Advances in sickle cell disease treatment: From drug discovery until the patient monitoring

Sickle Cell Disease (SCD) is one of the most prevalent hematological diseases in the world. Despite the immense progress in molecular knowledge about SCD in last years few therapeutical sources are currently available. Nowadays the treatment is performed mainly with drugs such as hydroxyurea or other fetal hemoglobin inducers and chelating agents. This review summarizes current knowledge about the treatment and the advancements in drug design in order to discover more effective and safe drugs. Patient monitoring methods in SCD are also discussed. © 2011 Bentham Science Publishers Ltd.

Effect of exercise training on the cardiovascular and biochemical parameters in women with eNOS gene polymorphism

Context: Presence of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) gene polymorphism has been associated with cardiovascular disease (CVD) whereas exercise training (EX) promotes beneficial effects on CVD which is related to increased nitric oxide levels (NO). Objective: To evaluate if women with eNOS gene polymorphism at position-G894T would be less responsive to EX than those who did not carry T allele. Methods: Women were trained 3 days/week, 40 minutes session during 6 months. Cardio-biochemical parameters and genetic analysis were performed in a double-blind fashion. Results: Plasma NOx - levels were similar in both groups at baseline (GG genotype: 18.44±3.28 μM) and (GT + TT genotype: 17.19±2.43 μM) and after EX (GG: 29.20±4.33 and GT+TT: 27.38±3.12 μM). A decrease in blood pressure was also observed in both groups. Discussion and conclusion: The presence of eNOS polymorphism does not affect the beneficial effects of EX in women. © 2011 Informa UK, Ltd.

Diet-induced obesity impairs AKT signalling in the retina and causes retinal degeneration

Retinopathy, a common complication of diabetes, is characterized by an unbalanced production of nitric oxide (NO), a process regulated by nitric oxide synthase (NOS). We hypothesized that retinopathy might stem from changes in the insulin receptor substrate (IRS)/PI3K/AKT pathway and/or expression of NOS isoforms. Thus, we analysed the morphology and apoptosis index in retinas of obese rats in whom insulin resistance had been induced by a high-fat diet (HFD). Immunoblotting analysis revealed that the retinal tissue of HFD rats had lower levels of AKT1, eNOS and nNOS protein than those of samples taken from control animals. Furthermore, immunohistochemical analyses indicated higher levels of iNOS and 4-hydroxynonenal and a larger number of apoptotic nuclei in HFD rats. Finally, both the inner and outer retinal layers of HFD rats were thinner than those in their control counterparts. When considered alongside previous results, these patterns suggest two major ways in which HFD might impact animals: direct activity of ingested fatty acids and/or via insulin-resistance-induced changes in intracellular pathways. We discuss these possibilities in further detail and advocate the use of this animal model for further understanding relationships between retinopathy, metabolic syndrome and type 2 diabetes. © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.

Infliximab prevents increased systolic blood pressure and upregulates the AKT/eNOS pathway in the aorta of spontaneously hypertensive rats

High systolic blood pressure caused by endothelial dysfunction is a comorbidity of metabolic syndrome that is mediated by local inflammatory signals. Insulin-induced vasorelaxation due to endothelial nitric oxide synthase (eNOS) activation is highly dependent on the activation of the upstream insulin-stimulated serine/threonine kinase (AKT) and is severely impaired in obese, hypertensive rodents and humans. Neutralisation of circulating tumor necrosis factor-α (TNFα) with infliximab improves glucose homeostasis, but the consequences of this pharmacological strategy on systolic blood pressure and eNOS activation are unknown. To address this issue, we assessed the temporal changes in the systolic pressure of spontaneously hypertensive rats (SHR) treated with infliximab. We also assessed the activation of critical proteins that mediate insulin activity and TNFα-mediated insulin resistance in the aorta and cardiac left ventricle. Our data demonstrate that infliximab prevents the upregulation of both systolic pressure and left ventricle hypertrophy in SHR. These effects paralleled an increase in AKT/eNOS phosphorylation and a reduction in the phosphorylation of inhibitor of nuclear factor-κB (Iκβ) and c-Jun N-terminal kinase (JNK) in the aorta. Overall, our study revealed the cardiovascular benefits of infliximab in SHR. In addition, the present findings further suggested that the reduction of systolic pressure and left ventricle hypertrophy by infliximab are secondary effects to the reduction of endothelial inflammation and the recovery of AKT/eNOS pathway activation. © 2012 Elsevier B.V.

Isolation, homology modeling and renal effects of a C-type natriuretic peptide from the venom of the Brazilian yellow scorpion (Tityus serrulatus)

Mammalian natriuretic peptides (NPs) have been extensively investigated for use as therapeutic agents in the treatment of cardiovascular diseases. Here, we describe the isolation, sequencing and tridimensional homology modeling of the first C-type natriuretic peptide isolated from scorpion venom. In addition, its effects on the renal function of rats and on the mRNA expression of natriuretic peptide receptors in the kidneys are delineated. Fractionation of Tityusserrulatus venom using chromatographic techniques yielded a peptide with a molecular mass of 2190.64Da, which exhibited the pattern of disulfide bridges that is characteristic of a C-type NP (TsNP, T. serrulatus Natriuretic Peptide). In the isolated perfused rat kidney assay, treatment with two concentrations of TsNP (0.03 and 0.1μg/mL) increased the perfusion pressure, glomerular filtration rate and urinary flow. After 60min of treatment at both concentrations, the percentages of sodium, potassium and chloride transport were decreased, and the urinary cGMP concentration was elevated. Natriuretic peptide receptor-A (NPR-A) mRNA expression was down regulated in the kidneys treated with both concentrations of TsNP, whereas NPR-B, NPR-C and CG-C mRNAs were up regulated at the 0.1μg/mL concentration. In conclusion, this work describes the isolation and modeling of the first natriuretic peptide isolated from scorpion venom. In addition, examinations of the renal actions of TsNP indicate that its effects may be related to the activation of NPR-B, NPR-C and GC-C. © 2013 Elsevier Ltd.

Efeito da terapia antituberculose na expressão dos receptores TLR-2 e 4, do fator de transcrição Foxp3, da Óxido Nítrico Sintase Induzível, no perfil de citocinas e nas alterações genóticas

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Efeito da apocinina na hipertensão, disfunção endotelial e hipertrofia ventricular esquerda em Ratos Espontaneamente Hipertensos (SHR)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Imunomarcação da óxido nítrico sintase induzível e da metaloproteinase-9 em úlceras corneais químicas de coelhos (Oryctolagus cuniculus - Linnaeus, 1758), tratadas com cetorolaco de trometamina

Pós-graduação em Cirurgia Veterinária - FCAV

Efeito de prostaglandinas sobre a atividade fingicida de monócitas humanos desafiados com o Paracoccidioides brasiliensis

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Estudo da resposta imunológica induzida por Arnica montana L

Pós-graduação em Biociências e Biotecnologia Aplicadas à Farmácia - FCFAR

Alterações hematológicas, bioquímicas e histopatológicas no modelo de malária aviária Gallus gallus por Plasmodium gallinaceum: papel do óxido nítrico

Malária é uma das doenças infecciosas de maior causa de morte no mundo. Modelos experimentais são necessários para melhor compreensão de mecanismos envolvidos na patogênese de doenças e desenvolvimento de novos tratamentos. Galinhas infectadas com Plasmodium gallinaceum fornecem bom modelo de malária devido a proximidade filogenética com o Plasmodium de humano assim como aspectos clínicos comuns, como a malária cerebral. O presente estudo objetivou investigar a participação do óxido nítrico no desenvolvimento da malária aviária, através do tratamento ou não com aminoguanidina (AG - inibidor da enzima Óxido Nítrico Sintase) in vivo de galinhas infectadas experimentalmente com P. gallinaceum. Foi verificado sobrevida, hematologia clássica, bioquímica sérica e patologia nos animais no percurso da infecção. Observou-se maior sobrevida nos animais tratados com AG, apesar de parasitemias mais elevadas. Houve ainda diminuição nos parâmetros hematológicos e aumento no Volume Corpuscular Médio de hemácias, indicando resposta medular para anemia. Linfopenia e trombocitopenia foram detectadas em animais infectados, com menor proporção nos animais tratados. Monócitos, linfócitos e heterófilos apresentaram aumento de tamanho e alterações que indicam ativação. Trombócitos também aumentaram de tamanho durante a infecção e apresentaram morfologia atípica. Os animais tratados mostraram lesões mais brandas nas secções histopatológicas de cérebro, fígado e baço, além de produção diminuída de NO, mesmo em alta parasitemia, em relação aos animais não tratados. Esses resultados confirmam a participação do mediador químico óxido nítrico na patogênese da malária no modelo experimental aviário.

A intensificação do comportamento tipo ansiedade induzido por cafeína em Daniorerio(zebrafish) é prevenida pelo tratamento com α-Tocoferol e L-NAME

O crescente consumo de bebidas com elevado teor de cafeína pode resultar no aparecimento de sintomas provenientes do transtorno de ansiedade induzida por essa droga. Atualmente, tem-se utilizado a cafeína como um indutor farmacológico do comportamento tipo ansiedade e essa indução pode facilitar a melhor compreensão da relação entre alterações comportamentais e os mecanismos de ação envolvidos nesse efeito, portanto o presente trabalho propôs que a via nitrérgica poderia ser um mecanismo chave para explicar os efeitos comportamentais produzidos pela cafeína e que esses efeitos poderiam ser revertidos por um antioxidante, logo, no presente trabalho nós tivemos como objetivo avaliar o possível efeito do L-NAME e do α-tocoferol no comportamento tipo ansiedade ampliado pela cafeína nos testes de preferência claro/escuro (PCE) e distribuição vertical eliciada pela novidade (DVN) em Daniorerio. Foram utilizados peixes da espécie Daniorerio(n=178) subdivididos nos seguintes grupos experimentais: SAL – salina 0,9%; CAF – cafeína 100 mg/kg; DMSO – dimetilsulfóxido 0,1%; L-NAME - (N -Nitro-L-arginina-metil éster hidrocloreto) 10 mg/kg; TF – α-tocoferol 1 mg/kg (receberam apenas uma injeção por i.p); SAL + SAL; DMSO + SAL; SAL + CAF; L-NAME + SAL; L-NAME +CAF; TF + CAF (receberam duas injeções seguidas, uma injeção de cada substância na forma de cotratamento, por i.p). Os animais foram submetidos ao teste de preferência claro/escuro e de distribuição vertical eliciada pela novidade. Todos os testes foram filmados e os vídeos foram avaliados utilizando o X-PLO-RAT. Os dados foram expressos em média ± erro padrão. Foi aplicado o teste de normalidade utilizando o teste Shapiro-Wilk e o teste paramétrico ANOVA de uma via com pós-teste Tukey, considerando significativos valores com p<0,05. Nós demonstramos que o α-tocoferol na dose de 1 mg/kg reverteu todos os parâmetros do comportamento tipo ansiedade ampliado pela cafeína nos testes de PCE e do DVN e esse efeito foi semelhante ao observado quando administrado um inibidor da enzima óxido nítrico sintase (NOS), L-NAME. Portanto, o presente trabalho demonstrou pela primeira vez que o efeito comportamental ampliado pela cafeína no teste escotáxico e no DVN pode ser modulado pelo sistema nitrérgico e que o α-tocoferol reverte esse efeito comportamental induzido pela cafeína de forma total.

Biogênese mitocondrial e marcadores de estresse oxidativo em ratos treinados e suplementados com L-Arginina

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Determinação dos mecanismos de ação envolvidos no efeito antiulcerogênico, antidiarreico e anti-inflamatório da Insulina Vegetal (Cissus sicyoides Linneu) em modelos animais

Pós-graduação em Ciências Biológicas (Farmacologia) - IBB

Analysis of Toll-Like Receptors, iNOS and Cytokine Profiles in Patients with Pulmonary Tuberculosis during Anti-Tuberculosis Treatment

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)