991 resultados para Trypanosoma cruzi, aislamiento
Resumo:
Durante a infeco experimental por Trypanosoma cruzi, a resposta imune adaptativa mediada por clulas CD8+ direcionada a poucos eptopos imunodominantes e subdominantes. Em estudos anteriores, foi demonstrado que, em diferentes linhagens de camundongos, a imunizao com plasmdeos ou protenas recombinantes, que expressam eptopos CD8 imunodominantes, antecipa a resposta imune aps o desafio e proporciona resposta imune protetora contra infeces letais com T.cruzi. Em nosso estudo atual, desenvolvemos a hiptese que tambm possvel gerar resposta imune protetora a partir de imunizaes com plasmdeos que expressam eptopos subdominantes. Neste caso, esta resposta poderia se somar a resposta imune dominante ampliando o espectro da resposta imuno-protetora. Para testar nossa hiptese, ns tivemos que construir diferentes plasmdeos contendo a ORF do gene da protena 2 de superfcie de amastigota (asp-2) de T.cruzi contendo mutaes que: i) retiraram os eptopos imunodominantes CD8 (VNHRFTLV para H-2Kb ou TEWETGQI para H-2Kk) ;ii) trocaram o eptopo imunodominante por eptopos sub-dominantes (TsKb-18 ANYDFTLV ou TsKb-20 ANYKFTLV). Alm disso, tambm foi construdo um plasmdeo contendo somente a poro P4-P7 (261 a 500 aminocidos) da asp-2. Aps a construo destes plasmdeos, testamos a imunogencidade de dois deles, denominados pRE-P4P7 e o pIgSP-VNHRATLA, foram testados individualmente na vacinao de camundongos F1(C57BL/6 x B10.A) (H-2Kb e H- 2Kk) ou de CB10 (H-2Kb), respectivamente, e desafiados com tripomastigotas da cepa Y de T.cruzi. A vacinao de camundongos F1 (C57BL/6 x B10.A) com o plasmdeo pr- P4-P7 aumentou significativamente a resposta imune de clulas CD8+ especficas ao eptopo sub-dominante TEWETGQI, restrito ao MHC H-2kk, porm no diminuiu a resposta ...(Resumo completo, clicar acesso eletrnico abaixo)
Resumo:
O agente etiolgico da doena de Chagas, Trypanosoma cruzi, responsvel pela infeco de milhes de pessoas na Amrica Latina. No momento h apenas dois frmacos disponveis, o nifurtimox (5-nitrofurano), teve o uso descontinuado no Brasil, e o benzonidazol (2-nitroimidazole), embora ambos possuam aes limitadas, visto que dependem da fase da doena, das condies fisiolgicas do hospedeiro, da suscetibilidade e variabilidade gentica da cepa. Assim, a busca de novas molculas torna-se urgente e necessria, bem como a compreenso do mecanismo de resistncia aos frmacos tripanocidas. Alguns estudos relatam aumento na produo de enzimas que atuam na defesa celular, as quais, provavelmente, poderiam ser responsveis pela resistncia de certas cepas do parasita. Tais enzimas tm funes importantes na sobrevivncia e crescimento dos parasitas: superxido dismutase (SOD), uma metaloenzima que elimina radicais superxido ao convert-los em perxido de hidrognio e oxignio molecular; old yellow enzyme (OYE), que uma NADPH flavina oxidoredutase e pode estar envolvida na reduo de substncias tripanocidas; e, peroxiredoxina (Prx), que catalisa a reduo de perxidos. O objetivo deste projeto avaliar a suscetibilidade de diferentes cepas ao benzonidazol, clonar, sequenciar e expressar enzimas possivelmente envolvidas na resistncia a este frmaco e realizar anlises morfolgicas sero nos parasitos aps serem expostos substncia em questo. Futuramente os anticorpos policlonais obtidos a partir das protenas recombinantes de Prx, SOD e OYE sero empregados para avaliar o nvel de expresso das mesmas em parasitas tratados e no tratados com o benzonidazol.
Resumo:
Embora a doena de Chagas seja amplamente estudada, ainda no se conhece todos os interferentes que modulam a relao parasitria Trypanosoma cruzi- vetor- hospedeiro vertebrado. Sabe-se que as aves so refratrias ao T. cruzi, ou seja, o parasito no consegue estabelecer parasitismo nas mesmas, enquanto que nos camundongos a infeco ocorre. Essa refratariedade representa um exemplo de resistncia natural do hospedeiro a uma infeco parasitria. Originalmente, acreditava-se que isso ocorria devido presena de um anticorpo natural contra o T. cruzi no sangue das aves, porm estudos atuais atribuem tal atividade ao sistema complemento presente no sangue das mesmas. Pretendeu-se avaliar neste projeto se a referida caracterstica peculiar do sangue das aves interfere no processo e no nvel de infeco dos triatomneos, em especial de Rhodnius neglectus, espcie de comprovada importncia epidemiolgica. Para tanto, utilizou-se a cepa Y de T. cruzi e ninfas de 4 estdio de R. neglectus. Avaliou-se tambm a capacidade ltica do soro de galinha em formas epimastigotas e tripomastigotas em meio de cultura LIT, utilizando a cepa Y. Referente influncia de diferentes fontes alimentares na infeco de R. neglectus por T. cruzi, observou-se um decrscimo no nmero de exemplares infectados aps alimentao em patos , apresentando ndice de Infeco mdio de 19,74%. Por outro lado, exemplares infectados aps alimentao em camundongos no apresentaram diferena significante na parasitemia total. Os testes in vitro demonstraram que a adio de soro de galinha em meio de cultura LIT, com formas epimastigotas e tripomastigotas, foi capaz de diminuir notoriamente a contagem de parasitos mveis at a contagem zero, uma hora aps a adio. O conjunto desses resultados sugere que a refratariedade das aves ao T. cruzi influencia a infeco de R. neglectus pelo flagelado e foi demonstrada, in vitro, pela ...
Resumo:
A atividade biolgica de extratos, fraes e substncias puras de Pterogyne nitens foi avaliada em formas epimastigotas das cepas Y e Bolvia de Trypanosoma cruzi, e a citotoxicidade das substncias com potente atividade tripanocida foi testada em macrfagos murinos pelo mtodo colorimtrico de reduo do sal 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2-5-difeniltetrazlio (MTT) a formazana, um produto colorido. As mesmas amostras foram tambm avaliadas quanto a um possvel sinergismo com o frmaco benzonidazol. Foram consideradas substncias ativas contra o parasito: nitensidinas A, D, E e cido cafeico, com concentraes inibitrias (CI50) inferiores s do benzonidazol (9,01 g/mL para cepa Y e 25,00 g/mL para cepa Bolvia). Essas substncias foram avaliadas quanto a sua citotoxicidade em macrfagos de camundongos isognicos Balb/c e C57/Black no infectados utilizando-se o mesmo mtodo colorimtrico. Alm disso, essas mesmas substncias foram analisadas em diferentes tempos: 2, 6, 24, 48 e 72 horas, a fim de detectar-se o seu tempo mnimo de ao nos parasitos que foram ento observados quanto sua morfologia atravs de microscopia de contraste de fase. Os resultados indicam que no h toxicidade seletiva, ou seja, as molculas se mostraram txicas tanto para as cepas testadas do parasito, quanto para macrfagos murinos das linhagens utilizadas. Modificaes nas estruturas qumicas podem ser sugeridas para que as substncias continuem ativas contra Trypanosoma cruzi e se tornem menos txicas para clulas de mamferos
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
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Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq)
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Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
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Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
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Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
Toxicity and loss of mitochondrial membrane potential induced by Alkyl Gallates in Trypanosoma cruzi
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American trypanosomiasis or Chagas disease is a debilitating disease representing an important social problem that affects, approximately, 10 million people in the world. The main aggravating factor of this situation is the lack of an effective drug to treat the different stages of this disease. In this context, the search for trypanocidal substances isolated from plants, synthetic or semi synthetic molecules, is an important strategy. Here, the trypanocidal potential of gallates was assayed in epimastigotes forms of T. cruzi and also, the interference of these substances on the mitochondrial membrane potential of the parasites was assessed, allowing the study of the mechanism of action of the gallates in the T. cruzi organisms. Regarding the preliminary structure-activity relationships, the side chain length of gallates plays crucial role for activity. Nonyl, decyl, undecyl, and dodecyl gallates showed potent antitrypanosomal effect (IC50 from 1.46 to 2.90M) in contrast with benznidazole (IC50 = 34.0M). Heptyl gallate showed a strong synergistic activity with benznidazole, reducing by 105-fold the IC50 of benznidazole. Loss of mitochondrial membrane potential induced by these esters was revealed. Tetradecyl gallate induced a loss of 53% of the mitochondrial membrane potential, at IC50 value.
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Ps-graduao em Doenas Tropicais - FMB
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A doena de Chagas, causada pelo protozorio flagelado Trypanosoma cruzi, foi descrita pelo pesquisador brasileiro Carlos Chagas em 1909. transmitida ao homem por insetos hempteros conhecidos como barbeiros dos quais os gneros mais importantes so Panstrongylus, Rhodnius e Triatoma. Essa zoonose representa um risco para aproximadamente 20 milhes de pessoas em todo o mundo, principalmente na Amrica Latina. Para tentar explicar as diferentes manifestaes observadas na doena de Chagas, vrios estudos foram realizados com intuito de averiguar as possveis correlaes entre as formas clnicas com a variabilidade gentica do parasito. Algumas hipteses esto relacionadas provavelmente ao fato de a doena ser um processo multifatorial, em que tanto aspectos do parasito como do hospedeiro esto inter-relacionados ou ainda a escolha inadequada de alvos como marcadores de patogenicidade na tentativa de estabelecer a correlao entre as formas clnicas e a variabilidade gentica do parasito. Com o intuito de contribuir para ampliar o conhecimento sobre as populaes de T. cruzi, foi realizada a cintica de crescimento em meio LIT e o estudo genotpico de seis cepas de T. cruzi isoladas de exemplares de R. montenegrensis, T. rubrovaria e T. sordida por meio de marcadores genotpicos utilizando as sequncia dos genes 24S do DNA ribossomal, HSP60 e GPI.
Resumo:
A doena de Chagas, conhecida tambm como tripanossomase americana, foi descrita por Carlos Ribeiro Justiniano das Chagas em 1909 em Lassance, Minas Gerais. Ela causada pelo protozorio Trypanosoma cruzi e transmitido ao homem por insetos hempteros conhecidos como barbeiros dos quais os gneros mais importantes so Panstrongylus, Rhodinus e Triatoma. Essa zoonose atinge aproximadamente 10 milhes de pessoas em todo o mundo, principalmente na Amrica Latina. Sabe-se que esse parasito apresenta grande variabilidade intraespecfica evidenciada por diferenas na patologia, virulncia, constituio antignica e habilidade de evaso resposta imunolgica e essa diversidade pode estar associada sua adaptao e sobrevivncia em diferentes hospedeiros. A diversidade patognica, imunolgica e morfolgica inerente a esse flagelado dependem de fatores ainda indeterminados, como variao regional e individual da doena humana em infeces naturais e experimentais. Com o intuito de contribuir para ampliar o conhecimento sobre as populaes de T. cruzi, prope-se o estudo biolgico, morfolgico e molecular de duas cepas isoladas dos exemplares, Triatoma sordida (SI7) e Triatoma rubrovaria (QMM12) por Rosa et al. 2004; 2008 coletados nos Estados da Bahia e Rio Grande do Sul, respectivamente.
