Influence of the fold surface of the lamellae on radiation effects - Research on irradiated polyamide-1010 containing heterogeneous nuclei

Irradiated polyamide-1010 (PA1010) and PA1010 containing 0.5% (wt) heterogeneous nuclei were studied by ESR, WAXD, DSC and the determination of gel fractions. The fold surface of the lamellae plays an important role in the effects of radiation on crystalline PA1010. The results show that the direct radiation effects on both samples vary, while after being heated to 220 degrees C, the final radiation effects are identical, regardless of the difference in the amount of the fold surface of the lamellae. The post-radiation effects result predominantly from the fold surface.

VALENCE STATE EQUILIBRIA BETWEEN COBALT AND MANGANESE IONS AND MAGNETIC-PROPERTIES OF LACO0.9MN0.1O3

According to the thermodynamic equilibria between the low spin state Co(III) (t2g6e(g)0) ion and the high spin state Co3+ (t2g4e(g)2) ion and between the cobalt and manganese ions with different valence state and spin state, an approximate semiempirical f

镧系金属化合物催化苯乙烯和双烯烃的共聚──苯乙烯和异戊二烯共聚合制备高顺式－1，4嵌段共聚物

采用稀土催化体系Ｎｄ（Ｆ_３ＣＯ_２）_３－ＢｒＣ_５Ｈ_（１１）－Ｒ_ｍＡｌＨ_（３－ｍ）（Ｎｄ－Ｂｒ－Ａｌ），以甲苯为溶剂，在５０℃恒温水浴中进行苯乙烯（Ｓｔ）和异戊二烯（Ｉｐ）共聚合。结果表明，由Ａｌ（Ｏｃｔ）－３组成的催化体系可制备以顺式－１，４结构为主的共聚物；在后者组成的催化体系中，当Ａｌ／Ｎｄ＝５（摩尔比，下同），Ｂｒ／Ｎｄ＝５时，聚合活性最高。经ＩＲ，ＮＭＲ检测表征了共聚物的微观结构。同时，用π－烯丙基型配位机理和返扣配位机理对实验结果进行了定性解释。

用~(29)Si固体核磁共振方法研究M—ZSM-5分子筛

杂原子ZSM-5分子筛对某些特定的催化反应具有很高的活性和选择性,因而杂原子在分子筛中的存在状态成为人们十分关注的问题,作者曾用许多结构研究方法对杂原子ZSM-5分子筛进行了表征。本文用~(29)Si MAS NMR方法研究了M-ZSM-5 (M=Ga、B、Zn、Ni)分子筛杂原子的存在状态。

石墨炉原子吸收光谱法测定磷时基体改进剂的应用研究

本文阐述几种基体改进剂测定磷的效果,发现Pd/Ca混合基体改进剂对测定植物和动物组织中磷最理想,利用氘灯扣背景,其特征量为8.2ng,吸光度线性范围为0～0.220,磷含量为0.144％和1.35％时,相对标准偏差为2％左右,精密度好,抗干扰能力强,测定茶树叶和贻贝中磷比较理想。

几种聚醚酰亚胺的气体透过性能

本文研究了一系列芳环聚醚酰亚胺(PEI)对H_2、CO_2、O_2和N_2的透过性能与分子结构之间的关系。单醚酐型聚醚酰亚胺具有较高的透氢系数和H_2/N_2分离系数。由半刚性的4,4′-二氨基二苯酮(DABP)与柔性的三苯二醚四酸二酐(HQDPA)、二苯醚四酸二酐(ODPA)缩聚得到的聚醚酰亚胺具有很高的H_2/N_2、CO_2/N_2和O_2/N_2分离系数。

以氯代烃为第三组分的稀土定向聚合催化剂——Ⅰ.催化剂配制及性能的研究

讨论了以氮代烃为第三组分的稀土催化剂聚合丁二烯的活性及其状态。发现Cl/Nd摩尔比在2至3的范围内变化,或采用先加入烷基铝和氮代烃再加入钕盐的配料顺序,其催化剂的活性最高。由某些氮代烃在一定条件下组成的催化剂可在较宽的Cl/Nd摩尔比范围内保持均相状态。

The mitochondrial manganese superoxide dismutase gene in Chinese shrimp Fenneropenaeus chinensis: Cloning, distribution and expression

Manganese superoxide dismutase (MnSOD) plays an important role in crustacean immune defense reaction by eliminating oxidative stress. Knowledge on MnSOD at molecular level allows us to understand its regulatory mechanism in crustacean immune system. A novel mitochondrial manganese superoxide dismutase (mMnSOD) was cloned from hepatopancreas of Chinese shrimp Fenneropenaeus chinensis by 3' and 5' rapid amplification of cDNA ends (RACE) PCR. The full-length cDNA consists of 1185 bp with a 660 bp open reading frame, encoding 220 amino acids. The deduced amino acid sequence contains a putative signal peptide of 20 amino acids. Sequence comparison showed that the mMnSOD of F. chinensis shares 88% and 82% identity with that of giant freshwater prawn Macrobrachium rosenbergii and blue crab Callinectes sapidus, respectively. mMnSOD transcripts were detected in hepatopancreas, hemocytes, lymphoid organ, intestine, ovary, muscle and gill by Northern blotting. RT-PCR analysis indicated that mMnSOD showed different expression profiles in shrimp hemocytes and hepatopancreas after artificial infection with while spot syndrome virus (WSSV). In addition, a fusion protein containing mMnSOD was produced in vitro. LC-ESI-MS analysis showed that two peptide fragments (-GDVNTVISLAPALK- and -NVRPDYVNAIWK-) of the recombinant protein were identical to the corresponding sequence of M. rosenbergii mMnSOD, and the enzyme activity of the refolded recombinant protein was also measured. (c) 2006 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Impact of Brunswick river mouth training walls on adjacent beaches, Brunswick heads, New South Wales, Australia

River training walls have been built at scores of locations along the NSW coast and their impacts on shoreline change are still not fully understood. In this study, the Brunswick River entrance and adjacent beaches are selected for examination of the impact of the construction of major training walls. Thirteen sets of aerial photographs taken between 1947 and 1994 are used in a CIS approach to accurately determine tire shoreline Position, beach contours and sand volumes, and their changes in both time and space, and then to assess the contribution of both tire structures and natural hydrodynamic conditions to large scale (years-decades and kilometres) beach changes. The impact of the training walls can be divided into four stages: natural conditions prior to their construction (pre 1959), major downdrift erosion and updrift accretion during and. following the construction of the walls in 1959 similar to 1962 and 1966. diminishing impact of the walls between 1966 and 1987, and finally no apparent impact between 1987 similar to 1994. The impact extends horizontally about 8 km updrift and 17 km downdrift, and temporally up to 25 years..

琼脂分级产物的研究

琼脂（agar，又称琼胶）作为世界三大工业海藻胶之一，被广泛应用于食品、医药、生物技术、造纸等领域。本文首先研究了琼脂的分级方法，用DEAE-Cellulose将石花菜琼脂分级，得到四个级分，即水级分、0.5mol/L NaCl级分、1.0mol/L NaCl级分、2.5mol/L NaCl级分。分析了各级分的理化性质，并通过IR和~（13）C-NMR光谱研究其化学结构。石花菜琼脂分级得到的四个级分中，水级分的硫酸基含量为0.16%，凝胶强度为1130 g/cm~2（1%浓度），电内渗（EEO）为0.12，主要质量标准为Sigma公司的低电内渗琼脂糖(agarose）产品接近，符合低电内渗琼脂糖产品的质量要求。1.0mol/L NaCl级分和2.5mol/L NaCl级分的硫酸基含量较高，分别为22.8%和32.5%，合称为硫琼脂(agaropectin）。在琼脂糖的应用中，特别是现代生物技术研究中，需要低凝固温度琼脂糖。本文以石花菜琼脂分级得到的水级分为原料，采用甲基化反应制备低凝固温度琼脂糖。实验产品的凝固温度为30.1 ℃(1.5%浓度），融化温度为64.8 ℃（1.5%浓度），凝胶强度为264 g/cm~2(1%浓度），主要质量标准与Sigma公司的低凝固温度琼脂糖产品接近，符合低凝固温度琼脂糖产品的质量要求。随着对多糖生物学功能的深入，海藻硫酸多糖表现出多种生物活性，其活性研究已经成为目前新药研究的一个热点。到目前为止，有关琼脂分级产物的生物活性研究较少。本文在研究石菜硫琼脂的组成和主要理化特性的基础上，对基体内外抗凝血活性进行了较系统的研究。新西兰兔腹主动脉血体外抗凝实验结果表明，石花菜硫琼脂具有明显的体外抗凝血活性，在3.125mg/ml ～ 25mg/ml剂量范围内呈现量效关系；大鼠体内抗凝血实验的结果表明其口服可以吸收，在体内产生抗凝血作用，在100 mg/kg·d ～ 400 mg/kg·d剂量范围内，与全血凝血时间(CT）、凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、部分凝血活酶时间（KPTT）的延长及血浆纤维蛋白原（Fib）含量的降低均呈剂量依赖关系。就其抗凝血机制而言，石花菜硫琼脂的抗凝血作用既影响凝血系统，又影响纤溶系统。

中国明对虾免疫系统中抗氧化相关基因的克隆与表达分析

对虾病害在世界范围内的广泛传播，给水产养殖和沿海农村经济造成了重大损失。深入开展对虾免疫机制研究并在此基础上寻找对虾疾病防治的有效方法已成为当务之急。研究表明，当对虾等甲壳动物受到外界病原刺激时，其体内的吞噬细胞在吞噬活动中会激活磷酸己糖支路的代谢，引起呼吸爆发，产生多种活性氧分子。另外，受到病原侵染的对虾还会产生其他多种免疫反应，这些免疫反应将消耗大量的能量（ATP），产能的呼吸链会加速运转，由此也会引发大量活性氧的产生。这些活性氧分子可以杀灭入侵的病原微生物，但同时由于活性氧分子反应的非特异性，它们也会对宿主的细胞、组织和器官造成严重伤害，进而导致对虾生理机能的损伤和免疫系统的破坏。所以，消除对虾体内因过度免疫反应产生的过量氧自由基将能够增强其抵御病原侵染的能力，提高免疫力。本论文从中国明对虾体内克隆了线粒体型超氧化物歧化酶（mMnSOD）、胞质型超氧化物歧化酶（cMnSOD）、过氧化氢酶（Catalase）和过氧化物还原酶（Peroxiredoxin）等四种与免疫系统相关的抗氧化酶基因，分析了它们的分子结构特征，组织分布及应答不同病原刺激的表达变化模式，并对其中的mMnSOD基因和Peroxiredoxin基因进行了体外重组表达、分离纯化和酶活性分析。 采用RACE技术从中国明对虾血细胞中克隆了两个超氧化物歧化酶（SOD）基因，通过序列比对分析发现，其中一个为mMnSOD基因，另一个为cMnSOD基因。mMnSOD基因的cDNA全长为1185个碱基，其中开放阅读框为660个碱基，编码220个氨基酸，其中推测的信号肽为20个氨基酸。多序列比对结果显示中国明对虾mMnSOD基因的推导氨基酸序列与罗氏沼虾、蓝蟹的推导氨基酸序列同源性分别为88%和82%。Northern blot结果表明，该基因在对虾的肝胰脏、血细胞、淋巴器官、肠、卵巢、肌肉和鳃等组织中均有表达。半定量RT-PCR结果显示，对虾感染病毒3 h时，该基因在血细胞和肝胰脏中的转录水平显著升高。此外，通过构建原核表达载体，本研究对该基因进行了体外重组表达，并对纯化的重组蛋白进行了质谱鉴定和酶活分析。cMnSOD基因的cDNA全长为1284个碱基，其中开放阅读框为861个碱基，编码287个氨基酸。多序列比对结果显示中国明对虾cMnSOD基因的推导氨基酸序列与斑节对虾和凡纳滨对虾的同源性高达98%和94%。组织半定量结果显示，cMnSOD基因在对虾被检测的各个组织中均有表达。 另外，半定量RT-PCR结果表明，对虾感染病毒23h时，该基因在肝胰脏中的转录上升到正常水平的3.5倍；而感染后59 h时，该基因在血细胞中的转录上升到正常水平的2.5倍。 利用根据其他生物过氧化氢酶保守氨基酸序列设计的简并引物，结合RACE技术，从中国明对虾肝胰脏中克隆到了过氧化氢酶基因的部分片段，片段长1725个碱基。多序列比对结果发现目前所得中国明对虾Catalase基因部分片段的推导氨基酸序列与罗氏沼虾和皱纹盘鲍Catalase氨基酸序列的同源性分别达到95%和73%。通过实时荧光定量PCR技术对中国明对虾Catalase基因在各个组织中的分布情况及病毒感染后该基因在血细胞和肝胰脏中的转录变化进行了研究。结果发现，该基因在肝胰脏、鳃、肠和血细胞中表达水平较高，在卵巢、淋巴器官和肌肉中的表达水平相对较弱；感染病毒23 h和37 h时，对虾血细胞和肝胰脏中该基因mRNA的表达量分别出现显著性上升。 依据中国明对虾头胸部cDNA文库提供的部分片段信息，结合SMART-RACE技术，从中国明对虾肝胰脏中克隆到了过氧化物还原酶基因（Peroxiredoxin）， 该基因的cDNA全长为942个碱基，其中开放阅读框为594个碱基，编码198个氨基酸。中国明对虾Peroxiredoxin基因的推断氨基酸序列与伊蚊、文昌鱼和果蝇等Peroxiredoxin基因的推断氨基酸序列同源性分别为77%、76%和73%。其蛋白理论分子量为22041.17 Da，pI为5.17。Northern blot结果表明，Peroxiredoxin基因在对虾的肝胰脏、血细胞、淋巴器官、肠、卵巢、肌肉和鳃等组织中均有表达。实时荧光定量PCR结果显示，弧菌感染后，该基因在对虾血细胞和肝胰脏中的转录水平都有明显变化并且表达模式不同。另外，对该基因进行了体外重组表达，并对纯化的重组蛋白进行了质谱鉴定和酶活性分析。酶活性分析表明，复性后的重组蛋白能在DTT存在的条件下还原H2O2。

菲律宾蛤(Ruditapes philippinarum)生理能量学的研究

本研究在实验室内采用静水系统以典型滤食性贝类菲律宾蛤仔为实验对象，从生理生态学的角度研究了体重和环境因子对菲律宾蛤仔摄食生理活动的影响，探讨了滤食性贝类的摄食机制和贝类本身对环境的适应性。同时，对蛤仔的碳代谢和能量收支进行了研究，建立了不同温度和饵料浓度下的能量收支方程。实验的主要结果如下：1．温度的影响在9±0.1℃，16±0.5℃，22±0.2℃，26±0.6℃四个温度下对菲律宾蛤仔的滤食率FR、清滤率CR、吸收率AE进行了测定。结果表明：在9-22℃温度范围内蛤仔滤食率、清滤率、吸收率均随温度的升高而增大，在22℃达到最大值，并且各温度间差异显著(ANOVA，P<0．05)。当温度达到26℃时，滤食率、清滤率、吸收率均有所下降，但和22℃值相比较差异并不显著(ANOVA，P>0．2)。这表明蛤仔生长的最适温度应当在22℃左右。对不同体重蛤仔的实验表明小个体蛤仔比大个体对温度有更高的敏感性。碳最小需求量MCR、生长余力(SFG)和生长效率均受温度的显著影响，在较低温度下(9℃)SFG出现负值。经计算9℃，16℃，22℃，26℃下的能量收支方程分别为：2．体重的影响蛤仔摄食率、清滤率、呼吸率都随个体体重的增加而增大，它们之间呈幂函数关系Y=aX~b(b值均小于1)；而单位体重的摄食率、清滤率、呼吸率随个体体重的增加而减小。吸收率和体重无明显的相关性，体重对生长效率无显著影响。蛤仔的碳最小需求量MCR、生长余力均和软体部干重呈幂函数关系Y=aX~b，b值在实验的四个温度下分别为0．43±0．12和0,78±0．09。3．饵料浓度的影响在实验的饵料浓度范围内(2．33-6．15mgPOM／L)，水温15℃，蛤仔摄食率和清滤率随着饵料浓度的增加而增大，呈幂函数关系(y=aX~b)。当饵料浓度达到一定值后，清滤率迅速下降，而摄食率只略微有所下降，基本上保持平稳不变。这说明蛤仔可以通过调节清滤率来稳定其摄食率，对环境具有生理适应性。蛤仔吸收率与饵料浓度无显著的相关性，不同饵料浓度其吸收率始终保持在57．93±2．94％左右。水温15℃，投喂小球藻的条件下，计算得出蛤仔(壳长3．53±0．02cm、软体部干重0．41±0．02g)产生假粪的饵料阈值为2.16mgPOM／L。饵料浓度对蛤仔生产碳有明显的影响，在实验的饵料范围内生产碳随着饵料浓度的增加而增加，在低浓度饵料时，生产碳出现负值。蛤仔的SFG随饵料浓度的增加而增加，在1．54±0．12mgPOM／L时蛤仔的生长余力出现负值。实验发现摄食能随温度变化显著而代谢能变化相对不明显，这表明对蛤仔生长来说饵料浓度可能是比温度更重要的环境因子。16℃投喂小球藻时蛤仔在不同饵料浓度下的能量收支方程为：4．底质的影响温度为17℃，饵料为三角褐指藻、浓度为2．87±1．07mgPOM／L(无假粪产生)。实验测定蛤仔在铺砂以后，摄食率和清滤率都增加了大约2倍，差异极显著(ANOVA，P<0．01)。实验中对蛤仔的吸收率也进行了对比研究。结果表明：铺砂组蛤仔的吸收率比未铺砂组提高了10．71士4．57％，经单因子方差检验铺砂和未铺砂时蛤仔吸收率差异显著(ANOVA，P<0．05)。实验表明底质对蛤仔摄食生理和代谢有显著的影响，这和实际生产中发现底质对蛤仔生长有明显影响是一致的。

皱纹盘鲍基因组单核苷酸多态标记开发与应用

本研究利用皱纹盘鲍的EST序列进行单核苷酸多态（SNP）标记开发；对等位基因特异性PCR（AS-PCR）方法进行了优化，使之适合SNP基因型分析；对一个作图家系开发基因相关SNP标记，并对标记在子代个体中的分离情况进行了分析，探讨了借助SNP在遗传连锁图谱上定位功能基因的方法。 对大约5800条EST序列进行拼接，共获得含有4条以上序列的contig 150个，在86个含有单碱基突变位点的contigs中发现SNP 302个，碱基置换类型A/G（C/T）、A/C（G/T）、A/T、C/G的位点数目分别为147、90、21、16个。50个contigs在BLASTx分析后具有匹配（E值小于1E-5），其中的220个SNPs全部为同义cSNPs，位于遗传密码子的第三简并位。粗略估算，皱纹盘鲍核基因组中SNP的平均分布密度不低于1%。 通过扩增DNA pool后产物直接测序共验证了28个SNP。PCR直接测序法操作简单，结果可靠，一次测序可能验证多个位点，有时还可以发现新的突变位点。通过重点研究引物3’端不同错配对PCR扩增的影响，对AS-PCR的引物设计原则及反应条件进行了探讨及优化，发现在AS引物的3’端倒数第二位引入额外的强错配后，AS-PCR检测SNP的特异性会得到很大的提高，从而使AS-PCR可以满足小规模的SNP基因型分析。 根据EST-contig或者单一的EST序列设计PCR引物74组，其中43组可以特异扩增皱纹盘鲍基因组DNA。用这些引物扩增一个作图家系的父母本，并对PCR产物纯化后分别进行双向直接测序，在18个基因片段中发现了86个SNP，其中82个是新SNP，并且绝大多数SNP位于内含子序列中。这些SNP在父母本中的基因型，在多数情形下，是一方为纯合（AA），而另一方为杂合（AB）；父母本均为杂合和均为纯合的形式则较少。在父母本中杂合形式的SNP位点，理论上可以在子代中发生分离。 在每个基因的内含子中选择父母本基因型为AA×AB或者AB×AA的SNP位点，设计AS-PCR分型引物并检测123个子代个体的基因型。在对9个基因中的11个SNP位点（包括5个母本标记和6个父本标记）进行子代基因型分析后发现，2个位点不符合孟德尔1：1分离（P < 0.05），符合预期分离比率的9个位点存在较大可能定位于遗传连锁图谱。通过分析两组父母本标记（F142和M142，F459和M459）发现，在根据父母本序列设计SNP分型引物时，可以设计指向同一基因的成对的父母本标记，从而使两个单亲标记可作为一个共同标记使用。

迟缓爱德华氏菌基因组fosmid文库的构建、opp基因簇的克隆及aroA基因缺失突变株的构建

本研究构建了迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)LSE40 基因组fosmid文库，该文库共包含2 500个克隆，插入片段平均大小为33.6kb，文库总容量约84Mb，覆盖E.tarda LSE40基因组（按5Mb计算）超过16倍。随机挑取1 000个fosmid克隆进行双末端测序共得到1 741条高质量的序列，序列平均长度546 bp，全长949 997bp，约为E.tarda基因组的19％。将这些序列提交到KEGG自动注释服务器KAAS对所得序列进行代谢途径分析，得到E.tarda LSE40的KO (KEGG Orthology) 注释。分析结果表明，与代谢途径相关的基因有932条序列，与环境信息处理相关基因283条，与遗传信息处理相关基因220条，与细胞进程和人类疾病相关的基因分别为64条和16条。同时将序列进行BlastX，按照微生物致病性共同主题找到61个毒力相关基因。Fosmid文库的建立和部分基因组序列的生物信息学分析为进一步研究E.tarda LSE40的致病机制、代谢机制和生理生态机制提供了丰富的物质基础。 通过比较基因组的方法，从E.tarda LSE40 fosmid文库克隆到编码寡肽透过酶的opp基因簇，该基因簇全长6 741bp，含有5个ORF，依次编码OppA-B-C-D-F 5个蛋白；位于oppA和oppB的间隔区和oppF之后的非编码区各有一个茎环结构，推测分别为oppA和opp基因簇的转录终止子。以细菌OppA的保守结构域SBP_bac_5构建系统发生树，结果显示E.tarda LSE40与同属细菌E.ictaluri的亲缘关系最近，与肠杆菌科细菌的亲缘关系较近，与革兰氏阳性细菌的亲缘关系较远，表明OppA的SBP_bac_5结构域可作为细菌分类鉴定的依据。 从E.tarda LSE40 fosmid文库克隆aroA基因全序列，该序列全长1 287bp，编码428个氨基酸，与鲶鱼爱德华氏菌(E. ictaluri)氨基酸相似性在94%，与其他肠杆菌科菌如Escherichia coli和Yersinia enterocolitica相似性在73%-74%。通过In-frame deletion构建了E.tarda LSE40 aroA缺失突变株。与野生型相比，aroA突变株的半数致死量LD50提高了62倍。在牙鲆接种~106cfu/ml的E.tarda细菌时，接种野生型细菌的牙鲆在6天内全部死亡，濒死鱼的细菌数达7.97×108cfu/ 100mg；而接种aroA突变株的牙鲆没有出现死亡，28天后检测不到细菌的存在。实验结果为进一步评价aroA突变株作为减毒活疫苗打下了基础。