Obtenção e avaliação das potencialidades biológicas de complexos metálicos de 'ZN' e 'CO' contendo proteínas hidrolisadas do soro do leite

Pós-graduação em Química - IQ

Eletroforetograma de proteínas séricas na avaliação da imunidade de leitões na fase de maternidade

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FMVZ

Proteinograma sérico, com ênfase em proteínas de fase aguda, de bovinos sadios e bovinos portadores de enfermidade aguda de ocorrência natural

Nas últimas décadas, as proteínas de fase aguda (PFAs) tornaram-se biomarcadores de escolha em medicina humana para identificação e monitoração de doenças. Não há razão para imaginar que tais pesquisas clínicas não sejam igualmente úteis na medicina veterinária. Com o objetivo de verificar a importância das PFAs como biomarcadores de doenças inflamatórias em bovinos, determinou-se o proteinograma sérico, por meio da técnica de eletroforese SDS-PAGE, com interesse especial nas PFAs. Foram utilizados 30 animais, distribuídos em dois grupos: 15 bovinos sadios e 15 bovinos doentes (cinco com mastite estafilocócica, cinco com fotossensibilização e cinco com onfaloflebite). Os animais foram submetidos a colheitas diárias de sangue durante sete dias, enquanto internados no Hospital Veterinário da Unesp, Campus de Jaboticabal. Ceruloplasmina e haptoglobina apresentaram elevação significativa em animais acometidos por mastite, fotossensibilização e onfaloflebite (275,17% e 343,71%; 175,17% e 230,19%; 114,47% e 144,47%, respectivamente). A α1-glicoproteína ácida foi um bom biomarcador apenas em animais com mastite e fotossensibilização, elevando, respectivamente, suas concentrações séricas em 198,14% e 145,89%. Fibrinogênio mostrou-se um indicador confiável apenas em bovinos com mastite, com elevação de 146,5% em relação ao grupo sadio. Ficou clara a diferença na responsividade de distintas PFAs frente a diferentes estímulos inflamatórios. Ceruloplasmina e haptoglobina foram biomarcadores mais sensíveis e, portanto, mais confiáveis entre as PFAs estudadas nessa espécie.

Influence of parity on concentrations of enzymes, proteins, and minerals in the milk of cows

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Proteinograma sérico e do líquido peritoneal de equinos hígidos e daqueles submetidos à obstrução intestinal experimental

Avaliou-se a resposta de fase aguda através da concentração das proteínas de fase aguda (PFA) no soro sanguíneo e no líquido peritoneal de vinte e um equinos, hígidos e submetidos à obstrução intestinal experimental, distribuídos em quatro grupos: obstrução de duodeno - GD (n=6), íleo - GI (n=6), cólon dorsal esquerdo - GM (n=6) e controle instrumentado - GC (n=3). Foram colhidas amostras de sangue e líquido peritoneal e, após centrifugação e fracionamento, as proteínas de fase aguda foram separadas por eletroforese em SDS-PAGE. Identificaram-se as proteínas IgA, ceruloplasmina, transferrina, albumina, IgG, haptoglobina, α1-glicoproteína ácida e P24, no soro e no líquido peritoneal. Houve aumento nas concentrações sérica e peritoneal de todas as PFA, sendo mais evidente no líquido peritoneal e nos animais obstruídos. O fracionamento eletroforético das PFA no líquido peritoneal é mais eficaz no diagnóstico de processos inflamatórios abdominais, quando comparado ao sérico.

Semen parameters and seminal plasma protein and biochemical profiles of dogs with benign prostatic hyperplasia after botulinum toxin type A intraprostatic injection

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Hemograma e proteínas de fase aguda de bezerros sadios do nascimento aos 30 dias de idade

O conhecimento da dinâmica das alterações nos parâmetros hematológicos e na cinética das proteínas de fase aguda em animais saudáveis nas primeiras semanas de vida é essencial para a interpretação correta dessas avaliações em situações de morbidez e para diferenciar animais sadios e enfermos de forma confiável. Com o intuito de avaliar a cinética desses parâmetros no primeiro mês de vida de bezerros de corte sadios, filhos de vacas primíparas ou pluríparas, amostras de sangue foram coletadas antes da ingestão de colostro e 1, 2, 7, 15 e 30 dias após o nascimento. Os parâmetros eritrocitários foram influenciados pelo número de partos das vacas e o leucograma mostrou alterações características de influência do cortisol fetal liberado por ocasião do nascimento. O teor sérico de proteína total aumentou significativamente após a ingestão do colostro. As concentrações de ceruloplasmina, haptoglobina e proteínas de pesos moleculares 33 kDa e 23 kDa aumentaram significativamente no primeiro dia de vida, seja pela resposta ao nascimento ou pela ingestão do colostro, enquanto os teores de transferrina, albumina e α1-glicoproteína ácida mantiveram-se relativamente estáveis nos primeiros dias de vida, aumentando gradualmente até os 30 dias de idade.

Caracterização do gene vip3A e toxicidade da proteína Vip3Aa50 à lagarta-do-cartucho e à lagarta-da-soja

O objetivo deste trabalho foi caracterizar o gene vip3A de Bacillus thuringiensis e verificar a toxicidade da proteína Vip3Aa50 a larvas da lagarta-do-cartucho (Spodoptera frugiperda) e da lagarta-da-soja (Anticarsia gemmatalis). O gene vip3A foi amplificado por PCR, com iniciadores específicos, e gerou um fragmento de 2.370 pb. Esse fragmento foi clonado em vetor pGEM-T Easy e, em seguida, sequenciado, subclonado em vetor de expressão pET-28a (+) e inserido em células de Escherichia coli BL21 (DE3). A expressão da proteína Vip3Aa50 foi induzida por isopropil-β-D-1-tiogalactopiranosídeo (IPTG), visualizada em SDS-PAGE e detectada por Western blot. Os ensaios de toxicidade revelaram alta atividade da proteína Vip3Aa50 contra as larvas neonatas da lagarta-da-soja e da lagarta-do-cartucho, com CL50 de 20,3 e 79,6 ng cm-2, respectivamente. O gene vip3Aa50 é um novo gene da classe vip3A.

Identificação e quantificação das proteínas miofibrilares, isoformas da cadeia pesada de miosina (MyHC) e o amaciamento da carne de bovinos Nelore (Bos indicus)

Pós-graduação em Genética e Melhoramento Animal - FCAV

Abordagens biossintéticas em piper tuberculatum auxiliada pela síntese de precursores fenilpropanoídicos

Pós-graduação em Química - IQ

A simple and rapid screening method for sulfonamides in honey using a flow injection system coupled to a liquid waveguide capillary cell

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Characterization of the co-purified invertase and beta-glucosidase of a multifunctional extract from Aspergillus terreus

The filamentous fungus Aspergillus terreus secretes both invertase and beta-glucosidase when grown under submerged fermentation containing rye flour as the carbon source. The aim of this study was to characterize the co-purified fraction, especially the invertase activity. An invertase and a beta-glucosidase were co-purified by two chromatographic steps, and the isolated enzymatic fraction was 139-fold enriched in invertase activity. SDS-PAGE analysis of the co-purified enzymes suggests that the protein fraction with invertase activity was heterodimeric, with subunits of 47 and 27 kDa. Maximal invertase activity, which was determined by response surface methodology, occurred in pH and temperature ranges of 4.0-6.0 and 55-65 A degrees C, respectively. The invertase in co-purified enzymes was stable for 1 h at pH 3.0-10.0 and maintained full activity for up to 1 h at 55 A degrees C when diluted in water. Invertase activity was stimulated by 1 mM concentrations of Mn2+ (161 %), Co2+ (68 %) and Mg2+ (61 %) and was inhibited by Al3+, Ag+, Fe2+ and Fe3+. In addition to sucrose, the co-purified enzymes hydrolyzed cellobiose, inulin and raffinose, and the apparent affinities for sucrose and cellobiose were quite similar (K-M = 22 mM). However, in the presence of Mn2+, the apparent affinity and V-max for sucrose hydrolysis increased approximately 2- and 2.9-fold, respectively, while for cellobiose, a 2.6-fold increase in V-max was observed, but the apparent affinity decreased 5.5-fold. Thus, it is possible to propose an application of this multifunctional extract containing both invertase and beta-glucosidase to degrade plant biomass, thus increasing the concentration of monosaccharides obtained from sucrose and cellobiose.

Development and Validation of A Stability-Indicating Mekc Method for Determination of Flucloxacillin Sodium in Capsules

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Chemical characteristics and fractionation of proteins from Moringa oleifera Lam. leaves

Moringa oleifera Lam, is a leguminous plant, originally from Asia, which is cultivated in Brazil because of its low production cost. Although some people have used this plant as food, there is little information about its chemical and nutritional characteristics. The objective of this study was to characterise the leaves of M. oleifera in terms of their chemical composition, protein fractions obtained by solubility in different systems and also to assess their nutritional quality and presence of bioactive substances. The whole leaf flour contained 28.7% crude protein, 7.1% fat, 10.9% ashes, 44.4% carbohydrate and 3.0 mg 100 g(-1) calcium and 103.1 mg 100 g(-1) iron. The protein profile revealed levels of 3.1% albumin, 0.3% globulins, 2.2% prolamin, 3.5% glutelin and 70.1% insoluble proteins. The hydrolysis of the protein from leaf flour employing sodium dodecyl sulfate (SDS) and 2-mercaptoethanol (ME) resulted in 39.5% and 29.5%, respectively. The total protein showed low in vitro digestibility (31.8%). The antinutritional substances tested were tannins (20.7 mg g(-1)), trypsin inhibitor (1.45 TIU mg g(-1)), nitrate (17 mg g(-1)) and oxalic acid (10.5 mg g(-1)), besides the absence of cyanogenic compounds. beta-Carotene and lutein stood out as major carotenoids, with concentrations of 161.0 and 47.0 mu g g(-1) leaf, respectively. Although M. oleifera leaves contain considerable amount of crude protein, this is mostly insoluble and has low in vitro digestibility, even after heat treatment and chemical attack. In vivo studies are needed to better assess the use of this leaf as a protein source in human feed. (C) 2013 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Cyclodextrin Production by Bacillus lehensis Isolated from Cassava Starch: Characterisation of a Novel Enzyme

The properties of a previously unknown enzyme, denominated cyclodextrin glycosyltransferase, produced from Bacillus lehensis, were evaluated using affinity chromatography for protein purification. Enzyme characteristics (optimum pH and temperature; pH and temperature stability), the influence of substances on the enzyme activity, enzyme kinetics, and cyclodextrin production were analysed. Cyclodextrin glycosyltransferase was purified up to 320.74-fold by affinity chromatography using beta-cyclodextrin as the binder and it exhibited 8.71% activity recovery. This enzyme is a monomer with a molecular weight of 81.27 kDa, as estimated by SDS-PAGE. Optimum temperature and pH for cydodextrin glycosyltransferase were 55 degrees C and 8.0, respectively. The Michaelis-Menten constant was 8.62 g/l during maximum velocity of 0.858 g/l.h.