Hair cell recovery in mitotically blocked cultures of the bullfrog saccule

Hair cells in many nonmammalian vertebrates are regenerated by the mitotic division of supporting cell progenitors and the differentiation of the resulting progeny into new hair cells and supporting cells. Recent studies have shown that nonmitotic hair cell recovery after aminoglycoside-induced damage can also occur in the vestibular organs. Using hair cell and supporting cell immunocytochemical markers, we have used confocal and electron microscopy to examine the fate of damaged hair cells and the origin of immature hair cells after gentamicin treatment in mitotically blocked cultures of the bullfrog saccule. Extruding and fragmenting hair cells, which undergo apoptotic cell death, are replaced by scar formations. After losing their bundles, sublethally damaged hair cells remain in the sensory epithelium for prolonged periods, acquiring supporting cell-like morphology and immunoreactivity. These modes of damage appear to be mutually exclusive, implying that sublethally damaged hair cells repair their bundles. Transitional cells, coexpressing hair cell and supporting cell markers, are seen near scar formations created by the expansion of neighboring supporting cells. Most of these cells have morphology and immunoreactivity similar to that of sublethally damaged hair cells. Ultrastructural analysis also reveals that most immature hair cells had autophagic vacuoles, implying that they originated from damaged hair cells rather than supporting cells. Some transitional cells are supporting cells participating in scar formations. Supporting cells also decrease in number during hair cell recovery, supporting the conclusion that some supporting cells undergo phenotypic conversion into hair cells without an intervening mitotic event.

Catalytic activity of the mouse guanine nucleotide exchanger mSOS is activated by Fyn tyrosine protein kinase and the T-cell antigen receptor in T cells.

mSOS, a guanine nucleotide exchange factor, is a positive regulator of Ras. Fyn tyrosine protein kinase is a potential mediator in T-cell antigen receptor signal transduction in subsets of T cells. We investigated the functional and physical interaction between mSOS and Fyn in T-cell hybridoma cells. Stimulation of the T-cell antigen receptor induced the activation of guanine nucleotide exchange activity in mSOS immunoprecipitates. Overexpression of Fyn mutants with an activated kinase mutation and with a Src homology 2 deletion mutation resulted in a stimulation and suppression of the mSOS activity, respectively. The complex formations of Fyn-Shc, Shc-Grb2, and Grb2-mSOS were detected in the activated Fyn-transformed cells, whereas the SH2 deletion mutant of Fyn failed to form a complex with mSOS. Moreover, tyrosine phosphorylation of Shc was induced by the overexpression of the activated Fyn. These findings support the idea that Fyn activates the activity of mSOS bound to Grb2 through tyrosine phosphorylation of Shc. Unlike the current prevailing model, Fyn-induced activation of Ras might involve the stimulation of the catalytic guanine nucleotide exchange activity of mSOS.

Investigação do mecanismo cinético da reação de redução de oxigênio em solventes não aquosos

O aumento no consumo energético e a crescente preocupação ambiental frente à emissão de gases poluentes criam um apelo mundial favorável para pesquisas de novas tecnologias não poluentes de fontes de energia. Baterias recarregáveis de lítio-ar em solventes não aquosos possuem uma alta densidade de energia teórica (5200 Wh kg-1), o que as tornam promissoras para aplicação em dispositivos estacionários e em veículos elétricos. Entretanto, muitos problemas relacionados ao cátodo necessitam ser contornados para permitir a aplicação desta tecnologia, por exemplo, a baixa reversibilidade das reações, baixa potência e instabilidades dos materiais empregados nos eletrodos e dos solventes eletrolíticos. Assim, neste trabalho um modelo cinético foi empregado para os dados experimentais de espectroscopia de impedância eletroquímica, para a obtenção das constantes cinéticas das etapas elementares do mecanismo da reação de redução de oxigênio (RRO), o que permitiu investigar a influência de parâmetros como o tipo e tamanho de partícula do eletrocatalisador, o papel do solvente utilizado na RRO e compreender melhor as reações ocorridas no cátodo dessa bateria. A investigação inicial se deu com a utilização de sistemas menos complexos como uma folha de platina ou eletrodo de carbono vítreo como eletrodos de trabalho em 1,2-dimetoxietano (DME)/perclorato de lítio (LiClO4). A seguir, sistemas complexos com a presença de nanopartículas de carbono favoreceu o processo de adsorção das moléculas de oxigênio e aumentou ligeiramente (uma ordem de magnitude) a etapa de formação de superóxido de lítio (etapa determinante de reação) quando comparada com os eletrodos de platina e carbono vítreo, atribuída à presença dos grupos laterais mediando à transferência eletrônica para as moléculas de oxigênio. No entanto, foi observada uma rápida passivação da superfície eletrocatalítica através da formação de filmes finos de Li2O2 e Li2CO3 aumentando o sobrepotencial da bateria durante a carga (diferença de potencial entre a carga e descarga > 1 V). Adicionalmente, a incorporação das nanopartículas de platina (Ptnp), ao invés da folha de platina, resultou no aumento da constante cinética da etapa determinante da reação em duas ordens de magnitude, o qual pode ser atribuído a uma mudança das propriedades eletrônicas na banda d metálica em função do tamanho nanométrico das partículas, e estas modificações contribuíram para uma melhor eficiência energética quando comparado ao sistema sem a presença de eletrocatalisador. Entretanto, as Ptnp se mostraram não específicas para a RRO, catalisando as reações de degradação do solvente eletrolítico e diminuindo rapidamente a eficiência energética do dispositivo prático, devido ao acúmulo de material no eletrodo. O emprego de líquido iônico como solvente eletrolítico, ao invés de DME, promoveu uma maior estabilização do intermediário superóxido formado na primeira etapa de transferência eletrônica, devido à interação com os cátions do líquido iônico em solução, o qual resultou em um valor de constante cinética da formação do superóxido de três ordens de magnitude maior que o obtido com o mesmo eletrodo de carbono vítreo em DME, além de diminuir as reações de degradação do solvente. Estes fatores podem contribuir para uma maior potência e ciclabilidade da bateria de lítio-ar operando com líquidos iônicos.

Apoio como dispositivo: conexões, invenções e provocações à produção coletiva do cuidado e da gestão no município de São Bernardo do Campo

A transformação nos modos de organizar e produzir atenção em saúde exige a invenção de dispositivos com potência para proporcionar espaços coletivos de análise acerca da produção da gestão e do cuidado. O apoio é tecido por múltiplas relações, interesses, projetos e agenciamentos. Fabricado no encontro, é um intercessor que pode favorecer reflexões sobre a micropolítica do trabalho, sobre os encontros entre trabalhadores e usuários, entre trabalhadores e entre trabalhadores e gestão, agenciando possibilidades de análise do cotidiano e interferências sobre os modos de cuidar e de gerir. As interrogações sobre o cuidado podem abrir zonas de visibilidade aos processos de trabalho, discursos, práticas e relações de poder. A pesquisa procurou analisar o processo de fabricação do apoio na rede de atenção à saúde no município de São Bernardo do Campo e seus efeitos. O município organizou nove núcleos territoriais em saúde, cada qual com um grupo de até cinco apoiadores constituído por trabalhadores com formações variadas. Ademais, conta com uma dupla de facilitadores de educação permanente, ligados à gestão nos diferentes departamentos da Secretaria de Saúde e orientadores de educação permanente que tem a função de dar suporte aos apoiadores e facilitar os processos de educação permanente nos territórios. No desenho de São Bernardo, o apoio é uma ferramenta estratégica para a construção do cuidado em rede e para a análise das práticas de saúde. Há uma forte aposta da gestão na criação de espaços coletivos e dispositivos de conexão entre os departamentos, serviços, gestores e trabalhadores na intenção de suscitar transversalidade e combater a estrutura vertical de sua organização. O município vive uma intensa criação de dispositivos mobilizadores de encontros, propostos para a construção de redes e de gestão compartilhada do cuidado. Por meio de andanças com os apoiadores em variados territórios, conversas, afecções, registros em diário de campo, narrativas e documentos, tecemos uma cartografia: composição de cenários, de perspectivas e de analisadores, sentidos abertos, múltiplos e conectáveis. A abordagem cartográfica acompanha processos, persegue rastros e traçados, se movimenta entre linhas, sustenta problemáticas; nela, somos pesquisadores in-mundos, nos infectamos, nos misturamos, sempre implicados e em produção com os mundos pesquisados. Mesmo sendo uma aposta de governo, tensionamentos e conflitos acontecem no cotidiano, relacionados a diferentes prioridades, agendas, quebra de acordos, interrupção de projetos. As produções do apoio vêm fomentando conexões entre os serviços, contribuindo com o matriciamento de saúde mental e de outras especialidades na atenção básica e entre os trabalhadores da atenção especializada, fortalecendo redes, estimulando análises coletivas sobre o cuidado, criando estratégias e ferramentas, transformações em fluxos e na regulação. O apoio não é função somente do apoiador, pode ser agenciado por variados atores. Por fim, a auto-análise, quando acontece, potencializa o apoio como dispositivo, provisório, ativador de processos e de protagonismo coletivo.