Estudo Comparativo de gráaficos de probabilidade normal para Anáalise de experimentos fatoriais não replicados

Two-level factorial designs are widely used in industrial experimentation. However, many factors in such a design require a large number of runs to perform the experiment, and too many replications of the treatments may not be feasible, considering limitations of resources and of time, making it expensive. In these cases, unreplicated designs are used. But, with only one replicate, there is no internal estimate of experimental error to make judgments about the significance of the observed efects. One of the possible solutions for this problem is to use normal plots or half-normal plots of the efects. Many experimenters use the normal plot, while others prefer the half-normal plot and, often, for both cases, without justification. The controversy about the use of these two graphical techniques motivates this work, once there is no register of formal procedure or statistical test that indicates \which one is best". The choice between the two plots seems to be a subjective issue. The central objective of this master's thesis is, then, to perform an experimental comparative study of the normal plot and half-normal plot in the context of the analysis of the 2k unreplicated factorial experiments. This study involves the construction of simulated scenarios, in which the graphics performance to detect significant efects and to identify outliers is evaluated in order to verify the following questions: Can be a plot better than other? In which situations? What kind of information does a plot increase to the analysis of the experiment that might complement those provided by the other plot? What are the restrictions on the use of graphics? Herewith, this work intends to confront these two techniques; to examine them simultaneously in order to identify similarities, diferences or relationships that contribute to the construction of a theoretical reference to justify or to aid in the experimenter's decision about which of the two graphical techniques to use and the reason for this use. The simulation results show that the half-normal plot is better to assist in the judgement of the efects, while the normal plot is recommended to detect outliers in the data

Does toxoplasmosis cause DNA damage? An evaluation in isogenic mice under normal diet or dietary restriction

Toxoplasmosis is an anthropozoonotic widespread disease, caused by the coccidian protozoan parasite Toxoplasma gondii. Since there are no data regarding the genotoxicity of the parasite in vivo, this study was designed to evaluate the genotoxic potential of the toxoplasmosis on isogenic mice with normal diet or under dietary restriction and submitted to a treatment with sulfonamide (375 mug/kg per day). DNA damage was assessed in peripheral blood, liver and brain cells using the comet assay (tail moment). The results for leucocytes showed increases in the mean tail moment in mice under dietary restriction; in infected mice under normal diet; in infected, sulfonamide-treated mice under normal diet; in infected mice under dietary restriction and in infected sulfonamide-treated mice under dietary restriction. In liver and brain cells, no statistically significant difference was observed for the tail moment. These results indicated that dietary restriction and T. gondii were able to induce DNA damage in peripheral blood cells, as detected by the comet assay. (C) 2004 Elsevier B.V. All rights reserved.

Motile sperm organelle morphology examination (MSOME): intervariation study of normal sperm and sperm with large nuclear vacuoles

Background: Although the motile sperm organelle morphology examination (MSOME) was developed only as a selection criterion, its application as a method for classifying sperm morphology may represent an improvement in evaluation of semen quality, with potential clinical repercussions. The present study aimed to evaluate individual variations in the motile sperm organelle morphology examination (MSOME) analysis after a time interval.Methods: Two semen samples were obtained from 240 men from an unselected group of couples undergoing infertility investigation and treatment. Mean time interval between the two semen evaluations was 119 +/- 102 days. No clinical or surgical treatment was realized between the two observations. Spermatozoa were analyzed at greater than or equal to 8400 x magnification by inverted microscope equipped with DIC/Nomarski differential interference contrast optics. At least 200 motile spermatozoa per semen sample were evaluated and percentages of normal spermatozoa and spermatozoa with large nuclear vacuoles (LNV/one or more vacuoles occupying >50% of the sperm nuclear area) were determined. A spermatozoon was classified as morphologically normal when it exhibited a normal nucleus (smooth, symmetric and oval nucleus, width 3.28 +/- 0.20 mu m, length 4.75 +/- 0.20 mu m/absence of vacuoles occupying >4% of nuclear area) as well as acrosome, post-acrosomal lamina, neck and tail, besides not presenting cytoplasm around the head. One examiner, blinded to subject identity, performed the entire study.Results: Mean percentages of morphologically normal and LNV spermatozoa were identical in the two MSOME analyses (1.6 +/- 2.2% vs. 1.6 +/- 2.1% P = 0.83 and 25.2 +/- 19.2% vs. 26.1 +/- 19.0% P = 0.31, respectively). Regression analysis between the two samples revealed significant positive correlation for morphologically normal and for LNV spermatozoa (r = 0.57 95% CI: 0.47-0.65 P < 0.0001 and r = 0.50 95% CI: 0.38-0.58 P < 0.0001, respectively).Conclusions: The significant positive correlation and absence of differences between two sperm samples evaluated after a time interval with respect to normal morphology and LNV spermatozoa indicated that MSOME seems reliable (at least for these two specific sperm forms) for analyzing semen. The present result supports the future use of MSOME as a routine method for semen analysis.

Efficacy of hyaluronic acid binding assay in selecting motile spermatozoa with normal morphology at high magnification

Background: The present study aimed to evaluate the efficacy of the hyaluronic acid (HA) binding assay in the selection of motile spermatozoa with normal morphology at high magnification (8400x).Methods: A total of 16592 prepared spermatozoa were selected and classified into two groups: Group I, spermatozoa which presented their head attached to an HA substance (HA-bound sperm), and Group II, those spermatozoa that did not attach to the HA substance (HA-unbound sperm). HA-bound and HA-unbound spermatozoa were evaluated according to the following sperm forms: 1-Normal morphology: normal nucleus (smooth, symmetric and oval configuration, length: 4.75+/-2.8 mu m and width: 3.28+/-0.20 mu m, no extrusion or invagination and no vacuoles occupied more than 4% of the nuclear area) as well as acrosome, post-acrosomal lamina, neck, tail, besides not presenting a cytoplasmic droplet or cytoplasm around the head; 2-Abnormalities of nuclear form (a-Large/small; b-Wide/narrow; c-Regional disorder); 3-Abnormalities of nuclear chromatin content (a-Vacuoles: occupy >4% to 50% of the nuclear area and b-Large vacuoles: occupy >50% of the nuclear area) using a high magnification (8400x) microscopy system.Results: No significant differences were obtained with respect to sperm morphological forms and the groups HA-bound and HA-unbound. 1-Normal morphology: HA-bound 2.7% and HA-unbound 2.5% (P = 0.56). 2-Abnormalities of nuclear form: a-Large/small: HA-bound 1.6% vs. HA-unbound 1.6% (P = 0.63); b-Wide/narrow: HA-bound 3.1% vs. HA-unbound 2.7% (P = 0.13); c-Regional disorders: HA-bound 4.7% vs. HA-unbound 4.4% (P = 0.34). 3. Abnormalities of nuclear chromatin content: a-Vacuoles >4% to 50%: HA-bound 72.2% vs. HA-unbound 72.5% (P = 0.74); b-Large vacuoles: HA-bound 15.7% vs. HA-unbound 16.3% (P = 0.36).Conclusions: The findings suggest that HA binding assay has limited efficacy in selecting motile spermatozoa with normal morphology at high magnification.

Exposição de fibroblastos provenientes de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal ao tacrolimus (FK-506)

OBJETIVO: Avaliar a taxa de proliferação de fibroblastos provenientes de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal, quando expostos in vitro ao tacrolimus (FK 506). MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, controlado, avaliando-se 8 amostras de explantes de cápsula de Tenon de pterígios recidivados e 6 de cápsula de Tenon normal, obtidas na Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP. A cápsula de Tenon normal foi colhida da região temporal inferior, do mesmo portador de pterígio. As amostras foram cultivadas em meio específico e posteriormente expostas ao tacrolimus 1M (FK 506), em única exposição, com avaliação da taxa de proliferação celular 1, 5, 12 e 19 dias após a exposição. RESULTADOS: Avaliando-se a proliferação dos fibroblastos provenientes de cápsula de Tenon de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal, os fibroblastos expostos ao tacrolimus tiveram taxa de proliferação significativamente menor (p<0,05) do que quando não houve exposição a droga, quando a avaliação foi feita 1 dia após a exposição. Quando a avaliação foi feita 19 dias após a exposição, a taxa de proliferação foi maior nos grupos expostos a droga. CONCLUSÃO: Os fibroblastos provenientes da cápsula de Tenon de pterígios recidivados apresentaram taxa de proliferação significativamente menor um dia após a exposição ao tacrolimus. Novos estudos devem ser realizados para definir dose e tempo de exposição dos fibroblastos a droga, com o intuito de definir se o tacrolimus pode ser útil como tratamento coadjuvante do pterígio.

Exposição de fibroblastos da cápsula de Tenon normal de portadores de pterígio ao 5-fluorouracil e à mitomicina C

OBJETIVO: Avaliar a atividade proliferativa dos fibroblastos da cápsula de Tenon normal, proveniente de portadores de pterígios primários e recidivados. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, aleatório, avaliando-se fragmentos da cápsula de Tenon normal, removidos de 20 portadores de pterígios primários e 21, recidivados. A taxa de proliferação foi avaliada em fibroblastos de terceira passagem, quando as culturas foram expostas a agentes antimitóticos: mitomicina C e 5-fluorouracil. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística. RESULTADOS: Dentre os 41 espécimes cultivados, apenas 1 de pterígio primário e 2 de recidivado proliferaram. Quando expostos a mitomicina C e ao 5-fluorouracil não houve diferença estatisticamente significativa quanto a inibição de proliferação celular. CONCLUSÃO: Desta forma, in vitro, ambos os antimitóticos estudados têm a mesma eficácia na inibição da proliferação sobre os fibroblastos de cápsulas de Tenon normal.

Análise do cultivo de fibroblastos de pterígios primários e recidivados e da cápsula de Tenon normal

OBJETIVO: Avaliar a atividade proliferativa dos fibroblastos da cápsula de Tenon, provenientes de explantes de pterígios primários e recidivados e da conjuntiva normal. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, randomizado, avaliando-se 43 peças cirúrgicas, produto da exérese de 30 pterígios primários e 13 recidivados, além de fragmentos da cápsula de Tenon normal, obtida dos próprios portadores de pterígio. Foram avaliadas a taxa de proliferação, migração e confluência, analisadas segundo dados dos portadores como: idade, localização da lesão, tipo de lesão (tamanho, involutivo ou carnoso), primário ou recidivado. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística. RESULTADOS: Dentre os 30 pterígios primários cultivados, 70% migraram e proliferaram e 60% chegaram à confluência. A migração, proliferação e confluência iniciaram-se mais precocemente nas culturas de fibroblastos provenientes de pterígios em comparação àquelas provenientes da Tenon normal. Os pterígios recidivados apresentaram migração mais precoce que os primários. Não houve diferença estatisticamente significativa quanto ao início da migração, proliferação e confluência entre os pterígios carnosos ou involutivos, assim como entre os pterígios de graus I-II e os de graus III-IV. CONCLUSÃO: O cultivo celular de fibroblastos de pterígios é mais viável que o de Tenon normal. A migração, proliferação e confluência diferem em pterígios primários e recidivados. Pterígios carnosos e involutivos são semelhantes em cultura, assim como não existe diferença entre os pterígios segundo o tamanho da lesão.

Exposição de fibroblastos de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal à triancinolona

Purpose: To evaluate the proliferation rate of recurrent pterygium and normal Tenon's capsule fibroblasts after exposure to triamcinolone.Methods: Explants of recurrent pterygia and normal Tenon's capsule of the same carrier were cultured. The fibroblasts were cultured and subcultured until the third passage and subsequently exposed to triamcinolone. The cell proliferation rate was evaluated 3, 6, 12 and 18 days after the exposure.Results: Fibroblasts exposed to triamcinolone had significantly lower proliferation rate (P < 0.05) compared to those not exposed, when the evaluation was performed 3, 6 and 12 days later. In the 18th day after exposure, there was a return in the proliferation rate, with statistical significance, only in the pterigyum fibroblasts.Conclusion: Both the fibroblasts from normal Tenon's capsule as from recurrent pterygia showed significantly lower proliferation rate after exposure to triamcinolone. After 18 days from the exposition, pterygium fibroblasts recovered the proliferation. The results suggested the triamcinolone might be useful as adjuvant in pterygium treatment.

DNA damage in cytologically normal urothelial cells of patients with a history of urothelial cell carcinoma

In order to determine if patients with a history of previous urothelial cell carcinoma (UCC) but with current normal urinary cytology have DNA damage in urothelial cells, the single-cell gel electrophoresis (comet) assay was conducted with cells obtained by urinary bladder washings from 44 patients (28 with a history of previous UCC). Increased DNA damage was observed in cytologically normal urothelial cells of patients with a history of UCC when compared with referents with no similar history and after correcting the data for smoking status and age (P < 0.018). Increased DNA damage also correlated with the highest tumor grade, irrespective of time or course of the disease after clinical intervention (Kendall tau correlation, 0.37, P = 0.016). Moreover, aneuploidy, as assessed by DNA content ratio (DCR; 75th/25th percentile of total DNA fluorescence of 50 comets/patient) was unaltered by smoking status, but increased with UCC grade: 1.39 +/- 0.12 (median +/- 95% confidence interval; referents); 1.43 +/- 0.11 (Grade I UCC; P = 0.264, against referents); 1.49 +/- 0.16 (Grade II UCC; P = 0.057); 1.57 +/- 0.16 (Grade III UCC; P = 0.003). Micronucleated urothelial cells (MNC) were also scored on Giemsa-stained routine cytological smears and were found not to correlate with DNA damage or DCR. MNC frequencies were higher for patients with a history of UCC and/or smoking than referents with neither history, but there was no statistical difference between groups. Taken together, these results suggest that the normal-appearing urothelium of patients resected for UCC still harbor genetically unstable cells. (C) 2002 Wiley-Liss, Inc.

Matrix metalloproteinases 2 and 9 expression in canine normal prostate and with proliferative disorders

Este estudo teve como objetivo avaliar a expressão das metaloproteinases 2 (MMP-2) e 9 (MMP-9) em próstatas caninas normais e com desordens proliferativas, verificando o papel dessas enzimas na remodelação da matriz extracelular (MEC) e no processo de invasão tecidual. Um total de 355 amostras prostáticas foram obtidas, sendo 36 (10,1%) normais, 46 (13,0%) com hiperplasia prostática benigna (HPB), 128 (36,1%) com atrofia inflamatória proliferativa (PIA), 74 (20,8%) com neoplasia intraepitelial prostática (PIN) e 71 (20,0%) com carcinoma prostático (CP). Houve diferença de imunomarcação citoplasmática para MMP-2 e MMP-9 entre o epitélio acinar e o estroma periacinar, quanto aos diferentes diagnósticos. Observou-se correlação entre a expressão de MMP-2 e MMP-9 em relação ao número de células marcadas no epitélio acinar e estroma periacinar, bem como para a intensidade de marcação das células estromais periacinares em próstatas caninas com PIA. Conclui-se que há variação na expressão de MMP-2 e MMP-9 em próstatas caninas de acordo com a lesão, com menor expressão em próstatas caninas normais e com HPB, e maior naquelas com PIA, PIN e CP. Ainda, o microambiente inflamatório na PIA influencia a atividade de ambas as enzimas.

Efeitos da transformação de uma variável com distribuição normal em sua inversa sobre os parâmetros de sua distribuição usando técnicas de Monte Carlo

Foram realizados quatro estudos de simulação para verificar a distribuição de inversas de variáveis com distribuição normal, em função de diferentes variâncias, médias, pontos de truncamentos e tamanhos amostrais. As variáveis simuladas foram GMD, com distribuição normal, representando o ganho médio diário e DIAS, obtido a partir da inversa de GMD, representando dias para se obter determinado peso. em todos os estudos, foi utilizado o sistema SAS® (1990) para simulação dos dados e para posterior análise dos resultados. As médias amostrais de DIAS foram dependentes dos desvios-padrão utilizados na simulação. As análises de regressão mostraram redução da média e do desvio-padrão de DIAS em função do aumento na média de GMD. A inclusão de um ponto de truncamento entre 10 e 25% do valor da média de GMD reduziu a média de GMD e aumentou a de DIAS, quando o coeficiente de variação de GMD foi superior a 25%. O efeito do tamanho dos grupos nas médias de GMD e DIAS não foi significativo, mas o desvio-padrão e CV amostrais médios de GMD aumentaram com o tamanho do grupo. em virtude da dependência entre a média e o desvio-padrão e da variação observada nos desvios-padrão de DIAS em função do tamanho do grupo, a utilização de DIAS como critério de seleção pode diminuir a acurácia da variação. Portanto, para a substituição de GMD por DIAS, é necessária a utilização de um método de análise robusto o suficiente para a eliminação da heterogeneidade de variância.

Estudo de simulação de modelos lineares mistos com distribuição normal contaminada no melhoramento genético animal

Objetivou-se com esse trabalho comparar estimativas de componentes de variâncias obtidas por meio de modelos lineares mistos Gaussianos e Robustos, via Amostrador de Gibbs, em dados simulados. Foram simulados 50 arquivos de dados com 1.000 animais cada um, distribuídos em cinco gerações, em dois níveis de efeito fixo e três valores fenotípicos distintos para uma característica hipotética, com diferentes níveis de contaminação. Exceto para os dados sem contaminação, quando os modelos foram iguais, o modelo Robusto apresentou melhores estimativas da variância residual. As estimativas de herdabilidade foram semelhantes em todos os modelos, mas as análises de regressão mostraram que os valores genéticos preditos com uso do modelo Robusto foram mais próximos dos valores genéticos verdadeiros. Esses resultados sugerem que o modelo linear normal contaminado oferece uma alternativa flexível para estimação robusta em melhoramento genético animal.