Purificação e caracterização parcial de uma Fucana C de Dictyota mentrualis e estudo do seu efeito antiinflamatório e nociceptivo

In recent years, sulfated polysaccharides from marine algae have emerged as an important class of natural biopolymers with potential application in human and veterinary health care, while taking advantage of the absence of potential risk of contamination by animal viruses. Among these, fucans isolated from the cell walls of marine brown alga have been study due to their anticoagulant, antithrombotic, anti-inflammatory and antiviral activities. These biological effects of fucans have been found to depend on the degree of sulfation and molecular size of the polysaccharide chains. In the present study, we examined structural features of a fucan extracted from brown alga Dictyota menstrualis and its effect on the leukocyte migration to the peritoneum. The sulfated polysaccharides were extracted from the brown seaweed by proteolytic digestion, followed by sequential acetone precipitation producing 5 fractions. Gel lectrophoresis using 0.05 M 1,3-diaminopropane-acetate buffer, pH 9.0, stained with 0.1% toluidine blue, showed the presence of sulfated polysaccharides in all fractions. The chemical analyses demonstrated that all fractions are composed mainly of fucose, xylose, galactose, uronic acid, and sulfate. Electrophoresis in agarose gel in three different buffers demonstrated that the fraction 2.0v have only one population of fucan. This compound was purify by exclusion molecular. It has shown composition of fucose, xilose, sulfate and uronic acid in molar ration of 1.0: 1.7: 1.1: 0.5 respectively. The effect of this heterofucan on the leukocyte migration was observed 6h after zymozan (mg/g) administration into the peritoneum. The heterofucan showed higher antimigratory activity, it decrease the migration of leukocyte in 83.77% to peritoneum. The results suggest that this fucan is a new antimigratory compound with potential pharmacological appications

Purificação, caracterização e avaliação da atividade antiproliferativa de um inibidor de quimotripsina tipo kunitz de semente de Eryhrina velutina

A chymotrypsin inhibitor was purified from Erythrina velutina seeds by ammonium sulphate fractionation, affinities chromatographies on Trypsin-Sepharose, Quimotrypsin-Sepharose and reversed phase C-18 FPLC/AKTA system. The inhibitor, named EvCI, shown molecular mass of 17 kDa, as determined by SDSPAGE. 2D-PAGE showed four isoinhibitors with pI values of 4,42, 4,63, 4,83 and 5,06, with molecular mass of 17 kDa each. The aminoacid sequence of EvCI was determined by MALDI-TOF-MS and showed a high similarity with other Kunitz-type inhibitor of Erythrina variegata. EvCI competitively inhibited chymotrypsin, with Ki of 4 x10-8 M, but did not inhibited trypsin, pancreatic elastase, bromelain and papain. The inhibitory activity of EvCI was stable over wide pH and temperature ranges. In the presence of DTT 100 mM for 120 min, EvCI lost 50 % of activity. Cytotoxicity was studied in HeLa, MDA, HepG2, K562 and PC3 cells after 72-h incubation period. EvCl inhibited HeLa cells growth with an IC50 value of 50 μg/ml. Subsequent studies in HeLa cells analysis of cell death by annexin V/PI double-staining and cell cycle, using flow cytometry. The results provide evidence for a cytostatic activity of EvCl and support further studies on potential application of this inhibitors as an antiproliferative agent in combined therapy against cervical cancer

Ascorbate electro-oxidation by modified electrodes: Polypyrrole and polypyrrole/Ni(OH)(2) composite thin films

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Activation and early parthenogenesis of bovine oocytes treated with ethanol and strontium

Efficient artificial activation is indispensable for the success of cloning programs. Strontium has been shown to effectively activate mouse oocytes for nuclear transfer procedures, however, there is limited information on its use for bovine oocytes. The present study had as objectives: (1) to assess the ability of strontium to induce activation and parthenogenetic development in bovine oocytes of different maturational ages in comparison with ethanol; and (2) to verify whether the combination of both treatments improves activation and parthenogenetic development rates. Bovine oocytes were in vitro matured for 24, 26, 28, and 30 h, and treated with ethanol (E, 7% for 5 min) or strontium chloride (S, 10 mM SrCl2 for 5 h) alone or in combination: ethanol + strontium (ES) and strontium + ethanol (SE). Activated oocytes were cultured in vitro in synthetic oviductal fluid (SOF) medium and assessed for pronuclear formation (15-16 h), cleavage (46-48 h) and development to the blastocyst stage (M). Treatment with ethanol and strontium promoted similar results regarding pronuclear formation (E, 20-66.7%; S, 26.7-53.3%; P > 0.05) and cleavage (E, 12.8-40.6%; S, 16.1-41.9%; P > 0.05), regardless of oocyte age. The actions of both strontium and ethanol were influenced by oocyte age: ethanol induced greater activation rates after 28 and 30 h of maturation (48.4 and 66.7% versus 20.0 and 23.3% for 24 and 26 It, respectively; P < 0.05) and strontium after 30 It (53.3%) was superior to 24 and 26h (26.7% for both). Blastocyst development rates were minimal in all treatments (0.0-6.3%; P > 0.05), however, when the mean (+/-S.D.) cell number in blastocysts at the same maturational period was compared, strontium treatment was superior to ethanol for activation rates (82 +/- 5.7 and 89.5 +/- 7.8 versus 54 and 61, at 28 and 30 h, respectively). Improved results were obtained by combined treatments. The combination of ethanol and strontium resulted in similar pronuclear formation (ES, 36.7-83.9%; SE, 53.1-90.3%) and cleavage rates (ES, 31.3-81.3%; SE, 65.6-80.7%). Regarding embryo development, there was no difference (P > 0.05) between treatments, and blastocysts were only obtained in treatment SE at 24 and 26 h (6.5% for both). It is concluded that, SrCl2 induces activation and parthenogenetic development in bovine oocytes. (C) 2003 Elsevier B.V. All rights reserved.

Infecções naturais em cervídeos (Mammalia: Cervidae) procedentes dos Estados do Mato Grosso do Sul e São Paulo, por nematódeos Trichostrongyloidea Cram, 1927

No período compreendido entre 1985 e 1996 foram necropsiados, para pesquisa de helmintos, 42 cervídeos, sendo sete Mazama americana, 16 M. gouazoubira, 13 Ozotoceros bezoarticus e seis Blastocerus dichotomus. Desses animais, foram colhidos 14.426 nematódeos Trichostrongyloidea, sendo 13.281 (92,06%) parasitos de abomaso e 1.145 (7,94%), de intestino delgado. Nesses órgãos, foram identificadas seis espécies de nematódeos: Haemonchus contortus, H. similis, Trichostrongylus axei, T. colubriformis, Cooperia punctata e C. pectinata. Todos os animais apresentaram infecções helmínticas por uma ou mais espécies, ocorrendo grande variação na intensidade de infecção (1 a 4.345 nematódeos). Ainda com relação à intensidade de infecção, os dados expressavam valores menores que 100 parasitos em 25 (59,52%) animais. Os valores mais altos de intensidade média das infecções foram observados em M. gouazoubira (596,37 helmintos) e em O. bezoarticus (331), e os menores, em M. americana (17,57) e B. dichotomus (75,5). Os dados mais expressivos de intensidade de infecção, abundância e prevalência foram observados para Haemonchus (larvas de 4º estágio), H. contortus, H. similis e T. axei. O gênero Haemonchus foi constatado em 35 animais, com prevalência de 83,33%; apresentou carga parasitária de 11.616 exemplares, representando 80,52% dos nematódeos verificados, sendo a maioria (8.903) constituída por formas imaturas. Por outro lado, H. similis foi a espécie predominante nas infecções e, portanto, a que apresentou maiores valores de abundância. Verificou-se o gênero Trichostrongylus em 24 (57,14%) animais, com carga parasitária de 2.444 exemplares, sendo 1.665 espécimes de T. axei, que representou 11,54% da carga parasitária obtida. As seis espécies de vermes identificadas nos cervídeos são comuns aos ruminantes domésticos nos Estados de São Paulo e Mato Grosso do Sul e dessa maneira não se observou nenhuma espécie de Trichostrongyloidea exclusiva dos cervídeos.

Heat or cold chronic stress affects organ weights and Hsp70 levels in chicken embryos

This study was carried out with the objective of evaluating the effect of heat (38.8 degreesC) or cold (35.8 degreesC) stress on chicken embryo development and tissues Hsp70 levels, after the 13th day of incubation. Embryo weight (percent egg weight), organ weight (percent embryo weight) and Hsp70 levels (ng Hsp70 mug(-1) total protein) in different tissues (liver, breast muscle, heart, lungs, brain and kidney) were studied at the end of incubation. Cold stress induced a lower embryo weight and lower kidney and lungs weights, whereas heart and liver were lighter in heat-stressed embryos. An interaction between temperature and age was obtained only for Hsp70 levels in kidney and heart. Cold-stressed embryos showed higher Hsp70 levels in the brain, lungs and liver; a decrease in brain and breast muscle Hsp70 levels was seen from the 19th to 20th days in control embryos. Hsp70 levels increased with age in kidneys of control embryos and in heart of heat- and cold-stressed embryos. In conclusion, this study showed that chicken embryo organ weights are affected by incubation temperature, and that Hsp70 expression is tissue dependent (higher levels being seen in the brain) being cold-stress more effective in increasing Hsp70 levels in most studied tissues.

Produção de matéria seca e absorção de nutrientes pelo milho em razão da saturação por bases e da adubação potássica

O trabalho foi conduzido em condições de casa de vegetação, com o objetivo de avaliar a resposta do milho à adubação potássica e à saturação do solo por bases, na produção de matéria seca e na absorção de nutrientes. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro repetições, em esquema fatorial 3x2x4, constituindo-se de três solos (Areia Quartzosa, Latossolo Vermelho-Escuro e Latossolo Roxo), dois valores de saturação por bases (40% e 70 %) e quatro teores de K no solo (0,5, 1,5, 3,0 e 6,0 mmol c dm-3). Para a calagem, foi utilizada mistura de carbonato de cálcio + carbonato de magnésio (PRNT = 103,3 %) na proporção de 4:1. A adubação básica constou de 200 mg kg-1 de N, 200 mg kg-1 de P e 5 mg kg-1 de Zn por vaso de 30 L, sendo o N parcelado em 2,48 g (83,7 mg kg-1) na semeadura e o restante em duas coberturas aos 25 e 40 dias após a emergência das plântulas (DAE). As doses de K utilizadas foram de 0, 3,62, 7,24 e 14,48 g de KCl por vaso. A semeadura foi realizada em 4/3/97, utilizando-se o milho cv. Zêneca 8392, mantendo-se uma planta/vaso durante 60 DAE. O K proporciona ganhos de matéria seca até teores de 1,5 mmol c dm-3 no solo. O aumento dos teores de K no solo resultam em queda na concentração de Ca e Mg na matéria seca do milho. A elevação da saturação por bases e respectivo aumento dos teores de Ca e Mg no solo reduzem a absorção de K pelo milho.

Períodos de interferência de uma comunidade de plantas daninhas na cultura da batata

Objetivou-se neste trabalho avaliar diferentes períodos de controle e de convivência de uma comunidade de plantas daninhas na cultura da batata 'Atlantic'. O experimento foi realizado no município de Botucatu-SP, e o delineamento experimental utilizado foi de blocos ao acaso com quatro repetições. Os tratamentos constituíram-se de seis períodos de controle, nos quais a cultura foi mantida livre da comunidade de plantas daninhas e após cada período, as plantas daninhas foram deixadas crescer livremente; e de seis períodos de convivência, nos quais a cultura foi mantida na presença da comunidade de plantas daninhas e após cada período, as plantas daninhas foram eliminadas até a colheita. Os períodos foram de 7, 14, 21, 28, 35 e 42 dias após o plantio dos tubérculos, além de uma testemunha mantida sempre livre de plantas daninhas e outra mantida sempre na presença dessas plantas. Foram identificadas 9 famílias e 15 espécies de plantas daninhas, com destaque para Bidens pilosa, Galinsoga parviflora,Brachiaria plantaginea,Commelina benghalensis e Digitaria horizontalis. Os resultados de produção de tubérculos ajustaram-se ao modelo de regressão não-linear: y = 8,907+(17,722/[1+(x/16,865)-8,412]), (R² = 0,963*) - equação para os períodos de controle e y = 5,728+(24,789/[1+(x/39,292)2,247 ]), (R² = 0,947*) - equação para os períodos de convivência. Assim, considerando perda de 5% na produtividade como aceitável, foram determinados o período anterior à interferência (PAI), que foi de 20 dias; o período total de prevenção à interferência (PTPI), de 21 dias; e o período crítico de prevenção da interferência (PCPI), de apenas de um dia, dos 20 aos 21 dias após o plantio dos tubérculos.

Seletividade de herbicidas em variedades de cana-de-açúcar

Este trabalho teve como objetivo avaliar a seletividade do herbicida topramezone aplicado de forma isolada e em mistura com tebuthiuron, em pós-emergência inicial, sobre dez variedades de cana-de-açúcar em condição de cana-planta. Os tratamentos utilizados foram: topramezone + Dash® (70 g ha-1 + 0,25% v/v); topramezone + tebuthiuron + Dash® (70 + 1.000 g ha-1 + 0,25% v/v); topramezone + tebuthiuron + Dash® (100 + 1.000 g ha-1 + 0,25% v/v); e ametryn + tebuthiuron (1.500 + 1.000 g ha-1), aplicados aos 35 dias após o plantio, além de uma testemunha sem aplicação de herbicidas. Durante a condução do experimento, todas as parcelas permaneceram livres da interferência das plantas daninhas por meio de capinas. As plantas de cana-de-açúcar estavam com duas a quatro folhas por ocasião da aplicação dos herbicidas. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados em parcelas subdivididas, com quatro repetições, sendo as variedades dispostas nas parcelas e os herbicidas nas subparcelas. As variedades utilizadas foram: SP 83 2847, SP 80 3280, RB 85 5453, SP 80 1842, SP 89 1115, RB 86 7515, PO 8862, RB 85 5156, SP 80 1816 e SP 81 3250. As avaliações visuais de fitotoxicidade foram realizadas aos 7, 14, 28 e 35 dias após a aplicação. Ao final do estudo foram determinados os parâmetros tecnológicos pol, fibra e brix e os parâmetros produtivos rendimento de colmos e produção de açúcar. A formulação isolada de topramezone seguida de suas misturas com tebuthiuron proporcionaram inicialmente severos sintomas visuais de injúrias às plantas de cana-de-açúcar; contudo, as plantas de todas as variedades testadas tiveram uma total recuperação visual a partir dos 35 dias após a aplicação dos herbicidas. A mistura de tebuthiuron com topramezone reduziu os sintomas de injúrias iniciais provocados por este último. A mistura de ametryn + tebuthiuron foi o tratamento que evidenciou a ação fitotóxica menos severa às plantas, independentemente da variedade estudada. Nenhum dos herbicidas testados afetou negativamente os componentes tecnológicos e produtivos, sendo as diferenças observadas dependentes apenas das variedades. Podem-se considerar seletivos os herbicidas utilizados sobre as variedades avaliadas de cana-de-açúcar.

Duração do teste de germinação do capim-tanzânia

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Rendimento de massa de matéria seca e relação c/n da aveia preta em função do lodo de esgoto e adubação nitrogenada

The final display of sewage sludge has been characterized as one of the most relevant environmental problems in the cities; it daily increases in both developed and developing countries, resulting in larger collection networks and increased treatment levels. The aim of this study was to verify the effect of mineral N and sewage sludge on dry matter yield and C/N ratio in black oat. The experiment was conducted in Sao Manuel Experimental Farm, belonging to the Faculty Agronomic Sciences, Unesp, Botucatu. The adopted experimental design was in randomized blocks constituted of 6 treatments and 5 replicates, as follows: T0 - without nitrogen fertilization; T1 - 70 kg ha(-1) of the N mineral; T2 - 35 kg ha(-1) of the N from sewage sludge and 35 kg ha(-1) of the N in the mineral form; T3 - 70 kg ha(-1) of the N from sewage sludge; T4 - 105 kg ha(-1) of the N from sewage sludge;- T5 - 140 kg ha(-1) of the N from sewage sludge. The parameters evaluated were dry matter acumulation and C/N ratio; with collections made at 60, 75, 90, 105 and 120 days after sowing. Increasing the dose of sewage sludge provided increment in dry matter yield in oat. The N provided a lawoer C/N ratio in plant oats.

Caracterização molecular de estafilococos isolados de vacas com mastite subclínica e ordenhadores

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Nanohardness and contact angle of Si wafers implanted with N and C and Al alloy with N by plasma ion implantation

Surfaces of silicon wafers implanted with N and C, respectively, and aluminum 5052 implanted with N alone by plasma immersion ion implantation WHO were probed by a nanoindentor and analyzed by the contact-angle method to provide information on surface nanohardness and wettability. Silicon nitride and silicon carbide are important ceramic materials for microelectronics, especially for high-temperature applications. These compounds can be synthesized by high-dose ion implantation. The nanohardness of a silicon sample implanted with 12-keV nitrogen PIII (with 3 X 10(17) cm(-2) dose) increased by 10% compared to the unimplanted sample, in layers deeper than the regions where the formation of the Si,N, compound occurred. A factor of 2.5 increase in hardness was obtained for C-implanted Si wafer at 35 keV (with 6 X 10(17) cm(-2) dose), again deeper than the SiC-rich layer, Both compounds are in the amorphous state and their hardness is much lower than that of the crystalline compounds, which require an annealing process after ion implantation. In the same targets, the contact angle increased by 65% and 35% for N- and C-implanted samples, respectively. Compared to the Si target, the nitrogen PIII-irradiated Al 5052 (wish 15 keV) showed negligible change in its hydrophobic character after ion implantation. Its near-surface nanohardness measurement showed a slight increase for doses of 1 X 10(17) cm(-2). We have been searching for an AlN layer of the order of 1000 A thick, using such a low-energy PIII process, but oxide formation during processing has precluded its synthesis. (C) 2002 Elsevier B.V. B.V. All rights reserved.

Effects of pentoxifylline and n-acetylcysteine on injuries caused by ischemia and reperfusion splanchnic organs in rats

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Spontaneous canine transmissible venereal tumor: association between different phenotypes and the insertion LINE-1/c-myc

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)