaron al departamento de urgencias de un hospital de tercer nivel con cuadro clínico compatible con faringitis aguda. Mediciones Principales: Se obtuvieron muestras de hisopados faríngeos para la realización del test rápido antigénico para SGA (FAMR) y para cultivo, respectivamente. Se calculó en cada caso los criterios de CENTOR-m. Resultados: La edad media de los pacientes incluidos en el estudio fue de 22,6 años (DE:13,8). El 48,5 % eran varones. El SGA fue el patógeno aislado en el 20,79 % de los casos. El CENTOR-m presentó una sensibilidad del 83,3 % (50,9 %-97,1 %), especificidad del 45,5 % (30,7 %-61,0 %) valor predictivo positivo (VPP) del 29,4 % (15,7 %-47,7 %) y valor predictivo negativo (VPN) del 90,9 % (69,4 %-98,4 %). El FAMR presento una sensibilidad del 81,5 % (61,3 %-93,0 %) especificidad del 98,6 % (91,4 %-99,9 %), VPP del 95,7 % (76,0 %-99,8 %) y VPN del 93,3 % (84,5 %-97,5 %). El 49,5 % de los pacientes recibieron antibióticos basándose en el juicio médico, lo que resultó en una proporción de sobreindicación de antimicrobianos del 62 %. Conclusiones: Los criterios de CENTOR-m demostraron adecuado valor pronóstico negativo y el FAMR buena sensibilidad, especificidad y valor pronóstico positivo para faringitis por SGA. La utilización de ambos métodos en la atención urgente podría optimizar el manejo de la patología y la adecuación antibiótica.